Nghiên cứu độc tính và tác dụng hạ lipid máu trên động vật thực nghiệm của cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng nuciferin từ lá sen hồng (folium nelumbinis)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ TRẦN LÊ CHIÊU BÍCH NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG HẠ LIPID MÁU TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM CỦA CAO ĐỊNH CHUẨN KIỂM SOÁT HÀM LƯỢNG NUCIFERIN TỪ LÁ SEN HỒNG (FOLIUM NELUMBINIS) LUẬN VĂN CHUYÊN KHOA II Cần Thơ - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ TRẦN LÊ CHIÊU BÍCH NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG HẠ LIPID MÁU TRÊN ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM CỦA CAO ĐỊNH CHUẨN KIỂM SOÁT HÀM LƯỢNG NUCIFERIN TỪ LÁ SEN HỒNG (FOLIUM NELUMBINIS) Chuyên ngành: Dược Lý - Dược Lâm Sàng Mã số: 8720205.CK LUẬN VĂN CHUYÊN KHOA II Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Đỗ Châu Minh Vĩnh Thọ Cần Thơ - 2022 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Cần Thơ, ngày tháng 10 năm 2022 Người thực đề tài Trần Lê Chiêu Bích LỜI CÁM ƠN Sau hai năm học tập rèn luyện Trường Đại học Y-Dược Cần Thơ; biết ơn kính trọng, Tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu, phòng, khoa thuộc Trường đại học Y-Dược Cần Thơ; Giáo sư, Phó Giáo sư, Tiến sĩ nhiệt tình giảng dạy tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ Tơi q trình học tập làm Luận văn Đặc biệt, Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn lời cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Đỗ Châu Minh Vĩnh Thọ, người thầy trực tiếp hướng dẫn, tận tình dìu dắt, giúp đỡ Tơi cộng suốt trình thực đề tài Với tình cảm chân thành lòng biết ơn sâu sắc, cho phép tơi gửi lời cảm ơn tới: khoa Dược, Phịng Đào tạo sau Đại học, giảng viên Trường Đại học YDược Cần Thơ; tận tình giảng dạy tạo điều kiện giúp đỡ trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn Chân thành cảm ơn Phòng Nghiên cứu khoa học phát triển thuộc Viện Kiểm nghiệm thuốc Thành phố Hồ Chí Minh tạo điều kiện thuận lợi giúp Tơi hoàn thành mục tiêu nghiên cứu Cảm ơn bạn đồng nghiệp, bạn bè, gia đình động viên, khích lệ giúp đỡ tơi q trình học tập nghiên cứu khoa học Do điều kiện lực thân hạn chế, luận văn chắn khơng tránh khỏi thiếu sót Kính mong nhận đóng góp ý kiến thầy giáo hội đồng khoa học, bạn bè đồng nghiệp để luận văn tơi hồn thiện Xin trân trọng cảm ơn Cần Thơ, ngày tháng năm 2022 Trần Lê Chiêu Bích MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục sơ đồ MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan dược liệu Sen hồng (Nelumbo nucifera Gaertn.,) cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng nuciferin từ Sen hồng 1.2 Tổng quan thử độc tính cấp chuột nhắt trắng 1.3 Tổng quan hội chứng rối loạn lipid máu mơ hình thử nghiệm tác 15 dụng hạ lipid máu chuột nhắt trắng 1.4 Các nghiên cứu thử nghiệm độc tính cấp, hạ lipid huyết liên quan 22 Sen hồng dược liệu khác CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 Đối tượng nghiên cứu 28 2.2 Hóa chất, thuốc thử, trang thiết bị 29 2.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 30 2.4 Phương pháp nghiên cứu 30 2.5 Phương pháp thu thập đánh giá số liệu 37 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHÊN CỨU 3.1 Đánh giá độc tính cấp cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng 38 38 nuciferin từ Sen hồng động vật thực nghiệm 3.2 Đánh giá tác dụng hạ lipid máu cao định chuẩn kiểm soát hàm 41 lượng nuciferin từ Sen hồng Chương BÀN LUẬN 4.1 Thử độc tính cấp cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng nuciferin từ 58 58 Sen hồng chuột nhắt trắng 4.2 Đánh giá tác dụng hạ lipid máu cao định chuẩn kiểm soát hàm 61 lượng nuciferin từ Sen hồng mơ hình gây rối loạn lipid máu KẾT LUẬN 73 KIẾN NGHỊ 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC MỤC LỤC BẢNG Trang Bảng 1.1 Vị trí phân loại chi Nelumbo Bảng 1.2 Các alcaloid khung aporphin có Sen Bảng 1.3 Phân loại độc tính theo OECD Bảng 1.4 Bảng thể tích tối đa dung dịch thuốc dùng cho động vật 11 Bảng 1.5 Một số mơ hình gây tăng lipid máu tyloxapol (triton WR- 18 1339) Bảng 1.6 Mơ hình gây rối loạn lipid máu nội sinh poloxamer 407 19 Bảng 1.7 Mơ hình gây rối loạn lipid máu ngoại sinh hỗn hợp dầu 21 cholesterol Bảng 1.8 Các nghiên cứu thử độc tính cấp động vật thử nghiệm 22 nguyên liệu chế phẩm Sen hồng Bảng 2.1 Cỡ mẫu chuột nhắt thực nghiệm cho nghiên cứu 30 Bảng 2.2 Thành