Microsoft Word 00 a1 loinoidau TV docx 34 Lã Văn Hiền, Vũ Mạnh Tuyền, Bùi ðình Lãm KHẢ NĂNG HÌNH THÀNH MÔ SẸO VÀ TÁI SINH CÂY DÂU TÂY TỪ LÁ CALLUS INDUCEMENT AND STRAWBERRY PLANT REGENERATION FROM LEA[.]
34 Lã Văn Hiền, Vũ Mạnh Tuyền, Bùi ðình Lãm KHẢ NĂNG HÌNH THÀNH MƠ SẸO VÀ TÁI SINH CÂY DÂU TÂY TỪ LÁ CALLUS INDUCEMENT AND STRAWBERRY PLANT REGENERATION FROM LEAVES Lã Văn Hiền, Vũ Mạnh Tuyền, Bùi ðình Lãm Trường ðại học Nông Lâm, ðại học Thái Nguyên (TUAF); lambk18052005@gmail.com Tóm tắt - Hạt dâu tây (Fragaria vescaL.) ñược xử lý 4oC ngày nuôi nảy mầm môi trường MS tuần, dâu tây dùng làm vật liệu để cảm ứng mơ sẹo ñiều kiện tối 10 ngày sáng 20 ngày môi trường MS bổ sung 0,2 mg/l (2,4-D) 1,0 mg/l (TDZ), sau – tuần mô sẹo xuất với tỷ lệ 85,3% Mô sẹo tái sinh nhân nhanh môi trường MS bổ sung BAP 0,2 mg/l TDZ 1,0 mg/l Khả hình thành chồi tốt 91,7% 60,6% nồng ñộ BAP 0,2 mg/l kết hợp TDZ 1,0 mg/l Kinetin 0,2 mg/l kết hợp TDZ 1,0 mg/l Hệ số nhân chồi thu 10,2 chồi 4,38 chồi hai cơng thức Dâu tây có khả rễ cao mơi trường MS có IBA 0,5 mg/l, tỷ lệ rễ trung bình đạt 92,8%, trung bình – rễ/cây, chiều dài rễ dao ñộng 0,8 – 3,2 cm Kết cho thấy nhân giống dâu tây thông qua mơ sẹo có khả tái sinh hệ số nhân giống cao Abstract - Strawberry seeds (Fragaria vescaL.) are processed at 4°C for days and are germinated on MS medium for weeks In this study, the strawberry leaves tissue is used to induce callus in the dark for 10 days and 20 days light on MS medium supplemented with 0.2 mg/l (2,4-D) and 1.0 mg/l (TDZ), after – weeks of callus appearance with 85.3 percent The callus regenerates on MS medium supplemented with BAP 0.2 mg/l and TDZ 1.0 mg/l The callus regenerates buds well with 91.7 percent and 60.6 percent at the concentrations of BAP 0.2 mg/l combined with TDZ 1.0 mg/l and Kinetin 0.2 mg/l combined with TDZ 1.0 mg/l, respectively Shoots multiply with 10.2 buds and 4.38 in the two formulations above, after 10 weeks Strawberries have high roots on MS medium supplemented with IBA 0.5 mg/l, The average of roots is 92.8 percent, averaging 3- roots/plant The length of roots is from 0.8 to 3.2 cm The results indicate that breeding strawberries through callus results in high regeneration and propagation coefficient Từ khóa - Dâu tây, in vitro, mơ sẹo, tái sinh, TDZ Key words - Strawberry, in vitro, callus, regeneration, TDZ ðặt vấn đề Dâu tây có nguồn gốc từ châu Mỹ loại ñược ưa chuộng giới Hiện nay, nguồn dâu tây sản xuất Việt Nam chủ yếu nhập từ Mỹ, Nhật Bản số giống ñược nhập nội từ Isarel Xuất phát từ thực tế cho thấy phương pháp nhân giống truyền thống thân bị tách từ thân chưa thực mang lại hiệu quả, hệ số nhân giống khơng cao lây nhiễm số bệnh từ mẹ (Dương Tấn Nhựtet al., 2004) Hiện nay, ni cấy đỉnh sinh trưởng tạo giống bệnh phương pháp có hiệu tốt nhân giống in vitro dâu tây ñã ñược nghiên cứu Tuy nhiên, việc sử dụng đỉnh sinh trưởng để ni cấy có ảnh hưởng ñến sức sống mẹ số lượng mẫu để phục vụ ni cấy khơng có nhiều Vì vậy, việc tối ưu nguồn vật liệu cho nuôi cấy vấn đề quan trọng nhân giống vơ tính.Trước ñây, nhiều nghiên cứu nhân giống dâu tây cho thấy tái sinh từ mô sẹo cảm ứng từ cho hiệu cao (Nehra et al., 1990; Yildirim Turker, 2014; Zakariaet