Luận án " Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản và thử nghiệm sản xuất giống cá nâu (scatophagus argus linnaeus, 1766)

Luận án " Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản và thử nghiệm sản xuất giống cá nâu (Scatophagus argus Linnaeus, 1766)" Mục tiêu nghiên cứu - Mục tiêu tổng quát: bổ sung cơ sở dữ liệu khoa học về đặc điểm sinh học sinh sản và sinh lý sinh sản cá nâu và qua đó phát triển qui trình sinh sản nhân tạo cá nâu để từng bước tiến tới phát triển nghề sản xuất giống và nuôi thương phẩm cá nâu; góp phần đa dạng hóa đối tượng và mô hình nuôi thủy sản ven biển; thúc đẩy sự phát triển bền vững nghề nuôi thủy sản ở ĐBSCL nói riêng và cả nước ta nói chung. - Mục tiêu cụ thể: tìm ra một số đặc điểm sinh học và sinh lý sinh sản quan trọng của cá nâu; loại kích dục tố và chất kích thích sinh sản thích hợp để kích thích cá nâu sinh sản nhân tạo; sự phát triển của cá nâu mới nở và biện pháp kỹ thuật ương nuôi cá nâu giai đoạn cá bột lên cá giống. 3. Nội dung nghiên cứu a) Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học sinh sản và sinh lý sinh sản quan trọng của cá nâu. b) Nghiên cứu sử dụng các loại kích dục tố và chất kích thích sinh sản khác nhau để kích thích cá nâu sinh sản nhân tạo và kỹ thuật ấp trứng cá nâu. c) Nghiên cứu sự phát triển của ống tiêu hóa và sự lựa chọn thức ăn của cá nâu bột. d) Nghiên cứu ương cá nâu bột lên cá hương bằng các loại thức ăn và cá hương lên cá giống ở các độ mặn khác nhau.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

LÝ VĂN KHÁNH

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC SINH SẢN VÀ THỬ NGHIỆM SẢN XUẤT GIỐNG CÁ NÂU

(Scatophagus argus Linnaeus, 1766)

LUẬN ÁN TIẾN SĨ THỦY SẢN

Cần Thơ, 2012

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

LÝ VĂN KHÁNH

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC SINH SẢN VÀ THỬ NGHIỆM SẢN XUẤT GIỐNG CÁ NÂU

(Scatophagus argus Linnaeus, 1766)

Chuyên ngành: Nuôi trồng Thủy sản nước Mặn, Lợ

Mã số: 62 62 70 05

LUẬN ÁN TIẾN SĨ THỦY SẢN

Người hướng dẫn khoa học:

PGs Ts NGUYỄN THANH PHƯƠNG PGs Ts TRẦN THỊ THANH HIỀN

Cần Thơ, 2012

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam kết luận án này được hoàn thành dựa trên các kết quả nghiên cứu do tôi thực hiện Tất cả các số liệu và kết quả được trình bày trong luận án hoàn toàn trung thực và chưa được dùng cho bất cứ luận án cùng cấp nào khác

Cần Thơ, ngày …… tháng …… năm 2012

Tác giả

LÝ VĂN KHÁNH

LỜI CẢM TẠ

Trước hết Tôi xin cảm ơn Ban Giám hiệu, Ban Chủ nhiệm Khoa Thủy sản, Bộ môn Kỹ thuật nuôi Hải sản và Bộ môn Dinh dưỡng và Chế biến thủy sản, Trường Đại học Cần Thơ đã tạo điều kiện để tôi được học tập, nghiên cứu nâng cao trình độ trong những năm qua

Tôi xin cảm ơn Bộ Giáo dục và Đào tạo, Trường Đại học Cần Thơ, Khoa Thủy sản, Bộ môn Kỹ thuật nuôi Hải sản, Bộ môn Dinh dưỡng và Chế biến Thủy sản và Dự án ươm tạo công nghệ đã hỗ trợ kinh phí thực hiện các nghiên cứu

Đặc biệt tôi xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGs.Ts Nguyễn Thanh Phương và PGs.Ts Trần Thị Thanh Hiền đã tận tình quan tâm, giúp đỡ, hướng dẫn, động viên, tạo mọi điều kiện thuận lợi và những lời khuyên quý báu trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu để hoàn thành Luận

án này Xin chân thành cảm ơn PGs.Ts Trần Ngọc Hải, PGs Ts Đỗ Thị Thanh Hương, Ts Phạm Thanh Liêm, Ths Lê Quốc Việt, Ths Châu Tài Tảo, Ths Nguyễn Hương Thùy, Ths Nguyễn Thị Kim Hà và Ths Cao Mỹ Án luôn sẵn lòng giúp đỡ và hỗ trợ Tôi trong suốt thời gian học tập và nghiên cứu

Tôi xin gởi lời cảm ơn đến Quý Thầy, Cô, Anh, Chị và các bạn thuộc Khoa Thủy sản, Trường Đại học Cần Thơ luôn sẵn lòng giúp đỡ Tôi trong trong suốt thời gian học tập và nghiên cứu

Sau cùng Tôi kính gởi lời cảm ơn sâu sắc đến Gia đình và những người thân đã động viên, chia sẽ, hỗ trợ tinh thần và giúp đỡ tôi rất nhiều trong suốt quá trình học tập để đạt được sự thành công như hôm nay

Cần Thơ, ngày …… tháng …… năm 2012

Tác giả

LÝ VĂN KHÁNH

MỤC LỤC

Trang

Lời cam đoan i

Lời cảm tạ ii

Mục lục iii

Danh sách bảng vii

Danh sách hình ix

Danh mục từ viết tắt xi

Tóm tắt xii

Abstract xiv

MỞ ĐẦU 1

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 6

1.1 Sơ lược đặc điểm sinh học cá nâu 6

1.1.1 Hình thái phân loại 6

1.1.2 Phân bố 7

1.1.3 Tập tính dinh dưỡng 8

1.1.4 Đặc điểm sinh trưởng 9

1.1.5 Đặc điểm sinh sản 9

1.1.6 Hệ số thành thục 9

1.2 Sơ lược đặc điểm sinh lý 10

1.2.1 Huyết học 10

1.2.2 Vitellogenin (protein tạo noãn hoàng) 12

1.3 Các loại kích dục tố và chất kích thích ở cá 14

1.3.1 Não thùy thể (Hypophysis - tuyến yên) 14

1.3.2 HCG (Human Chorionictropin Hormone) 14

1.3.3 GnRH (Gonadotropine Releasing Hormone) 15

1.4 Một số nghiên cứu về sản xuất giống và ương nuôi cá nước lợ mặn 17

1.4.1 Cá mú (Epinephelus spp) 17

1.4.2 Cá chẽm (Lates calcarifer) 18

1.4.3 Cá giò (Rachycentron canadum) 18

1.4.4 Cá măng (Chanos chanos) 19

1.4.5 Cá đối 20

1.5 Sự phát triển ống tiêu hóa và lựa chọn thức ăn của cá 21

1.5.1 Sự phát triển ống tiêu hóa của cá 21

1.5.2 Sự lựa chọn thức ăn của cá 25

1.6 Một số loại thức ăn tự nhiên sử dụng trong ương cá 27

1.6.1 Tảo 28

1.6.2 Rotifer 29

1.6.3 Giáp xác chân chèo (Copepoda) 30

1.6.4 Artemia 31

1.7 Một số nghiên cứu về thức ăn trong ương cá 32

1.8 Ảnh hưởng độ mặn đến tăng trưởng và tỷ lệ sống của 1 số loài cá 33

CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36

2.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 36

2.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 36

2.2.1 Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học sinh sản cá nâu 37

2.2.2 Nghiên cứu một số đặc điểm sinh lý sinh sản cá nâu 40

2.2.3 Thí nghiệm kích thích sinh sản và ấp trứng cá nâu 43

2.2.4 Nghiên cứu sự phát triển ống tiêu hóa và lựa chọn thức ăn của cá nâu bột 48

2.2.5 Ương cá nâu bột lên cá hương (cá 1 tháng tuổi) 51

2.2.6 Thí nghiệm ương cá từ 30-60 ngày tuổi ở các độ mặn khác nhau 54

2.3 Phương pháp xử lý số liệu 55

CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 56

3.1 Một số đặc điểm sinh học sinh sản cá nâu 56

3.1.1 Các giai đoạn phát triển của tuyến sinh dục 56

3.1.2 Mùa vụ sinh sản và tỷ lệ giới tính của cá nâu trong điều kiện tự nhiên 59

3.1.3 Mối quan hệ giữa giai đoạn phát triển tuyến sinh dục với hệ số thành thục và độ béo của cá nâu cái 61

3.1.4 Mối quan hệ giữa giai đoạn phát triển tuyến sinh dục với hệ

số thành thục và độ béo của cá nâu đực 62

3.1.5 Sức sinh sản thực tế của cá nâu 63

3.1.6 Đường kính trứng, sự phát triển phôi cá nâu và chiều dài cá bột 63

3.2 Một số đặc điểm sinh lý sinh sản cá nâu 68

3.2.1 Đặc điểm sinh lý sinh sản của cá nâu cái 68

3.2.2 Đặc điểm sinh lý sinh sản của cá nâu đực 75

3.3 Kích thích sinh sản và ấp trứng cá nâu 78

3.3.1 Nuôi vỗ thành thục cá nâu trong bể 78

3.3.2 Ảnh hưởng của loại và liều kích dục tố, chất kích thích sinh sản lên sinh sản nhân tạo của cá nâu 79

3.3.3 Ảnh hưởng của độ mặn lên tỉ lệ nở của trứng cá nâu 83

3.4 Sự phát triển ống tiêu hóa và lựa chọn thức ăn của cá nâu bột 85

3.4.1 Sự phát triển ống tiêu hoá của cá nâu bột 85

3.4.2 Sự lựa chọn thức ăn của cá bột 90

3.5 Ương cá bột lên cá hương bằng các loại thức ăn khác nhau 98

3.5.1 Ương cá nâu bột đến 15 ngày tuổi bằng các loại thức ăn 98

3.5.2 Ương cá bột 15 ngày tuổi lên 30 ngày tuổi bằng thức 104

3.6 Ương cá từ 30 ngày tuổi lên 60 ngày tuổi ở các độ mặn khác nhau 107

3.6.1 Yếu tố môi trường bể ương 107

3.6.2 Tăng trưởng của cá ương ở các độ mặn khác nhau 108

3.6.3 Tăng trưởng tương đối và tuyệt đối của cá ương ở các độ mặn 109

3.6.4 Sự phân cỡ của cá hương ương ở các độ mặn khác nhau 109

3.6.5 Tỷ lệ sống của cá hương ương ở các độ mặn khác nhau 112

CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 113

4.1 Kết luận 113

4.1.1 Đặc điểm sinh học và sinh lý sinh sản 113

4.1.2 Kích thích sinh sản và ấp trứng 114

4.1.3 Sự phát triển ống tiêu hoá và lựa chọn thức ăn 114

4.1.4 Ương cá bột lên cá hương và cá giống 114

4.2 Đề xuất 115

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU 116

TÀI LIỆU THAM KHẢO 118

PHỤ LỤC 133

DANH SÁCH BẢNG

Trang Bảng 2.1: Loại và liều lượng kích dục tố; chất kích thích sinh sản

dùng kích thích cá nâu cái sinh sản 45

Bảng 3.1: Hệ số thành thục và độ béo của các giai đoạn phát triển tuyến sinh dục của cá nâu cái 61

