GIÁO TRÌNH THỰC TẬP LÝ HÓA DƯỢC

GIÁO TRÌNH THỰC TẬP LÝ HÓA DƯỢC

KHOA DƯ C  GIÁO TRÌNH THỰC TẬP HĨA LÝ DƯ C (Dành cho Đào tạo D c sĩ Đại học) Tài liệu l u hành nội BÀI ĐI U CH H KEO VẨ NHǛ T S NG ĐÔNG VịN C A CÁC H KEO M C TIÊU  Điều chế số hệ keo phương pháp: thay dung mơi, pepti hố hố học;  Khảo sát tính chất gelatin: điểm đẳng điện, tác dụng bảo vệ gelatin keo sắt (III) hydroxyd;  Khảo sát tính chất keo xanh phổ: đơng vón khuếch tán;  Điều chế phân biệt loại nhũ tương: dầu nước (D/N) nước dầu (N/D) TI N HÀNH THÍ NGHI M ĐI U CH VÀ KH O SÁT TÍNH CH T M T S 1.1 Ph H KEO ng pháp thay th dung môi (điều chế keo lưu huỳnh) Cho từ từ ml dung dịch lưu huỳnh bão hồ cồn vào cốc có sẵn 30 ml nước cất, vừa thêm vừa khuấy đều, thu keo lưu huỳnh 1.2 Ph ng pháp phân tán b ng cách pepti hoá (điều chế keo xanh phổ) Lấy 10 ml dung dịch FeCl3 2% cho vào cốc có mỏ 50 ml Thêm từ từ ml dung dịch kali ferocyanid 10%, vừa thêm vừa khuấy Lọc rửa tủa thật nước cất nước rửa không màu Nhỏ từ từ lên tủa giọt acid oxalic 0,1 N dịch có màu chảy ra, thu keo xanh phổ Hệ keo sử dụng cho thí nghiệm 3.1 3.2 1.3 Ph ng pháp hoá h c (điều chế keo sắt (III) hydroxyd) Cho 20 ml nước cất vào becher Đun sôi, cho tiếp giọt dung dịch FeCl3 2% (2 ml) Đun thêm vài phút bếp cho dung dịch sẫm màu, thu keo sắt (III) hydroxyd Hệ keo sử dụng cho thí nghi m 2.2 TÍNH CH T C A GELATIN Điều chế keo gelatin 2%: cân 0,5 g gelatin vào becher; ngâm vào 25 ml nước 20 phút Đun cách thủy đến tan hồn tồn 2.1 Tìm m đ ng n c a gelatin Chuẩn bị ống nghiệm theo bảng sau: Hoá ch t CH3COOH 0,1 N (ml) CH3COONa 0,1 N (ml) Gelatin 2% (ml) Cồn ethylic tuyệt đối (ml) pH hỗn hợp 1,8 0,2 1,0 4,0 3,8 1,4 0,6 1,0 4,0 4,4 ng nghi m 1,0 1,0 1,0 4,0 4,7 0,6 1,4 1,0 4,0 5,1 0,2 1,8 1,0 4,0 5,7 Lắc so sánh độ đục hỗn hợp ống nghiệm Ghi nhận m đ ng n gelatin giá trị pH ống nghiệm có chứa hỗn hợp vẩn đục 2.2 Kh o sát tác d ng b o v c a gelatin đ i v i h keo s t (III) hydroxyd ng nghiệm 1: ml hệ keo sắt (III) hydroxyd + ml keo gelatin 2% + ml dung dịch NaCl 10% ng nghiệm 2: ml hệ keo sắt (III) hydroxyd + ml nước cất + ml dung dịch NaCl 10% Khảo sát nhận xét độ đục ống nghiệm sau: 0; 5; 10 15 phút TÍNH CH T C A KEO XANH PH 3.1 Kh o sát s đông vón c a keo xanh ph Lấy ml keo xanh phổ vừa điều chế thí nghi m 1.2 pha với nước cất vừa đủ 100 ml thực thí nghiệm sau: ng nghiệm 1: 10 ml keo xanh phổ + 0,1 ml dung dịch ZnSO4 0,05M ng nghiệm 2: 10 ml keo xanh phổ + 0,1 ml dung dịch ZnSO4 0,02M ng nghiệm 3: 10 ml keo xanh phổ + 0,1 ml dung dịch ZnSO4 0,01M Lắc đều, sau để yên khảo sát tượng xảy ống nghiệm Ghi nhận thời gian đơng vón keo xanh phổ ống nghiệm 3.2 Kh o sát tính khu ch tán c a keo xanh ph Điều chế gel thạch: cân 0,3 g thạch cho vào becher, thêm 30 