SÁCH THỰC tập mô học y2

TR NG Đ I H C Y KHOA PH M NG C TH CH B MÔN MÔ PHÔI DI TRUY N SÁCH TH C T P MÔ H C Y2 Lưu hành nội 2011 TH C T P MÔ H C N I DUNG BU I TH C T P Nhắc lại điểm lý thuyết Hướng dẫn tìm mục tiêu tiêu lam thực tập Quan sát tiêu kính hiển vi quang học TIÊU B N MƠ H C Tiêu mô học lát cắt m ng mơ quan bình thư ng, có chiều dày khoảng 4-6 μm nhuộm màu Kỹ thuật làm tiêu mơ học tóm tắt nh sau: C định mẫu mô: ngâm mẫu mô vào chất c định (Formol, cồn ) cách nhanh chóng nhằm ngăn cản q trình tự hủy khơng làm thay đổi cấu tạo bình thư ng mô quan Khử nước mẫu mô cồn có nồng độ tăng dần Đúc kh i mẫu mô paraffin Cắt lát m ng máy cắt (microtome) Dán lát cắt lên phiến kính (lame) Tẩy paraffin nhuộm màu Đặt kính (lamelle) lên mẫu mơ nhuộm màu để bảo vệ Trong kỹ thuật mô học, thư ng dùng kỹ thuật nhuộm màu H-E (Hematoxylin & Eosin): màu acide màu base Cấu trúc ưa base cấu trúc có chứa g c acide (như chất nhiễm sắc, hạch nhân, ribosome, lưới nội bào hạt), bắt màu phẩm nhuộm kiềm xanh methylen, hematoxylin Cấu trúc ưa acide cấu trúc có chứa g c kiềm (chủ yếu protein), bắt màu phẩm nhuộm acide eosin Màu acide thể dạng màu đ , hồng, cịn màu base màu tím, xanh Vì vậy, khảo sát tiêu mơ học phải ý đến: - Đặc điểm hình thái như: vị trí, kích thước, cách xếp, hình dạng tế bào v.v - Màu sắc (thay đổi tùy theo kỹ thuật nhuộm màu áp dụng) C U T O VÀ CÁCH S D NG KÍNH HI N VI Trong thực tập mô học chủ yếu sử dụng kính hiển vi quang học Một kính hiển vi có phần: - Các phận quang học: thị kính, vật kính, tụ quang, nguồn sáng quan trọng vật kính Vật kính có nhiều độ phóng đại khác sử dụng theo mục đích quan sát: Vật kính x4: có độ phóng đại nh , dùng để quan sát tổng thể, nhận diện quan Vật kính x10: dùng quan sát mức độ cấu trúc Vật kính x40: dùng quan sát mức độ tế bào - Các phận học: đế kính, bàn kính với thước kẹp tiêu , quan trọng c đại cấp vi cấp giúp nâng hạ bàn kính để có hình ảnh rõ nét Để bảo vệ kính hiển vi tiêu bản, dùng kính phải thận trọng, nhẹ nhàng tiến hành theo bước sau: Đưa vật kính nh (vật kính x4) vị trí quan sát Đặt tiêu lên bàn kính kẹp vào thước kẹp (Lưu ý: đặt mặt có kính lên trên) Bật đèn đưa lát cắt vào tâm nguồn sáng Dùng c đại cấp điều chỉnh tiêu cự quan sát Mu n xem độ phóng đại lớn hơn, đưa cấu tạo cần xem vào tâm vi trư ng, dùng đầu xoay chuyển vật kính lớn x10 x40 vào vị trí quan sát Khi s d ng v t kính x40, ch đ c dùng c vi c p, t đ i không đ c dùng c đ i c p d làm v tiêu b n tr y s t v t kính CHÚ Ý : Sinh viên không tự ý mở tháo, lắp kính, khơng lau kính đặc biệt phần quang học Bài 1: BI U MÔ Lam th c t p:Khí quản, thực quản, da Tiêu b n khí qu n: • M c tiêu: - Xác định biểu mơ trụ giả tầng có lơng chuyển - Phân biệt tế bào đài tế bào trụ có lơng chuyển • Quan sát: Mắt trần vật kính x4: Xác định lịng khí quản Vật kính x10: Biểu mơ trụ giả tầng có lơng chuyểnlà biểu mơ lợp mặt lịng khí quản Vật kính x40: Biểu mơ trụ giả tầng có lơng chuyển: tế bào trụ có lơng chuyển chiếm đa s , cực có lơng chuyển cấu tạo dài, không đều, phân b thưa Xen kẽtế bào trụ có lơng chuyển có tế bào đài có bào tương bắt màu bị lõm hình ly Sát màng đáy có tế bào tròn nh , nhân đậm