Bảng 3.2: Hệ số thành thục và độ béo của các giai đoạn phát triển tuyến sinh dục của cá nâu đực 63

Bảng 3.3: Sức sinh sản thực tế của cá nâu 63

Bảng 3.4: Đường kính trứng của cá nâu 64

Bảng 3.5: Sự phát triển phôi của cá nâu 65

Bảng 3.6: Kích thước noãn hoàng và cỡ miệng cá nâu 66

Bảng 3.7: Tỷ lệ khối lượng gan với khối lượng cá và tỷ lệ khối lượng tuyến sinh dục với khối lượng gan cá có các giai đoạn tuyến sinh dục khác nhau 70

Bảng 3.8: Số lượng huyết sắc tố, tỷ lệ huyết sắc tố, khối lượng trung bình của huyết cầu trong hồng cầu và nồng độ huyết sắc tố trong hồng cầu ở các giai đoạn tuyến sinh dục của cá nâu cái 71

Bảng 3.9: Số lượng hồng cầu, thể tích hồng cầu, số lượng bạch cầu và tỷ lệ bạch cầu với hồng cầu ở các giai đoạn tuyến sinh dục của cá nâu cái 72

Bảng 3.10: Hàm lượng phosphate protein huyết tương và protein ở các giai đoạn tuyến sinh dục cá nâu cái 74

Bảng 3.11: Tỷ lệ khối lượng gan với khối lượng cá và tỷ lệ khối lượng tuyến sinh dục với khối lượng gan ở các giai đoạn tuyến sinh dục cá nâu đực 76

Bảng 3.12: Số lượng huyết sắc tố, tỷ lệ huyết sắc tố, khối lượng trung bình của huyết cầu trong hồng cầu và nồng độ huyết sắc tố trong hồng cầu ở các giai đoạn tuyến sinh dục cá nâu đực 77

Bảng 3.13: Số lượng hồng cầu, thể tích hồng cầu, số lượng bạch cầu

và tỷ lệ bạch cầu với hồng cầu ở các giai đoạn tuyến sinh

dục cá nâu đực 77

Bảng 3.14: Thời gian hiệu ứng, thời gian phát triển phôi và tỷ lệ cá rụng trứng 80

Bảng 3.15: Tỷ lệ trứng thụ tinh, tỷ lệ trứng nở và tỷ lệ cá dị hình 82

Bảng 3.16: Biến động nhiệt độ bể ương trong thời gian ấp trứng cá ở các độ mặn khác nhau 83

Bảng 3.17: Biến động pH trong thời gian ấp trứng ở các độ mặn khác nhau 84

Bảng 3.18: Nhiệt độ và pH trung bình của các nghiệm thức 98

Bảng 3.19: Hàm lượng TAN và N-NO2- trung bình của các nghiệm thức.99 Bảng 3.20: Tốc độ tăng trưởng của cá ở các nghiệm thức sau 15 ngày ương 103

Bảng 3.21: Nhiệt độ và pH trung bình của các nghiệm thức 104

Bảng 3.22: Hàm lượng TAN và N-NO2- trung bình của các nghiệm thức.105 Bảng 3.23: Tốc độ tăng trưởng của cá ở các nghiệm thức sau 15 ngày ương 107

Bảng 3.24: Biến động các yếu tố môi trường nước ở các nghiệm thức 108

Bảng 3.25: Tốc độ tăng trưởng của cá hương sau 30 ngày ương 109

Bảng 3.26: Sự phân cỡ của cá hương sau 30 ngày ương 110

DANH SÁCH HÌNH

Trang

Hình 1.1: Hình thái bên ngoài của cá nâu (Scatophagus argus) 6

Hình 1.2: Một số loài tảo phổ biến sử dụng trong ương ấu trùng 29

Hình 1.3: Rotifer 30

Hình 1.4: Ấu trùng Giáp xác chân chèo 31

Hình 1.5: Giáp xác chân chèo 31

Hình 1.6: Artemia 32

Hình 2.1: Sơ đồ nghiên cứu của đề tài 36

Hình 2.2: Đầm nước lợ ở huyện Ngọc Hiển (nơi thu mẫu cá) 37

Hình 2.3: Hình thái giải phẩu cá nâu 38

Hình 2.4: Phương pháp xác định kích cỡ miệng cá 40

Hình 2.5: Thu mẫu máu cá nâu 41

Hình 2.6: Buồng đếm hồng cầu Neubauer 42

Hình 2.7: Hình dạng hồng cầu và bạch cầu 42

Hình 2.8: Hệ thống bể nuôi vỗ thành thục cá nâu 44

Hình 2.9: Các bước trong kích thích sinh sản và ấp trứng cá nâu 46

Hình 2.10: Hệ thống bể ấp trứng cá nâu ở các độ mặn khác nhau 48

Hình 2.11: Hệ thống bể ương cá bột từ 1 ngày tuổi đến 15 ngày 52

Hình 2.12: Hệ thống bể ương cá bột từ 15 ngày tuổi lên 30 ngày 54

Hình 2.13: Hệ thống bể ương cá 1 tháng tuổi lên cá 2 tháng tuổi 55

Hình 3.1: Tổ chức học buồng trứng cá nâu 57

Hình 3.2: Hình thái của buồng trứng cá nâu 58

Hình 3.3: Tổ chức học của buồng tinh cá nâu giai đoạn IV (40x) 59

Hình 3.4: Hình thái của buồng tinh cá nâu giai đoạn IV 59

Hình 3.5: Hệ số thành thục trung bình của cá nâu cái qua các tháng 59

Hình 3.6: Hệ số thành thục trung bình của cá nâu đực qua các tháng 60

Hình 3.7: Tỷ lệ cá nâu đực và cá nâu cái qua các tháng 60

Hình 3.8: Các giai đoạn phát triển phôi cá nâu (10X) 65

Hình 3.9: Cá nâu bột từ 1 ngày tuổi đến 30 ngày tuổi (4x) 67

Hình 3.10: Tương quan khối lượng cá với chiều dài và chiều cao cá

nâu cái 68

Hình 3.11: Tương quan giữa khối lượng tuyến sinh dục và khối lượng gan cá 71

Hình 3.12: Tương quan giữa khối lượng với chiều dài và chiều cao cá 75

Hình 3.13: Tỷ lệ thành thục của cá nâu sau 4 tháng nuôi vỗ trong bể 79

Hình 3.14: Kết quả ấp trứng cá nâu ở các độ mặn khác nhau 84

Hình 3.15: Đặc điểm hình thái ống tiêu hóa của cá nâu trưởng thành 86

Hình 3.16: Ống tiêu hóa cá nâu bột 86

Hình 3.17: Thực quản, ruột, dạ dày cá nâu 86

Hình 3.18: Tuyến dạ dày cá nâu 87

Hình 3.19: Mặt cắt dọc của thực quản cá nâu 87

Hình 3.20: Ruột cá nâu 15 ngày tuổi (10x) 89

Hình 3.21: Manh tràng cá nâu (10x) 90

Hình 3.22: Tỷ lệ phần trăm phiêu sinh thực vật trong nước ương 91

Hình 3.23: Tỷ lệ phiêu sinh động vật trong nước bể ương cá nâu 92

Hình 3.24: Tỷ lệ phiêu sinh động vật trong ruột cá 93

Hình 3.25: Tỷ lệ phần trăm phiêu sinh thực vật trong ruột cá 94

Hình 3.26: Tỷ lệ sống cá ở các nghiệm thức sau 15 ngày ương 100

Hình 3.27: Chiều dài cá ở các nghiệm thức sau 15 ngày ương 102

Hình 3.28: Tỷ lệ sống cá ở các nghiệm thức sau 15 ngày ương 105

Hình 3.29: Chiều dài cá ở các nghiệm thức sau 15 ngày ương 106

Hình 3.30: Khối lượng cá nâu sau 30 ngày ương ở các độ mặn khác nhau 108 Hình 3.31: Sự phân cỡ của cá sau 30 ngày ương 111

Hình 3.32: Tỷ lệ sống của cá nâu ương ở các độ mặn khác nhau 112

DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT

ĐBSCL: Đồng Bằng Sông Cửu Long

FSH: Follicle Stimulating Hormone

GnRH: Gonadotropine Releasing Hormone

GSI: Hệ số thành thục

HCG: Human Chorionictropin Hormone

LH: Luteinizing Stimulating Hormone

LH-RH: Luteotropin Hormone Releasing Hormone Analog MCV: Thể tích hồng cầu µm3

MHC: Khối lượng trung bình của huyết sắc tố trong hồng cầu MHCH: Nồng độ của huyết sắc tố trong hồng cầu

TACB: Thức ăn chế biến

TÓM TẮT

Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản và thử nghiệm sản xuất giống

cá nâu (Scatophagus argus Linnaeus, 1766) được thực hiện tại Khoa Thủy

sản, Trường Đại học Cần Thơ và huyện Năm Căn, huyện Ngọc Hiển tỉnh Cà Mau trong thời gian từ 2006-2010 Mục tiêu của luận án góp phần bổ sung kiến thức cơ bản về đặc điểm sinh học sinh sản và xác định được loại và liều kích dục tố, chất kích thích sinh sản trong sinh sản nhân tạo và ương cá nâu bột lên giống để từng bước tiến tới phát triển nghề sản xuất giống và nuôi thương phẩm cá nâu

Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản được thực hiện ở huyện Ngọc Hiển, tỉnh Cà Mau Cá nâu được thu ngẫu nhiên từ các đầm nước lợ 30 con/tháng và thu liên tục 12 tháng Kết quả cho thấy hệ số thành thục của cá lớn nhất vào tháng 8 là 27,2%, sức sinh sản thực tế 2.469.209 trứng/kg Độ béo Fulton của cá nâu cái có tuyến sinh dục giai đoạn 4 cao nhất (9,87 %) Nghiên cứu các chỉ tiêu sinh lý sinh sản của cá nâu qua 6 giai đoạn phát triển của tuyến sinh dục, kết quả cho thấy khối lượng gan của cá nâu cái có tuyến sinh dục giai đoạn 3 là lớn nhất (4,59 g/con); hàm lượng phosphat protein huyết tương của cá nâu cái tăng theo sự phát triển của tuyến sinh dục và đạt cao nhất ở cá có tuyến sinh dục giai đoạn 4 (3,12 µg ALP/mL protein)