phần phản ứng đo triglycerid huyết 35 Bảng 2.3 Thành phần phản ứng đo cholesterol toàn phần huyết 36 Bảng 2.4 Thành phần phản ứng đo LDL-C huyết 36 Bảng 2.5 Thành phần phản ứng đo HDL-C huyết 36 Bảng 3.1 Trọng lượng chuột bắt đầu thử nghiệm 38 Bảng 3.2 Mơ tả tình trạng chuột lơ vịng ngày 39 Bảng 3.3 Mơ tả thể trọng chuột lơ vịng ngày 39 Bảng 3.4 Mô tả thể trọng chuột lơ vịng ngày (g)(M ± SEM) 40 Bảng 3.5 Nồng độ lipid huyết lô chuột thử nghiệm 42 Bảng 3.6 Tỷ lệ (%) thay đổi số lipid so với lô chứng bệnh 43 Bảng 3.7 Nồng độ số lipid huyết sau tuần gây bệnh 45 Bảng 3.8 Nồng độ triglycerid (mg/dL) (Mean ± SEM) lô trước 46 sau tuần điều trị Bảng 3.9 Tỷ lệ (%) thay đổi số triglycerid lô điều trị so với lô chứng 47 bệnh Bảng 3.10 Nồng độ cholesterol (mg/dL) (Mean ± SEM) lô trước 49 sau tuần điều trị Bảng 3.11 Tỷ lệ (%) thay đổi số cholesterol - C lô điều trị so với lô 50 chứng bệnh Bảng 3.12 Nồng độ LDL - Cholesterol (mg/dL) (Mean ± SEM) lô 51 trước sau tuần điều trị Bảng 3.13 Tỷ lệ (%) thay đổi số LDL-C lô điều trị so với lô chứng 52 Bảng 3.14 Nồng độ HDL - Cholesterol (mg/dL) (Mean ± SEM) lô 53 trước sau tuần điều trị Bảng 3.15 Tỷ lệ (%) thay đổi số Nồng độ HDL-C lô điều trị so với lô 53 chứng bệnh Bảng 4.1 Phân loại nồng độ cholesterol máu 63 MỤC LỤC BIỂU ĐỒ Trang Biểu đồ 3.1 Trọng lượng trung bình lơ thử nghiệm độc tính cấp 40 ngày Biểu đồ 3.2 Tình trạng RLLPM cấp tyloxapol liều 250mg/kg 41 chuột nhắt trằng chủng Swiss albino Biểu đồ 3.3 Nồng độ lipid huyết lô thử nghiệm/tyloxapol 42 Biểu đồ 3.4 Thay đổi số lipid (%) lô thử nghiệm so với 44 lô chứng bệnh Biểu đồ 3.5 Chỉ số lipid chuột thử nghiệm sau tuần tiêm tyloxapol 45 Biểu đồ 3.6 Sự thay đổi nồng độ triglycerid sau tuần lô thử 47 nghiệm Biểu đồ 3.7 Nồng độ triglycerid thay đổi (%) tuần lô 48 chuột thử nghiệm so với lô chứng bệnh Biểu đồ 3.8 Nồng độ cholesterol –C trước sau tuần điều trị 49 Biểu đồ 3.9 Tỷ lệ (%) cholesterol -C thay đổi tuần lô 50 chuột thử nghiệm so với nhóm chứng bệnh Biểu đồ 3.10 Nồng độ LDL-C trước sau tuần điều trị 52 Biểu đồ 3.11 Tỷ lệ (%) thay đổi số Nồng độ LDL-C lô điều trị so 53 với lô chứng bệnh Biểu đồ 3.12 Sự thay đổi nồng độ HDL-C trước tuần điều trị 54 Biểu đồ 3.13 Chỉ số lipid máu chuột sau tuần tiêm tyloxapol so với lô 55 sinh lý Biểu đồ 3.14 So sánh tác dụng hạ lipid máu fenofibrat với cao 56 Sen Biểu đồ 3.15 Nồng độ trung bình lipid (mg/dL) máu chuột thử nghiệm 56 với cao Sen liều 30mg/Kg; 60mg/Kg 90mg/Kg Biểu đồ 3.16 Tác dụng hạ lipid máu chuột thử nghiệm fenofibrat cao Sen mức liều 30mg/Kg 60mg/Kg 57 80 khảo sát mối liên quan đặc điểm hình thái, chức thận với số thơng số nhân trắc xét nghệm người hiến thận huyết thống survey on the relationship between morphological characteristics, kidney function with some anthropometric and laboratory parameters in relatively living donors Trần Hồng Hiệp, Nguyễn Kim Lưu, Ngơ Văn Đàn, Nguyễn Hải Nguyễn, Ngô Vĩnh Điệp 81 mô tả số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng kết điều trị phẫu thuật tắc ruột bã thức ăn trẻ em Bệnh viện Nhi Trung ương, giai đoạn 2017 - 2021 clinical characteristics, diagnose and treatment results surgery of intestinal obstruction caused by phytobezoar in children in National Pediatric Hospital period of 2017 - 2021 Hán An Ninh, Phạm Duy Hiền 82 nghiên cứu tình hình sử dụng thuốc điều trị tăng huyết áp bệnh nhân suy thận mạn lọc máu định kỳ thận nhân tạo Trung tâm Y tế thị xã Giá Rai năm 2021 – 2022 research on the situation of use of hypertension medications in patients with chronic kidney disease requiring hemodialysis at Gia Rai Town Health Center in 2021 – 2022 Nguyễn Thúy An, Nguyễn Ngọc Tố Quyên, Mai Huỳnh Như 83 so sánh hài lòng người bệnh chất lượng dịch vụ dược nhà thuốc thuộc hệ thống nhà thuốc Bệnh viện Đại học Y Hà Nội comparing patient satisfaction with the quality of pharmacy services at pharmacies of the pharmacy system at Hanoi Medical University Hospital Lê Thu Thuỷ, Lương Thị Hiên, Chu Quốc Thịnh, Hà Quang Tuyến 84 §ánh giá kết phục hồi chức vận động sớm bệnh nhân sau mổ thay khớp gối toàn thối hóa assessment of early rehabilitation in patient after total knee arthroplasty due to osteoarthritis Trịnh Thu Hiền, Nguyễn Thị Kim Liên 85 §ặc điểm lâm sàng rối loạn xử lý cảm giác trẻ rối loạn phổ tự kỷ clinical features of sensory processing disorders in children with autism spectrum disorder Nguyễn Thế Tài, Nguyễn Doãn Phương 86 xác định