màu tế bào tái tạo tồn lớp biểu mơ Tiêu b n th c qu n: • M c tiêu - Xác định biểu mơ lát tầng sừng hóa - Phân biệt lớp biểu mô lát tầng sừng hóa - Xác định biểu mơ vng đơn - Xác định biểu mơ tuyến túi tiết nhày • Quan sát Vật kính 10: Xác định lịng thực quản, biểu mơ lát tầng sừng hóa lót lịng thực quản Phía biểu mơ mơ liên kết, quan sát ng xuất biểu mô tuyến Vật kính 40: Biểu mơ lát tầng khơng sừng hóalà biểu mô lợp mặt thành thực quản gồm nhiều hàng tế bào: hàng tế bào sinh sản hình vuông tựa màng đáy tiếp đến hàng tế bào trung gian, vài hàng tế bào dẹt cịn nhân (lớp bề mặt) Quan sát phía lớp biểu mô: ng xuất tuyến thực quản lót biểu mơ vng đơn, tuyến thực quản tuyến túi tiết nhày Tiêu b n da • M c tiêu - Nhận dạng biểu mơ lát tầng sừng hóa - Phân biệt lớp biểu mơ lát tầng sừng hóa • Quan sát: Vật kính x4: Phần lợp bề mặt biểu mơ lát tầng sừng hóa da Biểu mơ dày có nhiều hàng tế bào, thư ng có nhú lõm vào phần mô liên kết bên Vật kính x10 40: Phân biệt lớp biểu mơ lát tầng sừng hóa bao gồm: - Lớp sinh sản gồm lớp tế bào vuông hay trụ thấp, tựa màng đáy - Lớp trung gian gồm tế bào đa diện hình thoi, có nhân nằm tế bào thấy rõ vùng cận lớp sinh sản - Lớp sừng lớp cùng, tế bào thối hóa, nhân, tạo thành sừng chồng chất lên nhau, đơi chỗ có tượng bong sừng Bàài 2:MÔ Ô LIÊN NK T Lam thực tậập:Da, hỗnng - hồi trààng, dàyy Tiêu T b n da • M c tiêu - Nhận diệện đ ợc mô lliên kết đặc với v bó sợ ợi collagen - Tìm tế bàào liên kết: tếế bào sợi, tếế bào nội mô, tế bào mỡ Vật kính x4: Ph hần lợp trênn bề mặt biểu b mơ lát tầng sừng hóa h da đ học liên kết llà phần có nềền xanh nằm m biểu mô m lát tầng sừng s hóa trướcc Mơ Vật kính x10: Đ mô liêên kết đặc kh Đây hông định h ớng chứa đa phầần bó sợi collagenn bắt màu xanhh chạy theo nhiều hướng g khác nhauu, nằm xen g chúng chất b tếế bào liên kết Phía P cóó loại mơ liiên kết đặc vvà thưa Vật kính x40: Tìm tế bào liên kết: - Tế bào sợicótrong mơ liên kết Đó tế bào hình thoi dài, nhân bầu dục tế bào phần phình - Tế bào nội mơlà tế bào lót mặt mạch máu bạch huyết Chúng có dải bào tương hẹp, nhân lồi vào lòng mạch Bài 12 :CQ SINH D C NAM & N Lam thực tập:Tinh hoàn, ng mào tinh, buồng trứng, vịi trứng TIÊU B N TINH HỒN • M c tiêu - Nhận diện ng sinh tinh, tuyến kẽ - Phân biệt tế bào dòng tinh: tinh nguyên bào, tinh bào, tiền tinh trùng, tinh trùng - Xác định tế bào Sertoli - Xác định l ới tinh hồn Vật kính x4 vật kính x10: − ng sinh tinh ng tròn, bầu dục cong queo với kích thước khác Bên ngồi ng sinh tinh lớp mơ liên kết m ng có tế bào biểu mơ Lịng ng lót biểu mô tinh − Tuyến kẽlà tuyến nội tiết kiểu tản mác nằm mô liên kết thưa xen kẽ ng sinh tinh Vật kính x40: Quan sát ng sinh tinh ta thấy thành ng gồm hai loại tế bào: - Tế bào Sertoli có nhân lớn, hình tam giác trịn, nhuộm màu tế bào dịng tinh, nhân thư ng có - hạt nhân Bào tương tế bào Sertoli không phân biệt Tế bào Sertoli thư ng nằm hàng với tinh nguyên bào - Tế bào dòng tinh: gồm có tinh nguyên bào, tinh bào, tiền tinh trùng tinh trùng: Tinh ngun bào có nhân trịn nh , bắt màu tím đậm (thư ng đậm đặc không phân biệt chất nhiễm sắc) nằm rải rác thành hàng sát màng đáy Tinh bào: (không