Nghiên cứu kích thích sinh sản cá nâu được tiến hành trên cá đã thành thục ngoài tự nhiên có kích cỡ 80-300 g/con Cá cái được tiêm Ovaprim với liều 0,5; 1,0 và 1,5 mL/kg; LHRH-a với liều 50; 100 và 150 µg/kg kết hợp với domperidon 5 mg/kg; và HCG với liều 1.000; 1.500 và 2.000 UI/kg Trứng cá nâu thụ tinh được ấp ở các độ mặn 0, 5, 10, 15, 20, 25 và 30‰ Kết quả cho thấy, thời gian hiệu ứng dao động từ 12-32 giờ; ở liều ovaprim 1 mL/kg cho tỷ

lệ cá rụng trứng (93,3%), tỷ lệ trứng thụ tinh (76,5%), tỷ trứng lệ nở (69,5%) cao nhất và tỷ lệ cá dị hình thấp nhất (2,16%) Trứng cá nâu ấp ở độ mặn 30‰ cho tỉ lệ nở đạt cao nhất 43,3%

Thời gian phát triển phôi của cá nâu trong khoảng 18-22 giờ; cá nâu mới nở có chiều dài trung bình 1,88 mm; kích cỡ noãn hoàng 0,76 mm (dài),

Nghiên cứu ương cá bột từ 1 ngày tuổi lên cá 15 ngày tuổi với 6

nghiệm thức (i) Chlorella sp + Rotifer; (ii) Chlorella sp + Rotifer + TACB (thức ăn chế biến); (iii) Chlorella sp + TACB; (iv) Rotifer; (v) Rotifer + TACB

và (vi) TACB nhận thấy ở nghiệm thức cho ăn Chlorella sp + Rotifer + TACB

có tỷ lệ sống (15,7%) và tăng trưởng (3,64 mm) cao nhất; cá chết hoàn toàn ở nghiệm thức thức ăn chế biến sau 8 ngày ương Cá bột từ 15 ngày tuổi được

ương lên 30 ngày tuổi với 5 nghiệm thức (i) Rotifer; (ii) Artemia; (iii) Thức ăn chế biến (TACB); (iv) Rotifer + TACB và (v) Artemia + TACB thì thấy cá có

tỷ lệ sống cao khi cho ăn Artemia (72%) hay cho ăn Artemia kết hợp TACB

(65%)

Nghiên cứu ương cá 30 ngày tuổi lên 60 ngày tuổi ở các độ mặn 0, 5,

10, 15, 20, 25 và 30‰ cho thấy ở độ mặn 5‰, cá tăng trưởng tốt nhất với khối lượng cá trung bình là 0,91 g/con, tăng trưởng tuyệt đối 0,26 g/ngày và tốc độ tăng trưởng tương đối là 6,22 %/ngày; cá tăng trưởng chậm ở nghiệm thức có

độ mặn 0‰; tỉ lệ sống trung bình cao nhất ở độ mặn 5‰ (92,8%) và thấp nhất

ở độ mặn 0‰ (55,1%)

Các kết quả nghiên cứu cho phép xác định mùa vụ sinh sản chính của

cá nâu vào tháng 4 và tháng 8 hằng năm Có thể cho cá nâu sinh sản nhân tạo bằng Ovaprim với liều 1 mL/kg và ấp trứng ở độ mặn 30‰ Cá nâu giai đoạn

1-15 ngày tuổi cho cá ăn Chlorella sp + Rotifer + TACB, giai đoạn 15-30 ngày tuổi cho ăn Artemia Các kết quả nghiên cứu có ý nghĩa quan trọng góp

phần ứng dụng sản xuất giống và nuôi thương phẩm cá nâu trong thời gian tới

ABSTRACT

The study on the biological characteristics and induced spawning of

spotted scat fish (Scatophagus argus Linnaeus, 1766) was carried out at

College of Aquaculture and Fisheries, Can Tho University, and in Nam Can and Ngoc Hien district, Ca Mau province from 2006 to 2010 The objectives

of the study are to provide basic information on reproductive biology of the sportted scat fish; to determine appropriate types and doses of hormone and stimulating agents for induced spawning of the fish and to develop methods for larval rearing in order to contribute to development of seed propagation technology and grow-out of this species

Studying on reproductive biology of spotted scat fish were carried out

in Ngoc Hien District, Ca Mau province Fish were randomly collected from extensive shrimp farms with 30 fish/months for a year round Results showed that GSI of female fish were highest (27.2%) during August, and average fecundity was 2,469,209 eggs/kg Fulton index of female fish were highest (9.87 %) at ovarian stage IV Meanwhile, male fish has the highest Fulton and Clark indices at testis stage II Through six stages of ovarian development of female fish, liver has highest weight (4.59 g/ind.) at stage III; plasma protein phosphate content increased with development stages of the ovary and achieved the highest level of 3.12 µg ALP/mL protein at ovarian stage IV

Induced spawning and egg incubation of spotted scat fish were done with matured fish of 80-300 g in body weight The female fish were injected with different doses of ovaprim (0.5; 1.0 and 1.5 mL/kg); LHRH-a (50; 100 and 150 µg/kg) combined with domperidon (5 mg/kg); and HCG (1,000; 1,500 and 2,000 UI/kg) Fertilized eggs were incubated at different salinities (0, 5,

10, 15, 20, 25, 30‰) Results showed that ovulating time after hormone injection was 12-32 hours; ovaprim at 1 mL/kg gave the highest spawning rates (93%), egg fertilizing rates (76.5%) and hatching rates (69.5%) and the lowest deformed rates (2.16%) Salinity of 30‰ gave the highest egg hatching rates (43.3%)

Embryo development lasted for 18-22 hours Newly hatched larvae had average body length of 1.88 mm; yolk sac length and width of 0.76 mm and 0.29 mm, respectively; mouth width of 0.07 mm The yolk was totally absorbed after 3-4 days from hatching

Development of digestive tract and food selection of the larvae were examined histologically from the newly hatched to 30-day old larval Results showed that the digestive tract of the larvae of 3 days post hatching could be recognized for esophagus, stomach and intestine The digestive tract of larvae was completely developed after reaching 20-day old Larvae showed as zooplankton feeder from newly hatched stage to 15–day old, and as phytoplankton feeder from 15 to day 30-day old

Rearing larvae from 1 to 15-day old was conducted with 6 feeding

treatments (i) Chlorella + Rotifer; (ii) Chlorella + Rotifer + artificial feed; (iii) Chlorella + artificial feed; (iv) Rotifer; (v) Rotifer + artificial feed and (vi) artificial feed Results showed that the treatment with Chlorella + Rotifer +

artificial feed gave the highest survival rate (15.7%) and growth (3.64 mm); larvae fed with only artificial feed all died after 8 days of rearing

Rearing larvae from 15 to 30-day old was conducted with 5 different

feeding treatments including (i) Rotifer; (ii) Artemia; (iii) artificial feed; (iv) Rotifer + Artificial feed, and (v) Artemia + artificial feed The highest survival rates of 72% and 65% were obtained from the treatments fed with Artemia, and Artemia + artificial feed, respectively

Fish fingerlings from 30 to 60-day old were reared with different salinities of 0, 5, 10, 15, 20, 25 and 30‰ After 30 days of rearing, results showed that water salinity of 5‰ gave the highest fish BW (0.91g), and DWG (0.26 g) and SGR (6.22%) The fish grew slowest at salinity of 0‰ The highest and the lowest survival rates, 92% and 55.1%, were observed from the treatments with salinity of 5‰ and 0‰, respectively

In general, the findings from this study are very important to apply into practices of seed production and culture of the spotted scat in the coming time

1

MỞ ĐẦU

1 Giới thiệu chung

Việt Nam có tổng chiều dài đường bờ biển là 3.260 km, diện tích ven biển khoảng 1.000.000 km2, 12 đầm phá, eo biển, vịnh và hơn 4.000 hòn đảo lớn nhỏ (Vũ Văn Phái, 2007) Việt Nam vì thế có tiềm năng rất lớn về phát triển nuôi trồng thủy sản nước lợ, mặn (hay thủy sản ven biển) và lợi thế này

đã thể hiện trong nhiều năm qua Tuy nhiên, nghề nuôi thủy sản ven biển của Việt Nam còn mang tính độc canh cao, hầu hết các địa phương ven biển tập

trung phát triển nuôi tôm sú (Penaeus monodon) trong nhiều năm qua; và hiện

đã phát sinh những tác động tiêu cực về môi trường, dịch bệnh,… làm giảm tính bền vững của nghề nuôi tôm nói riêng và chậm khai thác thế mạnh của vùng ven biển nói chung

Nhiều nước trên thế giới có điều kiện tương tự Việt Nam đã có xu hướng đa dạng hóa đối tượng nuôi ở vùng ven biển; nhiều đối tượng thủy sản

bản địa và di nhập như tôm thẻ chân trắng (Penaeus vannamei), cua biển (Scylla spp), cá mú (Epinephelu spp), cá bớp (Rachycentron canadum), cá chẽm (Lates calcarifer), cá chình (Anguilla marmorata),… đã được đưa vào

nuôi Tuy nhiên, phát triển nuôi các đối tượng cá biển hiện còn gặp rất nhiều hạn chế về kỹ thuật nuôi, thức ăn, quản lý bệnh, đặc biệt là sản xuất con giống nhân tạo một trong những cơ sở quan trọng cho sự phát triển loài nuôi Hiện nay, rất nhiều quốc gia đang chú trọng đến các loài cá bản địa do có nhiều ưu thế riêng về sinh thái của loài nhưng kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo là yếu tố giới hạn chính Thực tế sản xuất ở Đồng Bằng Sông Cửu Long (ĐBSCL) cho thấy có nhiều đối tượng cá bản địa rất có tiềm năng để nuôi và có triển vọng

kinh tế cao đang được chọn lựa phát triển như cá nâu (Scatophagus argus), cá đối (Liza subviridis), cá kèo (Pseudapocryptes elongatus), cá ngát (Plotosus canius),… Cá nâu (Scatophagus argus) là loài cá phân bố tự nhiên ở vùng

ven biển và được đánh giá là loài rất có triển vọng phát triển để nuôi, đặc biệt

là ở vùng ĐBSCL vì cá nâu có tính ăn tạp thiên về thực vật nên không chỉ thích hợp cho việc nuôi đơn mà còn có thể nuôi ghép với các loài thủy sản

2

khác đặc biệt là nuôi kết hợp với tôm sú nhằm cải thiện môi trường nước ao nuôi tôm qua đó tăng thêm thu nhập cho người nuôi và tạo được mô hình nuôi bền vững Tuy nhiên, nghề nuôi cá nâu chưa được phát triển do thiếu nguồn giống, đặc biệt là giống được sản xuất nhân tạo để cung cấp được số lượng lớn cho nhu cầu nuôi

Theo Mai Đình Yên (1992); Trương Thủ Khoa và Trần Thị Thu Hương

(1993) thì ở Việt Nam có một giống và một loài cá nâu duy nhất là Scatophagus argus (Linnaeus, 1766) Các nghiên cứu về đối tượng này hiện

còn rất hạn chế, chỉ mới một số nghiên cứu bước đầu về hình thái phân loại, thành phần giống loài (Mai Đình Yên, 1992; Trương Thủ Khoa và Trần Thị

