nghiên cứu một số chỉ tiêu sinh lý sinh sản của cá nâu (scatophagus argus linnaeus, 1766)

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN Nguyễn Tiến Triển NGHIÊN CỨU MỘT SỐ CHỈ TIÊU SINH LÝ SINH SẢN CỦA CÁ NÂU (Scatophagus argus Linnaeus, 1766) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 2009 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN Nguyễn Tiến Triển NGHIÊN CỨU MỘT SỐ CHỈ TIÊU SINH LÝ SINH SẢN CỦA CÁ NÂU (Scatophagus argus Linnaeus, 1766) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN Cán hướng dẫn: Ths Lý Văn Khánh PGs.Ts Nguyễn Thanh Phương 2009 MỤC LỤC Trang Lời cảm tạ iii Tóm tắt - iv Phần I: Đặt vấn đề - Phần II: Lược khảo tài liệu - 2.1 Đặc điểm hình thái 2.2 Đặc điểm phân bố - 2.3 Tập tính dinh dưỡng 2.4 Đặc điểm sinh trưởng - 2.5 Đặc điểm sinh sản - PHẦN III: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU - 3.1 ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU - 3.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.2.1 Vật liệu thí nghiệm - 3.2.2 Phương pháp nghiên cứu 3.2.3 Phương pháp thu mẫu máu 3.2.4 Các phương pháp phân tích - 3.2.4.1 Phương pháp phân tích mơ học - 3.2.4.2 Phương pháp phân tích vitellogenines - 3.2.4.3 Phương pháp phân tích hồng cầu bạch cầu 12 3.2.4.4 Phương pháp đo Hematocrit (tỉ lệ huyết sắc tố, %) 13 3.2.5 Phương pháp xử lý số liệu - 14 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN - 15 4.1 ĐẶC ĐIỂM SINH LÝ SINH SẢN CÁ NÂU CÁI 15 4.1.1 Các giai đoạn phát triển buồng trứng - 15 4.1.2.Mối tương quan khối lượng cá với chiều dài chiều cao cá nâu 16 4.1.3 Ảnh hưởng giai đoạn tuyến sinh dục so với hệ số thành thục, độ béo Fulton độ béo Clark - 17 4.1.4 Ảnh hưởng giai đoạn tuyến sinh dục so với tỷ lệ khối lượng gan với khối lượng cá tỷ lệ khối lượng tuyến sinh dục với khối lượng gan cá nâu - 18 i 4.1.5 Ảnh hưởng giai đoạn tuyến sinh dục với số lượng, tỷ lệ huyết sắc tố; khối lượng nồng độ huyết sắc tố hồng cầu cá nâu 19 4.1.6 Ảnh hưởng giai đoạn tuyến sinh dục với số lượng hồng cầu, bạch cầu tỷ lệ bạch cầu với hồng cầu cá nâu - 19 4.1.7 Ảnh hưởng giai đoạn tuyến snh dục với hàm lượng i vitellogenines protein cá nâu - 20 4.2.ĐẶC ĐIỂM SINH LÝ SINH SẢN CÁ NÂU ĐỰC 19 4.2.1 Các giai đoạn phát triển buồng tinh 21 4.2.2 Mối tương quan khối lượng cá với chiều dài chiều cao cá nâu đực 22 4.2.3 Ảnh hưởng giai đoạn tuyến s dục với hệ số th inh ành thục, độ béo Fulton độ béo Clark cá nâu đực - 22 4.2.4 Ảnh hưởng giai đoạn tuyến snh dục với tỷ lệ khối i lượng gan với khối lượng cá tỷ lệ khối lượng tuyến sinh dục với khối lượng gan cá nâu đực - 23 4.2.5 Ảnh hưởng giai đoạn tuyến sinh dục với số lượng, tỷ lệ huyết sắc tố; khối lượng nồng độ huyết sắc tố hồng cầu cá nâu đực - 23 4.2.6 Ảnh hưởng giai đoạn tuyến sinh dục với số lượng hồng cầu, bạch cầu tỷ lệ bạch cầu