genotype Human Papilloma Virus kỹ thuật Real time PCR bệnh nhân khám sàng lọc Viện Pasteur thành phố Hồ Chí Minh 2021-2022 determination of human papilloma virus genotypes by Real time PCR in patients testing at pasteur institute Ho Chi Minh City 2021-2022 Cao Thị Thu Cúc, Nguyễn văn Thắng, Cao Hữu Nghĩa 87 §ặc điểm lâm sàng rối loạn nhận thức người bệnh rối loạn phân liệt cảm xúc clinical description of cognitive dysfunction in patients with schizoaffective disorder Nguyễn Thị Cẩm Tú, Dương Minh Tâm 88 kết phẫu thuật nội soi tái tạo dây chằng chéo trước khớp gối với mảnh ghép nửa trước gân mác dài tự thân kỹ thuật tất bên results of all-inside anterior cruciate ligament reconstruction using an anterior half of the peroneus longus tendon autograft Phạm Quang Vinh, Đỗ Quang Sang, Nguyễn Phương Nam 89 §ặc điểm hướng dẫn sàng bên từ tư lồng múi tối đa nhóm sinh viên Răng hàm mặt trường Đại học Y Hà Nội characterization of fuctional occlusal patterns during lateral excursions from the maximal intercuspal in dental students in Ha Noi Medical University Trần Thị Lâm Oanh, Hoàng Việt Hải, Quách Thị Thuý Lan, Bùi Thị Bích Ngân 90 phân tích chi phí thỏa dụng esomeprazole điều trị phòng ngừa tái xuất huyết tiêu hóa loét dày – tá tràng bệnh nhân sau nội soi can thiệp cầm máu Việt Nam cost-effectiveness analysis of esomeprazole for preventing rebleeding peptic ulcer in patients after endoscopy treatment in Vietnam Võ Xuân Nam, Cao Ngọc Tuấn, Lương Thị Tuyết Minh 349 354 358 363 368 372 377 382 386 391 395 T¹P CHÝ Y HäC VIƯT NAM VIETNAM MEDICAL JOURNAL TỔNG BIÊN TẬP Nguyễn Thị Xuyên PHÓ TỔNG BIÊN TẬP Nguyễn Thị Ngọc Dung Nguyễn Văn Kính Nguyễn Viết Nhung HỘI ĐỒNG CỐ VẤN Hoàng Bảo Châu (Chủ tịch Hội đồng) Trần Quán Anh Đỗ Kim Sơn Lê Đức Hinh Tôn Thị Kim Thanh Nguyễn Văn Hiếu Trần Hữu Thăng Phạm Gia Khánh Nguyễn Viết Tiến Phạm Gia Khải Nguyễn Khánh Trạch Phan Thị Phi Phi Lê Ngọc Trọng Đặng Vạn Phước Đỗ Đức Vân Trần Quỵ ỦY VIÊN BAN BIÊN TẬP Trần Ngọc Ân Đặng Đức Anh Mai Hồng Bàng Ngô Quý Châu Trần Văn Cường Trần Hữu Dàng Trần Bình Giang Trần Thị Nhị Hà Trịnh Đình Hải Lê Trung Hải Nguyễn Trần Hiển Lê Thị Hợp Tống Thị Song Hương Nguyễn Gia Khánh Lương Ngọc Khuê Phạm Đức Mục Hồng Thị Bích Ngọc Bùi Đức Phú Nguyễn Minh Phương Nguyễn Huy Quang Đỗ Quyết Nguyễn Tiến Quyết Trương Hồng Sơn Đinh Ngọc Sỹ Công Quyết Thắng Nguyễn Văn Thường Trần Phan Chung Thủy Trần Văn Thuấn Nguyễn Quốc Trường Ong Thế Viên Lê Gia Vinh BAN THƯ KÝ Tạ Thị Kim Oanh (Trưởng ban) Nguyễn Tiến Dũng Đặng Th M Hnh TòA SOạN QUảN Lý Và PHáT HàNH TỉNG HéI Y HäC VIƯT NAM 68A Bà Triệu - Hoàn Kiếm - Hà Nội; Tel: 024.39431866 - 0915070336 Email: tapchiyhocvietnam@gmail.com; Website: tapchiyhocvietnam.vn – vmj.vn GPXB: Sè 291/GP-BTTTT, Ngµy 03/6/2016 Bộ Thông tin Truyền thông cấp In Xí nghiệp in - Nhà máy Z176 Bộ Quốc Phòng TẠP CHÍ Y häc viƯt nam tẬP 519 - th¸ng 10 - sè - 2022 Nguyễn Thị Nhung cộng sự, Các nhân tố ảnh hưởng đến hài lịng sinh viên chương trình đào tạo theo định hướng ứng dụng CDIO trường Đại học Công nghiệp Hà Nội Tập san sinh viên nghiên cứu khoa học 269, Số 9.2019 Lê Huyền Trang, Đánh giá hài lòng sinh viên chất lượng dịch vụ đào tạo trường Cao đẳng Kỹ thuật công nghệ Bà Rịa Vũng Tàu Luận văn thạc sỹ Trường Đại học Bà Rịa Vũng Tàu 2019 Hair J., Anderson, R., Tatham, R and Black, W, Multivariate data analysis, Prentice Hall, New Jersey 1998 Nunnally, J., and I Bernstein., "Psychometric Theory 3rd edition (MacGraw-Hill, New York)" 1994 Parasuraman A Z.V Berry L, "SERVQUAL: A multiple-item scale for measuring consumer perceptions of service quality", Journal of Retailing 64(Spring), 1988, pp 12-40 NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH CẤP CỦA CAO ĐỊNH CHUẨN KIỂM SOÁT HÀM LƯỢNG NUCIFERIN TỪ LÁ SEN (NELUMBO NUCIFERA GAERTN.) TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG Trần Lê Chiêu Bích1, Huỳnh Huỳnh Anh Thi1, Phạm Đoan Vi2, Đỗ Châu Minh Vĩnh Thọ1 TÓM TẮT 13 Đặt vấn đề: Sen số dược thảo mà tất phận dùng sử dụng vị thuốc q, có giá trị sinh học cao Có nhiều nghiên cứu dược lý đại chứng minh dịch chiết Sen có nhiều hoạt tính sinh học in vivo như: an thần [2],[4], chống béo phì [2], giảm cholesterol [2], hạ đường huyết [7], chống oxy hóa [8] máu có liên quan đến diện thành phần nuciferin có Sen Tuy nhiên, chưa có nghiên cứu đánh giá tính an toàn cao định chuẩn hàm lượng nuciferin từ Sen (Nelumbo nucifera Gaertn.) Do đó, thử nghiệm đánh