ml nước cất, ngâm 30 phút cho thạch nở Đun cho tan, thêm tiếp 40 giọt phenolphtalein 0,04% ml dung dịch NaOH 0,1 N vào thạch Khuấy Đổ gel vào ống nghiệm Để nguội đến nhiệt độ phịng, sau làm lạnh cho thạch đơng hồn tồn Cho vào ống trên: ng 1: ml dung dịch HCl 0,1 N ng 2: ml dung dịch CuSO4 10% ng 3: ml keo xanh phổ thu thí nghi m 1.2 Để yên khoảng Quan sát khuếch tán H+ ống 1, Cu++ ống tiểu phân keo xanh phổ ống ĐI U CH VÀ PHÂN BI T NHǛ T NG 4.1 Vai trò c a ch t ho t đ ng b mặt Chuẩn bị ống nghiệm có nắp: ng nghiệm 1: 2-3 ml nước cất vài giọt dầu ng nghiệm 2: 2-3 ml nước cất, vài giọt dầu vài giọt xà phòng natri 2% Đậy chặt miệng ống nghiệm, lắc mạnh vài phút, thu nhũ tương 4.2 Đi u ch chuy n t ng nhǜ t ng Cho ml dung dịch xà phòng natri 5% 10 giọt Sudan III/ benzen vào ống nghiệm có nắp Đậy nút, lắc mạnh tạo nhũ tương Lấy vài giọt nhũ tương để lên lame, đậy lamelle Dùng kính hiển vi để quan sát bội giác 10 Chuy n t ng: Cho 1-2 ml dung dịch CaCl2 1% vào phần nhũ tương lại ống nghiệm Thêm đủ dầu, lắc mạnh để tạo nhũ tương Dùng kính hiển vi để quan sát bội giác 10 pH - DUNG D CH Đ M BÀI Đ D N ĐI N M C TIểU  Xác định pH số dung dịch dược phẩm phép đo điện máy pH kế với điện cực thủy tinh kép;  Pha chế, khảo sát tính chất dung dịch đệm tính suất đệm;  Đo độ dẫn điện dung dịch;  Xác định số điện ly dung dịch độ tan chất tan phương pháp đo độ dẫn điện pH DUNG D CH Đ M 1.1 Đ i c ng pH dung d ch: pH= - lg[H+] pH=  lg a H (1)  Dung d ch đ m dung dịch trì pH khơng đổi thêm vào lượng acid hay base vừa phải pha loãng Dung dịch đệm thường tạo thành acid yếỐ ốà mỐ i acid ốới base mạnh hay base yếỐ ốà mỐ i base ốới acid mạnh * pH dung dịch đệm acid (tạo acid yếu muối với base mạnh) pH  pK a  log Cmí (2) Cacid với pKa = -lgKa, Ka số phân ly acid * pH dung dịch đệm base (tạo base yếu muối với acid mạnh) pOH  pKb  log Cmí Cbase  C   pH  14   pKb  log muôi  (3) Cbase   với pKb số phân ly base Đi n c c th y tinh: E  ETT  RT ln aH  (4) với ETT : điện nghiệm chuẩn điện cực thủy tinh F Đi n c c th y tinh kép điện cực thủy tinh ghép với điện cực calomel 1.2 Nguyên t c 1.2.1 Đo pH: Đo sức điện động mạch điện điện cực thủy tinh điện cực calomel môi trường cần đo pH Từ xác định điện điện cực thủy tinh suy pH dung dịch cần đo theo công thức (4) E pin  Ecal  ETT  pH  E pin  Ecal 0, 059 (5) 1.2.2 Tính su t đ m Năng su t đ m số đương lượng gam acid mạnh base mạnh cần thêm vào lít dung dịch đệm để pH biến thiên ± đơn vị Năng suất đệm tính theo công thức: B B E pH1  pH E pH  pH1 (với kiềm) (6) (với acid) (7) Trong đó: B: suất đệm E: số đương lượng gam acid base dùng, tính cho lít dung dịch đệm pHo: pH trước chuẩn độ pH1: pH sau chuẩn độ 1.3 TI N HÀNH THÍ NGHI M 1.3.1 Pha ch dung d ch CH3COOH 0,1 N; 0,01 