Nghiên cứu và đánh giá độc tính cấp, tác động kháng viêm của bài thuốc gia truyền Cao Khai sản xuất tại tỉnh Ninh Thuận

NTTU-NCKH-04 CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Đơn vị chủ trì: Trường Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TỎNG KẾT ĐÈ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 2020 Tên đề tài: NGHIÊN cứu VÀ ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CẨP, TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦA BÀI THC GIA TRUYỀN "CAO KHAI" SẢN XUẤT TẠI TỈNH NINH THUẬN số hợp đồng: 2020.01.094 Chủ nhiệm đề tài: NGUYỀN THỊ BẠCH TUYẾT Đơn vị công tác: KHOA DƯỢC, ĐẠI HỌC NGUYỀN TÁT THÀNH Thời gian thực hiện: 03/2020-11/2020 TP Hồ Chí Minh, ngày 27 thảng 11 năm 2020 MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC BANG iv DANH MỤC HÌNH V MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1.1 TỐNG QUAN TÀI LIỆU TỐNG QUAN VÈ DÂY KHAI 1.1.1 Phân loại thực vật .2 1.1.2 Mô tả thực vật 1.1.3 Một số nghiên cứu nước Dây khai 1.2 TỐNG QUAN VÈ VIÊM 1.2.1 Khái niệm viêm 1.2.2 Nguyên nhân gây viêm 1.2.3 Các giai đoạn trình viêm 1.2.4 Các thuốc điều trị kháng viêm 1.2.5 Các mơ hình nghiên cứu kháng viêm thực nghiệm 1.3 TỐNG QUAN VÈ THỬ NGHIỆM ĐỘC TÍNH CÁP 1.3.1 Định nghĩa 1.3.2 Tầm quan trọng việc xác định LDso 10 1.3.3 Phương pháp xác định LD50 10 1.3.3.1 Mô hình liều cố định [2] 10 1.3.3.2 Mơ hình Tăng - Giảm [2] 12 1.3.3.3 Mơ hình thử theo Berhen [2] 13 1.3.3.4 Mơ hình theo Wilcoxon [2] 13 CHƯƠNG NỘI DUNG- PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CÚƯ 15 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN cúư 15 2.1.1 Động vật thí nghiệm 15 2.1.2 Nguyên vật liệu 15 2.1.3 Hóa chất, thiết bị, dụng cụ 15 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cửư 16 2.2.1 Khảo sát độc tính cấp đuờng uống chuột nhắt trắng 16 2.2.2 Khảo sát tác động kháng viêm cấp mơ hình gây viêm bàn chân chuột bang carrageenan 17 2.3 XỬ LÝ KẾT QUA VÀ PHÂN TÍCH THỐNG KÊ 18 CHƯƠNG 3.1 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 19 KẾT QUẢ ĐỘC TÍNH CÁP ĐƯỜNG UỐNG TRÊN CHUỘT NHẮT TRÁNG 19 3.2 KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦA CAO CHIẾT CAO KHAI 22 CHƯƠNG KÉT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 29 4.1 KÉT LUẬN 29 4.2 KIẾN NGHỊ 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO .30 ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt ALT Aanine aminotransferase Alanin aminotransferase AST Aspartate aminotransferase Aspartat aminotransferase ĐVTN GSH Động vật thử nghiệm Globally Harmonised System for Classification of Chemicals HCT Hematocrit Dung tích hồng