giá độc tính cấp cao định chuẩn kiểm sốt hàm lượng nuciferin nhằm đánh giá độ an toàn cho việc thiết lập mức liều sử dụng hiệu an toàn cho cao định chuẩn hàm lượng nuciferin yêu cầu cấp thiết Mục tiêu nghiên cứu: Đánh giá độc tính cấp cao định chuẩn kiểm sốt hàm lượng nuciferin từ sen hồng chuột nhắt trắng Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Độc tính cấp Cao Sen hồng xác định chuột nhắt chủng Swiss albino, qua đường uống, mơ hình liều cố định, theo hướng dẫn Bộ Y tế [1], tác giả Đỗ Trung Đàm[3] nghiên cứu [5], [6] Liều thử giới hạn ban đầu 50g/kg/1 lần Kết quả: Trong khoảng thời gian quan sát 72h ngày, chuột khơng có hiểu độc tính hành vi, ăn uống, tiêu tiểu khơng có chuột bị chết Kết luận: Cao định chuẩn hàm lượng nuiferin từ Sen (Nelumbo nucifera Gaertn.) khơng gây độc tính cấp đường uống chuột nhắt trắng liều thử nghiệm tối đa cho uống qua kim 50 g/kg Cao định chuẩn hàm lượng Trường Đại học Y Dược Cần Thơ Trường Đại học Tây Đơ Chịu trách nhiệm chính: Đỗ Châu Minh Vĩnh Thọ Email: dcmvtho@ctump.edu.vn Ngày nhận bài: 29.8.2022 Ngày phản biện khoa học: 28.9.2022 Ngày duyệt bài: 11.10.2022 nuiferin từ Sen an tồn mơ hình thử nghiệm độc tính cấp, ứng dụng cơng nghệ bào chế dược phẩm Từ khóa: Độc tính cấp, LD50, nuciferin, sen hồng, cao định chuẩn SUMMARY STUDY ON ACUTE TOXICITY OF THE STANDARDIZED EXTRACT OF NUCIFERINE CONTENT FROM LOTUS LEAVES (NELUMBO NUCIFERA GAERTN.) IN EXPERIMENTAL ANIMALS Background: In the treasure of Vietnamese medicinal plants, the Lotus (Nelumbo nucifera Gaertn., Nelumbonaceae) is one of the few herbs whose components are highly valuable medicines Many modern pharmacological studies proved that the Lotus leaf extracts have many biological activities in vivo, such as insomnia, anti-obesity, inhibiting the growth of cancer cells, and antioxidant effects related to the presence of nuciferine in lotus leaves Currently, there are many preparations made from the raw materials of Folium Nelumbinis that are becoming more and more popular However, almost no studies evaluate the acute toxicity of the standardized extract of nuciferine content from Lotus leaves Therefore, conducting an acute toxicity test of a controlled high level of nuciferine is very necessary to establish safe dose levels Objectives: This study investigated the acute toxicity of the standardized extract of nuciferine from Folium Nelumbinis in Swiss albino rats for evaluating its safety profile Materials and method: Acute toxicity was determined in mice with Swiss albino strain, orally, in a fixed dose model, following the guidelines of the Ministry of Health and Do Trung Dam The initial test dose limit is 50 g/kg/time only Results: During the 72h and days observation periods, rats did not show any behavioral, feeding, or urinary toxicity, and none of the mice died Conclusion: The product did not show acute oral toxicity in mice with the maximum oral dose of 50 g/kg, equivalent to 233,75 g in humans of 55 kg 53 vietnam medical journal n02 - OCTOBER - 2022 Hence, the extract can be utilized safely for therapeutic use in pharmaceutical preparation Keywords: acute toxicity, LD50, nuciferine, Folium nelumbinis, standardized extract I ĐẶT VẤN ĐỀ Cây Sen (Nelumbo nucifera Gaertn., Nelumbonaceae) người sử dụng từ lâu loại thảo dược, đặc biệt Việt Nam Danh y Hải Thượng Lãn Ông viết: “Cây mọc từ bùn đen mà không ô nhiễm mùi bùn, đượm khí thơm lành trời đất nên củ, lá, hoa, tua, vỏ quả, ruột thuốc hay” Các nghiên cứu dược lý chứng minh dịch chiết sen có nhiều hoạt tính sinh học in vivo như: an thần [2],[4], chống béo phì[4], hạ cholesterol huyết, chống oxy hóa[4] [8], hạ đường huyết [7], nghiên cứu năm 2022 tác giả Anupam Bishayee đánh giá hoạt tính sinh học sen có khả chống lại phát triển tế bào ung thư Lá sen chứa nhiều hợp chất khác nhau, nhóm alkaloid flavonoid hai thành phần chiếm tỉ lệ tương đối lớn cho tác dụng sinh học chủ yếu Hàm lượng alkaloid toàn phần sen chiếm từ 0,77 - 0,84% tùy điều kiện khí hậu, thổ nhưỡng Có khoảng 15 alkaloid xác định Các alkaloid Sen có cấu trúc isoquinolin bao gồm phân nhóm aporphin, proaporphin, benzylisoquinolin bisbenzylisoquinolin[6] Trong đó, alkaloid có cấu trúc aporphin chiếm phần lớn tỉ lệ số lượng alkaloid toàn phần sen Nuciferin – hoạt chất từ sen – alkaloid có khung apomorphincó cấu trúc Hình [2] Bên cạnh đó, theo nghiên cứu năm 1963 Bernauer K đánh giá thành phần cao sen cịn