N; 0,001 N vƠ đo pH Pha 50 ml dung dịch CH3COOH 0,1 N từ dung dịch CH3COOH N Pha 50 ml dung dịch CH3COOH 0,01 N từ dung dịch CH3COOH 0,1 N Pha 50 ml dung dịch CH3COOH 0,001 N từ dung dịch CH3COOH 0,01 N 1.3.2 Pha ch vƠ kh o sát h đ m 1.3.2.1 Pha ch dung d ch đ m Pha 100 ml dung dịch đệm từ dung dịch CH3COOH 0,1 N CH3COONa 0,1 N pH mong mu n Thể tích CH3COONa 0,1 N (ml) Thể tích CH3COOH 0,1 N (ml) Thể tích tổng cộng 3,0 4,0 100 ml Kiểm tra pH dung dịch vừa pha máy đo pH Nếu pH đo sai lệch với pH mong muốn điều chỉnh dung dịch CH3COOH N dung dịch CH3COONa N sau: - Trường hợp pH đo > pH cần pha điều chỉnh dung dịch CH3COOH N: cho giọt CH3COOH N vào dung dịch khuấy đều, đo pH dung dịch Tiếp tục điều chỉnh thu dung dịch đạt giá trị pH mong muốn - Trường hợp pH đo < pH cần pha điều chỉnh dung dịch CH3COONa N Cho giọt CH3COONa N vào dung dịch khuấy đều, đo pH dung dịch Tiếp tục điều chỉnh thu dung dịch đạt giá trị pH mong muốn 1.3.2.2 Kh o sát h đ m Pha dung dịch đệm theo bảng sau: ThƠnh ph n 27 Dung dịch CH3COOH 0,1 N (ml) Dung dịch CH3COONa 0,1 N (ml) Dung d ch đ m 15 15 27 Pha loãng dung dịch đệm thành 06 dung d ch theo bảng sau: Dung d ch đ m Dung dịch đệm (ml) 10 Dung dịch đệm (ml) Dung dịch đệm (ml) Nước cất (ml) ng nghi m 10 0 10 9 - Tính giá trị pHLT 06 dung dịch theo công thức (2) - Đo pH dung dịch (pHTN), ghi nhận so sánh giá trị pHLT pHTN - So sánh giá trị pH dung dịch đệm trước sau pha loãng - Thêm vào dung dịch trên, ống giọt thị vạn năng, quan sát màu 1.3.2.3 Kh o sát tính ch t đ m c a dung d ch đ m (chú ý màu sắc dung dịch trước sau thêm acid/ base) ng nghiệm (a): Lấy ml dung d ch đ m 1, thêm giọt đỏ methyl, quan sát màu sắc Thêm giọt HCl 0,1 N, ý màu sắc dung dịch ng nghiệm (b) Lấy ml dung d ch đ m 2, thêm giọt đỏ methyl, nhận xét màu Thêm giọt HCl 0,1 N, ý màu sắc dung dịch ng nghiệm (c): Lấy ml dung d ch đ m 2, thêm giọt phenolphtalein, nhận xét màu Thêm giọt NaOH 0,1 N, nhận xét màu ng nghiệm (d): Lấy ml dung d ch đ m 3, thêm giọt đỏ methyl, nhận xét màu Thêm giọt NaOH 0,1 N, ý màu sắc dung dịch 1.3.3 Năng su t đ m Cho vào becher ml dung dịch CH3COOH 0,1 N ml dung dịch CH3COONa 0,1 N; thêm giọt đỏ methyl, đo pH Chuẩn độ dung dịch NaOH 0,1 N có màu vàng chanh, đo lại pH Ghi nhận giá trị pH hệ đệm trước sau chuẩn độ Tính suất đệm theo cơng thức (6) 1.3.4 Ti n hƠnh đo pH c a m t s d c ph m D c ph m kh o sát Dung dịch tiêm truyền Glucose 5% Dung dịch tiêm truyền Lactat Ringer Thuốc nhỏ mắt Cloraxin 0,4% Thuốc nhỏ Efticol Đ pH xác D N ĐI N 2.1 Dung d ch ch t n ly y u Pha dung dịch CH3COOH 0,05 N; 0,02 N từ dung dịch CH3COOH 0,1 N Dung dịch CH3COOH Dung dịch CH3COOH 0,1 N Nước cất vừa đủ 0,02 N 0,05 N 0,1 N 100 ml Sử dụng máy đo độ dẫn điện để xác định độ dẫn