cần phân biệt tinh bào I tinh bào II) có nhân trịn, lớn, bắt màu tím xù xì, nằm sâu vào phía 65 Tiền tinh trùng tế bào có nhân trịn, nh , nhuộm màu nhạt mịn, nằm sâu lòng ng sinh tinh Tinh trùng dễ nhận biết đầu tinh trùng có hình dấu phẩy, màu tím đậm, tinh trùng thư ng bết vào tạo thành vết màu hồng hướng vào lịng ng ] Lưới tinh hồn: thuộc hệ th ng ng tinh hoàn, n i ng thẳng vào ng ra, lót lịng biểu mơ vng đơn 66 TIÊU B N MÀO TINH • Mục tiêu: Nhận dạng ng ra, ng mào tinh ng ra: biểu mơ vng khơng có vi nhung mao xen kẽ biểu mơ vng cao có vi nhung mao, bên ngồi có lớp trơn m ng ng mào tinh: biểu mơ trụ giả tầng có vi nhung mao, bên ngồi có lớp trơn m ng 67 TIÊU B N BU NG TR NG • M c tiêu - Nhận diện biểu mơ vng đơn bọc mặt ngồi buồng trứng - Phân biệt nang trứng nguyên thủy, sơ cấp, thứ cấp đặc thứ cấp có h c Vật kính x4 x10: Cần phân biệt vùng v vùng tủy buồng trứng Vùng v vùng tương đ i đậm đặc tập trung nhiều nang trứng với mô liên kết xung quanh Vùng tủynằm buồng trứng, có nhiều mạch máu lị xo, mạch bạch huyết, trơn gặp nhánh thần kinh Vật kính x40: Phân tích vùng v buồng trứng vật kính ta nhận diện cấu trúc: Bọc mặt buồng trứng biểu mô vuông đơn Màng trắng nằm biểu mơ, mơ liên kết khơng có giới hạn rõ rệt 68 Lớp đệm v lớp mô liên kết nằm màng trắng chứa nhiều nang trứng tiến triển giai đoạn khác nhau: - Nang trứng nguyên thủy nhiều, nh nhất, nằm sát vùng màng trắng hình trịn bọc b i hàng tế bào nang dẹt Giữa noãn hàng tế bào nang chưa xuất màng su t - Nang trứng sơ cấp lớn nang trứng nguyên thủy, bọc phía ngồi nỗn hàng tế bào nang vng - Nang trứng thứ cấp đặc (nang trứng đặc) có kích thước lớn hai loại nang trên, có nỗn to tế bào nang có nhiều hàng, kh i tế bào nang chưa xuất h c - Nang trứng thứ cấp có h c có kích thước lớn, có màng su t kh i tế bào nang nhiều hàng xuất h c nang trứng Cần ý s lượng h c kích thước chúng khác Trên tiêu có s nang trứng khơng chứa nỗn 69 TIÊU B N VỊI TR NG • Mục tiêu: - Xác định cấu tạo gồm tầng niêm mạc, tầng tầng v Vật kính x4 x10 Vịi trứng có cấu tạo gồm tầng: niêm mạc, v 70 Vật kính x40: Tầng niêm mạc: biểu mơ trụ đơn có lơng chuyển xen kẽ tế bào khơng có lơng chuyển có nhiều vi nhung mao khơng Tầng cơ: vịng, ngồi dọc 71 Bài 12:C QUAN TI T NI U Lam thực tập: thận, bàng quang TIÊU B N TH N • M c tiêu - Nhận diện vùng v với tiểu cầu thận, ng lượn gần, ng lượn xa - Nhận diện vùng tủy, ng góp - Nhận diện vết đặc Vật kính x4 x10: Nhìn bao qt tiêu thận ta nhận thấy hai phần khác biệt: Một phần đậm màu chứa nhiều tiểu cầu thận (cấu trúc hình cầu có khe sáng xung quanh) phần v , cịn phần nhuộm màu nhạt khơng có tiểu cầu thận, phần tủy thận Phần v cần quan sát tiểu cầu thận, ng lượn gần, ng lượn xa Phần tủy gồm tháp Ferrein tháp Malpighi Tháp Ferrein bó ng, cắt dọc, cắt ngang, nằm xen vùng v Vật kính x40: Tiểu cầu thận kh i trịn có chùm nhân tế bào bắt màu đậm, xung quanh đám nhân có khe sáng Ta phân biệt: Chùm mao mạch Malpighi đám nhân nằm giữa, trúc mao mạch phân biệt cấu Bao Bowman gồm lá, dính vào chùm mao mạch Malpighi nên khơng thể phân biệt được, ngồi lớp biểu mơ lát đơn bao tồn tiểu cầu thận Khoang Bowman khe sáng bao quanh chùm mao mạch