Thu Hương, 1993; Fast, 1988; Barry et al, 1992), sự phân bố (Nguyễn Hữu Phụng, 1995; Nguyễn Tấn Trịnh và ctv, 1996; Khan, 1984; Mohsin et al,

1996), mô tả hình thái (Võ Văn Chi, 1993) và một số đặc điểm sinh học (Võ

Thành Tiếm, 2004; Nguyễn Thanh Phương và ctv, 2004; Nguyễn Thanh Phương và ctv, 2008)

Do đó, để phát triển các mô hình nuôi cá nâu cần có nhiều nghiên cứu

xa hơn về các vấn đề sinh học cá nâu làm cơ sở nghiên cứu hoàn thiện quy trình kỹ thuật kích thích cá nâu sinh sản nhân tạo như các đặc điểm sinh học sinh sản, sinh lý, chọn lựa kích dục tố kích thích cá đẻ, sự phát triển cá bột,

thức ăn cho cá mới nở, sự thích nghi độ mặn,… Với các lý do trên, đề tài

“Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản và thử nghiệm sản xuất giống cá

nâu (Scatophagus argus Linnaeus, 1766)” được thực hiện

2 Mục tiêu nghiên cứu

- Mục tiêu tổng quát: bổ sung cơ sở dữ liệu khoa học về đặc điểm sinh

học sinh sản và sinh lý sinh sản cá nâu và qua đó phát triển qui trình sinh sản nhân tạo cá nâu để từng bước tiến tới phát triển nghề sản xuất giống và nuôi thương phẩm cá nâu; góp phần đa dạng hóa đối tượng và mô hình nuôi thủy sản ven biển; thúc đẩy sự phát triển bền vững nghề nuôi thủy sản ở ĐBSCL nói riêng và cả nước ta nói chung

3

- Mục tiêu cụ thể: tìm ra một số đặc điểm sinh học và sinh lý sinh sản

quan trọng của cá nâu; loại kích dục tố và chất kích thích sinh sản thích hợp để kích thích cá nâu sinh sản nhân tạo; sự phát triển của cá nâu mới nở và biện pháp kỹ thuật ương nuôi cá nâu giai đoạn cá bột lên cá giống

3 Nội dung nghiên cứu

a) Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học sinh sản và sinh lý sinh sản quan trọng của cá nâu

b) Nghiên cứu sử dụng các loại kích dục tố và chất kích thích sinh sản khác nhau để kích thích cá nâu sinh sản nhân tạo và kỹ thuật ấp trứng cá nâu

c) Nghiên cứu sự phát triển của ống tiêu hóa và sự lựa chọn thức ăn của cá nâu bột

d) Nghiên cứu ương cá nâu bột lên cá hương bằng các loại thức ăn và

cá hương lên cá giống ở các độ mặn khác nhau

4 Ý nghĩa của luận án

Luận án góp phần bổ sung kiến thức cơ bản về đặc điểm sinh học sinh sản và sinh lý sinh sản của cá nâu; nghiên cứu cũng đã xác định được loại và liều kích dục tố, chất kích thích sinh sản để kích thích sinh sản nhân tạo cá nâu; phương pháp ấp trứng; sự lựa chọn thức ăn và phát triển ống tiêu hóa cá nâu bột và kỹ thuật ương từ cá nâu bột lên cá hương và từ cá hương lên cá giống Những kết luận về sinh học và kỹ thuật sản xuất giống và ương cá nâu

sẽ là nguồn cơ sở dữ liệu khoa học quan trọng cho sự hoàn thiện và phát triển nghề sản xuất giống và ương cá nâu để chủ động cung cấp con giống thúc đẩy nghề nuôi cá nâu phát triển, đa đạng hóa đối tượng và mô hình nuôi thủy sản, góp phần phát triển bền vững nghề nuôi thủy sản ven biển

4

5 Điểm mới của luận án

- Luận án đã xác định được mùa vụ sinh sản chính của cá nâu vào tháng

4 và tháng 8 hằng năm; sức sinh sản thực tế của cá nâu trung bình 2.469.209 trứng/kg; đường kính trứng ở tuyến sinh dục giai đoạn V là 0,68 mm và sự phát triển phôi của cá nâu trong khoảng 19 giờ 30 phút ở nhiệt độ nước 26,2-27,7 oC

- Luận án đi sâu tìm hiểu các chỉ tiêu về huyết học và sinh hóa của cá nâu; đánh giá được mối tương quan giữa các chỉ tiêu huyết học (hồng cầu, bạch cầu, huyết sắc tố, …) và phosphate protein huyết tương (vitellogenin) với các giai đoạn phát triển của tuyến sinh dục cá nâu

- Luận án cũng đã xác định được kích cỡ noãn hoàng, kích cỡ miệng cá nâu bột Ở cá nâu bột mới nở thì noãng hoàng có kích cỡ 0,76 mm (dài) và 0,29 mm (rộng), cỡ miệng 0,77 mm, chiều dài 1,88 mm và đến ngày tuổi thứ 3-4 thì cá sử dụng hết noãn hoàng

- Luận án đã xác định được thức ăn khi cá nâu bắt đầu ăn ngoài là

rotifer (Brachionus plicatilis và Brachionus rotundiformis) ở ngày tuổi thứ 3;

từ ngày tuổi thứ 3 đến ngày tuổi thứ 15 cá nâu chủ yếu ăn động vật phiêu sinh

và từ ngày tuổi thứ 15 trở đi cá nâu chuyển dần sang ăn thực vật phiêu sinh

- Luận án mô tả sự phát triển của ống tiêu hóa của cá nâu bột; có thể phân biệt được thực quản, dạ dày và ruột ở giai đoạn cá 3 ngày tuổi và hệ thống tiêu hóa của cá nâu phát triển hoàn chỉnh như cá trưởng thành sau khi cá được 20 ngày tuổi

- Luận án đã xác định được chất kích thích sinh sản tốt nhất là ovaprim với liều 1 mL/kg thì có tỷ lệ cá rụng trứng 93,3%, tỷ lệ trứng thụ tinh 76,5%

và tỷ lệ trứng nở 69,5%, tỷ lệ cá dị hình 2,16% Thời gian hiệu ứng của kích dục tố dao động 12-32 giờ và tỷ lệ trứng nở cao nhất là 43,3% ở độ mặn 30‰

- Luận án cũng cho thấy rằng cá nâu từ ngày tuổi thứ 3 đến ngày tuổi

thứ 15 cho ăn Chlorella sp + Rotifer + TACB có tỷ lệ sống 15,7% và tăng

5

trưởng đạt 3,64 mm; từ ngày tuổi thứ 15 đến ngày tuổi thứ 30 cho cá ăn

Artemia thì cá đạt tỷ lệ sống cao 72% và đạt chiều dài là 9,14 mm

Trên cơ sở những kết quả trên, luận án kết luận rằng bước đầu có thể sản xuất giống và ương cá nâu để chủ động cung cấp con giống thúc đẩy nghề nuôi cá nâu phát triển, đa dạng hóa đối tượng và mô hình nuôi thủy sản

6

CHƯƠNG 1:

TỔNG QUAN 1.1 Sơ lược đặc điểm sinh học cá nâu

1.1.1 Hình thái phân loại

Cá nâu (Scatophagus argus) có tên tiếng Anh là spotted scat thuộc họ Scatophagidae Theo Mohsin et al., (1996) thì cá nâu phân bố nhiều nơi từ

Nhật Bản đến Ấn Độ – Thái Bình Dương bao gồm cả vùng biển phía Nam

Trung Quốc Theo Barry et al., (1992) thì cá nâu có 2 giống là Scatophagus và Selenotoca Ở Việt Nam, các tác giả Mai Đình Yên (1992); Trương Thủ Khoa

và Trần Thị Thu Hương (1993) xác định cá nâu chỉ có một giống và một loài

cá nâu duy nhất là Scatophagus argus Linnaeus, 1766

Theo Trương Thủ Khoa và Trần Thị Thu Hương (1993) thì vị trí phân loại của cá nâu như sau:

Lớp: Osteichthyes

Bộ: Perciformes

Họ: Scatophagidae

Giống: Scatophagus (Cuvier và Valenoiennes, 1831)

Loài: Scatophagus argus Linnaeus, 1766

Hình 1.1: Hình thái bên ngoài của cá nâu (Scatophagus argus)

7

Cá nâu có mình dẹp bên, cao thân, lưng hình vòm, nhìn ngang gần như tròn Cá có đầu nhỏ, ngắn, mõm tù, miệng nhỏ, rạch miệng nằm ngang và ngắn, trên hàm có răng mịn Mắt cá lớn vừa, nằm phía trên đường ngang kể từ góc miệng và gần như cách đều chót mõm và điểm cuối nắp mang Lỗ mũi trước tròn, lỗ mũi sau là vạch, màng mang hẹp và liền với eo mang Phần trán giữa hai mắt cong lồi và tương đương 1,5 lần đường kính mắt Cạnh trước xương lệ có răng cưa, xương nắp mang có một gai Vảy lược, nhỏ, phủ khắp thân, đầu, gốc vi hậu môn, vi lưng và đuôi, rìa tia vây lưng và vây hậu môn gần như thẳng đứng, viền sau vây đuôi thẳng (Trương Thủ Khoa và Trần Thị Thu Hương, 1993) Theo Võ Văn Chi (1993) thì cá nâu có thân cao và dẹp, thân gần như vuông, viền trước của vây lưng dốc đứng xuống và có một vết lõm sâu sau mắt Mõm tù, miệng nhỏ có nhiều răng nhọn, không kéo dài đến viền trước của mắt, cơ thể và đầu phủ vảy nhỏ cho tới gốc của vây lưng và vây hậu môn Đường bên hoàn toàn phía trước cong lên theo viền lưng Phần trước

có gai của vây lưng tương đối ít phát triển, ngoại trừ tia thứ ba và tia thứ tư Ngược lại, phần của vây lưng cấu tạo bởi các tia mềm cũng như vây hậu môn khá phát triển và tách rời với vây đuôi chỉ có một khoảng ngắn, cuốn đuôi ngắn vây đuôi không chia thùy Không có dấu hiệu hình thái phân biệt rõ đực hay cái Cá nâu còn có màng mang hẹp và liền với eo mang Rìa phần gai, vây lưng đen thẫm và màng vây nhạt, phần tia phân nhánh vây lưng, vây đuôi và vây hậu môn đen nhạt Lưng có màu nâu nhạt, trên thân có các đốm tròn màu nâu đen lớn nhỏ xếp xen kẽ không đều nhau, các đốm này nhạt dần về phía bụng Theo Võ Thành Tiếm (2004), cá nâu có thể phân biệt được đực và cái dựa vào hai đặc điểm là cá có đầu nhỏ, xương trán ở con đực phát triển và nhô cao hơn xương trán con cái, con đực thường ốm hơn và thon dài hơn con cái

1.1.2 Phân bố

Cá nâu là loài cá phân bố nhiều nơi từ Nhật Bản đến Ấn Độ - Thái Bình

Dương bao gồm cả vùng biển phía Nam Trung Quốc (Mohsin et al., 1996)