điện riêng dung dịch CH3COOH 0,1 N; 0,05 N 0,02 N L u Ủ: Xem kỹ b ng h ng d n sử d ng máy Đo dung d ch t n ng đ th p đ n n ng đ cao 2.2 Dung d ch ch t n ly m nh 2.2.1 Đo đ d n n c a dung d ch HCl 0,1 N 0,01 N Pha chế 100 ml dung dịch HCl 0,01 N từ dung dịch HCl 0,1 N Đo độ dẫn điện riêng , lập bảng kết tính độ dẫn điện đương lượng λv 2.2.2 Đo đ d n n c a dung d ch NaCl 0,1 N 0,01 N Pha chế dung dịch NaCl 0,01 N từ dung dịch NaCl 0,1 N Đo độ dẫn điện riêng , lập bảng kết tính độ dẫn điện đương lượng λv 2.3 Xác đ nh đ tan c a m t ch t tan b ng ph ng pháp đo đ d n n Đo độ dẫn điện riêng dung dịch CaSO4 bão hồ nước, từ tính độ tan CaSO4 nước Tiến hành: Lấy khoảng 50 ml dung dịch CaSO4 bão hoà nước, đo độ dẫn điện riêng () dung dịch Sau đó, đo độ dẫn điện riêng nước cất (’) Ta có: (Ω-1.cm-1); : nồng độ đương lượng dung dịch CaSO4 (đương lượng gam/ lít) Từ suy độ tan CaSO4 (gam/ lít) = C x đương lượng gam CaSO4 Cho biết: λ∞CaSO4 = 119,5 (Ω-1.cm2) S BÀI HOẨ TAN H N CH C A CH T L NG M C TIểU  Thiết lập giản đồ hoà tan hạn chế phenol nước;  Xác định nhiệt độ tới hạn thành phần (%) tới hạn giản đồ TI N HẨNH THệ NGHI M Chú ý: Phenol gây bỏng, nguy hiểm, có khơng phát Do đó, sinh viên phải cẩn thận tiếp xúc Nếu bị bỏng, rửa nhiều nước bôi acid picric tủ y tế, đồng thời báo cho Cán giảng biết PHA H N H P PHENOL VẨ N th y tinh đ l y phenol) ng nghi m Phenol (ml) Nước cất (ml) Thể tích tổng cộng (ml) 0,6 5,4 ThƠnh ph n (%) phenol/ h n h p 10 TỊM NHI T Đ C THEO B NG (dùng buret có khóa 0,9 5,1 1,5 4,5 3,0 3,0 3,6 2,4 4,2 1,8 50 60 70 6,0 15 25 CHUY N PHA Th c hi n nh sau cho t t c ng nghi m: Lấy nhiệt kế que khuấy cho vào ống nghiệm, nhúng ống nghiệm vào ly nước Đun cách thủy ly nước từ từ đồng thời khuấy tay Khi hỗn hợp suốt, ghi nhận nhi t đ tẲ Đó nhiệt độ hai tướng lỏng chuyển thành tướng (hệ dị thể chuyển thành hệ đồng thể) Nhấc ly khỏi bếp, vừa khuấy vừa quan sát hỗn hợp đục trở lại Ghi nhận nhi t đ tẰ (đó nhiệt độ mà hệ chuyển thành dị thể) NếỐ t’ ốà t” cách nhaỐ ≤ 0,5 oC, kết qỐả chấp nhận Từ tính t1  t'  t" Tiến hành lần cho ống nghiệm để có: t  t1  t  t 3 Từ kết thu được, vẽ gi n đ s hoƠ tan h n ch c a phenol n đồ xác định nhi t đ t i h n thƠnh ph n (%) t i h n c từ giản BÀI PH N NG B C I: THUỶ PHÂN ETHYL ACETAT M C TIÊU Xác định số tốc độ phản ứng, chu kỳ bán huỷ lượng hoạt hoá phản ứng bậc TI N HÀNH THÍ NGHI M (Khảo sát q trình thuỷ phân ethyl acetat 30 oC 40 oC) THUỶ PHÂN ETHYL ACETAT Ở 40 oC – Lấy xác 50 ml dung dịch HCl 0,2 N (dùng bình định mức) cho vào bình nón (A) 250 ml Lắp sinh hàn khí đặt bình (A) vào bếp cách thuỷ 40 oC khoảng 15 phút để ổn định nhiệt độ – Cho vào 04 bình nón (B) (dùng bình nón 100 ml) bình khoảng 30 ml nước cất (dùng ng đong) giọt phenolphtalein