cầu HGB Haemoglobin Huyết sắc tố LD100 Abssolute Lethal Dose Liều tối thiếu làm chết 100% số động vật thử nghiệm LD50 Liều làm chết 50% số đồng vật thử Median Lethal Dose nghiệm LDo Liều tối đa không làm chết động vật Maximum Tolerable Dose thủ nghiệm MCH Mean Corpuscular hemoglobin Số lượng hemoglobin trung bình hồng cầu Mean Corpuscular hemoglobin Nong độ hemoglobin trung bình concentration hồng cầu MCV Mean Corpuscular volume Thế tích trung bình hồng cầu NSAIDS Non Steroid Anti-inflammation Drug Thuốc kháng viêm không steroid PLT Platelet Số lượng tiểu cầu RBC Red Blood (cell) Count Số lượng hồng cầu SEM Standard Error of the Mean Sai số chuẩn trung bình TI Therapeutic Index Chỉ số điều trị WBC White Blood (cell) Count So lượng bạch cầu MCHC 111 DANH MỤC • BẢNG Bảng 1.1 Một số mơ hình nghiên cứu kháng viêm thực nghiệm Bảng 1.2 Bảng phân loại hóa chất theo mức độ độc dựa vào LDsotheo OECD [23] 12 Bảng 2.1 Danh mục hóa chất, thiết bị, dụng cụ sừ dụng 16 Bảng 3.1 Tỷ lệ chuột sống/chết lô thử nghiệm 19 Bảng 3.2 Ảnh hưởng cao Khai đến trọng lượng chuột 20 Bảng 3.3 Ảnh hưởng cao Khai đến thông so huyết học chuột bình thường 20 Bảng 3.4 Ảnh hưởng Cao Khai lên chức gan, thận chuột thử nghiệm 21 Bảng 3.5 Sự thay đổi độ phù chân chuột theo lô thử nghiệm (%) 23 Bảng 3.6 Khả giảm độ phù bàn chân chuột I (%) lô diclofenac mg/kg lô Cao khai 25 IV DANH MỤC HÌNH Hình 2.1.Hình ảnh Cao Khai 15 Hình 3.1 Hình ảnh quan chuột sau 14 ngày thử nghiệm độc tính cấp 19 Hình 3.2 Độ sung phù chân chuột lô thử nghiệm theo thời gian 22 Hình 3.3 Độ sung phù chân chuột theo thời gian chứng bệnh diclofenac mg/kg 24 Hình 3.4 Độ sưng phù chân chuột theo thời gian lô chứng bênh, Cao khai 400 800 mg/kg 25 Hình 3.5 Độ sưng phù chân chuột theo thời gian lô Diclofenac, Cao khai 400 800 mg/kg 26 V TÓM TẮT KỂT QUẢ NGHIÊN cúư STT Kết quà đạt Công việc thực Tông quan đề tài - đề cương thông qua hội Thu thập tài liệu đồng Xác định độc tính cấp đường uống Xác định liểu LDso Từ đó, xác định liều an chuột nhắt cùa thuốc gia toàn đe thử tác động kháng viêm cao truyền "Cao Khai" sản xuất tỉnh thử Ninh Thuận Khảo sát tác động kháng viêm in vitro Bảng số liệu kểt đánh giá tác động chuột nhắt trắng thuốc gia kháng viêm cao chiết “CAO KHAI” truyền “CAO KHAI” sản xuất địa bàn tỉnh Ninh Thuận Tơng hợp số liệu, hồn thành báo cáo 01 báo đăng Tạp chí Khoa học cơng STT nghệ trường Đại học Nguyễn Tất Thành Sản phẩm đăng ký Sản phâm đạt 01 báo đăng Tạp chí Khoa 01 báo đăng Tạp chí Khoa học cơng học cơng nghệ trường Đại học nghệ trường Đại học Nguyễn Tất Thành Nguyền Tất Thành Thời gian thực hiện: tháng (03/2020 - 11/2020) Thời gian nộp báo cáo: 27/11/2020 VI MỞ ĐÀU Viêm đáp ứng tự bảo vệ thể để trì định nội mơi, phải ứng viêm khơng phù họp có gia tăng mức, viêm trở thành có hại, gây đau đớn, tổn thương mô lành roi loạn chức Bên cạnh việc điều trị nguyên nhân gây viêm, cần phải điều trị triệu chứng viêm nhằm cải thiện chất lượng sống cho bệnh nhân Trên thực tế, sử dụng lâu dài thuốc trị kháng viêm thuốc kháng viêm không steroid (NSAID) thuốc kháng viêm steroid (glucocorticoid) gây tác dụng khơng mong muốn xuất huyết tiêu hóa, loét dày giảm hiệu điều trị Do đó, biện pháp sử dụng thảo dược thay tiềm việc kiểm soát triệu chứng viêm Hiện nay, nghiên cứu phát triên loại thuốc kháng viêm từ thiên nhiên nhùng định hướng Việt Nam giới Dây khai vốn loài đặc hừu, giàu tiềm người dần sử dụng phần khơng nhỏ chăm sóc sức khỏe thơng qua thuốc cố truyền Dược liệu Dây khai cao khô từ Dây Khai (thường gọi “Cao Khai”) Ninh Thuận xem nguồn tài nguyên quý giá, có giá trị khoa học, có ý nghĩa thực tiễn to lớn với nhiều công dụng khác kháng viêm, kháng khuấn, dùng đe rửa, làm lành vết thương, uống đe điều trị bệnh xương khớp [9], Tuy nhiên,vẫn chưa có báo khoa học thực nghiệm chứng minh sở khoa học tính an tồn tác dụng dược lý thuốc gia truyền “CAO KHAI” Với lý vừa nêu trên, tơi tiến hành đề tài« Nghiên cứu đánh giá độc tính cấp, tác động kháng viêm thuốc gia truyền "Cao Khai" sản xuất tỉnh Ninh Thuận” với mục tiêu cụ thể sau: (1) Xác định độc tính cấp đường uống chuột nhắt thuốc gia truyền "Cao Khai" sản xuất tỉnh Ninh Thuận (2) Khảo sát tác động kháng viêm in vitro chuột nhắt trắng thuốc gia truyền “CAO KHAI” sản xuất địa bàn tỉnh Ninh Thuận CHƯƠNG TỐNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TÔNG QUAN VÈ DÂY KHAI Tên khoa học: Coptosapelta flavescens Korth., họ Cà phê (Rubiaceae) Tên đong danh : Coptosapeỉta tomentosa (Blume) Vahl ex Heyne var dongnaiensis (Pit.) Phamh, Coptosapelta flavescens var dongnaiensis Pierre ex Pit Tên Việt Nam : Dây khai, Vàng hoan, Dây cổ rùa, Dây họng trâu [9], [11], Hình 1.1 Hình ảnh Dây khai (Coptosapelta flavescens) 1.1.1 Phân loại • thực • vật • Giới (Regnum) Thực vật (Plante) Ngành (Phylum) Ngọc lan (Magnoliophyta) Lớp (Class) Hai mầm (Magnoliopsida) Bộ (Ordo) Gentianales Họ (Famillia) Cà phê (Rubiaceae) Chi (Genus) Coptosapelta Loài (Species) Coptosapelta flavescens Korth 1.1.2 Mô tả thực vật Dây khai có dạng dây leo gồ, dài 5-7m Rễ chặt có mùi khai nồng, khó chịu nên có người cịn gọi Rễ khai [9], [11] Dây leo dài 5-1 Om, cành tròn màu xám có lơng mịn, sau chuyến sang màu nâu sẫm, nhằn bóng Lá mọc đối, ngun hình trái xoan thn, dài 