có pronuciferin chuyển thành nuciferin mơi trường acid Nuciferin chứng minh có tác dụng chống loạn thần loài gặm nhấm [4][6] Hoạt chất chất chủ vận nghịch đảo mạnh thụ thể 5-HT7 người [6] Hình – Cấu trúc hóa học nuciferin [2] Tại Việt Nam nay, việc sử dụng sen điều trị, hỗ trợ điều trị bệnh ngày phổ 54 biến Tuy nhiên, có nghiên cứu độc tính cấp cao chiết từ sen có kiểm sốt thành phần nuciferin – chất có hoạt tính sinh học Vì vậy, nghiên cứu thực nhằm mục tiêu đánh giá độc tính cấp cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng nuciferin chuột nhắt trắng Swiss albino Nghiên cứu tiền đề giúp triển khai nghiên cứu nhằm tạo sản phẩm an toàn hiệu đưa đến người tiêu dùng II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Cao định chuẩn hàm lượng nuciferin 10% chiết suất từ Sen (Nelumbo nucifera Gaertn.) (gọi tắt cao định chuẩn) Cao định chuẩn hàm lượng nuciferin 10% chiết theo quy trình nhóm nghiên cứu: sen khơ sau xử lý tạp tẩm acid H2SO4 2% ngâm lạnh với cồn 700C, áp suất thấp, cắn tồn phần thu hịa tan với acid; kiềm hóa với dung dịch NH3 12,5%, chiết kiệt alcaloid với Ethyl acetat, cô áp suất thấp thu cao alkaloid Cao định chuẩn Sen có kiểm soát hàm lượng nuciferin xác định phương pháp sắc ký lỏng ghép với đầu dò dãy diod quang (HPLC/PDA)[3] Cao định chuẩn thu có dạng bột, màu vàng kem nhạt, đựng lọ thủy tinh tối màu đậy kín Cao đạt yêu cầu tiêu chuẩn sở (TCCS) với độ ẩm 12%, định tính đạt yêu cầu vi phẫu, soi bột, phản ứng hóa học sắc lý lớp mỏng, độ tro toàn phần, định lượng hàm lượng nuciferin cao định chuẩn sen xác định phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao với đầu dò dãy diod quang 10%, dư lượng kim loại nặng tồn phần khơng q 10 phần triệu Pb (DĐVN V) Động vật thử nghiệm: Chuột nhắt, đực cái, chủng Swiss albino, tuần tuổi, trọng lượng 18 22g, cung cấp Viện Vaccin Sinh phẩm y tế Nha Trang Sử dụng chuột khỏe mạnh, khơng có biểu bất thường, ni ổn định mơi trường thí nghiệm ngày Chuột nuôi lồng 25 x 35 x 15 cm, cung cấp thức ăn nước uống đầy đủ [1], [3] 2.1.2 Hóa chất, dụng cụ, thuốc thử Bình nước Pet Water Bottle 125 mL, lưới kim loại mạ kẽm, hộp nhựa chữ nhật Duy Tân, găng tay cao su y tế, trang y tế, bơm tiêm sử dụng lần mL/cc, kim cong đầu tù, cân phân tích Metller Toledo, cân kỹ thuật Nước tinh khiết, cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng nuciferin sen hồng 2.1.3 Tiêu chuẩn loại trừ Động vật thử TẠP CHÍ Y häc viƯt nam tẬP 519 - th¸ng 10 - sè - 2022 nghiệm mang thai, tổn thương, chết q trình thực nghiệm; cao định chuẩn khơng đạt yêu cầu chất lượng (TCCS) đề 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu Sử dụng phương pháp xác định độc tính cấp mơ hình liều cố định, theo Quyết định 141/QĐ-K2ĐT ngày 27/10/2015 Bộ Y tế [1] Tài liệu Nghiên cứu Độc tính thuốc tác giả Đỗ Trung Đàm [5] Nguyên tắc: Cho chuột thử nghiệm dùng liều mẫu thử điều kiện ổn định nhau, quan sát phản ứng xảy vòng 72 ngày 2.2.3 Phương pháp nghiên cứu Cho 10 chuột nhịn đói 12 trước cho uống mẫu thử liều tối đa qua đường uống, thể tích 50 ml/kg theo tài liệu Đỗ Trung Đàm [5] Theo dõi ghi nhận cử động tổng quát, biểu hành vi, trạng thái lông, ăn uống, tiêu tiểu số lượng chết chuột vòng 72 Nếu sau 72 giờ, chuột khơng có dấu hiệu bất thường chết, tiếp tục theo dõi vịng ngày Có trường hợp xảy ra: - Trường hợp 1: Sau chuột uống mẫu thử, số chuột thử nghiệm bảo tồn, xác định liều mẫu thử cao qua kim mà không làm chuột chết (Dmax) - Trường hợp 2: Sau cho chuột uống mẫu thử, tỷ lệ chuột tử vong 100% thử với liều giảm ½ liều đầu Tiếp tục giảm liều đến tìm liều tối thiểu gây chết 100% chuột (LD100) liều tối đa không gây chết chuột (LD 0) Tiến hành thử nghiệm xác định LD50: chia chuột làm lơ, lơ Chia liều theo cấp số cộng khoảng từ LD0 - LD100 Ở liều gần LD50, tăng số lượng chuột lên để đo lường xác Theo dõi 72 giờ, ghi nhận diễn biến chuột, số lượng chuột chết lô, lập phân suất tử vong để tìm LD 50 - Trường hợp 3: Sau cho uống mẫu thử, tỷ lệ chuột chết thấp 100%, không xác định liều LD100, khơng xác định LD50 Trường hợp xác định liều tối đa không gây chết chuột, gọi liều liều chết (LD0) Tiến hành khảo sát độc tính cấp đường uống cao định chuẩn khảo sát 10 chuột nhắt trắng (5 đực, cái) Mẫu thử cao định chuẩn cho chuột nhắt uống lần nồng độ cao thử đậm đặc qua kim cho chuột uống 1g cao/ml với thể tích tối đa cho chuột nhắt uống 50 ml/kg, tương ứng với liều 50 g cao/kg Dung môi phân tán cao định