với hồng cầu cá nâu đực 24 4.2.7 Ảnh hưởng giai đoạn tuyến snh dục với hàm lượng i vitellogenines protein cá nâu đực 24 PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT - 26 5.1 Kết luận - 26 5.2 Đề xuất - 26 TÀI LIỆU THAM KHẢO 27 ii LỜI CẢM TẠ Trong khoảng thời gian thực luận văn vừa qua nhờ dẫn, dạy bảo tận tình thầy giúp cho em có kiến thức bổ ích cho cơng việc sau nầy, em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến: Thầy Nguyễn Thanh Phương, Thầy Lý Văn Khánh giúp cho em nhận thấy khoảng trống kiến thức cần bổ sung, đồng thời nhờ dẩn quý báo thầy để luận văn hồn thành theo mục tiêu Em xin chân thành cám ơn tất thầy cô, cán Khoa Thủy Sản giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho em suốt thời gian học tập thực đề tài Em xin chân thành cám ơn anh chị cao học, bạn sinh viên lớp nuôi trồng thủy sản K31, bạn lớp bệnh học thủy sản K31 giúp đỡ em lúc em gặp khó khăn iii TÓM TẮT Nghiên cứu số tiêu sinh lý sinh sản cá nâu (Scatophagus argus Linnaeus, 1766) thực từ tháng 04/2009 đến 06/2009 nhằm mục tiêu xác định mối tương quan giai đoạn phát triển tuyến sinh dục với hàm lượng vitellogenines huyết tương, số lượng, tỷ lệ hồng cầu bạch cầu huyết tương, hàm lượng protein huyết tương, gan Kết cho thấy cá nâu có tuyến sinh dục giai đoạn có độ béo Fulton (13,22) độ béo Clark (10,93) đạt cao thấp giai đoạn Khối lượng gan trung bình cá nâu có tuyến sinh dục giai đoạn lớn (4,59 g/con) hàm lượng vitellogenines huyết tương cá nâu tăng dần theo phát triển tuyến sinh dục đạt cao cá có tuyến sinh dục giai đoạn (3,73 µg ALP/ml protein) Ở cá nâu đực có hệ số thành thục khơng khác giai đoạn phát triển tuyến sinh dục Cá nâu đực có tuyến sinh dục giai đoạn có độ béo Fulton (9,01) độ béo Clark (8,14) đạt cao thấp giai đoạn hàm lượng vitellogenines huyết tương cá nâu đực đạt cao cá có tuyến sinh dục giai đoạn (3,48 µg ALP/ml protein) iv PHẦN I: ĐẶT VẤN ĐỀ Nguồn lợi thủy sản ngày xem nguồn tài nguyên quan trọng sống người Hầu hết quốc gia tr n giới sử dụng sản ê phẩm thủy sản làm thức ăn nguồn cung cấp đạm tốt cho c n o người Tuy nhiên, năm gần nguồn lợi thủy sản nói chung bị giảm mạnh khai thác đánh bắt mức đồng thời nghề ni gặp khó khăn vấn đề dịch bệnh, ô nhiễm môi trường vấn đề giống Ở Việt Nam, nuôi thủy sản mạnh phát triển kinh tế xã hội nay, đóng góp đáng kể v kim ngạch xuất n ước Trong nghề nuôi thủy sản ven biển tơm sú, tơm thẻ chân trắng, cá mú, cá chẽm, cua biển đối tượng ni phổ biến giá giảm mạnh tôm sú, cá tra, cua biển Do đa dạng hóa đối tượng mơ hình ni u cầu phát triển nghề nuôi thủy sản nhằm giảm áp lực lên vài loài tiêu biểu Hiện nghề ni cá biển, bên cạnh số lồi địa cá mú, cá chẽm,… cá nâu xem lồi có triển vọng ni vùng ven biển Cá nâu (Scatophagus argus) lồi có kích thước tương đối lớn, thịt cá béo có mùi vị thơm