Vùng phân bố từ bờ biển Trung Quốc dọc đến Úc Châu (Trương Thủ Khoa và Trần Thị Thu Hương, 1993) Theo Nguyễn Hữu Phụng (1995) thì cá nâu sống

8

ở biển, nước lợ và nước ngọt (sông và hồ), phân bố từ Ấn Độ, Úc, Srilanka, Indonesia, Malaysia, New Caledonia, Philipphines, Thái Lan, Trung Quốc và Việt Nam Cá nâu được tìm thấy ở Rajpara (Ấn Độ) có chiều dài lớn nhất 334

mm và khối lượng 1,2 kg (Khan, 1984)

Ở Việt Nam cá nâu phân bố trong đầm phá, kênh rạch nước lợ và cửa

sông (Nguyễn Tấn Trịnh và ctv, 1996; Mai Đình Yên, 1992) và có ở cả ba

vùng gồm Vịnh Bắc Bộ, Miền Trung và Nam Bộ (Nguyễn Hữu Phụng, 1995)

Cá thường phân bố nhiều ở những nơi có chế độ triều dao động thường xuyên,

có giá thể và sống theo bầy đàn (Võ Thành Tiếm, 2004) Cá nâu cũng có thể sống được những nơi có đá ngầm, sông, phá và các cửa sông

1.1.3 Tập tính dinh dưỡng

Cá nâu ăn được nhiều loại thức ăn khác nhau như giun, giáp xác, côn

trùng, các vật chất có nguồn gốc thực vật, tảo, Theo Nguyễn Tấn Trịnh và ctv (1996) thì cá nâu là loài cá ăn tạp, thức ăn của cá là tảo Enteromorpha, tảo Chaetomorpha, tảo silic, tảo Euglenophyta,… trong đó tảo Enteromorpha và tảo Chaetomorpha không chỉ có tần số xuất hiện cao mà còn chiếm số lượng

lớn trong ống tiêu hóa Theo Chang (1997) thức ăn cho ấu trùng trong những

ngày đầu mới nở là rotifer Brachionus (rotifer); sau 9 ngày cá có thể ăn được

ấu trùng Artemia và sau 19 ngày cá có thể sử dụng giáp xác chân chèo

(copepoda) Theo Nikolsky (1963) thì những loài cá có tính ăn thiên về động vật có tỷ lệ chiều dài ruột/chiều dài thân ≤1, cá ăn tạp có tỷ lệ chiều dài ruột/chiều dài thân là 1-3 và cá ăn thiên về thực vật có tỷ lệ chiều dài ruột/chiều dài thân ≥3 Theo Võ Thành Tiếm (2004) thì cá nâu thuộc loài ăn tạp thiên về thực vật vì cá có tỷ lệ chiều dài ruột/chiều dài thân là 2,88; thức ăn

của cá gồm mùn bã hữu cơ và một số loài tảo như Coscinodiscus, Lyngbya, Nitzschia, Closterium và Navicula Kết quả phân tích thành phần thức ăn trong

dạ dày và ruột cá nâu trưởng thành cũng cho thấy thức ăn là mùn bã hữu cơ chiếm đến 97,8% và các loài tảo chiếm 2,25% (Võ Thành Tiếm, 2004)

9

1.1.4 Đặc điểm sinh trưởng

Sinh trưởng của cá là quá trình gia tăng về kích thước và tích lũy thêm

về khối lượng cơ thể (Nikolsky, 1963) Các kết quả nghiên cứu về cá nâu ở

Việt Nam hiện nay còn rất ít, theo Nguyễn Tấn Trịnh và ctv (1996) thì cá nâu

có kích thước tương đối lớn Cá nâu lớn nhất được tìm thấy có chiều dài 33 cm (Allen, 2000) Trong một số đầm nuôi ven biển cá nâu có sản lượng khai thác đáng kể, chiều dài cá đánh bắt đạt đến 143-175 mm với khối lượng tương ứng 105-140 g Theo Assadi and Delighani (1997) thì cá nâu có chiều dài cực đại

là 30 cm Barry and Fast (1992) nghiên cứu về cá nâu cho biết cá cái có chiều dài tối đa là 28 cm và cá đực là 27 cm Cá nâu còn được nuôi như 1 loài cá kiểng, nhất là ở giai đoạn nhỏ (Mohsin, 1996)

tự như xác định ở cá tai tượng (Osphronemus gourami) là “trán cá đực” (Ngô

Trọng Lư và Thái Bá Hồ, 2003)

1.1.6 Hệ số thành thục

Theo Pravdin (1963) thì khối lượng tuyến sinh dục là một trong những điều kiện giải thích mức độ chín muồi của các sản phẩm sinh dục, hệ số này là

tỷ lệ phần trăm của khối lượng tuyến sinh dục trên khối lượng thân cá Những

cá thể đạt giai đoạn III trở lên của chu kỳ thành thục được xem là đã thành thục sinh dục nhưng khi đạt giai đoạn IV trở lên mới được xem là sinh sản (Pravdin, 1963) Hệ số thành thục cho phép ta theo dõi quá trình chín của sản

10

phẩm sinh dục; sự sai số của hệ số này là do khối lượng thân cá (gồm cả ruột

và các phần khác trong ruột) nên khối lượng này bị thay đổi theo độ no của ruột Ở những cá có dạ dày no thì hệ số thành thục giảm đi rất nhiều; hệ số thành thục tối đa có ý nghĩa đặc biệt, nó nói lên đặc tính của tuyến sinh dục ở giai đoạn phát triển mạnh nhất Xác định hệ số thành thục tối đa của buồng trứng nhằm để xác định mức độ chuẩn bị đẻ trứng của buồng trứng, tính số lượng trứng đẻ ra, và tính toán khả năng sinh sản và đánh giá so sánh nó ở những loài cá khác nhau

1.2 Sơ lược đặc điểm sinh lý

1.2.1 Huyết học

Máu có hai thành phần là tế bào máu (gồm hồng cầu, bạch cầu và tiểu cầu) và huyết tương (gồm 90% là nước, các chất hữu cơ, đường và các chất điện phân,…) Tỷ lệ giữa huyết cầu và huyết tương thay đổi theo giống loài

và phương thức sinh sống của cá Thông thường huyết cầu chiếm khoảng

27%, cao nhất là cá chép 36%, thấp nhất là cá hàm ếch (Lophius picastirius)

16% (Đỗ Thị Thanh Hương và Nguyễn Văn Tư, 2010)

Mott (1957) (trích của Bùi Lai và ctv, 1985) cho rằng số lượng máu cá

ít hơn máu ở động vật có xương sống bậc cao và chỉ tương đương với máu của lưỡng thê có đuôi Các loài cá khác nhau có lượng máu khác nhau cũng như lượng máu trong cơ thể cá ở điều kiện sinh thái khác nhau thì khác nhau Cá nước ngọt có lượng máu ít hơn cá biển, máu ở cá nước ngọt chiếm 2,7% và cá

biển là 4,1% so với khối lượng của cơ thể (Bùi Lai và ctv, 1985); cá đực có nhiều máu hơn cá cái Theo Welsker (1958) (trích của Bùi Lai và ctv, 1985) thì máu cá Squalus suckii đực chiếm 5,2% và cá cái là 4,4% so với khối lượng

của cơ thể

a) Hồng cầu

Hồng cầu có dạng hình bầu dục, hai bên lồi, ở giữa có nhân (giống như chim, bò sát, lưỡng thể) Kích thước hồng cầu biến động lớn tùy theo loài cá

11

còn số lượng hồng cầu biến động theo tình trạng sinh lý của cá, theo giống loài, theo chế độ dinh dưỡng, theo giới tính, theo tuổi cũng như sự biến động của các yếu tố môi trường, Thành phần hóa học của hồng cầu gồm nước (60%), chất khô (40%), trong đó chủ yếu là hemoglobine (90%); mỗi hồng cầu chứa khoảng 340 triệu phân tử hemoglobine Lượng hemoglobine biến đổi theo sự biến đổi số lượng hồng cầu; và nhiệm vụ của hồng cầu chuyển oxy từ môi trường ngoài vào cơ thể bằng các hemoglobine của tế bào máu kết hợp với oxy tạo oxyhemoglobin, theo động mạch đi khắp cơ thể (Đỗ Thị Thanh

Hương và Nguyễn Văn Tư, 2010; Suprancee et al., 1991) Số lượng hồng cầu,

hemoglobine và bạch cầu biến đổi theo tuổi, giới tính (cá đực cao hơn cá cái); sau mùa sinh sản thì hàm lượng của các chỉ tiêu này giảm rõ rệt

b) Bạch cầu (Leucocyte)

Bạch cầu là loại tế bào có nhân, có kích thước lớn hơn hồng cầu, dựa vào đặc tính bắt màu với thuốc nhuộm được chia làm hai nhóm:

- Bạch cầu có hạt: nhân có nhiều thùy, nguyên sinh chất có hạt bắt

màu, tùy theo loại màu nhuộm mà người ta chia thành các dạng như bạch cầu

ưa a-xít (acidophil leucocyte), bạch cầu ưa kiềm (basodophil leucocyte) và bạch cầu trung tính (neutrophil leucocyte)

- Bạch cầu không hạt: loại này nhân không chia thành thùy, không bắt

màu nhuộm; có hai loại là monocyte (có một nhân) và lymphocyte (có nhiều nhân)

Số lượng bạch cầu biến đổi lớn theo loài, tình trạng sinh lý, tuổi, dinh dưỡng, nhiệt độ và sự thành thục sinh dục Bạch cầu bảo vệ cơ thể chống sự xâm nhập của vi khuẩn bằng phương thức thực bào (do monocyte và neutrophyl leucocyte) và tạo kháng thể (do lymphocyte), góp phần vào quá trình rụng trứng và quá trình tiêu hóa Chinabut et al., (1991) bằng phương

pháp phết mẫu máu tươi đã quan sát và mô tả tế bào hồng cầu, các loại tế bào bạch cầu (không gặp tế bào basonophyl và eosinophyl) và tế bào tiểu cầu (thrombocyte); trong đó tế bào tiểu cầu được mô tả rất chi tiết, chúng có dạng

12

hình tròn hoặc hình bầu dục, nhân to chiếm gần hết tế bào, chức năng chính trong quá trình đông máu ở cá

Khi nghiên cứu sự ảnh hưởng của độ mặn lên các chỉ tiêu huyết học cá

tầm (Huso huso) giai đoạn 5 tháng tuổi thì theo Zarejabad et al., (2009) thấy

rằng khi chuyển cá từ môi trường nước ngọt (0‰) sang môi trường nước lợ 3‰, 6‰, 9‰ và 12‰, sau 20 ngày thì số lượng hồng cầu, hematocrit, hemoglobine và khối lượng trung bình huyết sắc tố cá giảm theo sự gia tăng của độ mặn; trong khi khối lượng bạch cầu có sự gia tăng nhưng khác biệt không có ý nghĩa thống kê so với đối chứng Tế bào bạch cầu trong cơ thể thể hiện tình trạng sức khỏe ở động vật hữu nhủ cũng như ở cá; bạch cầu là giải pháp cho sự điều hòa chức năng miễn dịch của cơ thể (Duthie and Tort, 1985) Quá trình tạo bạch cầu trong cơ thể được đáp ứng cho việc bảo vệ cơ thể trong suốt thời kỳ cơ thể gặp tình trạng sốc, sự gia tăng số lượng bạch cầu gián tiếp thông qua hormon cortisol Theo Hồ Văn Bình (2010) thì số lượng hồng cầu ở

cá đối (Liza subviridis) có tuyến sinh dục ở giai đoạn I (4,39 triệu tb/mm3) và giai đoạn VI (5,10 triệu tb/mm3) cao hơn so với các giai đoạn II đến giai đoạn