4-9cm, rộng 3-6cm, gốc trịn, chóp nhọn có lơng gân mặt dưới, kèm rụng sớm Cụm hoa ngọn, hình xim dài 6-8cm, có lông; hoa màu vàng tươi, mùi thơm hắc Lá đài hình trái xoan, ống đài dài mm, hình trứng Cánh hoa 5, dài Imm, rộng 2mm, hình dải, tù nhằn; ống tràng dài mm có long nhung Nhị 5, dài 12mm, đính họng, nhị mảnh, dài l,5mm; bao phấn hình dải, có mũi nhọn gốc, nhọn đầu, có lơng mềm lưng Bầu có ơ; vịi dài 9mm, mảnh; đầu nhụy dài 8mm, phồng, dạng thoi; noãn nhiều; giá nỗn có thùy Quả nang có núm nhọn đầu, nhằn, chia 2-3 mảnh, chứa nhiều hạt có cánh [27] Hoa tháng 9-12, tháng 1-4 [9], Phân bố sinh thái Việt Nam có số địa danh có rừng thường gặp nhiều Dây khai : Nghệ An, Quảng Nam, Bình Định, Gia Lai, Đắc Nơng, Đắc Lắc Dây khai hoa nhiều hàng năm Cây mọc ven rừng, gần bờ sơng suối có nhiều ánh sáng, có hoa nhiều tán rừng Nguồn trữ lượng Dây khai tỉnh phía Nam doi dào, ước tính tới hàng ngàn [9] Bộ phận dùng: Rề Khai Thu hái: Quanh năm, dùng tươi hay phơi, sấy khơ Dược liệu có mặt màu vàng nhạt, mùi khai hắc đặc biệt, vị đắng, [9] Công dụng: Nước sắc rễ Dây khai dùng đe rừa vết thương, làm cho vết thương mủ, chóng sinh cơ, lên da non Ngồi ra, Dây khai sử dụng chừa thấp khớp, chừa cảm cúm, làm thuốc bố máu, thông kinh, trừ thấp nhiệt, phù thũng, dùng cho phụ nữ sau sinh đẻ uống cho nhiều sữa, máu huyết lưu thông, da dẻ hồng hào Dân gian thường sử dụng dạng nước sắc, cao lỏng cao đăc, thuốc bột đe uống 1.1.3 Một số nghiên cứu nước Dây khai Một số nghiên cứu nước Dây khai thành phần hóa học số tác dụng dược lý • Nguyễn Thướng Trần Hùng (2002) phân tích sơ thành vật hóa thực vật Dây khai cho thấy toàn chứa saponin, tritrerpen steroid tự do, hợp chất khử, coumarin, acid hữu hợp chất polyuronic Riêng anthraquinon, flavonoid chất có mùi khai nồng thấy rễ Hàm lượng trung bình anthraquinon saponin toàn phần rề khai 5,66 % 4,68% [6], • Trần Thị Vân Anh cộng (2015) tiến hành khảo sát hoạt tính ức che NF-kB TNF-a gây tế bào HEK-293 chiết xuất dichloromethane PHỤ LỤC Phụ lục Trọng lượng chuột thử nghiệm độc tính cấp mg/kg Cao khai liều 5000 Sinh lý Lô Khối lượng chuột Khối lượng chuột Khối lượng trước thử nghiệm (g) cuối thử nghiệm (g) chuột tăng (g) 23.2 28.5 5.3 24.2 27.4 3.2 22.4 26.5 4.1 22.8 27.5 4.7 23.1 28.6 5.5 23.1 27.7 4.6 20.3 25.9 5.6 22.1 27.5 5.4 21 25.3 4.3 23.4 27.8 4.4 22.7 27.5 4.8 22.9 28.7 5.8 Chuột PL-1 Phụ lục Thơng số sinh hóa chuột cuối thủ nghiệm độc tính cấp L Chuột Cao Khai liều 5000 mg/kg Sinh lý Unit WBC 109/l 3.5 4.5 5.1 4.8 4.6 RBC 1012/l 7.5 6.6 8.0 7.0 7.5 7.3 HgB g/dL 14.7 12.3 15.4 13.9 14.7 14.2 HCT % 0.4 0.3 0.5 0.4 0.4 0.4 MCV fL 53.1 