Nghiên cứu tác dụng của chế phẩm ''Giáng chỉ tiêu khát linh'' điều trị rối loạn lipid máu trên động vật đái tháo đường týp 2 thực nghiệm
B GIO DC V O TO B Y T TRNG I HC Y H NI V VIT HNG NGHIÊN CứU TáC DụNG CủA chế phẩm "GIáNG CHỉ TIÊU KHáT LINH" ĐIềU TRị RốI LOạN LIPID MáU TRÊN động vật ĐáI THáO ĐƯờNG týp 2 THựC NGHIệM LUN N TIN S Y HC H NI - 2013 B GIO DC V O TO B Y T TRNG I HC Y H NI V VIT HNG NGHIÊN CứU TáC DụNG CủA chế phẩm "GIáNG CHỉ TIÊU KHáT LINH" ĐIềU TRị RốI LOạN LIPID MáU TRÊN động vật ĐáI THáO ĐƯờNG týp 2 THựC NGHIệM Chuyờn ngnh : Y HC C TRUYN Mó s : 62720201 LUN N TIN S Y HC Ngi hng dn khoa hc: PGS.TS. Nguyn Th H PGS.TS. Th Phng H NI - 2013 Lời cảm ơn Sau một thời gian học tập và nghiên cứu, trải qua nhiều những khó khăn nay tôi đã hoàn thành bản luận án Tiến sỹ y học của mình. Với tất cả tấm lòng, tôi xin bày tỏ sự biết ơn sâu sắc tới: Đảng uỷ, Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo Sau đại học và Khoa Y học cổ truyền Trường Đại học Y Hà Nội. Ban Giám đốc và Khoa Hoá sinh Bệnh viện Việt Nam - Thuỵ Điển, Uông Bí đã tạo điều kiện thuận lợi và cho phép tôi được học tập, nghiên cứu và trưởng thành như hôm nay. Tôi xin bày tỏ sự kính trọng và biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Thị Hà, PGS.TS Đỗ Thị Phương, hai người thầy kính yêu, hai người mẹ hiền đã tận tâm hướng dẫn, dìu dắt và động viên tôi trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu và hoàn thành bản luận án này. Tôi xin bày tỏ sự kính trọng và biết ơn sâu sắc tới : PGS.TS Nguyễn Nhược Kim PGS.TS Hoàng Minh Chung PGS.TS Nguyễn Trọng Thông Những người thầy đã tận tâm hướng dẫn, ân cần chỉ bảo và cho tôi nhiều ý kiến quý báu về phương pháp luận, tư duy khoa học trong suốt quá trình nghiên cứu và hoàn thành bản luận án án này. Trong quá trình học tập và nghiên cứu tôi đã nhận được rất nhiều sự giúp đỡ tận tình và quý báu của các tập thể và cá nhân. Tôi xin chân thành cám ơn: - Bộ môn Dược lý, Bộ môn Giải phẫu bệnh - Trường Đại học Y Hà Nội - Tập thể cán bộ Khoa Hoá sinh - Bệnh viện Việt Nam - Thuỵ Điển, Uông Bí. - Công ty Cổ Phần Dược phẩm Khang Minh, TP. HCM. Có được thành quả như ngày hôm nay tôi cũng xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới cha mẹ đã sinh thành và dưỡng dục. Xin cảm ơn chồng và các con, những người thân trong gia đình cùng bạn bè và đồng nghiệp đã dành những tình cảm quý báu, thường xuyên động viên, khích lệ tôi trong suốt quá trình nghiên cứu. Vũ Việt Hằng LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, đã được các thày cô hướng dẫn khoa học nghiêm túc và tận tình. Các kết quả và số liệu viết trong bản luận án này là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác. Tác giả luận án VŨ VIỆT HẰNG CÁC CHỮ VIẾT TẮT AGE : Advanced glycation end products (Sản phẩm tận/sản phẩm cuối cùng) ATP III : Adult Treatment Panel III (Quy chuẩn điều trị ở người trưởng thành III) BCLD : Bột chiết lá dâu BMV : Bệnh mạch vành CE : Cholesterol este CETP : Cholesteryl este transfer protein CM : Chylomicron DAG : Diacylglycerol ĐMV : Động mạch vành ĐTĐ : Đái tháo đường EL : Endothelial lipase FC : Free cholesterol (Cholesterol tự do) GPx : Glutathion peroxidase (Enzym có vai trò chống