Đánh giá độc tính cấp của cao chiết từ lá cây sầu đâu ăn lá (azadirachta indica jus f ) trồng tại an giang

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ PHAN HUỲNH NGỌC XUÂN ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CẤP CỦA CAO CHIẾT TỪ LÁ CÂY SẦU ĐÂU ĂN LÁ (Azadirachta indica Jus F.) TRỒNG TẠI AN GIANG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Cần Thơ – 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ PHAN HUỲNH NGỌC XUÂN ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CẤP CỦA CAO CHIẾT TỪ LÁ CÂY SẦU ĐÂU ĂN LÁ (Azadirachta indica Jus F.) TRỒNG TẠI AN GIANG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS TS DƯƠNG XUÂN CHỮ ThS TRẦN YÊN HẢO Cần Thơ – 2018 LỜI CÁM ƠN Lời đầu tiên, em xin gửi lịng kính trọng lời cám ơn sâu sắc đến Thầy PGS TS Dương Xuân Chữ, người thầy hết lòng quan tâm, động viên, giúp đỡ tận tình hướng dẫn em suốt thời gian thực luận văn Thầy dành nhiều thời gian, tâm huyết nhẫn nại để truyền đạt cho em kinh nghiệm kiến thức quý báu, cho em lời khuyên hữu ích tạo điều kiện thuận lợi để em hoàn thành tốt luận văn Em xin gửi lời cám ơn sâu sắc đến Cô ThS Trần Yên Hảo, Cô TS Nguyễn Thị Thu Trâm, Cô ThS Nguyễn Thị Trang Đài, Cô ThS Trần Hoàng Yến, Thầy ThS BS Nguyễn Văn Luân quan tâm, giúp đỡ, tận tình hướng dẫn tạo điều kiện cho em hoàn thành tốt luận văn Em xin chân thành cám ơn quý Thầy Cô Liên môn Dược lý - Dược lâm sàng, Bộ mơn Hóa – Khoa Khoa học bản, Liên môn Dược Liệu - Thực vật dược - Dược cổ truyền, Bộ môn Bào chế - Công nghiệp dược giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho em thời gian thực luận văn Cám ơn bạn lớp Dược B K39, đặc biệt bạn Vũ, Vân, Thư, Linh, Trinh, bạn chung nhóm đề tài Sầu đâu – Thoảng, Châu, Nguyệt bạn làm đề tài mơn Hóa Dược, Dược lý, Dược liệu, Kiểm nghiệm bên cạnh giúp đỡ, ủng hộ động viên giai đoạn khó khăn sống suốt trình làm luận văn Cuối lời, xin cám ơn Cha Mẹ nhà lo lắng, chăm sóc, chỗ dựa, nguồn động lực để vững bước đường học vấn Em xin chúc q Thầy Cơ dồi sức khỏe hồn thành tốt cơng tác Một lần nữa, xin chân thành cám ơn tất người LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình khảo sát nghiên cứu riêng tơi, kết luận văn hoàn toàn trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu trước Cần Thơ, ngày 14 tháng 06 năm 2018 Sinh viên ký tên Phan Huỳnh Ngọc Xuân i MỤC LỤC LỜI CÁM ƠN LỜI CAM ĐOAN MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC CÁC BẢNG iv DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ v ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan Sầu đâu 1.1.1 Tên gọi .3 1.1.2 Phân loại thực vật 1.1.3 Mô tả 1.1.4 Phân bố sinh thái 1.1.5 Bộ phận dùng công dụng 1.1.6 Thành phần hóa học 1.1.7 Tác dụng dược lý .6 1.1.8 Các nghiên cứu độc tính Sầu đâu giới 1.2 Nghiên cứu độc tính cấp 10 1.2.1 Một số định nghĩa 10 1.2.2 Ý nghĩa việc xác định LD50 .11 1.2.3 Các trường hợp không xác định LD50 12 1.2.4 Nguyên tắc thử độc tính cấp 12 1.2.5 Cách tính LD50 14 1.3 Các thông số cần theo dõi .14 1.3.1 Theo dõi tổng trạng 14 1.3.2 Các số huyết học 15 1.3.3 Các số hóa sinh máu 19 ii 1.3.4 Xét nghiệm đại thể vi