53.1 57.1 52.5 53.1 53.8 MCH Pg 19.5 18.7 19.3 19.9 19.5 19.4 MCHC g/dL 36.8 35.3 33.9 38.0 36.8 36.2 PLT 109/l 413.0 377.0 416.0 450.0 413.0 413.8 ALT U/L 68.0 70.0 90.0 82.0 68.0 75.6 AST U/L 39.0 40.0 40.0 45.0 39.0 40.6 Ure mmol/L 5.4 6.1 6.2 6.8 5.4 6.0 Creatinine pmol/L 78.0 79.0 80.0 81.0 78.0 79.2 WBC 109/l 5.0 3.3 4.4 5.3 2.7 4.1 RBC 1012/l 7.8 7.9 7.6 7.4 7.0 7.6 HgB g/dL 15.2 15.4 15.4 14.3 13.7 15.3 HCT % 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 MCV fL 54.3 53.1 53.1 52.4 51.8 52.4 MCH Pg 29.5 19.5 20.1 19.2 19.5 20.2 MCHC g/dL 36.1 36.8 38.0 36.8 37.8 38.7 PLT 109/L 339.0 603.0 485.0 385.0 484.0 563.0 ALT U/L 180.0 210.0 110.0 220.0 130.0 210.0 AST U/L 190.0 120.0 120.0 100.0 130.0 130.0 Ure mmol/L 6.6 5.9 5.2 3.7 3.9 5.1 Creatinine gmol/L 76.0 79.0 80.0 73.0 74.0 86.0 PL-2 Phụ lục Thê tích bàn chân chuột thay đơi theo thời gian lô thử nghiệm (ml) Cao khai 800 mg/kg Cao khai 400 mg/kg Diclofenac mg/kg Chứng bệnh Sinh lý Lô thử nghiệm VOh Vlh V3h V5h V24h V48h V72h V96h V120h V144h 9 10 9 10 8 8 10 10 9 10 11 9 10 10 10 10 10 11 9 9 10 10 10 10 9 10 10 10 9 10 14 16 14 13 15 15 13 14 12 12 13 12 11 14 13 11 13 15 13 15 14 10 12 14 14 13 14 13 14 13 12 13 10 10 10 9 10 14 14 13 15 15 15 16 15 14 14 14 13 14 15 14 14 14 15 15 16 15 14 15 14 15 15 16 15 15 16 14 16 10 10 10 9 10 15 15 14 14 16 15 17 19 15 15 15 13 14 15 16 14 14 15 15 16 16 15 15 15 15 15 20 16 16 19 15 17 10 10 10 10 10 10 9 14 14 14 14 14 14 15 15 15 15 14 13 14 13 14 14 13 14 13 15 13 13 14 13 14 13 13 14 14 13 13 13 10 10 10 10 10 10 9 14 15 15 21 14 14 15 14 14 14 13 12 13 14 13 14 13 14 14 16 14 14 15 14 15 14 15 17 16 14 15 14 10 10 10 10 10 10 9 16 15 15 17 15 15 14 14 14 14 13 12 12 14 13 14 13 14 14 16 13 12 14 12 15 14 15 16 15 13 12 13 10 10 10 10 10 10 10 10 14 14 13 14 13 13 13 13 13 13 13 12 11 14 13 14 12 14 13 15 14 11 12 12 14 13 14 15 15 13 12 13 10 10 10 10 10 10 10 10 14 13 12 14 12 13 12 13 12 13 12 12 11 14 13 14 12 13 13 15 12 11 12 12 14 13 13 14 15 13 12 12 10 10 10 10 10 10 10 10 13 13 11 14 12 12 11 12 12 12 12 12 11 13 12 13 11 13 12 13 11 11 12 11 13 11 12 13 14 12 12 12 PL-3 Phụ lục Tỷ lệ phù chân chuột theo thời gian giừa lô thừ nghiệm (%) Cao khai 800 mg/kg Cao khai 400 mg/kg Diclofenac mg/kg Chứng bệnh Sinh lý Lô thử nghiêm AVlh 11.11 11.11 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 75.00 100.00 75.00 30.00 87.50 66.67 44.44 75.00 20.00 33.33 18.18 33.33 22.22 40.00 30.00 10.00 44.44 50.00 30.00 36.36 55.56 25.00 33.33 55.56 55.56 30.00 40.00 30.00 40.00 44.44 33.33 44.44 AV3h 11.11 11.11 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 