oxy hoá) GR : Glutathion reductase GSH : Glutathion dạng khử GSSH : Glutathion dạng oxy hoá HDL : High density lipoprotein (Lipoprotein có tỷ trọng cao) HDL -C : Cholesterol của HDL HL : Hepatic lipase HSL : Hormon- sensitive lipase IDL : Intermediate Density Lipoprotein (Lipoprotein có tỷ trọng trung gian) LCAT : Lecithin cholesterol acyl transferase LDL : Low density lipoprotein (Lipoprotein có tỷ trọng thấp) LDL -C : Cholesterol của LDL LP : Lipoprotein LPL : Lipoprotein lipase PLTP : Phospholipid transfer protein NCEP : National Cholesterol Education Program (Chương trình giáo dục Quốc gia về Cholesterol) PDGF : Platelet-derived growth factor (Yếu tố tăng trưởng tiểu cầu) RLCH : Rối loạn chuyển hoá RLDNG : Rối loạn dung nạp glucose RLGLĐ : Rối loạn glucose lúc đói RLLPM : Rối loạn lipid máu SOD : Superoxid dismutase (Enzyme có vai trò chống oxy hoá) STZ : Streptozotocin TAS : Total antioxidant status (Trạng thái chống oxy hoá toàn phần) TC : Total Cholesterol (Cholesterol toàn phần) TG : Triglycerid TV : Giá trị trung vị THA : Tăng huyết áp THb : Total Hemoglobin ( Hemoglobin toàn phần) VLDL : Very low density lipoprotein (Lipoprotein có tỷ trọng rất thấp) VXĐM : Vữa xơ động mạch VEGF : Vascular endothelial growth factor (Yếu tố tăng trưởng nội mạch) YHCT : Y học cổ truyền YHHĐ : Y học hiện đại MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ 1 CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 3 1.1. Rối loạn chuyển hóa lipid, hoạt động gốc tự do và vữa xơ động mạch trong đái tháo đƣờng 3 1.1.1. Đái tháo đường 3 1.1.2. Rối loạn chuyển hóa lipid trong đái tháo đường 4 1.1.3. Stress oxy hoá ở bệnh đái tháo đường 12 1.1.4 Đái tháo đường và vữa xơ động mạch 19 1.2. Đái tháo đƣờng và rối loạn chuyển hoá lipid theo y học cổ truyền 22 1.2.1. Đái tháo đường theo quan niệm của Y học cổ truyền 22 1.2.2. Quan niệm của YHCT về hội chứng rối loạn lipid máu 24 1.2.3. Mối liên quan giữa chứng đàm thấp và tiêu khát trên phương diện nguyên nhân cơ chế bệnh sinh theoYHCT 26 1.3. Điều trị đái tháo đƣờng và rối loạn lipid máu theo y học hiện đại và y học cổ truyền 28 1.3.1. Thuốc Y học hiện đại điều trị đái tháo đường và rối loạn lipid máu 28 1.3.2. Y học cổ truyền điều trị đái tháo đường và rối loạn lipid máu 31 1.4. Các mô hình gây đái tháo đƣờng trên thực nghiệm 34 1.4.1 Mô hình gây đái tháo đường thực nghiệm týp 1 34 1.4.2 Mô hình gây đái tháo đường týp 2 35 1.4.3. Streptozotocin và các mô hình gây ĐTĐ trên động vật thực nghiệm 35 1.5. Xuất xứ bài thuốc và tổng quan các vị thuốc 36 1.5.1. Xuất xứ bài thuốc nghiên cứu 36 1.5.2 Một số nghiên cứu liên quan đến bài thuốc nghiên cứu 37 1.5.3. Sơ bộ về các vị thuốc của bài thuốc 37 CHƢƠNG 2: CHẤT LIỆU, ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 42 2.1. Chất liệu và đối tƣợng nghiên cứu 42 2.1.1 Thuốc nghiên cứu: “Giáng chỉ tiêu khát linh” 42 2.1.2 Đối tượng nghiên cứu 43 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 46 2.2.1. Nghiên cứu độc tính cấp 46 2.2.2. Nghiên cứu độc tính bán trường diễn 46 2.2.3. Nghiên cứu tác dụng của “Giáng chỉ tiêu khát linh” trên thực nghiệm 47 2.3. Các kỹ thuật đƣợc sử dụng trong nghiên cứu 55 2.3.1. Chuẩn bị bệnh phẩm 55 