Malpighi - ng l ợn gần ng cắt ngang, có nhiều xung quanh tiểu cầu thận, lòng ng tương đ i hẹp thành ng dày nhuộm màu đậm, - tế bào hình tháp tạo nên - ng l ợn xa nằm xen kẽ ng lượn gần, ta phân biệt nh chúng có cấu tạo khác với lịng ng rộng hơn, thành ng m ng nhuộm màu hơn, biểu mô thành ng thư ng biểu mô vuông đơn trụ thấp - Vết đặc phần ng lượn xa nằm có nhiều nhân tế bào nằm sát 72 vùng tủy ta cần nhận diện ng góp ng cấu tạo b i biểu mô vuông đơn gồm loại tế bào: tế bào sáng nhuộm màu tế bào đậm màu 73 TIÊU B N BÀNG QUANG • M c tiêu - Nhận diện cấu trúc bàng quang Vật kính x4 x10: Dưới kính hiển vi quang học có độ phóng đại nh thấy thành dầy,biểu mơ gấp nếp Thành trơn có lớp: vịng, chéo, dọc 74 Vật kính x40: Biểu mơ bàng quang: đa dạng tầng có tế bào hình vợt 75 BÀI 14: C QUAN N I TI T Lam thực tập: tuyến giáp,tuyến thượng thận TIÊU B N TUY N GIÁP • M c tiêu - Nhận diện tuyến giáp: nang giáp (chất keo giáp), tế bào nang Vật kính x4 x10: vật kính ta thấy ng tròn, rộng túi tuyến giáp hay gọi nang giáp, bên s nang giáp có chứa chất keo giáp phần ngoại vi lịng túi, giáp với thành túi, có h c khơng nhuộm màu, khơng bào tái hấp thụ Xen kẽ nang giáp mô liên kết m ng chứa mao mạch Vật kính x40: Nang giáp túi trịn, thành túi biểu mơ vng đơn gồm loại tế bào: - Tế bào nang chiếm đa s , tạo thành lớp tựa màng đáy, nhân tế bào có dạng hình cầu nằm trung tâm 76 TIÊU B N TUY N TH NG TH N • M c tiêu - Nhận diện vùng v vùng tủy tuyến thượng thận - Phân biệt lớp cung, lớp bó, lớp l ới vùng v Vật kính x4: Th ợng thận v phần dày bọc xung quanh, nhuộm màu đậm Th ợng thận tủy nằm tuyến thượng thận, nhuộm màu nhạt Các tế bào chế tiết lớn xếp với thành lưới Mao mạch kiểu xoang lớn tạo thành h c xen kẽ lưới tế bào chế tiết Vật kính x10: - - • Thượng thận v có lớp: Lớp cung nằm sát v xơ, gồm tế bào đa diện n i với tạo thành cung hướng v xơ Lớp bó n i tiếp lớp cung, dày lớp cung Trong lớp này, tế bào tuyến n i với thành dãy tế bào chạy song song với vuông g c với bề mặt tuyến Xen kẽ dây tế bào chế tiết mơ liên kết mao mạch Tế bào có nhiều lipit nên sáng màu Lớp l ới nằm giáp với thượng thận tủy, tế bào chế tiết nh , nhuộm màu đậm xếp với thành lưới 77 78 ÔN T P N I DUNG ÔN T P BAO G M : Xem lại mục tiêu Ôn lại 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 tiêu học Khí quản Thực quản Da đầu ngón tay Hổng tràng - hồi tràng Phết máu ngoại vi Polyp mũi Lưỡi Cơ tim Hạch Tuyến ức Lách Tiểu não Dây thần kinh Mạch máu Dạ dày Tụy Gan Phổi Tinh hồn Buồng trứng Vịi trứng Thận Bàng quang Tuyến thượng thận Tuyến giáp 79 ...TH C T P MÔ H C N I DUNG BU I TH C T P Nhắc lại điểm lý thuyết Hướng dẫn tìm mục tiêu tiêu lam thực tập Quan sát tiêu kính hiển vi quang học TIÊU B N MƠ H C Tiêu mơ học lát cắt m ng mô quan bình... dụng) C U T O VÀ CÁCH S D NG KÍNH HI N VI Trong thực tập mơ học chủ yếu sử dụng kính hiển vi quang học Một kính hiển vi có phần: - Các phận quang học: thị kính, vật kính, tụ quang, nguồn sáng quan... lịng thực quản, biểu mơ lát tầng sừng hóa lót lịng thực quản Phía biểu mô mô liên kết, quan sát ng xuất biểu mơ tuyến Vật kính 40: Biểu mơ lát tầng khơng sừng hóalà biểu mơ lợp mặt thành thực