75.00 75.00 62.50 50.00 87.50 66.67 77.78 87.50 40.00 55.56 27.27 44.44 55.56 50.00 40.00 40.00 55.56 50.00 50.00 45.45 66.67 75.00 66.67 55.56 66.67 50.00 60.00 50.00 50.00 77.78 55.56 77.78 AV5h 11.11 11.11 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 87.50 87.50 75.00 40.00 87.50 66.67 88.89 137.50 50.00 66.67 36.36 44.44 55.56 50.00 60.00 40.00 55.56 50.00 50.00 45.45 77.78 87.50 66.67 66.67 66.67 50.00 100.00 60.00 60.00 111.11 66.67 88.89 AV24h AV48h AV72h AV96h AV120h 11.11 11.11 0.00 11.11 11.11 0.00 0.00 12.50 75.00 75.00 75.00 40.00 62.50 55.56 66.67 87.50 50.00 66.67 27.27 44.44 55.56 30.00 40.00 40.00 44.44 40.00 30.00 36.36 44.44 62.50 55.56 44.44 55.56 30.00 30.00 40.00 40.00 44.44 44.44 44.44 11.11 11.11 0.00 11.11 11.11 0.00 0.00 12.50 75.00 87.50 87.50 110.00 75.00 55.56 66.67 75.00 40.00 55.56 18.18 33.33 44.44 40.00 30.00 40.00 44.44 40.00 40.00 45.45 55.56 75.00 66.67 55.56 66.67 40.00 50.00 70.00 60.00 55.56 66.67 55.56 11.11 11.11 0.00 11.11 11.11 0.00 0.00 12.50 100.00 87.50 87.50 70.00 87.50 66.67 55.56 75.00 40.00 55.56 18.18 33.33 33.33 40.00 30.00 40.00 44.44 40.00 40.00 45.45 44.44 50.00 55.56 33.33 66.67 40.00 50.00 60.00 50.00 44.44 33.33 44.44 11.11 11.11 0.00 11.11 11.11 0.00 11.11 25.00 75.00 75.00 62.50 40.00 75.00 44.44 44.44 62.50 30.00 44.44 18.18 33.33 22.22 40.00 30.00 40.00 33.33 40.00 30.00 36.36 55.56 37.50 33.33 33.33 55.56 30.00 40.00 50.00 50.00 44.44 33.33 44.44 11.11 11.11 0.00 11.11 11.11 0.00 11.11 25.00 75.00 62.50 50.00 40.00 62.50 44.44 33.33 62.50 20.00 44.44 9.09 33.33 22.22 40.00 30.00 40.00 33.33 30.00 30.00 36.36 33.33 37.50 33.33 33.33 55.56 30.00 30.00 40.00 50.00 44.44 33.33 33.33 PL-4 AV144h 11.11 11.11 0.00 11.11 11.11 0.00 11.11 25.00 62.50 62.50 37.50 40.00 62.50 33.33 22.22 50.00 20.00 33.33 9.09 33.33 22.22 30.00 20.00 30.00 22.22 30.00 20.00 18.18 22.22 37.50 33.33 22.22 44.44 10.00 20.00 30.00 40.00 33.33 33.33 33.33 MINH CHỨNG ĐI KÈM Sản phẩm 1: Bảng số liệu kết độc tính cấp thuốc gia truyền CAO KHAI SỐ chuột thử Lô thử nghiệm SỐ chuột chết nghiệm Tỷ lệ chuột chết (%) Lô (đối chứng sinh lý) 0/6 Lô (cao khai liều 5000 mg/kg) 0/6 Thơng số sinh hóa chuột cuối thử nghiêm độc tính cấp Chuột L Sinh lý WBC RBC HgB HCT MCV MCH MCHC PLT ALT ÍL Ure Creatinine WBC RBC HgB HCT MCV Pg g/dL 109/l U/L U/L mmol/L gmol/L 109/L 1012/l g/dL % ÍL MCH MCHC PLT ALT AST Ure Creatinine Pg g/dL 109/l U/L U/L mmol/L gmol/L AST Cao Khai liều 5000 mg/kg Unit 109/L 1012/L g/dL % 3.5 7.5 14.7 0.4 53.1 19.5 36.8 413.0 68.0 39.0 5.4 78.0 5.0 7.8 15.2 0.4 54.3 29.5 36.1 339.0 180.0 