2.3.2. Kỹ thuật sinh hoá 55 2.3.3. Kỹ thuật mô bệnh học 56 2.4. Xử lý số liệu 56 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 57 3.1. Kết quả nghiên cứu độc tính cấp và bán trƣờng diễn của giáng chỉ tiêu khát linh 57 3.1.1. Kết quả nghiên cứu độc tính cấp trên chuột nhắt trắng 57 3.1.2. Kết quả nghiên cứu độc tính bán trường diễn trên thỏ 57 3.2 Tác dụng của giáng chỉ tiêu khát linh trên mức glucose máu ở chuột cống trắng 69 3.2.1 Tác dụng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên mức glucose máu ở chuột cống trắng bình thường 69 3.2.2 Tác dụng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên mức glucose máu ở chuột cống trắng gây ĐTĐ týp 2 70 3.3 Ảnh hƣởng của chế độ ăn giàu chất béo trên các chỉ số lipid và trạng thái chống oxy hoá trong máu ở chuột cống trắng 71 3.3.1 Ảnh hưởng chế độ ăn giàu chất béo lên cân nặng chuột cống trắng 71 3.3.2. Ảnh hưởng chế độ ăn giàu chất béo trên các chỉ số lipid máu ở chuột cống trắng 72 3.3.3. Ảnh hưởng chế độ ăn giàu chất béo trên hoạt độ SOD hồng cầu, GPx máu toàn phần và TAS huyết tương ở chuột cống trắng 73 3.4. Tác dụng dự phòng của giáng chỉ tiêu khát linh trên các chỉ số lipid và trạng thái chống oxy hoá trong máu chuột cống trắng 74 3.4.1 Ảnh hưởng chế độ ăn giàu chất béo lên cân nặng chuột cống trắng 74 3.4.2 Tác dụng dự phòng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên các chỉ số lipid máu ở chuột cống trắng với chế độ ăn giàu lipid. 75 3.4.3. Tác dụng dự phòng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên nồng độ TAS huyết tương, hoạt độ SOD hồng cầu và GPx máu toàn phần ở chuột cống trắng có chế độ ăn giàu lipid 77 3.5. Tác dụng điều trị của giáng chỉ tiêu khát linh trên các chỉ số lipid và trạng thái chống oxy hoá trong máu chuột cống trắng 78 3.5.1 Cân nặng các nhóm chuột gây RLLPM được điều trị và không được điều trị bằng Giáng chỉ tiêu khát linh 78 3.5.2 Tác dụng điều trị RLLPM của Giáng chỉ tiêu khát linh trên các chỉ số lipid huyết tương của chuột cống trắng với chế độ ăn giàu lipid. 79 3.5.3. Tác dụng của điều trị của Giáng chỉ tiêu khát linh trên nồng độ TAS huyết tương, hoạt độ SOD hồng cầu và GPx máu toàn phần ở chuột cống trắng rối loạn lipid máu 81 3.6. Tác dụng của giáng chỉ tiêu khát linh trên các chỉ số glucose, lipid và trạng thái chống oxy hoá trong máu ở chuột cống trắng gây đái tháo đƣờng týp 2 82 3.6.1. Kết quả gây đái tháo đường thực nghiệm ở chuột bị rối loạn lipid máu 82 3.6.2 Cân nặng các lô chuột gây đái tháo đường được điều trị và không được điều trị bằng Giáng chỉ tiêu khát linh 82 3.6.3 Tác dụng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên các chỉ số glucose và lipid máu ở chuột cống trắng gây ĐTĐ týp 2 83 3.6.4. Tác dụng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên hoạt độ SOD hồng cầu, GPx máu và TAS huyết tương ở chuột cống trắng đái tháo đường týp 2 87 3.7. Ảnh hƣởng của giáng chỉ tiêu khát linh trên sự thay đổi mô bệnh học của chuột cống trắng 89 3.7.1. Hình thái vi thể động mạch chủ của chuột cống trắng thực nghiệm 89 3.7.2. Hình thái vi thể mô tuỵ của chuột cống trắng rối loạn lipid máu gây đái tháo đường týp 2 thực nghiệm 92 3.7.3. Hình thái vi thể mô gan của chuột cống