thể 22 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .23 2.1 Đối tượng, hóa chất thiết bị nghiên cứu 23 2.1.1 Động vật thí nghiệm 23 2.1.2 Đối tượng nghiên cứu 23 2.1.3 Hóa chất 24 2.1.4 Trang thiết bị, dụng cụ thí nghiệm 25 2.2 Phương pháp nghiên cứu 25 2.2.1 Nghiên cứu độc tính cấp cao chiết từ Sầu đâu cách xác định LD50 25 2.2.2 Các tiêu đánh giá độc tính cấp cao chiết từ Sầu đâu .28 2.2.3 Phân tích kết thống kê 32 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 33 3.1 Kết xác định LD50 cao chiết từ Sầu đâu (LSĐ) .33 3.2 Kết khảo sát độc tính cấp cao chiết từ Sầu đâu (LSĐ) 34 3.2.1 Thay đổi tổng trạng chuột thí nghiệm .34 3.2.2 Kết xét nghiệm huyết học 38 3.2.3 Kết xét nghiệm hóa sinh 41 3.2.4 Kết giải phẫu mô học gan, thận 42 Chương BÀN LUẬN 47 4.1 Xác định LD50 cao chiết từ Sầu đâu .47 4.2 Khảo sát độc tính cấp cao chiết từ Sầu đâu 48 4.2.1 Sự thay đổi tổng trạng chuột nhắt trắng 48 4.2.3 Sự thay đổi số huyết học .50 4.2.4 Sự thay đổi số hóa sinh 50 4.2.5 Sự thay đổi mô học 53 KẾT LUẬN 54 KIẾN NGHỊ .55 TÀI LIỆU THAM KHẢO iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT LD50: Lethal dose 50% – Liều làm chết 50% số vật thí nghiệm RBC: Red blood cell – Số lượng hồng cầu HGB: Hemoglobin HCT: Hematocrit WBC: White blood cell – Số lượng bạch cầu NEU: Neutrophil – Bạch cầu đa nhân trung tính EOS: Eosinophil – Bạch cầu ưa acid BASO: Basophil – Bạch cầu ưa base LYM: Lymphocyte – Bạch cầu lympho MONO: Monocyte – Bạch cầu mono PLT: Platelet – Tiểu cầu AST: Aspartat aminotransferase ALT: Alanin aminotransferase IR: Tia hồng ngoại LSĐ: Lá Sầu đâu iv DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Ứng dụng y học Sầu đâu Bảng 1.2 Chức loại bạch cầu 17 Bảng 1.3 Các số huyết học chuột nhắt 18 Bảng 1.4 Phân loại enzym gan 19 Bảng 1.5 Giá trị hóa sinh lâm sàng chuột nhắt 22 Bảng 3.1 Kết thăm dò liều ban đầu 33 Bảng 3.2 Tỷ lệ chuột chết thử nghiệm độc tính cấp cao chiết Sầu đâu liều 12000mg/Kg thể trọng chuột 33 Bảng 3.3 Trọng lượng chuột trước thử nghiệm 24 giờ, 72 sau thử nghiệm 34 Bảng 3.4 Số ô di chuyển trước thử nghiệm 24 giờ, 72 sau thử nghiệm 35 Bảng 3.5 Số lần vận động bất thường trước thử nghiệm 24 giờ, 72 sau thử nghiệm 36 Bảng 3.6 Thời gian chuột bám quay trước thử nghiệm 24 giờ, 72 sau thử nghiệm 37 Bảng 3.7 Kết xét nghiệm hemoglobin hematocrit lô thử nghiệm 39 Bảng 3.8 Thành phần bạch cầu lô sau thử nghiệm 40 Bảng 3.9 Kết hàm lượng enzym gan AST, ALT lô thử nghiệm 41 Bảng 3.10 Kết creatinin huyết thanh, urê máu lô thử nghiệm 41 v DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Trang Hình 2.1 Kết sắc ký lớp mỏng 24 Hình 2.2 Mơ hình mơi trường mở (Open field test) 29 Hình 2.3 Mơ hình quay Rota-rod 31 Hình 3.1 Biểu đồ biểu diễn thay đổi trọng lượng chuột sau 24 giờ, 72 so với trước thử nghiệm 33 Hình 3.2 Biểu đồ biểu diễn thay đổi số ô di chuyển chuột sau 24 giờ, 72 so với trước thử nghiệm 35 Hình 3.3 Biểu đồ biểu diễn thay đổi số lần vận động bất thường chuột sau 24 giờ, 72 so với trước thử nghiệm 36 Hình 3.4 Biểu đồ biểu diễn thay đổi thời gian chuột bám quay sau 24 giờ, 72 so với trước thử nghiệm 37 Hình 3.5 Kết