Ngâm bình (B) vào nước đá – Hút xác ml ethyl acetat (dùng pipet xác) cho vào bình (A) Bấm đồng hồ: ta có thời điểm t = (phản ứng bắt đầu), đồng thời lắc hút ml hỗn hợp bình (A) cho vào bình (B) – Định phân dung dịch bình (B) dung dịch NaOH 0,05 N – Ln ln giữ bình (A) bếp cách thủy 40 oC Căn vào đồng hồ, thời điểm t = 15, 30, 45 phút, dùng pipet hút ml hỗn hợp bình (A) cho vào bình (B) định phân dung dịch NaOH 0,05 N Gọi n (ml) VNaOH 0,05 N định phân sau thời điểm Như vậy, ta có giá trị n0, n15, n30, n45 tương ứng với thời điểm 0; 15; 30; 45 phút – Sau tiếp tục đun cách thuỷ bình (A) 80 oC vòng cho phản ứng xảy hồn tồn Hút ml hỗn hợp bình (A) cho vào bình (B) đem định phân để có giá trị n∞ Chú ý: Phải thực định phân nhiều lần để tìm giá trị n∞, lần định phân cách 10 phút lúc bình (A) cách thuỷ 80 oC đến có giá tr liên ti p khơng đ i n∞ THUỶ PHÂN ETHYL ACETAT Ở 30 oC: Thực tương tự nhiệt độ phịng (khoảng 30 oC) để tìm giá trị n0, n15, n30, n45 n∞ 10 BÀI PH N NG B C II: XÀ PHỊNG HỐ ETHYL ACETAT M C TIÊU Xác định số tốc độ phản ứng phản ứng bậc hai TI N HÀNH THÍ NGHI M – Lấy xác 100 ml dung dịch NaOH 0,05 N cho vào bình nón nút mài 250 ml (bình A) Lắp sinh hàn khí để ổn định khoảng 15 phút nhiệt độ phòng – Cho vào 05 bình nón (B) (dùng bình nón 100 ml) bình xác 10 ml dung dịch HCl 0,05 N giọt phenolphtalein Ngâm bình (B) vào nước đá – Dùng pipet khắc vạch cho 0,35 ml ethyl acetat vào bình (A) (coi thời điểm to – phản ứng bắt đầu xảy ra) Lắc Để yên – Sau phút, hút 10 ml hỗn hợp bình (A) cho vào bình (B) (hút xác) Lắc đều, chuẩn độ dung dịch NaOH 0,05 N – Tiếp tục làm thời điểm 4; 6; 8; 10 12 phút – Đặt bình (A) có lắp ống sinh hàn khí vào bếp cách thuỷ 60 - 70 oC khoảng để phản ứng xảy hoàn toàn – Xác định n∞ cách hút 10 ml hỗn hợp từ bình A cho vào bình B, chuẩn độ dung dịch NaOH 0,05N Chú ý: Phải thực định phân nhiều lần để tìm giá trị n∞, lần định phân cách 10 phút lúc bình (A) cách thuỷ 60-70 oC để đến có giá tr liên ti p khơng đ i n ∞ Từ kết thu được, tính tốn h ng s t c đ ph n ng: K  11 2,303 b(a  x)  lg t ( a  b) a(b  x) BÀI Đ NG Đ NG NHI T H P PH TRONG DUNG D CH N C M C TIÊU  Khảo sát hấp phụ acid acetic than hoạt  Vẽ đuờng đẳng nhiệt hấp phụ  Tìm trị số số k 1/n phương trình Freundlich TI N HÀNH THÍ NGHI M PHA CÁC DUNG D CH X T Dung d ch Nồng độ (N) X1 0,05 DUNG D CH CH3COOH N X2 0,1 Thể tích cần pha X3 0,2 X4 0,4 200 ml Cách pha ch :  Dùng pipet xác hút 80 ml dung dịch CH3COOH N cho vào bình định mức 200 ml, thêm nước cất vừa đủ, ta X4  Dùng bình định mức lấy 100 ml dung dịch X4 cho vào bình định mức 200 ml, thêm nước cất vừa đủ, ta X3  Tương tự, dùng X3 để pha X2 dùng X2 để pha X1 CHU N Đ Tiến hành chuẩn độ dung d ch X dung dịch NaOH 0,1 N với thị phenolphtalein