TRONG PHÂN TÍCH THỰC PHẨM Giảng viên Nguyễn Thị Hải Hòa TRONG PHÂN TÍCH THỰC PHẨM TÌM HIỂU CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ NHÓM 2 GIỚI THIỆU Sắc ký là phương pháp phân tích được ứng dụng trong nhiều ngành khoa học và đời sống. Nhà thực vật học người Nga Mikhail Tswett đã phát minh ra sắc ký vào năm 1906, khi dùng sắc ký cột với chất nhồi là calci carbonate để tách các sắc tố thực vật cholorophyl và xanthophyl. Sau đó, ông đã đặt tên cho kỹ thuật này là chromatography. Tên này được ghép bởi hai từ Hy Lạp là từ “ chroma ” có nghĩa là “ màu sắc ” và từ “ graphein ” có nghĩa là “ viết ”. Từ năm 1937 đến 1972, đã có 12 giải Nobel cho những công trình khoa học có nội dung liên quan chủ yếu đến sắc ký.
NHĨM TÌM HIỂU CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ TRONG PHÂN TÍCH THỰC PHẨM Giảng viên: Nguyễn Thị Hải Hòa GIỚI THIỆU Phát minh sắc ký vào năm 1906 12 giải Nobel cho nghiên cứu khoa học Nhà thực vật học Mikhail Tswett (1872-1919) sắc ký NỘI DUNG 01 CƠ SỞ LÝ 04 PHÁP SẮC KÝ CỔ THUYẾT 02 PHÂN LOẠI CÁC 05 PHƯƠNG PHÁP 03 QUÁ TRÌNH SẮC KÝ VÀ SẮC KÝ CÁC PHƯƠNG 06 CÁC PHƯƠNG ĐIỂN PHÁP SẮC KÝ PHỔ BIẾN VÀ ỨNG CỦNG CỐ KIẾN DỤNG THỨC 01 CƠ SỞ LÝ THUYẾT Khái niệm? Khái niệm Sắc ký Sắc ký phương pháp phân tách mà thành phần cần tách phân bố hai pha Pha tĩnh Pha động NGUYÊN TẮC CHUNG CỦA SẮC KÝ Sơ đồ nguyên tắc a) Sắc ký cột b) Sắc ký mỏng 02 PHÂN LOẠI CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ PHÂN LOẠI CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ THEO CÁCH CÁCH 1: Dựa vào cấu tạo pha tĩnh Sắc ký cột: Pha tĩnh giữ ống nhỏ, pha động qua pha tĩnh nhờ áp suất trọng lực Sắc kỷ phẳng: Pha tĩnh cố định mặt phẳng (giấy, mỏng), pha động di chuyển qua pha tĩnh đặt thẳng đứng nhờ lực mao dẫn (đi lên) tác động trọng lực (đi xuống) PHÂN LOẠI CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ THEO CÁCH CÁCH 2:Dựa vào tính chất pha động CÁCH 3:Dựa vào cách cho pha động di chuyển qua pha tĩnh Sắc ký lỏng Sắc ký khí Sắc ký khai triển: Pha động đưa thành phần mẫu di chuyển tách pha tĩnh Sắc ký đồ nằm pha tĩnh Sắc ký khai triển thường thực mặt phẳng Sắc ký rửa giải: Pha động đưa thành phần mẫu di chuyển khỏi pha tĩnh Sắc ký đồ detector ghi lại PHÂN LOẠI CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH SẮC KÝ THEO CÁCH CÁCH 4: Dựa theo chất tương tác chất phân tích pha tĩnh trình sắc ký Sắc ký phân bố: Phân tích sắc ký dựa vào phân bố chất hai hệ lỏng - lỏng khí - lỏng Sắc ký hấp phụ: Pha tĩnh chất rắn có khả hấp phụ chất phân tích Cân xuất hệ lỏng - rắn khí - rắn Sắc ký trao đổi ion: Pha tĩnh nhựa trao đổi ion Nhựa mang ion trao đổi với ion dấu mẫu phân tích Sắc ký gel: Pha tĩnh có cấu tạo rỗng xốp với lỗ có kích thước xác định, chất phân tích tách dựa vào kích thước hình dạng