190.0 6.6 76.0 4.5 6.6 12.3 0.3 53.1 18.7 35.3 377.0 70.0 40.0 6.1 79.0 3.3 7.9 15.4 0.4 53.1 19.5 36.8 603.0 210.0 120.0 5.9 79.0 8.0 15.4 0.5 57.1 5.1 7.0 13.9 0.4 52.5 19.9 38.0 450.0 82.0 45.0 6.8 81.0 5.3 7.4 14.3 0.4 52.4 19.2 36.8 385.0 220.0 100.0 3.7 73.0 4.8 7.5 14.7 0.4 53.1 19.5 36.8 413.0 68.0 39.0 5.4 78.0 2.7 7.0 13.7 0.4 51.8 19.5 37.8 484.0 130.0 130.0 3.9 74.0 4.6 7.3 14.2 0.4 53.8 19.4 36.2 413.8 75.6 40.6 6.0 79.2 4.1 7.6 15.3 0.4 52.4 20.2 38.7 563.0 210.0 130.0 5.1 86.0 PL-5 19.3 33.9 416.0 90.0 40.0 6.2 80.0 4.4 7.6 15.4 0.4 53.1 20.1 38.0 485.0 110.0 120.0 5.2 80.0 Sản phâm 2: Bảng sô liệu kêt đánh giá tác động kháng viêm thuôc gia truyền CAO KHAI Lô Độ sưng phù chân chuột (MEAN ± SEM) (%) △V120h AV144h △ Vlh A V3h A V5h AV24h A V48h AV72h AV96h 2.78 2.78 2.78 7.12 7.12 7.12 10.07 10.07 10.07 ± 1.82 ± 82 ± 1.82 ± 2.09 ± 2.09 ± 2.09 ± 2.77 ± 2.77 ± 2.77 69.20 ±7.95 72.74 ±4.49 83.82 ±9.67 67.15 ±5.16 79.03 ±5.76 78.72 ±5.10 59.86 ±5.30 53.78 ±4.98 46.32 ±5.45 25.88 44.10 50.38 44.24 37.69 36.30 32.27 29.89 24.75 ±3.50 ±3.36 ±3.60 ±4.61 ±3.87 ±3.77 ±3.21 ±4.26 ±2.99 41.28 58.11 62.45 44.72 52.84 44.15 37.43 33.40 25.71 ±4.17 ±3.63 ±5.25 ±3.64 ±4.54 ±2.38 ±2.81 ±0.93 ±2.47 Cao khai 39.72 60.97 75.42 41.11 58.06 48.61 44.86 39.58 30.55 800 mg/kg ±3.06 ±4.20 ±7.72 ±2.96 ±3.53 ±3.78 ±4.02 ±3.41 ±3.87 Sinh lý Chứng bệnh Diclofenac 5mg/kg Cao khai 400 mg/kg PL-6 Sản phẩm 3: Toàn văn báo khoa học Nghiên cứu đánh giá độc tính cấp, tác động kháng viêm thuốc gia truyền "cao khai" sản xuất tỉnh ninh thuận Nguyền Thị Bạch Tuyết*, Hoàng Thị Phương Liên*, Bạch Long Giang** *BỘ môn Dược lý, Khoa Dược, Đại học Đại học Nguyễn Tất Thành ** Phịng Khoa học -Cơng nghệ, Đại học Nguyễn Tất Thành *ntbtuyet@,ntt.edu.vn TÓM TẢT Đe tài khào sát độc tính cấp đường uống tác dụng kháng viêm thuốc gia truyền “Cao Khai” sàn xuất tỉnh Ninh Thuận Các thữ nghiệm in vivo chuột nhắt trắng Swiss albino, 6-8 tuần tuồi, trọng lượng trung bình khoảng 22g Khảo sát độc tinh cấp đường uống cùa cao Khai liều 5000 mg/kg với tích 50ml/kg trọng lượng chuột, theo dõi tỷ lệ chết biếu độc tính cấp vịng 14 ngày Sự thay đối trọng lượng the, chi số huyết học, chức gan thận chuột ghi nhận vào cuối thữ nghiệm Tác dụng điều trị viêm cao Khai với liều 400 800 mg/kg xác định mơ hình gây viêm bàn chân chuột nhắt bang carrageenan 1%, mồi lô chuột Diclofenac liều mg/kg sử dụng làm chất đối chứng Ket quà cho thấy Cao Khai không gây độc tính cấp đường uống nồng độ 5000 mg/kg, xếp vào phân loại - chất gần khơng có độc tính theo GSH (Globally Harmonised System for Classification of Chemicals) Hơn