trắng rối loạn lipid máu gây đái tháo đường týp 2 thực nghiệm 94 3.7.4. Hình thái vi thể mô thận của chuột cống trắng rối loạn lipid máu gây đái tháo đường týp 2 thực nghiệm 96 CHƢƠNG 4: BÀN LUẬN 97 4.1 Độc tính cấp và bán trƣờng diễn của giáng chỉ tiêu khát linh 97 4.1.1 Độc tính cấp trên chuột nhắt trắng 97 4.1.2 Độc tính bán trường diễn 97 4.2 Ảnh hƣởng của chế độ ăn giàu lipid trên các chỉ số lipid máu và trạng thái chống oxy hoá trong máu ở chuột cống trắng 100 4.2.1 Ảnh hưởng của chế độ ăn giàu lipid trên các chỉ số lipid máu 100 4.2.2 Ảnh hưởng của chế độ ăn giàu chất béo lên trạng thái chống oxy hoá máu của cơ thể 102 4.3. Về sự lựa chọn mô hình gây đái tháo đƣờng 104 4.4. Tác dụng cuả giáng chỉ tiêu khát linh trên các chỉ số lipid máu ở chuột cống trắng gây rối loạn lipid và đái tháo đƣờng týp 2 106 4.4.1 Tác dụng dự phòng của Giáng chỉ tiêu khát linh ở chuột cống trắng có chế độ ăn giàu lipid 106 4.4.2 Tác dụng điều trị của Giáng chỉ tiêu khát linh ở chuột cống trắng gây rối loạn lipid máu 108 4.4.3 Tác dụng điều trị rối loạn lipid máu của Giáng chỉ tiêu khát linh ở chuột cống trắng gây đái tháo đường týp 2 111 4.4.4 Tác dụng điều trị rối loạn lipid máu của Giáng chỉ tiêu khát linh trên hình thái mô động mạch chủ ở chuột cống trắng gây rối loạn lipid máu. 113 4.4.5 Lý giải tác dụng điều chỉnh lipid máu của Giáng chỉ tiêu khát linh 114 4.5 Tác dụng của giáng chỉ tiêu khát linh trên nồng độ glucose máu chuột cống trắng 118 4.5.1 Ảnh hưởng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên mức glucose máu chuột cống trắng bình thường và chuột gây đái tháo đường týp 2. 118 4.5.2 Tác dụng điều trị trên chỉ số glucose máu của Giáng chỉ tiêu khát linh sau 30 ngày và 60 ngày uống thuốc 120 [...]... “Giáng chỉ tiêu khát linh”, đề tài: Nghiên cứu tác dụng của chế phẩm “Giáng chỉ tiêu khát linh” điều trị rối loạn lipid máu trên động vật đái tháo đường týp 2 thực nghiệm được thực hiện nhằm các mục tiêu sau: 1 Nghiên cứu độc tính cấp và bán trường diễn của viên nang “Giáng chỉ tiêu khát linh” trên động vật thực nghiệm 2 Nghiên cứu tác dụng của viên nang “Giáng chỉ tiêu khát linh” trên một số chỉ số lipid, ... 82 Tác dụng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên nồng độ glucose máu chuột cống trắng đái tháo đường sau 30 và 60 ngày điều trị 83 Tác dụng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên nồng độ lipid máu chuột cống trắng đái tháo đường sau 30 ngày điều trị 84 Bảng 3. 32 Tác dụng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên nồng độ lipid máu chuột cống trắng đái tháo đường sau 60 ngày điều trị 85 Bảng 3.33 Tác dụng điều. .. hình thực nghiệm đánh giá tác dụng điều trị của GCTKL 51 Sơ đồ 2. 4 Sơ đồ mô hình thực nghiệm đánh giá tác dụng điều trị của GCTKL ở chuột cống trắng gây ĐTĐ týp 2 53 Sơ đồ 2. 