V Ngược lại, thể tích hồng cầu và khối lượng trung bình huyết sắc tố trong hồng cầu thấp nhất có tuyến sinh dục ở giai đoạn I và VI Số lượng bạch cầu

và hemoglobin khác biệt không có ý nghĩa ở cá có các giai đoạn phát triển của tuyến sinh dục khác nhau

Ở cá chình Anguilla anguilla, cá Catla catla và cá Labeo rohita thành

thục có tỷ lệ hồng cầu, hàm lượng hemoglobin cao hơn cá chưa thành thục nhưng tỷ lệ nồng độ huyết sắc tố/thể tích hồng cầu ở cá chưa thành thục cao hơn cá thàng thục (Glomski and Pica, 2006 trích dẫn của Đỗ Thị Thanh Hương và Nguyễn Văn Tư, 2010)

1.2.2 Vitellogenin (protein tạo noãn hoàng)

a) Sơ lược về vitellogenin

Ở các loài động vật trong quá trình phát triển tế bào trứng cần một lượng lớn chất dinh dưỡng Các nghiên cứu trước đây đã chứng minh rằng

13

nguồn dinh dưỡng đó chính là protein noãn hoàng, nó được tích lũy trong tế bào trứng Vitellogenin còn gọi là tiền protein noãn hoàng với thành phần là lipoprotein có ở hầu hết các loài động vật, nhưng quá trình hình thành và tổng hợp khác nhau Quá trình tạo noãn hoàng gồm sự tổng hợp chất noãn hoàng (vitellogenin) trong gan kể cả sự tăng hàm lượng vitellogenin trong huyết thanh và sự kết nạp chất này từ máu vào noãn bào (Nguyễn Tường Anh, 1999) Ở cá xương quá trình tạo noãn hoàng ở gan và phóng thích vitellogenin vào máu Kích dục tố kích thích các tế bào nang trứng tiết ra 17β-estradiol; 17β-estradiol kích thích sự tổng hợp và tiết ra vitellogenin bởi gan (Ng & Idler, 1983; Wallace, 1985; Tyler, 1991 trích dẫn của Nguyễn Tường Anh, 1999) Lượng vitellogenin được tổng hợp tỷ lệ thuận với liều 17β-estradiol được đưa vào môi trường (Goncharov, 1977 trích dẫn của Nguyễn Tường Anh, 1999) Các giai đoạn phát triển của buồng trứng gắn liền với hệ số thành thục của buồng trứng và hàm lượng vitellogenin trong buồng trứng

b) Một số nghiên cứu về vitellogenin

Ở cá Mrigal thì hàm lượng vitellogenin biến động tỷ lệ thuận theo hệ số

thành thục và hàm lượng vitellogenin cao nhất vào giai đoạn sinh sản (Sudipta

Maitra et al., 2007) Theo Hồ Văn Bình (2010) thì hàm lương vitellogenin ở

cá đối (Liza subviridis) cái tăng khi buồng trứng giai đoạn I đến giai đoạn V

và đạt cao nhất ở giai đoạn V (4,71 µg ALP/mg protein) nhưng giảm mạnh ở

giai đoạn IV Ở cá đối (Liza subviridis) đực không có sự khác biệt hàm lượng vitellogenin giữa các giai đoạn buồng tinh

Protein ở cơ của cá đực tăng theo tuổi và protein ở gan cao nhất trong giai đoạn sinh sản và giảm sau khi sinh sản, sau đó tiếp tục giảm theo tuổi Ở con cái thì protein ở cơ và gan tăng tỷ lệ thuận theo tuổi cá Khả năng tổng hợp protein ở gan cao hơn ở cơ, tổng hợp protein ở gan là 37 mg/ngày/g tính theo mô tươi hay 25% protein huyết tương, tổng hợp ở cơ là 0,54 %/ngày

(Audrey and Michael, 1979) Ở cá đối (Liza subviridis) cái thì protein trong

máu giảm thấp nhất ở cá có buồng trứng ở giai đoạn V (45,2 mg protein/mL huyết tương), protein ở gan ở cá đối có buồng trứng giai đoạn từ II đến V giảm

14

thấp so với cá có tuyến sinh dục giai đoạn I và VI; protein ở cơ khác biệt không có ý nghĩa giữa các giai đoạn phát triển của buồng trứng của cá Protein

ở máu, cơ và gan cá đối (Liza subviridis) đực không có thay đổi giữa cá có các

giai đoạn phát triển của buồng tinh (Hồ Văn Bình, 2010)

1.3 Các loại kích dục tố và chất kích thích ở cá

1.3.1 Não thùy thể (Hypophysis - tuyến yên)

Vào những năm đầu thập niên 30 của thế kỷ XX thì các nhà nghiên cứu

đã chứng minh rằng việc tiêm dịch chiết từ tuyến yên cá có thể làm cho cá sinh sản (Houssay, 1930; Von Ihering, 1937; Gherbilsky, 1938 trích dẫn của Nguyễn Tường Anh, 1999) Hiện nay não thùy cá được sử dụng dưới hai dạng

là não tươi và não khô Bất cứ loài cá nào khi tuyến sinh dục thành thục thì hoạt tính của não thùy cao nhất tức là khả năng gây chín và rụng trứng cao nhất vì hai loại kích thích tố trong não thùy là FSH (Follicle Stimulating Hormone) và LH (Luteinizing Stimulating Hormone) được sản sinh ra nhiều nhất khi tuyến sinh dục thành thục

Não thùy thể tuyến yên được lấy ra từ những loài cá thuộc các loài cá chép, trắm, mè, trê, đã thành thục còn tươi sống Cá chết vài giờ thì hoạt tính kích dục chỉ còn khoảng 50% (Nguyễn Tường Anh, 1999) Não thùy thể cá chép được xem là kích dục tố mạnh cho nhiều loài cá kể cả các đối tượng khác

họ và các loài cá biển Tiêm não thùy cho cá bố mẹ các loài tham gia sinh sản tùy thuộc vào nhiều yếu tố mà quyết định liều lượng khác nhau như chất lượng hoạt tính của não thùy, đặc tính nhạy cảm của loài, tình trạng thành thục của

cá bố mẹ (mức độ thành thục và hệ số thành thục), nhiệt độ nước, các điều kiện khác của môi trường chứa cá

1.3.2 HCG (Human Chorionictropin Hormone)

HCG (kích dục tố màng đệm hoặc kích dục tố nhau thai) được Zondec

và Aschheim phát hiện từ năm 1927 trong nước tiểu của người phụ nữ có thai

từ 2-4 tháng là một polypeptide có khối lượng phân tử 36.000 kDa, nó được

15

tiết ra từ màng đệm của nhau thai (Nguyễn Tường Anh, 1999) HCG là một hormone polypeptide có chức năng như LH và FSH; HCG kích thích sự rụng trứng, phát triển buồng trứng và tiết ra hormone sinh dục; HCG có tác dụng duy trì thể vàng sau khi rụng trứng do LH sản phẩm nội tiết của thể vàng hoạt tính là progesterone hormone có tác dụng chuẩn bị nội mạc dạ con cho sự làm

tổ của phôi và những thay đổi khác về sinh lý trong thời gian mang thai và nuôi con bằng sữa

HCG là loại kích dục tố dị chủng được dùng có hiệu quả cho nhiều loài

cá nhất HCG được dùng cho cá chình (Yamamato and Nagahama, 1973), cá nheo mang túi ở Ấn Độ (Sundararaj and Goswami, 1966), cá vược vằn

(Stevens, 1967), cá sóc (Hyose, 1972), cá bơn (Zenzerov, 1982), cá Acerina cernua (Barannikova et al., 1975), cá bống tượng (Oliver et al., 1974), cá chạch (Kabak, 1968), cá buffalo của Mỹ (Burlakov et al (1982) (trích dẫn của

Nguyễn Tường Anh, 1999)

Liều lượng HCG sử dụng cho cá phụ thuộc rất nhiều vào mức độ tinh khiết của chế phẩm cũng như sự thành thục của cá Thậm chí có loài khi sử dụng đơn độc HCG hiệu quả rất kém hoặc không có tác dụng

1.3.3 GnRH (Gonadotropine Releasing Hormone)

Dưới tác dụng của các yếu tố môi trường như nhiệt độ, ánh sáng, dòng nước, giới tính,… thì vùng dưới đồi (hypothalamus) và não trước tiết ra GnRH kích thích não thùy tiết ra kích dục tố Các GnRH-A chính là các chất tổng hợp có thành phần các a-xit amin; các chất tổng hợp này thường chỉ có 9 a-xit amin

Ovaprim là hỗn hợp của 2 hợp chất 20 µg sGnRH và 10 mg glycol domperidone chứa chất tổng hợp tiền kích dục tố của cá hồi [Salmon GnRH (sGnRH)] và đó là một peptide sẵn có được tìm thấy trên tất cả các loài cá có xương Ovaprim kích thích sự rụng trứng và tạo tinh trong quá trình sinh sản của hầu hết các loài cá; khi tiêm sẽ kích thích phóng thích những hormone tự nhiên trong não và tuyến sinh dục kích thích sinh sản bình thường

16

LH-RHa (Luteinizing Hormone Releasing Hormone Analog) có tác dụng nhưng GnRH và được sử dụng kèm với thụ thể nhân tạo kháng dopamine là domperidone; có nhiều tên thương mại khác nhau nhưng sản phẩm thường sử dụng là motilium Domperidone ngăn chặn ảnh hưởng ngược của dopamine gây ức chế tiết hormone bình thường Ở những loài cá khó sinh sản, domperidone cần thiết hỗ trợ rất hiệu quả đối với sGnRHa

Năm 1973 thì các nhà khoa học Trung Quốc đã tổng hợp một peptid gồm 10 a-xit amin dưới tên thương mại là LH-RHa Sản phẩm thương mại LH-RHa khi sử dụng cho cá thì liều lượng gấp 100 lần sử dụng cho động vật Nếu sử dụng LH-RHa kết hợp với não thùy hay HCG thì kích thích sự rụng trứng và nhân dịch chuyển về một cực của tế bào; tỉ lệ rụng trứng sẽ cao và ổn định Tuy nhiên, người ta sử dụng phương pháp phối hợp với não thùy hoặc