nữa, cao Khai không gây khác biệt đáng kế trọng lượng chuột, chức tạo máu, chức thận, chức gan cũa chuột (p>0,05) Trên mơ hình khảo sát tác động điều trị viêm, cao Khai thể tác động làm giâm độ phù chân chuột đáng kể cà hai liều 400 800 mg/kg (p0.05) Điều cho thấy cao Khai khơng làm ánh hướng đến cân cũa chuột thữ nghiệm, Tác động cao Khai lên so huyết học Ảnh hường cũa cao Khai lên thông số huyết học chuột (n=6) trình bày Bâng Bảng Ánh hường cũa cao Khai đen thông so huyết học chuột bình thường Lơ thử nghiệm Thơng số huyềt Chì sồ bình thường học Sinh lý Cao khai 5000 mg/kg [5] WBC(109/L) 4,6 ± 0,2 4,1 ±0,4 3,0- 14,2 RBC(10i2/L) 7,3 ± 0,2 7,5 ±0,1 5-9,5 HgB (g/dL) 14,2 ±0,4 14,9 ±0,3 10,9-16,3 HCT (%) 0,4 ±0,01 0,4 ±0,01 / MCV (fL) 53,8 ±0,7 52,9 ± 0,4 48,0 - 56,0 MCH (pg) 19,4 ±0,2 21,3 ± 1,6 11,9-19,0 MCHC (g/dl) 36,2 ± 0,6 37,4 ± 0,4 25,9-35,1 PLT(lO-VpL) 413,8 ±9,4 476,5 ±41,2 / Chú thích: WBC: Số lượg bạch cầu RBC: Lượng hong cầu HgB:Huyet sắc tố MCV: Thế tích trung bình hồng cầu HCT: Thế tích khối hồng cầu MCH: Huyết sac tố trung binh hồng cầu MCHC: Nồng độ huyết sắc tố trung bình hồng cầu PLT: số lượng tiếu cầu So với lô sinh lý, thông số công thức máu gồm WBC (bạch cầu), RBC (hồng càu), HgB (huyết sac to), MCV (thế tích trung bình hồng cầu), HCT (the tích khối hồng cầu), MCH (huyết sắc tố trung bình hồng cầu), MCHC (nong độ huyết sắc tố trung binh hồng cầu), PLT (tiểu càu) cúa chuột uống cao Khai 5000 mg/kg khác biệt không cỏ ý nghĩa thống kê (p>0.05), vần nằm khoảng thơng số sinh lý bình thường chuột Như vậy, cao Khai không ảnh hường đen phát triến bình thường chuột, khơng có dấu hiệu nhiễm trùng ảnh hưởng đến chức tạo máu chuột Tác động cao Khai lên chức gan, thận Ành hướng cũa cao Khai đen chức gan thận đánh giá thông qua đinh lượng chi số sinh hóa: hoạt động enzyme gan (ALT, AST), nồng độ ure creatinine máu trinh bày Bảng Băng Anh hưởng Cao Khai lên chức gan, thận chuột thử nghiệm Lơ thừ nghiệm Chi số sinh hóa Chi số bình thường Sinh lý Cao khai 5000 mg/kg [5] ALT (U/L) 75,6 ± 3,6 176,7‘± 18.9 69-191 AST (U/L) 40,6 ± 0,9 131,7'± 12,5 26-120 Ure (mmol/L) ±0,2 5,1 ±0.5 / Creatinine (pmol/L) 79,2 ± 0,5 78 ± 1,9 / *: p < 0.05 so với lô sinh lý PL-10 Tại thời điếm khảo sát, số Urê Creatinine lô uống cao Khai liều 5000 mg/kg khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê so với lơ sinh lý (p>0,05); điều chứng tị thận không bị tốn thương (giảm chức thận, viêm thận mơ kẽ, viêm đài bế thận ) Nhìn chung, Cao Khai không ánh hường đen chức thận chuột Trên chức gan, chuột uống cao Khai liều 5000 mg/kg có chì so ALT, AST tăng so với lô sinh lý (p