xét nghiệm số lượng hồng cầu (RBC) lơ thử nghiệm 38 Hình 3.6 Kết xét nghiệm số lượng bạch cầu (WBC) lô thử nghiệm 39 Hình 3.7 Kết xét nghiệm số lượng tiểu cầu (PLT) lô thử nghiệm 40 Hình 3.8 Kết glucose huyết lơ thử nghiệm 42 Hình 3.9 Trọng lượng gan tương đối lô thử nghiệm 43 Hình 3.10 Hình đại thể gan lô thử nghiệm 44 Hình 3.11 Hình đại thể thận lô thử nghiệm 44 Hình 3.12 Hình vi thể gan lơ chứng nước 45 Hình 3.13 Hình vi thể gan lơ chứng tween 45 Hình 3.14 Hình vi thể gan lơ uống cao LSĐ 45 Hình 3.15 Hình vi thể thận lô chứng nước 46 Hình 3.16 Hình vi thể thận lô chứng tween 46 Hình 3.17 Hình vi thể thận lơ uống cao LSĐ 46 ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam đất nước có nguồn tài nguyên thực vật nói chung tài nguyên dược liệu nói riêng đa dạng, phong phú Từ xa xưa, nhân dân ta biết sử dụng thuốc dân gian từ loài thân thuộc quanh Ngày nay, xu hướng sử dụng sản phẩm có nguồn gốc tự nhiên phịng điều trị bệnh ngày phát triển Tuy nhiên, việc sử dụng thuốc từ dược liệu nước ta chủ yếu cịn dựa vào kinh nghiệm, chưa có chứng khoa học rõ ràng; với tâm lý thuốc từ dược liệu rẻ tiền, dễ sử dụng, tác dụng phụ chưa có nhiều nghiên cứu độ an tồn, độc tính thuốc Sầu đâu ăn (gọi tắt Sầu đâu, tên khoa học Azadirachta indica Jus F.) có nguồn gốc từ Ấn Độ, biết đến loại “thần dược trị bách bệnh” Sầu đâu xuất nhiều thuốc cổ truyền với nhiều cơng dụng như: trị bệnh ngồi da, sốt rét, trị giun, diệt sâu bọ, ký sinh trùng, làm răng, giảm căng thẳng, mệt mỏi,… [16], [25], [21] Sau đó, tác dụng dược lý Sầu đâu như: kháng khuẩn, kháng nấm, kháng viêm, chống oxy hóa, hạ đường huyết, trị ung thư, trị sốt rét,… [20], [32] chứng minh qua cơng trình nghiên cứu nhiều nhà khoa học giới Tại An Giang, Sầu đâu biết đến loại nguyên liệu chế biến ăn đặc sản Người dân địa phương khai thác đọt Sầu đâu để chế biến ăn bữa tiệc gia đình Sầu đâu cho thấy lồi có nhiều công dụng, xem “kho báu xanh” Việc nghiên cứu, khảo sát thành phần hóa học, tác dụng dược lý độ an tồn, độc tính Sầu đâu góp phần quan trọng cho việc đặt tảng khoa học cho việc khai thác, sử dụng nguồn tài nguyên thực vật cách hợp lý hiệu Hiện nay, giới, có nhiều đề tài khoa học nghiên cứu Sầu đâu Tuy nhiên, Việt Nam điều hạn chế, chưa có nghiên cứu đánh giá độ an tồn, độc tính lồi Đánh giá độc tính cấp, xác định liều LD50 (một thơng số quan trọng để đánh giá độc tính thuốc) giúp xác định phương hướng dùng liều thí nghiệm dược lý cách đắn, xác định 45 A B Hình 3.12 Hình vi thể gan lô chứng nước A: Đơn vị tiểu thùy gan A B: Khoảng cửa B Hình 3.13 Hình vi thể gan lô chứng tween A: Đơn vị tiểu thùy gan A B: Khoảng cửa B Hình 3.14 Hình vi thể gan lô uống cao LSĐ A: Đơn vị tiểu thùy gan B: Khoảng cửa 46 A B Hình 3.15 Hình vi thể thận lô chứng nước A: Vi cầu thận B: Ống thận mơ kẽ B A Hình 3.16 Hình vi thể thận lơ chứng tween A: Vi cầu thận A B: Ống thận mơ kẽ B Hình 3.17 Hình vi thể thận lơ uống cao LSĐ A: Vi cầu thận B: Ống thận mô kẽ 47 Chương BÀN LUẬN 4.1 Xác định LD50 cao chiết từ Sầu đâu Cao chiết từ Sầu đâu thể cao đặc, khơng tan nước Vì cho chuột uống cao dạng dung dịch mà phải pha dạng hỗn dịch nước