ngon, có giá trị thương phẩm cao Các nghiên cứu đối tượng hạn chế đặc biệt đặc điểm sinh học sinh lý sinh sản Để cung cấp thêm thông tin cần thiết để hồn thiện qui trình sản xuất giống góp phần đưa đối tượng trở thành đối tượng nuôi phổ biến nên thực đề tài “Nghiên cứu số iêu sinh lý sinh s n cá nâu t ả (Scatophagus argus Linnaeus, 1766)” Mục tiêu Tìm hiểu mối tương quan giai đoạn phát triển tuyến sinh dục với: - Hàm lượng vitellogenines huyết tương - Số lượng tỷ lệ hồng cầu bạch cầu huyết tương - Hàm lượng protein huyết tương, gan Nội dung  Phân tích mơ học xác định giai đoạn phát triển tuyến sinh dục  Phân tích hàm lượng vitellogenines huyết tương  Phân tích số lượng tỷ lệ hồng cầu bạch cầu huyết tương  Phân tích hàm lượng protein máu, gan PHẦN II: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Đặc điểm hình thái 2.1.1 Vị trí phân loại: Bộ: perciformes Họ: Scatophagidae Giống: Scatophagus (Cuvier Valenciennes, 1831) Loài: Scatophagus argus Linnaeus, 1766 Cá nâu (Scatophagus argus) có kích thước tương đối lớn, thịt cá béo, có muồi vị thơm ngon, có giá trị thương phẩm cao Theo Barry (1992) cá nâu có giống Scatophagus Selenotoca Ở Việt Nam theo tác giả nh Yên (1992), Khoa Hương (1993) có giống loài cá nâu (Scatophagus argus Linnaeaus, 1766) Các nghiên cứu đối tượng nài hạn chế, phần lớn tập trung vào phân loại, mô tả, số thông tin ngắn thành phần giống lồi phân bố, cịn dẫn liệu đặc điểm sinh học dinh dưỡng sinh sản loài cá nâu (Scatophagus argus) để làm sở cho nhiên cứu sản xuất giống ni u cầu cấp thiết Hình 2.1: Hình dạng bên cá nâu (Scatophagus argus Linnaeus, 1766) Cá nâu dẹp bên, cao thân, lưng hình vịm, nhìn ngan gần trịn Cá có đầu nhỏ, mắt ngắn, mõm tù, miện nhỏ, hàm có mịnh, mắt cá lớn vừa, lỗ mũi trước tròn, lỗ mũi sau vạch, màng mang hẹp liền với eo mang Vảy lược, nhỏ, phủ khắp thân, đầu, gốc vi hậu mơn, vi lương đi, rìa tia vi lưng va tia hậu môn gần thẳng đứng ,viền sau vây đuôi thẳng (Trương Thủ Khoa Trần Thị Thu Hương, 1993) Đường bên hoàn toàn, mép lổ mang, cong lên phía trên, chạy đến đuôi Khởi điểm vi lưng nằm ngang phần xương nắp mang, gai vi cứng nhọn, gai thứ IV, V, VI đài vi khác Trước gốc vi lưng có gai khơng cử động được, hướng phía đầu Khởi điểm vi hậu mơn ngang với gai vi lưng, vi hậu môn có gai nhọn Cá nâu có thân màu xám , nửa thân có nhiều chấm đen, to trịn, đóm nầy nhạt dần phía bụng, số lượng hình dạng thay đổi theo cá thể Vi ngực có màu traengs trong, màng da tia vi cịn lại có nhiều sác tố đen 2.2 Đặc điểm phân bố Cá nâu tìm thấy Rajpara- Ấn Độ, có chiều dài lớn 334 mm co khối lượng 1,2kg (Khang, 1984) Phân bố nhiều từ Nhật đến Ấn Độ -Thái Bình Dương bao gồm vùng biển phía nam Trung Quốc (Mohsin ctv, e 1996) Cá nâu sống từ vùng nước mặn, vùng cửa sông nước ngọt, phần lớn sống biển vùng phân bố từ bờ biển