HCG thu được kết quả mong muốn (Peter et al., 1988); trong khi các thử

nghiệm nếu chỉ dùng LH-RHa để kích thích cá sinh sản không thu được kết quả

Ở nước ta LH-RHa và domperidone được sử dụng trong khoảng 20 năm gần đây; và hiện nay được dùng phổ biến trên nhiều loài cá Sử dụng LH-RHa và domperidone làm cá sử dụng cạn kiệt FSH và LH từ não thùy cho quá trình chín và rụng trứng nên kéo dài thời gian tái thành thục của cá so với sử dụng HCG hoặc não thùy (Nguyễn Tường Anh, 1999)

Ngoài các loại hormone là tác nhân sinh lý chủ yếu và quan trọng tác động đến hoạt động sinh sản của cá thì sự thành thục của tuyến sinh dục, tình trạng sức khỏe cá là những điều tiên quyết Cá sẽ không thể tiếp nhận kích dục

tố do con người cung cấp trong sinh sản nhân tạo nếu như tuyến sinh dục chưa đạt tới giai đoạn sẵn sàng cho sinh sản (giai đoạn IV) Cá yếu hoặc bị sốc sinh

lý đều là những cản trở cho quá trình kích thích sinh sản nhân tạo cá

17

1.4 Một số nghiên cứu về sản xuất giống và ương nuôi cá nước lợ mặn

1.4.1 Cá mú (Epinephelus spp)

Nuôi vỗ cá mú chấm nâu trong lồng với mật độ 1 con/2,5 m3 lồng, cho

ăn bằng cá tạp có bổ sung khoáng và vitamin cho tỷ lệ thành thục đạt 80% Cá bố mẹ sau khi thành thục cho đẻ tự nhiên và vớt trứng ấp trong bể composite với mật độ 400-600 trứng/lít, độ mặn 30‰, nhiệt độ 27-29 oC, pH 8,0-8,5 thì sau 18-20 giờ cá nở, tỷ lệ thụ tinh 62,6-68% và tỷ lệ nở 61,2-72%

77,7-(Lê Xân và ctv, 2003) Nhiệt độ và độ mặn cũng ảnh hưởng đến tỷ lệ nở và

thời gian nở Ở nhiệt độ 24oC thì thời gian nở 26-30 giờ nhưng khi nhiệt độ

28oC thì thời gian nở là 18-20 giờ; ở độ mặn 30‰ có tỷ lệ nở cao nhất (85%),

độ mặn cao hơn hay thấp hơn 30‰ đều có tỷ lệ sống thấp (Lê Xân và ctv,

2003)

Trong các loài cá mú khi kích thích sinh sản nhân tạo có thể sử dụng

liều đơn lẻ HCG (Tseng and Ho, 1979; Kuo et al., 1988) hay HCG kết hợp với não thùy cá hồi (Chen et al., 1977) hay HCG kết hợp với não thùy của cá mú (Huang et al., 1986) (Bảng 1.4) Cá mú Epinephelus salmoides kích thích bằng

LH-RHa 10 µg/kg với ba liều tiêm đạt hiệu quả tương tự như sử dụng HCG

(500 UI/cá) kết hợp với 3 µg/kg não thùy cá mú (Kungvankij et al, 1986a)

Theo Lê Xân (2004) thì kết quả sản xuất giống nhân tạo cá mú chấm nâu đạt tỷ lệ sống ở cá bột lên cá giống 60 ngày tuổi (4-5 cm) là 13-15% và 90 ngày tuổi (8-10 cm) 8-9% Ương cá mú chấm nâu từ giai đoạn bột lên cá hương (15 ngày tuổi) trong bể nhỏ (2,5 m3) trong nhà và bể lớn (30 m3) ngoài trời thì tỷ lệ sống cá ương trong bể nhỏ cao hơn (76%) so với bể lớn (69%); bên cạnh đó thì việc ương bể nhỏ trong nhà sử dụng nước bán tuần hoàn và sử dụng lại rotifer có tỷ lệ sống thấp hơn (74%) so với nước bán tuần hoàn nhưng cho ăn rotifer mới (76%) Thức ăn cũng ảnh hưởng đến giai đoạn phát triển của ấu trùng, cá 25-30 ngày tuổi cho ăn 4 loại thức ăn (thức ăn công nghiệp

của Nhật, thức ăn tự chế biến, thịt tôm tươi xay nhỏ, Artemia trưởng thành kết

hợp với copepoda và thức ăn tự chế biến) thì tỉ lệ sống sau 10 ngày ương với

18

Artemia trưởng thành kết hợp với Copepoda và thức ăn tự chế biến cao nhất

(73,2%) và thấp nhất là nhóm cá thịt tôm tươi xay nhỏ (58,3%); khi ương từ cá hương lên cá giống trong bể trong thời gian 50-60 ngày được cho ăn bằng thức

ăn tự chế và phân cỡ mỗi 7-10 ngày thì tỷ lệ sống của cá đạt từ 82-82,5% (Lê

Xân và ctv, 2003)

1.4.2 Cá chẽm (Lates calcarifer)

Cá bố mẹ thành thục thường được bắt vào lúc trăng tròn lúc thủy triều

lên cao, khoảng 18-22 giờ (Kungvankij, 1986b) và kích thích sinh sản nhân

tạo cũng được thực hiện trong thời điểm này và thời gian cá đẻ trong thời gian 18-22 giờ Cá cái thành thục được tiêm 1 liều hay 2 liều HCG 50-200 UI/kg khối lượng cơ thể và cá đẻ trứng sau 36 giờ từ khi tiêm 1 liều hay 12-15 giờ

sau khi tiêm liều thứ 2 Theo Nguyễn Tuần và ctv (2002) thì kích thích sinh

sản cá chẽm bằng kích dục tố HCG ở liều 4.500 UI/kg cá cái thì thời gian hiệu ứng 12-35 giờ, tỷ lệ thụ tinh 0-99,9%, tỷ lệ nở 24-99,9% và khi ương từ cá bột lên cá hương (25 ngày tuổi) tỷ lệ sống 60% và ương từ cá hương lên cá giống (55 ngày tuổi) tỷ lệ sống 65,7%

LH-RHa tiêm 1 hoặc 2 liều ở liều lượng 10-75 µg/kg khối lượng cơ thể

kích thích cá đẻ trứng 2 lần liên tiếp nhau trong 24 giờ (Lim et al., 1986;

Nacario, 1986; Nacario and Sherwood, 1986) Cá đẻ được 4 lần sau khi tiêm

LH-RHa với liều 60-100 µg/kg cá (Almendras et al., 1988)

1.4.3 Cá giò (Rachycentron canadum)

Tỷ lệ thành thục của cá giò nuôi vỗ là 65-78%, tỷ lệ cá tham gia sinh sản >70%, tỷ lệ thụ tinh >60%, tỷ lệ nở >70% và tỷ lệ sống của cá bột lên cá giống (5-6 cm) khoảng 5% (Lê Xân, 2004) Ương ấu trùng cá giò ở độ mặn

18-20‰ thì tỷ lệ sống đạt 3,75% sau 45 ngày ương (Lê Xân và ctv, 2003)

Nuôi vỗ cá giò bố mẹ có kích cỡ 150-250 g/con trong bể xi-măng thì sau 6 tháng tỷ lệ cá thành thục là 73% và cá có khả năng sinh sản tự nhiên trong bể

xi măng và trong ao đất (Trần Văn Đan, 1998) Nuôi vỗ cá giò trong lồng qua

3 năm nhận thấy cá từ 3-5 tuổi có tỷ lệ thành thục rất cao (trên dưới 90%), cá 2

19

năm tuổi có tỷ lệ thành thục 60-70% (Đỗ Văn Minh và ctv, 2004) Theo Ngô Trọng Lư và ctv (2004) thì cá giò nuôi vỗ đạt tỷ lệ thành thục 85-87% và khi

tiêm LH-RHa với liều 20 µg/kg thì sau 24-28 giờ cá đẻ 66-75%, tỷ lệ trứng

thụ tinh 66-91% và sau 23 giờ 60% cá nở Nguyễn Quang Huy và ctv., (2003)

nuôi vỗ tích cực cá giò trong lồng với mật độ <10 kg/m3 với thức ăn là mực tươi, cá tươi được bổ sung vitamin, khoáng, dầu mực, DHA selco thì tỷ lệ cá thành thục đạt trên 80%; cá thành thục được kích thích bằng kích dục tố LH-RHa với 1 liều 20 µm/kg cá cái và 10 µm/kg cá đực và cho đẻ trong bể hình trụ (45 m3) hoặc bể hình vuông (72 m3) với tỷ lệ đực cái là 2:1 hoặc 3:2, độ mặn 27-32‰, nhiệt độ 28-30oC thì cá đẻ sau 27-36 giờ với tỷ lệ thụ tinh 0-87% Ngoài ra, trứng cá giò ấp trong bể 500 lít với mật độ 2.000-3.000 trứng/lít, độ mặn 33-35‰ nở sau 27-29 giờ ở nhiệt độ 25-27,5oC (Nguyễn

Quang Huy và ctv., 2003)

Ấu trùng cá giò được ương trong bể composite thể tích 2-3 m3, mật độ

50-80 con/lít cho ăn tảo Isochrysis sp, Tetraselmis sp (2-20 ngày tuổi), rotifer (3-15 ngày tuổi), Artemia (8-20 ngày tuổi), thức ăn công nghiệp (18-20 ngày

tuổi) thì tỷ lệ sống của cá giai đoạn 20 ngày tuổi đạt 15-25% (Nguyễn Quang

Huy và ctv, 2003); ương từ cá bột lên cá hương 22 ngày tuổi ở mật độ 26-30

con/lít, ở độ mặn 28-30‰ thì tỷ lệ sống trung bình 5,85% (Đào Văn Trí, 2004) Ương cá giò từ 1-10 ngày tuổi ở mật độ 70-80 con/lít với các loại thức

ăn tảo, rotifer, Artemia thì kết quả tỷ lệ sống của cá đạt 22-25%; khi ương cá giò ở mật độ 30-40 con/lít với các loại thức ăn tảo Nanochloropsis, sinh vật phù du (vớt trong ao), rotifer và ấu trùng Copepoda, Artemia thì kết quả tỷ lệ sống của cá đạt 0,6-2,4% (Đỗ Văn Minh và ctv, 2003)

1.4.4 Cá măng (Chanos chanos)

Theo Đào Văn Trí (2004) thì cá măng bố mẹ thành thục tốt trong điều kiện nuôi trong bể bằng thức ăn công nghiệp, cá đẻ tự nhiên không phải tiêm kích dục tố, thời gian ấp trứng 24-26 giờ ở nhiệt độ 29oC, độ mặn 32‰ và tỉ lệ

nở đến 90%; tỉ lệ sống khi ương cá bột lên cá hương 22 ngày là 5,85% với mật

độ 26-30 con/lít và độ mặn 28-30‰ Nghiên cứu sinh sản nhân tạo cá măng

20

bằng não thùy cá hồi, não thùy cá chép và HCG được tiến hành bởi Lam (1984); Kuo (1985); Kelley and Lee (1986); và Marte (1987) Cá cái được kích thích sinh sản khi trứng có đường kính lớn hơn 0,66 mm và được vuốt 4-