cất với chất gây thấm tween 80 Tween 80 chất nhũ hóa khơng ion, thân nước thường sử dụng chất để đưa thuốc nghiên cứu tiền lâm sàng in vivo [39], có LD50 đường uống chuột cao 25000mg/Kg thể trọng [29] Tween 80 có tác dụng làm giảm sức căng bề mặt giúp phân tán cao nước cất thành dạng hỗn dịch đồng Trong nghiên cứu này, dung dịch tween 80 5% sử dụng làm dùng môi pha cao Bên cạnh đó, chúng tơi thiết kế thêm lơ dùng dung mơi để chứng minh độc tính (nếu có) cao chiết Sầu đâu khơng bị ảnh hưởng dung môi pha cao Theo nghiên cứu Chattopadhyay năm 1999, giá trị LD50 đường uống chuột cao chiết dung môi ethanol từ Sầu đâu 4570mg/Kg thể trọng chuột [23] Vì thế, lựa chọn liều khởi đầu cho giai đoạn thăm dò 4000mg/Kg thể trọng chuột tăng liều dần đến 12000mg/Kg thể trọng chuột Cao chiết từ Sầu đâu cho chuột uống tới liều 12000mg/Kg thể trọng chuột Đây liều lớn pha chế dạng hỗn dịch đủ bền vững trình cho uống, để đảm bảo chất lỏng cho uống ln đồng ống tiêm, đảm bảo tính xác liều lượng Đồng thời liều chấp nhận cho chuột uống qua kim cho uống đầu tù mà không gây tượng căng tức bụng, làm chuột chết mà khơng phải độc tính cao chiết Do đó, chúng tơi lựa chọn liều 12000mg/Kg thể trọng chuột làm liều khảo sát độc tính cấp cao chiết từ Sầu đâu chuột nhắt trắng thử nghiệm thức Sau cho chuột uống thuốc, qua quan sát, theo dõi biểu hoạt động chuột sau uống thuốc 72 giờ, chúng tơi nhận thấy chuột nhóm chứng tween nhóm chứng nước hoạt động ăn uống bình thường, lơng mượt, tính chất phân bình thường Chuột lơ thử 24 đầu có tượng giảm hoạt động, ăn 48 ít, bụng chướng Qua 48 giờ, chuột lô thử hồi phục vận động, ăn uống bình thường, lơng mượt, tính chất phân bình thường Trong q trình thử nghiệm chúng tơi nhận thấy cao chiết từ Sầu đâu thể cao đặc không tan nước, mức liều 12000mg/Kg thể trọng chuột, hỗn dịch tạo thành có độ nhớt cao, thể tích uống lớn Việc cho uống thể tích lớn dịch có độ nhớt cao gây cảm giác no lâu, khó tiêu dẫn đến tình trạng chướng bụng, ăn ít, giảm vận động chuột 24 đầu Thử nghiệm không xác định LD50 mức liều tối đa cho chuột uống 12000mg/Kg thể trọng chuột mà khơng có chuột chết Theo phân loại độc tính GHS (Globally Harmonised System for Classification of Chemicals) chất có giá trị độc tính cấp LD50 khoảng >5000mg/Kg thể trọng, coi chất gần không độc [37] 4.2 Khảo sát độc tính cấp cao chiết từ Sầu đâu 4.2.1 Sự thay đổi tổng trạng chuột nhắt trắng 4.2.1.1 Ảnh hưởng cao chiết từ Sầu đâu đến thay đổi trọng lượng Trọng lượng chuột theo dõi thời điểm: trước thử nghiệm, sau uống thuốc 24 72 Trọng lượng chuột lô tăng, lô thử trọng lượng chuột tăng so với hai lô chứng Tuy nhiên thay đổi trọng lượng thời điểm sau 24 giờ, sau 72 so với trước thử nghiệm lơ khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê Từ kết trên, nhận thấy: dung dịch tween 80 5% không làm ảnh hưởng kết thử nghiệm; cao chiết Sầu đâu liều 12000mg/Kg thể trọng không làm ảnh hưởng đến thay đổi thể trọng chuột so với nhóm chứng 4.2.1.2 Ảnh hưởng cao chiết từ Sầu đâu lên hoạt tính vận động tự nhiên – mơ hình mơi trường mở Thử nghiệm môi trường mở tiến hành lần Lần thứ thực trước tiến hành thử