khác qng đường qua pha tĩnh khác LỊCH SỬ HÌNH THÀNH 1946-1949:Cremer, Prior, Keulemans => Máy sắc ký khí Erika Cremer (1900-1996) Fritz Prior (1921-1996) Sơ lược sắc ký khí Sắc ký khí (Gas Chromatography – GC ) phương pháp sắc ký pha động chất khí (thường khí trơ) chạy liên tục qua pha tĩnh Tách Hợp chất dễ bay Sắc ký khí dùng Phân tích mà khơng làm phân hủy, thay đổi mẫu bền nhiệt Khả tách sắc ký Cơ chế tách phương pháp sắc ký khí + Phân bố + Hấp phụ Phân loại sắc ký khí Sắc ký khí lỏng (GLC – Phân bố) Sắc ký khí rắn (GSC – Hấp phụ) + Sử dụng phổ biến + Ít sử dụng + Pha tĩnh chất lỏng + Pha tĩnh chất rắn Cấu tạo máy sắc ký khí Đầu dị (Detector) phổ biến Đầu dò dẫn nhiệt (TCD) Đầu dị ion hóa lửa (FID) Đầu dò Nitơ – Phospho (NPD) Đầu dò bẫy điện tử (ECD) Một số máy sắc ký khí phổ biến Máy sắc ký khí Shimadzu 14B GC-MS Agilent 6890 Một số máy sắc ký khí phổ biến Các hệ thống sắc ký Trung tâm Khảo kiểm nghiệm phân bón Quốc gia Ứng dụng sắc ký khí phân tích thực phẩm Phân tích dư lượng thuốc trừ sâu; loại thuốc diệt cỏ, diệt nấm mẫu nông sản, thực phẩm, thủy hải sản, Ứng dụng sắc ký khí phân tích thực phẩm Phân tích 20 amino acid thực phẩm, chế phẩm sinh học Phân tích mẫu bệnh phẩm, mẫu ngộ độc Methanol, Trichloroacetic, Benzen, Toluen,… máu, nước tiểu Phân tích BTX (Benzen – Toluen – Xylen) số hợp chất bay khác khơng khí Phân tích thành phần bảng giá trị dinh dưỡng acid béo, cholesterol thành phần khác 06 CỦNG CỐ KIẾN THỨC Giải đáp thắc mắc Câu 1: Phương pháp sắc ký khí có đặc điểm: A Pha động chất khí hay chất rắn B Pha tĩnh chất lỏng chất khí C Pha tĩnh chất lỏng rắn D Cả ý Câu 2: Dựa theo chất tương tác chất phân tích pha tĩnh trình sắc ký, hệ thống sắc ký bao gồm: A Sắc ký hấp phụ, sắc ký khí, sắc ký lỏng B Sắc ký hấp phụ, sắc ký phân bố, sắc ký trao đổi ion, sắc ký Gel C Sắc ký lỏng, sắc ký phân bố, sắc ký trao đổi ion, sắc ký khí D Sắc ký khí, sắc ký phân bố, sắc ký lỏng, sắc ký Gel Câu 3: Ưu nhược phương pháp sắc ký lỏng A Thời gian gian làm ổn định cột sắc ký sau lần chạy lâu B Đầu dò hiệu cao, độ nhạy cao C So với sắc ký khí, sắc ký lỏng kỹ thuật chậm D Phân tích hợp chất đa vịng rau CÁM ƠN ĐÃ LẮNG NGHE! ... độ phân giải thấp so với sắc ký khí Ứng dụng HPLC phân tích thực phẩm 1 /Phân tích chất đa lượng có thực phẩm 2/Đo lường chất lượng nước 3 /Phân tích đường nước giải khát nước ép trái 4 /Phân tích. .. Martin (19 10-2002) 19 41: Martin Synge => Lý thuyết sắc ký phân bố (khí-lỏng) Synge (19 14 -19 94) LỊCH SỬ HÌNH THÀNH 19 46 -19 49:Cremer, Prior, Keulemans => Máy sắc ký khí Erika Cremer (19 00 -19 96) Fritz... khí phân tích thực phẩm Phân tích 20 amino acid thực phẩm, chế phẩm sinh học Phân tích mẫu bệnh phẩm, mẫu ngộ độc Methanol, Trichloroacetic, Benzen, Toluen,… máu, nước tiểu Phân tích BTX (Benzen