chuẩn nước tinh khiết III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Sau cho uống, chuột nhắt giảm di chuyển 15 phút, sau tất chuột di chuyển bình thường, khỏe mạnh, cử động bình thường Trong thời gian 72 quan sát, khơng có chuột bị chết Tiếp tục theo dõi chuột 07 ngày điều kiện chăm sóc bình thường, kết cho thấy khơng có chuột bị chết; chuột khơng có bất thường hành vi, trạng thái lông, ăn uống, tiêu tiểu Bảng Kết thử độc tính cấp đường uống Cao Sen hồng Chuột thử nghiệm Phái Trọng lượng (g) Thể tích uống (ml) Tổng trọng lượng (g) Tổng thể tích (ml) Số chuột thử nghiệm Số chuột chết sau 72 Số chuột chết sau ngày Trọng lượng sau 72 (g) Trọng lượng sau ngày (g) ♂ 19,4 0,97 ♂ 17,6 0,88 ♂ 17,7 0,89 ♂ 18,3 0,92 24,1 21,0 23,5 26,1 19,9 22,0 22,7 24,6 Như vậy, sản phẩm cao Sen hồng không làm chết chuột, thể độc tính cấp đường uống chuột nhắt với liều tối đa cho uống 50 g cao/kg, tương ứng với liều 233,75 g cao người lớn nặng 55 kg IV BÀN LUẬN Nhóm nghiên cứu lựa chọn mơ hình liều cố định theo hướng dẫn tổ chức Hợp tác ♂ ♀ 17,5 22,1 0,88 1,11 188,4 9,45 10 0 19,7 25,4 22,9 26,5 ♀ 18,2 0,91 ♀ 18,3 0,92 ♀ 18,8 0,94 10 ♀ 20,5 1,03 22,4 24,4 21,5 23,6 25,2 27,7 24,0 27,5 Phát triển kinh tế (Organization for Economic Cooperation and Development – OECD) Bộ y tế phương pháp phù hợp với tất trường hợp cần xác định độc tính cấp Theo OECD, với sản phẩm có liều chết LD50 lớn 5000 mg/kg xem an toàn (xem bảng 2) [1],[5] Bảng Phân loại hóa chất theo mức độ độc dựa vào LD50 theo OECD [1] 55 vietnam medical journal n02 - OCTOBER - 2022 Cấp độ độc Mức độ Liều LD50 gần độc (mg/kg) Cực kỳ độc Từ đến ≤ Rất độc > đến ≤ 50 Độc > 50 đến ≤ 300 Độc vừa > 300 đến ≤ 2000 Độc thấp > 2000 đến ≤ 5000 Gần > 5000 không độc Sau thử nghiệm sơ dự đốn mẫu thử khơng độc, thử nghiệm giới hạn nhóm lựa chọn thực với mức liều đường uống cao nhằm giảm số lượng động vật thời gian thử nghiệm mà hoàn thành mục tiêu nghiên cứu Với mức liều cao cho chuột uống (về nồng độ thể tích) 50 g cao/kg thể trọng chưa ghi nhận biểu độc tính cấp chuột khơng có chuột chết vịng 72 ngày, chưa xác định LD50 chuột nhắt chủng Swiss albino theo đường uống Dựa theo kết thu được, mức liều thử nghiệm tối đa gấp 10 lần giới hạn Bộ y tế OECD (5000 mg), phân loại mức độ – “Gần không độc” Điều cho thấy cao định chuẩn hàm lượng nuciferin có tính an tồn cao thử nghiệm đánh giá độc tính cấp chuột So sánh với nghiên cứu năm 2012 tác giả K K Patel, Fedelic A Toppo, P K Singour đánh giá dịch chiết ethanol phận mặt đất sen, chuột thử nghiệm chết 100% liều 600 mg/kg thể trọng sau ngày, nghiên cứu khác năm 2001 tác giả Nguyễn Thị Nhung đánh giá liều LD50 theo phương pháp Behrens 330mg/kg thể trọng cho thấy cao định chuẩn hàm lượng nuciferin nhóm nghiên cứu có tính an tồn cao Theo nghiên cứu độc tính cấp nuciferin [4], [5] cho thấy nuciferin có tác động hướng thần, ức chế hoạt động quan cảm giác nói chung, gây lơ mơ, làm thay đổi ngưỡng co giật chuột thử nghiệm ghi nhận mức liều đường uống 240 mg/kg chuột nhắt 280 mg/kg chuột cống, liều 83 mg/kg qua đường phúc mạc chuột nhắt [6] Tuy nhiên, thử nghiệm này, với nồng độ nuciferin cao định chuẩn 10%, tương đương với liều tối đa 50g cao/kg, liều nuciferin dùng 5g/kg, chưa ghi nhận độc tính hệ thần kinh chuột Nhóm nghiên cứu nhận thấy sau cho uống, chuột nhắt giảm di chuyển 15 phút cần thực thêm thí nghiệm khác để tìm hiểu 56 chế tác động hệ thần kinh cao Sen hồng nhằm phát triển ứng dụng hiệu đồng thời kiểm sốt độc tính có; quan trọng biết cao Sen hồng chiết theo quy trình nhóm nghiên cứu không gây độc không gây chết chuột dù dùng liều tối đa Liều 50g cao/kg chuột nhắt trắng tương đương liều dùng 233,75 g cao người nặng 55 kg (tính theo hệ số chuyển đổi 11,76) Vì vậy, so sánh với liều dự kiến thành phẩm viên nang 1,5g cao/kg/ngày chưa gây độc, cho thấy sản phẩm gần khơng có độc tính tính khả thi cao liều dự kiến V KẾT LUẬN Sản phẩm cao định chuẩn hàm lượng nuciferin chiết suất từ Sen (Nelumbo nucifera Gaertn.) khơng thể độc tính cấp đường uống chuột nhắt liều tối đa cho uống 50 g/kg, ứng với 233,75 g cao người nặng 55 kg Kết cho thấy việc uống cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng nuciferin từ Sen hồng an tồn mơ hình thử nghiệm triển khai ứng dụng cơng nghệ bào chế dược phẩm TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y tế (2015) - Quyết định số 141/QĐ-K2ĐT ngày 27/10/2015 việc ban hành tài liệu chuyên môn “Hướng dẫn