nghiệm độc tính cấp, lần thứ hai lần thứ sau 24 72 sau cho chuột uống thuốc Thông thường, trước môi trường lạ, chuột thường tăng cường hoạt động, di chuyển xung quanh để khám phá Khả 49 vận động khám phá chuột dựa số ô chuột di chuyển, số lần vận động bất thường (số lần chuột đứng lên chân sau) Từ thử nghiệm môi trường mở cho thấy: - Dung dịch tween 80 5% không làm thay đổi chức vận động tự nhiên chuột lô chứng tween Số ô di chuyển số lần vận động bất thường thay đổi khơng khác biệt có nghĩa thống kê so với lô chứng nước thời điểm 24 72 - Tại thời điểm sau 24 giờ, nhóm chuột uống cao chiết Sầu đâu liều 12000mg/Kg thể trọng có giảm vận động, điều phản ánh qua giảm số ô di chuyển nhiều có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng tween nhóm chứng nước Ở mức liều 12000mg/Kg thể trọng, cao chiết từ Sầu đâu phân tán nước tạo thành hỗn dịch có độ nhớt cao; thể tích uống lớn (0,2mL/10g chuột x lần); 24 đầu quan sát thấy chuột có tượng chướng bụng Điều làm chuột khó chịu, tức bụng, giảm vận động từ ảnh hưởng đến chức vận động chuột - Tuy nhiên thời điểm sau 72 giờ, thay đổi số ô di chuyển số lần vận động bất thường lơ khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê Quan sát thể trạng chung chuột lô thử cho thấy sau 48 chuột ăn uống vận động lại bình thường, tình trạng chướng bụng giảm Như cao chiết Sầu đâu liều 12000mg/Kg thể trọng không làm thay đổi hoạt tính vận động tự nhiên chuột so với nhóm chứng 4.2.1.3 Ảnh hưởng cao chiết từ Sầu đâu lên khả phối hợp vận động – thử nghiệm quay Nhóm chuột uống dung dịch tween 80 5% khơng có thay đổi khả phối hợp vận động có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng nước Như dung dịch tween 80 5% dùng làm dung môi pha cao không làm ảnh hưởng kết thử nghiệm Sự thay đổi thời gian chuột bám quay chuột lô thử khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê so với lô chứng tween lô chứng nước thời điểm 50 sau 24 sau 72 Như cao chiết Sầu đâu liều 12000mg/Kg thể trọng không làm thay đổi khả phối hợp vận động chuột so với lô chứng 4.2.3 Sự thay đổi số huyết học Số lượng chất lượng tế bào máu phản ánh tình trạng quan tạo máu Nếu thuốc tác động đến quan tạo máu làm thay đổi số lượng chất lượng tế bào máu [5] Số lượng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu tiêu phản ánh tình trạng sản sinh tế bào máu tủy xương, tình trạng miễn dịch đơng máu chuột có bình thường hay khơng Các số hemoglobin (lượng hemoglobin có đơn vị thể tích máu) hematocrit (tỷ lệ phần trăm thể tích huyết cầu với máu toàn phần) giúp đánh giá rõ khả vận chuyển oxy hồng cầu tình trạng bệnh lý liên quan đến huyết học Kết xét nghiệm số lượng hồng cầu, hemoglobin, hematocrit, số lượng tiểu cầu lô khác biệt ý nghĩa thống kê cho thấy: Dung dịch tween 80 5% không làm thay đổi số huyết học (RBC, HGB, HCT, PLT) so với nhóm chứng nước, không làm ảnh hưởng đến kết thử nghiệm Cao chiết Sầu đâu liều 12000mg/Kg thể trọng không làm thay đổi số lượng hồng cầu, hemoglobin, hematocrit, số lượng tiểu cầu chuột nhắt trắng thử nghiệm so với nhóm chứng Sau thử nghiệm, số lượng bạch cầu thành phần bạch cầu: NEU, EOS, LYM, MONO