Trung Quốc dọc đ Úc ến Châu (Trương Thủ Khoa Trần Thị Thu H ương,1993) Theo Nguyễn Hữu Phụng (1995) cá nâu sống biển , nườc lợ nước , phân bố từ Ấn Độ, Úc, Srilanka, Indonesia, Malaysia, Mew Caled onia, Philipphines, Thái Lan, Trung Quốc, Việt Nam Ở Việt Nam cá nâu phân bố tron đầm, kểnh rạch nước lợ cửa sông g (Nguyễn Tấn Trịnh ctv, 1996; Mai Đình n, 1992) có vùng nước gồm Vịnh Bắc Bộ, Miền Trung Miền Nam Bộ (Nguyễn Hữu Phựng,1995) 2.3 Tập tính dinh dưỡng Cá nâu ăn nhiều loại thức ăn khác giun, giáp xác, trùng, vật chất có nguồn gốc từ thực vật tảo …(Fishbae,2000) Trong báo cáo Nguyễn Tấn Trịnh cá nâu loài ăn t p, thức ăn cá tảo Silic tảo l l Enteromopha, tảo Chaetomorpha… Theo Chang (1997) thức ăn cho ấu trùng nở ngày luân trùng Branchionus (rotifer) Sau ngày ăn ấu trùng artemia sau 19 ngày ăn copepode 2.4 Đặc điểm sinh trưởng Các nghiên cứu cá nâu nai cịn ít, theo báo cáo Nguyễn Tấn Trịnh ctv (1996) cá nâu có kích thước tương đối lớn Cá nâu lớn tìm thấy có chiều dài 33 cm (Allen, 2000) Trong m số đầm ni ven biển ột chúng có sản lượng khai thác đáng kể, chiều dài cá đánh bắt đạt đến 143-175 mm với khối lượng tương ứng105-140 g Theo nghiên cứu Assadi Delighani (1997) cá nâu có chiều dài cực đại 30 cm Barry Fast (1992) nghiên cứu cá nâu cho biết cá dài tối đa 28 cm đực 27 cm cá nâu thường nuôi loài cá kiểng, giai đoạn nhỏ (Mohsine, 1996) 2.5 Đặc điểm sinh sản Sự thành thục cá lần cá khoảng 150 g, tương ứng với cá khoảng 7-9 tháng tuổi cá đực thành thục sớm cá (Barry Fast, 1992) Sự khác biệt giới tính cá nâu phân biệt dựa vào hình dạnh đầu (Barry Fast, 1992) Đặc điểm nầy phân biệt tương tự xác định cá tai tượng (Osphronemus gourami) “trán cá đực” (Ngô Trọng Lư Thái Bá Hổ, 2003) Đường kính trứng khoảng 0,4 mm thích hợp cho việc kích thích cho cá sinh sản phương pháp tiêm kích dục tố Trứng chín mùi có đường kính trứng khoảng 0,6 mm, giọt dầu khoản 0,2 mm vỏ trứng phẳng, suốt, màu vàng sáng, trứng rời Trứng cá nâu thụ tinh trơi hồn tồn, bán suốt đường kính trứng khoảng 0,78-0,8 mm theo Arlo W Fast (1988) trứng cá nâu thành thục có đường kính trứng 0,5 mm Sự khác biệt giới tính c nâu phân biệt dựa vào hình dạng đầu (Barry & Fast, 1992) Đặc điểm nầy đ tác giả Nguyễn ã Tường Anh xác định cá tai tượng “cá đực trán có khối u lớn cá cái” Theo đánh giá nhà khoa học, cá nâu trở thành đối tượng ni đầm nước lợ khơng cạnh tranh thức ăn với đối tượng ni khác có nguồn giống tự nhiên phong phú Tuy nhiên nghiên cứu trước Yên(1992), Khoa & Hương (1993)cũng nước tập trung vào đặc điểm hình thái phân loại, mơ tả số thơng tin ngắn phân bố, đặc tính dinh dưỡng sinh sản Còn dẩn liệu sinh học sinh sản loài cá nầy chưa quan tâm mức Số lượng huyết sắc tố g/100 ml = A x 1,1625 3.2.5 Phương pháp xử lý số liệu Số liệu phân tích giá trị trung bình (average), độ lệch