24 giờ sau liều tiêm quyết định (Lam, 1984) Theo Liao and Chen (1984) và Lin (1984) khi dùng não thùy cá đối kết hợp với HCG để kích thích cá măng sinh sản thì kết quả thấp, ngoại trừ có một cá cái sinh sản với liều tiêm HCG 1.000 IU/kg LH-RHa và D-Ala6-sGnRHa (dẫn xuất của LHRHa) cho kết quả như nhau khi tiêm một liều, cấy vào xoang bụng hay bơm thẩm thấu vào cơ

thể cá (Marte et al., 1987; Marte et al, 1988)

Lee et al (1986 a, b) cho đẻ nhân tạo thành công cá măng nuôi trong bể

bằng cách cấy thuốc vào cá hay tiêm 1 liều duy nhất (200-250 µg LHRHa) Sử dụng D-Arg6-sGnRHa cho cá măng mang lại hiệu quả tương tụ như dùng D-Ala6-sGnRH và D-Ala6LHRH Tuy nhiên, HCG không mang lại hiệu quả cao

so với LHRHa và dẫn xuất của chúng khi cho sinh sản nhân tạo cá măng

(Marte et al., 1988) Tỷ lệ thụ tinh khi sử dụng LHRHa biến động lớn từ 20-88

% (Marte et al., 1987) và 14-99 % (Kelley and Lee, 1986)

1.4.5 Cá đối

Các nghiên cứu về sinh sản cá đối (Mugil cephalus) được tóm lượt bởi

Liao (1975); Nash and Shehadeh (1980) Lee and Tamaru (1988) cũng cung cấp một số thông tin nghiên cứu đạt được gần đây tại Viện nghiên cứu Hải

dương học Hawai Theo Lê Quốc Việt và ctv (2010a) khi tiêm kích dục tố RHa cho cá đối (Liza subviridis) với các liều lượng khác nhau (200, 250, 300

LH-và 350 µg/kg) kết hợp với domperidon (5 mg/kg) LH-và Ovaprim (0,5; 1; 1,5 LH-và 2 mL/kg) với phương pháp tiêm 2 liều thì tỷ lệ rụng trứng dao động 14,3-83,3%; thời gian hiệu ứng 13,2-20 giờ ; tỷ lệ thụ tinh 76,5-82,3% và tỷ lệ nở 60,4-84,4% ở kích dục tố LHRHa 300 µg/kg

21

1.5 Sự phát triển ống tiêu hóa và lựa chọn thức ăn của cá

1.5.1 Sự phát triển ống tiêu hóa của cá

1.5.1.1 Ống tiêu hóa

Trong quá trình phát triển phôi thì ống tiêu hóa của cá được phát sinh

từ các tế bào nội bì hình trụ nằm trên khối noãn hoàng Khi cá mới bắt đầu lấy thức ăn ngoài, từng phần của ống tiêu hóa đã được phân hóa, tuy nhiên cá vẫn

chưa có dạ dày (Govoni et al., 1986 trích của Lục Minh Diêp, 2009) Giai

đoạn cá mới nở đến 4-5 ngày tuổi thì cá bột của nhiều loài cá (cá kết, cá đù,

cá chẽm, cá bống tượng,…) chỉ dinh dưỡng chủ yếu bằng noãn hoàng; thời gian 16 giờ sau khi nở thì 87,6% noãn hoàng đã được hấp thụ và sau 71 giờ cá con đã hấp thu hết noãn hoàng (Bond, 1999; Lục Minh Diệp, 2009)

Theo Phạm Thanh Liêm và ctv (2002a) thì ở giai đoạn cá mới nở ống

tiêu hóa của cá bống tượng bột chỉ là một ống thẳng hẹp, thực quản và hậu môn còn đóng; sau 24 giờ đầu tiên sau khi nở thì ống hóa của cá đã phân hóa thành xoang miệng, thực quản và ruột nhưng lỗ hậu môn vẫn còn đóng; ngày tuổi thứ 2 thì cá bột đã bắt lấy thức ăn ngoài mặc dù vẫn còn dinh dưỡng bằng noãn hoàng Theo Loewe and Eckmann (1988) thì cá 4-5 ngày tuổi là thời điểm ống tiêu hóa của cá đã thể hiện chức năng bắt giữ, vận chuyển, tích trữ

và thải ra ngoài những loại thức ăn không tiêu hóa được (được trích của Phạm Thanh Liêm, 2002a)

Giai đoạn 4-5 ngày tuổi, ống tiêu hóa của cá đã được phân chia làm 5 phần gồm xoang miệng, thực quản, phần dạ dày, ruột và trực tràng; sự xuất hiện của các tuyến dạ dày chỉ sự phát triển hoàn chỉnh chức năng của ống tiêu

hóa (Kjorsvik et al., 1991; Boulhic and Gabaudan, 1992; Gawlicka et al., 1995; Santamaria et al, 2004 được trích của Kozaric et al., 2008) Giai đoạn

đầu bắt đầu sử dụng thức ăn ngoài thì cá bột của các loài cá xương có ống tiêu hóa dạng thẳng hay dạng xoắn và có sự thay đổi nhanh chóng về hình thái giống với cấu trúc tiêu hóa của cá trưởng thành (đối với các loài không có dạ

dày) (Verreth et al., 1992)

22

Nghiên cứu về hệ thống tiêu hóa bằng phương pháp mô học đã được

nhiều tác giả quan tâm và nghiên cứu như ở cá măng (Ferraris et al., 1987), cá bống tượng (Phạm Thanh Liêm và ctv., 2002a) Theo Stroband and Dabrowski

(1979) cho rằng cá măng khi ăn thức ăn ngoài thì ống tiêu hóa có sự thay đổi như tăng chất tiết dịch và phân chia thành các vùng khác nhau; khi đó răng phát triển, dạ dày và manh tràng cũng phát triển, ruột dài ra và cuộn lại

Tuy nhiên, cũng có một số loài cá có hệ thống tiêu hóa sau khi phát triển thì thực hiện được chức năng như cá trưởng thành nhưng cấu trúc thì đơn

giản hơn (Sarasquete et al., 1995) Cá bột bống tượng tiêu hóa hết noãn hoàng

vào ngày thứ 4-5, nhưng cá đã bắt đầu ăn thức ăn ngoài sau khi nở 2 ngày; ống tiêu hóa phân biệt được 5 phần rõ ràng (miệng, thực quản, vùng dạ dày, ruột và trực tràng) khi cá bắt đầu ăn thức ăn ngoài; hệ tiêu hóa của cá phát triển hoàn chỉnh khi kết thúc giai đoạn cá bột ở ngày tuổi thứ 30 (Liem, 2001; Phạm

Thanh Liêm và ctv., 2002a) Ở cá bơn (yellow flounder) thì cá bột ở ngày thứ

3 sau khi nở ống tiêu hóa thẳng; trong thời gian từ ngày 3-7 sau khi nở thì hệ thống tiêu hóa phân biệt được 5 phần gồm miệng, xoang miệng, thực quản, dạ

dày và ruột; ngày thứ 10 thì có thể nhận ra trực tràng (Baglole et al., 1997)

Nghiên cứu của Mai et al., (2005) về sự phát triển ống tiêu hóa của cá

Pseudoscianea crocea bột sau khi nở đến 40 ngày tuổi thì thấy cá bắt đầu ăn

thức ăn ngoài ở ngày tuổi thứ 3; ống tiêu hóa của cá bao gồm hầu, thực quản

và ruột chia làm 3 phần (ruột trước, ruột giữa và ruột sau); cá sử dụng hỗn hợp thức ăn ngoài và noãn hoàng cho đến ngày thứ 6 sau khi nở; khi hết noãn hoàng thì có sự chuyển biến quan trọng về hình thái xảy ra ở cuối giai đoạn bột đó là sự biến thái của cá; các tuyến dịch vị xuất hiện đầu tiên ở cá 21 ngày tuổi, dạ dày chia làm 3 phần (tâm vị, hạ vị và môn vị) theo đặc điểm hình thái lớp dịch nhày của chúng Và đây cũng là thời điểm hệ tiêu hóa của cá phát triển hoàn chỉnh (giống với hệ tiêu hóa của cá trưởng thành)

23

1.5.1.2 Chức năng của các phần ống tiêu hóa

- Xoang miệng: ở cá bống tương thì xoang miệng cá bột ở ngày tuổi

thứ 2 gồm có một lớp mỏng các biểu mô hình vẩy phân lớp; ngày tuổi thứ 3 xuất hiện những tế bào tiết chất nhày và chồi vị giác; ngày tuổi thứ 4ở hàm dưới xuất hiện hai răng nanh; ngày tuổi thứ 7 thì cá có thêm một cặp răng ở hàm trên và 2 cặp răng ở hàm dưới; các răng đã xuất hiện xếp thành một hàng

ở hàm trên vào ngày tuổi thứ 20 (Liem, 2001; Phạm Thanh Liêm và ctv.,

2002a)

- Thực quản: thực quản được hình thành vào ngày tuổi thứ 2 của cá

bột với sự sắp xếp của các lớp biểu mô hình vẩy và ở ngày tuổi thứ 3 bắt đầu xuất hiện nếp gấp dọc ở mặt trong của thực quản; thực quản là phần ống nối giữa xoang miệng và dạ dày có cấu trúc rất ngắn, vách có nhiều nếp gấp và đó

là phương thức để thực quản gia tăng khả năng tiết dịch nhày giúp cá đưa thức

ăn xuống dạ dày dễ dàng (Dương Tuấn, 1981) Về tổ chức học thì thực quản được cấu tạo bởi cơ vân, vách thực quản có nhiều nếp gấp và gợn sóng hay có cấu trúc phức tạp; các cấu trúc phức tạp này thường sản sinh ra một lượng lớn chất nhày; các tế bào tiết chất nhày (tế bào dạng chén) giống dạ dày tuyến hiện diện ở phần sau của thực quản; sự xuất hiện của tế bào chén (goblet), trong thực quản sau khi cá mở miệng sẽ kích thích cá ăn thức ăn ngoài (Teresa, 2005)

- Dạ dày: tiếp sau phần thực quản là dạ dày, dạ dày là một túi chứa

thức ăn sau khi được thực quản đưa xuống và tiết các loại men tiêu hóa nhưng chủ yếu là men phân giải đạm (protein) Khi mới bắt đầu lấy thức ăn ngoài vào ngày tuổi thứ 2 thì dạ dày của cá bống tượng chưa hình thành nhưng phần của ống tiêu hóa kéo dài về phía sau của thực quản sẽ phát triển thành dạ dày mà

có thể nhận biết nhờ lớp niêm mạc dạ dầy chỉ gồm một lớp các tế bào biểu mô hình trụ nằm dưới một lớp màng nhầy mỏng (Liem, 2001) Các chất tiết ở dạ dày tiêu biểu gồm tế bào tiết chất nhày (tế bào goblet) và tiết HCl và men pepsin phân giải đạm (tế bào hạt) (Đỗ Thị Thanh Hương và Nguyễn Văn Tư,

2010)