lơ khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê Từ kết nhận thấy: dung dịch tween 80 5% không làm thay đổi số bạch cầu chuột so với lô chứng nước, không làm ảnh hưởng đến kết thử nghiệm; cao chiết từ Sầu đâu liều 12000mg/Kg thể trọng chuột không làm thay đổi số bạch cầu chuột nhắt trắng so với lô chứng 4.2.4 Sự thay đổi số hóa sinh 4.2.4.1 Các số đánh giá chức gan Gan nội tạng đóng vai trị quan trọng q trình chuyển hóa chất Các tế bào gan thực chức chuyển hóa nhờ vào hệ thống enzym Khi xảy tượng hủy tế bào gan, tế bào bị tổn thương, rối loạn chuyển hóa tế bào, tăng sinh tổng hợp enzym dẫn đến hoạt tính enzym tăng cao bất thường 51 [14]; thay đổi enzym AST ALT có giá trị chẩn đoán Trong viêm gan virus loại khác bệnh gan liên quan đến hoại tử tế bào gan cấp tính, nồng độ AST ALT huyết tăng trước hội chứng dấu hiệu lâm sàng xuất [15] Do đó, đánh giá hoạt độ enzym huyết tương phản ánh tình trạng tổn thương, hoại tử tế bào gan hay mức độ độc tính thuốc gan Kết xét nghiệm hàm lượng enzym AST, ALT sau thử nghiệm lô không khác biệt có ý nghĩa thống kê cho thấy: - Dung dịch tween 80 5% dùng làm dung môi pha cao không làm thay đổi hàm lượng AST ALT huyết tương so với nhóm chứng nước, khơng làm ảnh hưởng đến kết thử nghiệm - Cao chiết Sầu đâu liều 12000mg/Kg thể trọng không làm thay đổi hàm lượng AST ALT huyết tương so với nhóm chứng, khơng làm tổn thương hay gây độc tính gan 4.2.4.2 Các số đánh giá chức thận Thận quan hệ tiết niệu, đóng vai trị quan trọng trình lọc máu, nơi đào thải chủ yếu chất điện giải sản phẩm thối hóa protein acid nucleic (muối amơn, urê, creatinin, acid uric,…) [14] Các kỹ thuật xét nghiệm để đánh giá chức thận dựa việc xác định nồng độ sản phẩm chuyển hóa máu thường urê creatinin [15] Creatinin urê sản phẩm thối hóa, khơng cịn tác dụng, lọc qua cầu thận đào thải qua nước tiểu, nên số urê creatinin huyết cao chức thận giảm [1] Trong máu, creatinin thành phần đạm ổn định nhất, không phụ thuộc vào chế độ ăn thay đổi sinh lý khác mà phụ thuộc vào khả đào thải thận nên sử dụng nhiều để theo dõi chức thận Xét nghiệm urê huyết thường làm kèm với creatinin huyết để đánh giá chức lọc thận xác [5], [14] Kết xét nghiệm creatinin huyết thanh, urê máu sau thử nghiệm lô khác biệt ý nghĩa thống kê cho thấy: 52 - Dung dịch tween 80 5% dùng làm dung môi pha cao không làm thay đổi nồng độ creatinin huyết thanh, urê máu so với nhóm chứng nước, khơng làm ảnh hưởng đến kết thử nghiệm - Cao chiết Sầu đâu liều 12000mg/Kg thể trọng không làm thay đổi nồng độ creatinin huyết thanh, urê máu chuột nhắt trắng thử nghiệm so với nhóm chứng, khơng làm ảnh hưởng đến chức lọc thận hay trình đào thải thận, khơng gây độc tính thận 4.2.4.3 Chỉ số glucose huyết Kết xét nghiệm glucose huyết chuột lô chứng tween khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê so với lơ chứng nước cho thấy dung dịch tween 80 5% không làm thay đổi đường huyết chuột so với nhóm chứng nước, không làm ảnh hưởng kết thử nghiệm Ở nhóm chuột uống cao chiết Sầu đâu liều 12000mg/Kg thể trọng có giảm đường huyết rõ rệt, thể qua kết glucose huyết thấp có ý nghĩa thống kê (p