thử nghiệm tiền lâm sàng lâm sàng thuốc đông y, thuốc từ dược liệu” Đỗ Tất Lợi (2004) Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học Hà Nội, tr 783- 786 Đỗ Trung Đàm (2014), “Phương pháp xác định độc tính cấp thuốc”, Nhà xuất Y học, Hà Nội Nguyễn Thị Nhung (2001), Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học tác dụng sinh học sen (Nelumbo nucifera Gaertn.) họ sen (Nelumbonaceae), Luận án tiến sĩ dược học, Đại học Dược Hà Nội E Macko et al (1972), Studies on the pharmacology of nuciferine and related aporphines, Archives Internationales de Pharmacodynamie et de Therapie., 197(261), p 261 – 273 Farrell MS, McCorvy JD, Huang X-P, Urban DJ, White KL, Giguere PM, et al (2016) In Vitro and In Vivo Characterization of the Alkaloid Nuciferine PLoS One 11(3): e0150602 doi: 10.1371/journal.pone.0150602 K Hoa Nguyen, T Nhan Ta, T Hong Minh Pham (2012), “Nuciferine stimulates insulin secretion from beta cells-an in vitro comparison with glibenclamide”, Journal of Ethnopharmacology, 142(2), pp 488-95 Ming-Jiuan Wu, Lisu Wang, Ching-Yi Weng, Jui-Hung Yen (2003), “Antioxidant activity of methanol extract of the lotus leaf (Nelumbo nucifera Gertn.)”, The American Journal of Chinese Medicine, 31(5), pp 687-689 BO Y TÉ CONG HỊA X HOI CHn NGH*A VIỈT NAM TRUONG DAI HOCY DUOC Doelâp-Ty - Hanh phúc CAN THO Cán Tho, ngày) tháng {0 nm 2043 BIEN BAN CÜA HOI DÒNG CHÁM LUÂN VN CHUYÊN KHOA CÅP II Ho tên hoc viên: TRÂN LÊ CHIÊU BÍCH Dè tài: "Nghiên cru Ùc tinh tác dung h¡ Lipid máu dong v-t thve nghiem cia cao dinh chn kiêm sốt hàm lugng Nuciferin tir Sen Hơng (Folium Nelumbinis)" Nguoi hng dân: PGS.TS Đ Châu Minh V+nh Tho Chuyên ngành: Dugc lý Duoc lâm sàng Duoc cơng nh-n hÍc viên Chun khoa cáp II theo Quyột dinh sú 1690/Qé DHYDCT ngy 11/09/2020 cỗa Hiầu truong Truong hoc Y Duge Cân Tho I HOI DÓNG CHM LUAN VN Cn cỳ cỏc quy ậnh cỗa B Giáo dåc t¡o, BÙ Y te vÁ viÇc tơ chúéc chám luan Chun khoa câp I, HiÇu truong TruÝng hÍc Y Durgc Cân Tho dã quyet dËnh thành l-p HÙi ông châm luan vän sô D-DHYDCT ngày / /20 gôm thành viÃn sau: TT Don vi công tác Ho tên PGS.TS Duong Xuân Chï | TS Nguyên Ngoc Quynh |3 BS CKII Ngun Chí Thanh Trrong Dai hÍc YDugc Cân Tho Trrong Dai hÍc Y Duge Cân Tho SoY te Bac Liêu Trách nhim HÙi ông Chu tich Phàn biÇnl Phan biÇn Uy vien Truong Dai hÍc YDugc CânThoUy viên-Thu ký BV Da khoa Bac Liêu BS CKII Trân Vän TriÇu 55 TS.Nguyn ThË Linh Tuyên Buoi châm lu-n uoc tiên hành vào lúc gio phút ngày4./.AC/.L tai Truong ¡i hÍc Y Duoc Cân Tho Có mat thành viên hÙi ơng Váng mat: II NOI DUNG BIËN BÅN: Dai diÇn Phịng luan Chuyên khoa câp phan HÙi dông däm b£o iêu t¡o sau d¡i hÍc doc quyêt Ënh II cỗa Truong Dai hc thnh lõp Hi dụng chõm Y Duoc Cân Tho, cơng bơ thành kiÇn dê HÙi dơng làm viÇc Chù tich HÙi ơng: PGS.TS Duong Xn Chï diêu khiên buôi châm lu-n Uy vien thu ký oc ly lich khoa hÍc, bàng iêm tồn khúa cỗa hc viờn v khọng ậnh hc viờn dam bào ây dù chuong trinh tac Hoc viên trinh bày lu-n thÝi gian không 15 phúl Phàn biÇn 1: TS Nguyên Ngoc Quynh doc nh-n xét (dính kèm bån nhân xét) nh-n xét (dính kèm bàn nh-n Phan biÇn 2: BS CKII Nguyên Chí Thanh oc xét) Thành vièn HÙi dơng nguoi tham dr dat câu hoi ho·c phát biêu ý kiên: und y LS cKLIhanh.Aha.a baing adagia ké S.CKD.Ie s.a.Ja.ng hni ** ue cvik.A ) he.phano.raa s toi'a'aa.q yi *** Las.dgt.kaia.d 19kuea Luc *°*°*°°°°° lan M hat n ku.g *°°°°*°** GST i A Aaa da Anh.cá.ma.lekhng Lua di.c.hiadr ********* M.n t e h.h.n-.kaaa.iualn.kas.Mas.a Aue'rn AR 3.o t.a Cae.aba sraa.Aet.g *******.s Aa han.alkala.ncl.huas da elang kckh ta chs.ctr.uq **** ****° Hoc viờn tr loi cỏc cõu hoi cỗa thnh viờn hÙi dông nhïng nguÝi tham dur: CAa es.uaha.chsaa La cau on.q.baok ****** **** ****** ******°°* *********** ************ ***°****°°°*°* Nguoi hng dân nh-n xét vê hÍc viên luân vn: 111 KÉT LUAN CÚA HOI ÓNG búc thiêt cia dë tài NÙi dung vä (Noi dung két huan can nêu ro: Tinh thuc tiên và két luan thu dugc Trién vong kët phurong pháp nghiên cinu Y ngh+a cua - - - - cua de tài) aia KaAka.deaanad ke.suieka.Aa.tkenait dn2 au Ma .si.sa.sh.t ka.q.clk.AmRa k M asnq.aucaag asia i d.yhanq qua nk ahaa.kk n q.ud.a pacin ua ta aa.a kaab MA A.20.c cng Kamq a ha.pat.b * IV HOI DĨNG HOP KÍN: Hoi - dơng bàu ban kiêm phieu: +Trrongban:G5,.DMh1 uan.i ******** ge Nasug +Uy viên: +Uy viên: Kêt quå kiêm phiêu: +So phieu phát hành: - Ih.Lake y +So phieu không dùng: phiêu +So phiêu hop lÇ +So phiêu *********** phiêu