Từ tính n ng đ ban đ u dung dịch X Dung d ch tr c h p ph Thể tích dung dịch X (ml) X1 20 X2 10 X3 X4 Thể tích dung dịch NaOH 0,1 N (ml) Nồng độ ban đầu (Co) CHO H P PH DUNG D CH X B NG THAN HO T Cho vào bình nón nút mài bình xác 50 ml dung d ch X Dùng cân phân tích, cân cho vào bình nón bình lượng xác khoảng 1,5 g than ho t Lắc phút để yên 20 phút Sau lọc qua giấy để lấy dung dịch 12 CHU N Đ CÁC DUNG D CH X SAU H P PH Chuẩn độ dịch lọc sau hấp phụ, lập bảng kết quả, tính toán nồng độ dung dịch sau hấp phụ (C) (thực tương tự M C 2) Dung d ch sau h p ph Thể tích dung dịch X (ml) Thể tích dung dịch NaOH 0,1 N (ml) Nồng độ sau hấp phụ (C) X1 20 X2 10 X3 X4 Từ kết thu được, vẽ đường đẳng nhiệt hấp phụ y theo C, đường đẳng nhiệt hấp phụ lgy theo lgC, xác định hệ số k 1/n để có phương trình Freundlich: y  k  C 13 n BÀI S C KÝ GI Y VÀ S C Kụ TRAO Đ I ION M C TIÊU  Tách riêng ion Ni++ ion Co++ phương pháp sắc ký trao đổi ion  Tách riêng acid amin hỗn hợp phương pháp sắc ký giấy TI N HÀNH THÍ NGHI M S C Kụ TRAO Đ I ION Ki m tra c t s c ký: cho nước cất vào cột đến nước chảy khơng cịn ion H+ (thử methyl da cam, so với ống đối chiếu gồm nước cất methyl da cam) Ti n hành s c ký: - Dùng pipet hút 1,2 ml NiCl2 0,6 ml Co(NO3)2 cho vào ống nghiệm, lắc cho vào c t s c ký - Cho tiếp nước cất qua cột (khoảng 300 ml) đến nước chảy khơng cịn ion H+ - Cho tiếp dung dịch Citrat I qua cột với vận tốc – ml/ phút Dùng ống đong để hứng 10 ml Nếu khơng có màu đổ bỏ, có màu cho vào ống nghiệm giữ lại - Khi dung dịch chảy hết màu cịn màu nhạt cho tiếp Citrat II vào Thực tương tự với Citrat I để thu ống nghiệm có màu H i ph c nh a trao đ i ion c t s c ký: cho từ từ qua cột 20 ml dung dịch HCl 5% rửa cột nước cất nước chảy khơng cịn H+ L U ụ: Nhựa trao đổi ion cột phải ngập dung môi khoảng – cm S C KÝ GI Y  Dùng viết chì kẻ đường ngang cách mép giấy sắc ký cm (vạch xuất phát) Cách lề trái lề phải giấy sắc ký tối thiểu cm vạch xuất phát, dùng viết chì xác định điểm cách nhau: m 1, Tiếp theo, kẻ đường thứ hai cách vạch xuất phát 10 cm (vạch tiền tuyến)  Dùng mao quản riêng biệt ch m dung d ch acid amin lên m 1, (Đi m 2: ch m acid amin riêng r , m 3: ch m h n h p acid amin trên) Trên điểm chấm khoảng - lần, sau lần chấm phải để khô chấm tiếp  Để cho vết chấm khơ hồn tồn 14  Gắn giấy sắc ký vào bình chứa dung mơi Partridge Dung mơi bình sắc ký phải tiếp xúc với giấy sắc ký không chạm vào vết chấm acid amin Giấy phải thăng bằng, không nghiêng lệch tiếp xúc với dung môi lần  Đậy kín bình sắc ký  Khi dung mơi lên đến vạch tiền tuyến lấy giấy Hơ khơ giấy sắc ký bếp điện  Phun dung dịch Ninhydrin 0,5% lên giấy Hơ nóng giấy sắc ký, vết acid amin màu tím xuất  Tính Rf  Kết vết acid amin gọn, rõ, màu đồng 15