chuẩn (standard deviation), phương trình hồi qui (sử dụng chương trình microsoft office Excel 2003) so sánh khác biệt nghiệm thức dựa vào phân tích Anova Duncan (sử dụng phần mềm SPSS 11.5) với mức ý nghĩa p < 0,05 14 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 ĐẶC ĐIỂM SINH LÝ SINH SẢN CÁ NÂU CÁI 4.1.1 Các giai đoạn phát triển buồng trứng Giai đoạn 1: Noãn sào nhỏ, mảnh, suốt, khó phân biệt tinh sào hay noãn sào mắt thường Trong noãn sào xuất nhiều tế bào thuộc thời kỳ đầu sinh trưởng nguyên sinh chất, tế bào có nhiều góc cạnh, kích thước nhỏ Tế bào chất ưa kiềm mạnh, nhân nhỏ trịn, bắt màu tím nhạt Số tiểu hạch Giai đoạn 2: Noãn sào gia tăng kích thước phân biệt rõ tuyến sinh dục đực, mắt thường Kích thước nỗn sào nhỏ, màu hồng, màng mỏng, khó thấy hạt trứng mắt thường Trong noãn sào chứa tế bào cuối thời kỳ sinh trưởng nguyên sinh chất, tế bào chất ưa kiềm yếu giai đoạn 1, tiểu hạch di chuyển màng nhân Giai đoạn 3: Kích thước nỗn sào gia tăng rõ, nỗn sào có màu vàng nhạt, nỗn sào có mạch máu phân bố Có thể thấy rõ hạt trứng nỗn sào mắt thường Chúng nhỏ, khó tách rời khỏi trứng Thời kỳ noãn bào bắt đầu chuyển sang giai đoạn sinh trưởng chất dinh dưỡng, nỗn bào lớn lên rõ nhờ tích lũy chất dinh dưỡng Tế bào chất cịn ưa kiềm cịn yếu Nỗn hồng xuất nhiều hơn, tạo thành lớp dầy bắt màu hồng eosin rõ Giai đoạn 4: Nỗn sào có kích thước lớn, có màu vàng tươi, đậm so với noãn sào giai đoạn Mạch máu phân bố noãn sào nhiều hơn, hạt trứng to tương đối đồng Trong noãn sào tổ chức liên kết ít, mạch máu phát triển, màng nỗn sào mỏng, có số tế bào thời kỳ đầu cuối sinh trưởng nguyên sinh chất Đa số tế bào thời kỳ lớn ngun sinh nỗn hồng Giai đoạn 5: Nỗn sào có kích thước lớn, có màu sắc đậm so với giai đoạn Trong noãn sào, chủ yếu tế bào trứng kết thúc thời kỳ lớn nỗn hồng chuẩn bị cho thời kỳ đẻ tới Nỗn hồng tích luỹ đầy tế bào chất, số tiểu hạch nhân giảm từ từ tan biến vào dịch nhân Giai đoạn 6: Sau cá đẻ xong, noãn sào teo lại, mềm nhão, màng noãn sào nhăn nheo, mạch máu phát triển đều, bên có dịch bầm đỏ Trong nỗn sào số tế bào trứng khơng đẻ số trứng nhỏ bám chặt vào trứng, tổ chức liên kết mạch máu nhiều, số nỗn bào thối hố tái hấp thu, bên cạnh cịn có tế bào dự trữ, số tế bào chuyển giai đoạn 15 Các giai đoạn phát triển buồng trứng qua quan sát mô học Giai đoạn Giai đoạn Giai đoạn Giai đoạn Giai đoạn Giai đoạn Hình 4.1: Các giai đoạn phát triển buồng trứng cá nâu 4.1.2 Mối tương quan khối lượng cá với chiều dài chiều cao cá nâu g/con 450 2,7766 W = 0,1107Lc 2,9964 W = 0,1947H 400 2,7494 W = 0,0732Lt R = 0,9723 R = 0,9694 R = 0,9511 350 Chiều dài tổng (Lt) 300 Chiều dài chuẩn (Lc) 250 Chiều cao (H) 200 150 100 50 cm/con 0 10 15 20 25 Hình 4.2: Mối tương quan khối lượng cá với chiều dài chiều cao cá nâu 16 Do phát triển đồng thể q trình