phiéu khơng hop lÇ: phiêu - Tơng sơ diêm: ***°°**°'***** Diêm trung binh: - - Xép lo¡i: **************** - HÙi dông kêt luân cuôi cùng: achete.iaguan.kli ctnh.Aia.uo 0p ****°*********************************** *************************'°°***°******************************** V KÊT LUAN Trrong ban kiêm phiêu công bô kêt quå bị phiêu châm lu-n Chu tich HÙi ơng oc kờt lu-n cỗa Hi ụng Hoc viờn phỏt biờu ý kien Buoi cham lu-n kêt thúc lúc A9 giÝ A phút ngày Uy viên thu ký TS Nguyên ThË Linh Tuyên Chu tich HÙi ông PGS.TS Duong Xuân Chï CỘNG HÒA Xà HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc Lập – Tự – Hạnh Phúc BẢN GIẢI TRÌNH VỀ VIỆC BỔ SUNG, SỬA CHỮA LUẬN VĂN THEO Ý KIẾN CỦA HỘI ĐỒNG ĐÁNH GIÁ LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP Kính gửi: Ban Giám Hiệu Trường Đại học Y Dược Cần Thơ Họ tên học viên: TRẦN LÊ CHIÊU BÍCH Tên đề tài luận văn: Nghiên cứu độc tính tác dụng hạ lipid máu động vật thực nghiệm cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng nuciferin từ Lá Sen hồng Chuyên ngành: Dược lý- Dược lâm sàng Mã số: 8720205.CK Người hướng dẫn: PGS TS ĐỖ CHÂU MINH VĨNH THỌ Sau trình luận văn, học viên sửa chữa bổ sung luận văn theo ý kiến Hội đồng đánh giá luận văn tốt nghiệp năm 2022, cụ thể điểm sau đây: Kiểm tra chỉnh sửa lỗi format, lỗi tả, thuật ngữ chun mơn Chỉnh sửa vị trì bảng, biểu đồ có nội dung giống xếp gần để dễ theo dõi nội dung Bố cục lại số lượng trang kết bàn luận Lược bớt nội dung không cần thiết phụ lục Lồng ghép số nội dung vào phần bàn luận nhằm giải thích rõ câu hỏi Hội đồng: Cao tồn dạng muối, giải thích khơng thử độc tính mãn; Giải thích nồng độ cao lại có tác dụng khơng rõ ràng Tơi xin chân thành cảm ơn ý kiến đóng góp quý báu Hội đồng để luận văn hoàn chỉnh Cần Thơ, ngày 18 tháng 11 năm 2022 Người hướng dẫn PGS.TS Đỗ Châu Minh Vĩnh Thọ Học viên Trần Lê Chiêu Bích *Lưu ý: Học viên giải trình đầy đủ ý kiến nhận xét Thành viên Hội đồng đánh giá luận văn điểm chỉnh sửa theo góp ý TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ THƯ VIỆN Số: GXN/TV-2022 TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ THƯ VIỆN Số: …… GXN/TV-2022 GIẤY XÁC NHẬN GIẤY XÁC NHẬN V/v nhận luận văn tốt nghiệp sau đại học V/v nhận luận văn tốt nghiệp sau đại học Họ tên: TRẦN LÊ CHIÊU BÍCH Họ tên: TRẦN LÊ CHIÊU BÍCH Mã số học viên: 20220510155 Mã số học viên: 20220510155 Lớp: CKII DL-DLS Khóa: 2020 - 2022 Đơn vị: CKII DL-DLS khóa 2020 - 2022 Tên đề tài: “Nghiên cứu độc tính tác dụng hạ lipid máu động vật Tên đề tài: “Nghiên cứu độc tính tác dụng hạ lipid máu động vật thực nghiệm cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng nuciferin từ Lá Sen hồng” Thư viện nhận 01 in luận văn tốt nghiệp file PDF Cần Thơ, ngày … tháng … năm 2022 Người nộp Trần Lê Chiêu Bích Số ĐT: 094 903 0000 Người nhận thực nghiệm cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng nuciferin từ Lá Sen hồng” Thư viện nhận 01 in luận văn tốt nghiệp file PDF Cần Thơ, ngày … tháng … năm 2022 Người nộp Trần Lê Chiêu Bích Số ĐT: 094 903 0000 Người nhận CỘNG HÒA Xà HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc Cần Thơ, ngày tháng năm PHIẾU THỎA THUẬN V/v đồng ý cho Thư viện sử dụng khai thác nội dung tài liệu Tơi tên: Trần Lê Chiêu Bích Là tác giả tài liệu: Nghiên cứu độc tính tác dụng hạ lipid máu động vật thực nghiệm cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng nuciferin từ Lá Sen hồng Tơi hồn tồn đồng ý cho phép Thư viện toàn quyền sử dụng khai thác nội dung tài liệu nhằm mục đích phục vụ cơng tác đào tạo, nghiên cứu khoa học phục vụ cộng đồng Trường Đại học Y Dược Cần Thơ Tôi khơng có khiếu nại liên quan đến quyền sử dụng tài liệu Nếu sai tơi hồn toàn chịu trách nhiệm trước pháp luật./ Tác giả (Ký ghi rõ họ tên) Trần Lê Chiêu Bích ... giá độc tính cấp cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng 38 38 nuciferin từ Sen hồng động vật thực nghiệm 3.2 Đánh giá tác dụng hạ lipid máu cao định chuẩn kiểm soát hàm 41 lượng nuciferin từ Sen hồng. .. phần nuciferin cho tác dụng sinh học sen chứng minh Từ lý trên, đề tài: ? ?Nghiên cứu độc tính tác dụng hạ lipid máu động vật thực nghiệm cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng nuciferin từ Sen hồng (Folium. .. NGHIÊN CỨU 3.1 Đánh giá độc tính cấp cao định chuẩn kiểm soát hàm lượng nuciferin từ Sen hồng động vật thực nghiệm 3.1.1 Thực nghiệm thử độc tính cao định chuẩn kiểm sốt hàm lượng nuciferin từ