5 Sơ đồ tổng quát mô hình thực nghiệm nghiên cứu tác dụng của Giáng chỉ tiêu khát linh ở chuột cống trắng 54 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 Nồng độ glucose máu ở chuột cống trắng đái tháo đường týp 2 uống Giáng chỉ tiêu khát. .. Tác dụng của giáng chỉ tiêu khát linh trên trạng thái chống oxy hoá máu ở chuột cống trắng 123 4.6.1 Tác dụng dự phòng và điều trị của Giáng chỉ tiêu khát linh trên trạng thái chống oxy hoá trong máu ở chuột cống trắng có chế độ ăn giàu lipid 123 4.6 .2 Về tác dụng điều trị của Giáng chỉ tiêu khát linh trên trạng thái chống oxy hoá trong máu ở chuột cống trắng gây đái tháo đường týp. .. có chế độ ăn giàu lipid .73 Bảng 3 .20 Ảnh hưởng chế độ ăn giàu chất béo lên cân nặng chuột cống trắng .74 Bảng 3 .21 Tác dụng dự phòng RLLPM của Giáng chỉ tiêu khát linh trên các chỉ số lipid máu chuột cống trắng sau 30 ngày nghiên cứu 75 Bảng 3 .22 Tác dụng dự phòng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên các chỉ số lipid máu chuột cống trắng sau 60 ngày nghiên cứu .75 Bảng 3 .23 Tác dụng dự phòng của. .. ngày điều trị liều 840mg và 126 0mg 79 Bảng 3 .27 Tác dụng điều trị của Giáng chỉ tiêu khát linh trên nồng độ TAS Bảng 3 .28 Bảng 3 .29 Bảng 3.30 Bảng 3.31 huyết tương, hoạt độ SOD và GPx ở chuột cống trắng có chế độ ăn giàu lipid 81 Nồng độ glucose máu của các lô chuột được gây đái tháo đường 82 Cân nặng của chuột đái tháo đường được điều trị và không được điều trị bằng Giáng chỉ tiêu khát. .. của Giáng chỉ tiêu khát linh trên chỉ số TAS huyết tương, hoạt độ SOD và GPx ở chuột cống trắng có chế độ ăn giàu lipid 77 Bảng 3 .24 Cân nặng của chuột điều trị và không được điều trị GCTKL .78 Bảng 3 .25 Tác dụng điều trị RLLPM của Giáng chỉ tiêu khát linh ở chuột cống trắng sau 30 ngày điều trị liều 840mg và 126 0mg 79 Bảng 3 .26 Tác dụng điều trị RLLPM của Giáng chỉ tiêu khát linh ở... đường týp 2 125 4.6.3 Lý giải về tác dụng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên trạng thái chống oxy hoá trong máu 126 4.7 Bàn về tác dụng của giáng chỉ tiêu khát linh và một số bài thuốc y học cổ truyền trong điều trị đái tháo đƣờng có rối loạn lipid máu 127 4.8 Bàn về liều dùng của giáng chỉ tiêu khát linh .130 KẾT LUẬN 131 KIẾN NGHỊ VÀ ĐỀ XUẤT 1 32 DANH MỤC... glucose máu một cách chặt chẽ được thiết lập * Rối loạn chuyển hóa lipid trong đái tháo đường týp 2 Rối loạn chuyển hóa lipid trong ĐTĐ týp 2 phổ biến hơn trong ĐTĐ týp 1 Ảnh hưởng của ĐTĐ týp 2 trên chuyển hóa lipid và lipoprotein phức tạp hơn nhiều vì nó chịu tác động của nhiều yếu tố như tình trạng kháng insulin, béo phì, phương pháp điều trị, mức độ kiểm soát glucose máu, sử dụng thuốc điều trị các rối. .. albumin trong máu thỏ 62 Ảnh hưởng của Giáng chỉ tiêu khát linh đến nồng độ cholesterol trong máu thỏ 63 Ảnh hưởng của Giáng chỉ tiêu khát linh đến nồng độ bilirubin toàn phần trong máu thỏ 63 Bảng 3.14 Ảnh hưởng của Giáng chỉ tiêu khát linh đến nồng độ creatinin trong máu thỏ 64 Bảng 3.15 Tác dụng của Giáng chỉ tiêu khát linh trên mức glucose máu chuột cống . 4.4.3 Tác dụng điều trị rối loạn lipid máu của Giáng chỉ tiêu khát linh ở chuột cống trắng gây đái tháo đường týp 2 111 4.4.4 Tác dụng điều trị rối loạn lipid máu của Giáng chỉ tiêu khát linh trên. tài: Nghiên cứu tác dụng của chế phẩm “Giáng chỉ tiêu khát linh” điều trị rối loạn lipid máu trên động vật đái tháo đường týp 2 thực nghiệm được thực hiện nhằm các mục tiêu sau: 1. Nghiên cứu. V VIT HNG NGHIÊN CứU TáC DụNG CủA chế phẩm "GIáNG CHỉ TIÊU KHáT LINH" ĐIềU TRị RốI LOạN LIPID MáU TRÊN động vật ĐáI THáO ĐƯờNG týp 2 THựC NGHIệM LUN N TIN S