gia tăng kích thước tích lũy thêm khối lượng thể, q trình đặc trưng cho lồi cá thể mối tương quan chiều dài khối lượng cá (Nicolski,1963; Loan, 1998) Khối lượng kích cỡ cá quan trọng ảnh hưởng trực tiếp đến sức sinh sản cá Khi cá đến độ tuổi sinh sản cần phải đạt khối lượng cần thiết để đảm bảo nguồn lượng cho hoạt động sinh sản, q trình tích lũy vật chất dinh dưỡng đánh giá dựa khối lượng cá, đồng thời kích cỡ cá định phần đáng kể đến sức chứa sản phẩm sinh dục đặc biệt cá Vì mối tương quan khối lượng, chiều dài chiều cao cá định giai đoạn buồng trứng Qua việc khảo sát (Hình 4.2) cho thấy hệ số mũ chiều dài tổng, chiều dài chuẩn chiều cao nhỏ Vậy khối lượng cá tăng chậm nhất, chiều dài tổng tăng nhanh nhất, chiều cao cá tăng chậm h so với ơn chiều dài chuẩn chiều dài tổng 4.1.3 Ảnh hưởng giai đoạn tuyến sinh dục so với hệ số thành thục, độ béo Fulton độ béo Clark Bảng 4.1: Hệ số thành thục, độ béo Fulton độ béo Clark giai đoạn tuyến sinh dục cá nâu Giai đoạn tuyến sinh dục Hệ số thành thục (%) Độ béo Fulton (%) Độ béo Clark (%) 0,42±0,13 a 7,52±1,75 a 6,78±1,58 a 0,54±0,15 a 8,41±2,12 a 7,54±1,91 a 3,65±1,87 b 12,08±1,95 b 10,73±1,96 b 9,87±3,42 c 12,80±2,03 b 10,82±1,91 b 12,01±3,30 d 13,22±2,08 b 10,93±1,68 b Các giá trị cột mang mẫu tự (a, b, c d) khác thể khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) Ở giai đoạn 3, có hệ số thành thục khác có ý nghĩa thống kê (p0,05) khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) Ở giai đoạn tuyến sinh d c số lượng bạch cầu đạt 0,02 (triệu tế ụ bào/mm ) có khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) so v giai đoạn ệ ê ới (32,41%) giai đoạn (24,35%) khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) Trong bảng 4.9 cho thấy, ảnh hưởng giai đoạn thành thục với số lượng hồng cầu, thể tích hồng cầu, số lượng bạch cầu tỷ lệ bạch cầu hồng cầu máu cá khơng có khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê (p>0,05) (Bảng 4.9) 4.2.7 Ảnh hưởng giai đoạn tuyến sinh dục với hàm lượng vitellogenines protein cá nâu đực Bảng 4.10: Hàm lượng vitellogenines protein giai đoạn tuyến sinh dục cá nâu đực Giai đoạn tuyến sinh dục Vitellogenines (µg ALP/ml protein) Protein máu (mg protein/ml Plasma) Protein (mg) Protein gan (mg) 1,09±0,75 a 48,39±4,72 a 6,74±1,87 a 10,53±3,21 a 1,62±0,88 a 41,82±5,03 a 7,30±4,52 a 9,21±1,22 a 3,48±1,80 b 41,03±8,72 a 7,93±4,18 a 8,97±2,32 a 2,64±0,93 ab 43,95±11,97 a 9,10±5,96 a 7,65±2,81 a Các giá trị cột mang mẫu tự (a b) khác thể khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) giai đoạn tuyến sinh dục (Bảng 4.10) 24 Hàm lượng vitellogenines huyết tương cá nâu đực giai đoạn (2,64 µg ALP/ml protein) tuyến sinh dục khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê (p>0,05) so v giai đoạn khác biệt có ý nghĩa thống k ới ê (p