al.,2014) Hình thức tái sinh dâu tây tập trung chủ yếu từ vật liệu khác (Nehra et al., 1990,Husaini Abdin, 2007), cuống (Debnath, 2005, 2006), nụ hoa (Lis, 1993), thân (Graham, 1995), kèm, rễ (Passey et al., 2003) số phận khác ñã ñược báo cáo.Tuy nhiên ảnh hưởng chất điều hịa sinh trưởng 2,4-D, BAP TDZ đến hình thành mơ sẹo hệ số nhân nhanh dâu tây chưa ñược nghiên cứu rõ ràng ðể hiểu ñược vai trò 2,4-D, BAP TDZ tiến hành khảo sát giai đoạn hình thành mơ sẹo nhân nhanh chồi sau tái sinh Vì vậy, nội dung báo trình bày kết việc ứng dụng 2,4-D, BAP TDZ trình nhân nhanh giống dâu tây Vật liệu phuơng pháp nghiên cứu 2.1 Vật liệu nghiên cứu Vật liệu giống dâu tây (Fragaria vescaL.) ñược cung cấp từ Viện Khoa học sống, trường ðại học Nông Lâm Thái Nguyên Lá dâu tây tuần tuổi ñược sử dụng làm vật liệu để ni cấy tạo mơ sẹo 2.2 Phương pháp nghiên cứu Nuôi cấy tạo vật liệu Khử trùng hạt cồn 70% 30 giây NaClO 0,1% phút, tráng nước cất vô trùng Tiến hành gieo hạt môi trường MS sau tuần lấy để tạo mơ sẹo.Lá dâu tây lựa chọn làm mẫu ni cấy Mẫu cắt thành mảnh nhỏ có kích thước khoảng x mm Phương pháp tạo mô sẹo tái sinh dâu tây từ mảnh ñược tiến hành dựa nghiên cứu Nehra et al(1990) Cảm ứng mơ sẹo từ mảnh Tạo mơ sẹo bố trí theo thí nghiệm sau: Ảnh hưởng 2,4-D kết hợp TDZ đến khả tạo mơ sẹo Thí nghiệm gồm công thức bao gồm: CT1: 0,1 mg/l (2,4-D) + 0,5 mg/l (TDZ); CT2: 0,2 mg/l (2,4-D) + 0,5 mg/l (TDZ); CT3: 0,5 mg/l (2,4-D) + 0,5 mg/l (TDZ); CT4: 0,1 mg/l (2,4-D) + 1,0 mg/l (TDZ); CT5: 0,2 mg/l (2,4-D) + 1,0 mg/l (TDZ); CT6: 0,5 mg/l (2,4-D) + 1,0 mg/l (TDZ) Ảnh hưởng 2,4-D kết hợp TDZ đến khả tạo mơ sẹo Thí nghiệm gồm công thức bao gồm:CT1: 0,1 mg/l (2,4-D) + 0,5 mg/l (TDZ); CT2: 0,2 mg/l (2,4-D) + 0,5 mg/l (TDZ); CT3: 0,5 mg/l (2,4-D) + 0,5 mg/l (TDZ); CT4: 0,1 mg/l (2,4-D) + 1,0 mg/l (TDZ); CT5: 0,2 mg/l (2,4-D) + 1,0 mg/l (TDZ); CT6: 0,5 mg/l (2,4-D) + 1,0 mg/l (TDZ) ISSN 1859-1531 - TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ ðẠI HỌC ðÀ NẴNG, SỐ 3(112).2017-Quyển Tái sinh chồi tạo hoàn chỉnh Sau mơ sẹo hình thành với độ tuổi phù hợp chuyển sang mơi trường tái sinh chồi có bổ sung BAP TDZ theo cơng thức thí nghiệm sau: Ảnh hưởng BAP TDZ ñến khả tái sinh nhân chồi: Thí nghiêm tái sinh chồi bố trí BAP nồng ñộ 0,0; 0,1; 0,2; 0,3; 0,5 1,0 mg/l Thí nghiệm nhân nhanh chồi bao gồm cơng thức sau CT1: 0,2 mg/l (BAP) + 0,0 mg/l (TDZ); CT2: 0,2 mg/l (BAP) + 0,1 mg/l (TDZ); CT3: 0,2 mg/l (BAP) + 0,3 mg/l (TDZ); CT4: 0,2 mg/l (BAP) + 0,5 mg/l (TDZ); CT5: 0,2 mg/l (BAP) + 1,0 mg/l (TDZ); CT6: 0,5 mg/l (BAP) + 1,0 mg/l (TDZ); CT7: 1,0 mg/l (BAP) + 0,5 mg/l (TDZ) Ảnh hưởng Kinetin TDZ ñến khả tái sinh nhân chồi: Thí nghiêm tái sinh chồi bố trí kinetin nồng ñộ 0,0; 0,1; 0,2; 0,3; 0,5 1,0 mg/l Thí nghiệm nhân nhanh chồi bao gồm cơng thức sau CT1: 0,0 mg/l (kinetin) + 1,0 mg/l (TDZ); CT2: 0,1 mg/l (kinetin) + 1,0 mg/l (TDZ); CT3: 0,2 mg/l (kinetin) + 1,0 mg/l (TDZ); CT4: 0,3 mg/l (Kinetin) + 1,0 mg/l (TDZ); CT5: 0,5 mg/l (kinetin) + 1,0 mg/l (TDZ); CT6: 1,0 mg/l (kinetin) + 1,0 mg/l (TDZ) 35 Ảnh hưởng IBA đến khả rễ: Thí nghiệm gồm cơng thức, IBA có nồng độ 0,0 mg/l; 0,1 mg/l; 0,3 mg/l; 0,5 mg/l; 0,7 mg/l 1,0 mg/l Mơi trường sử dụng cho thí nghiệmlà: MS + inositol 100 mg/l + agar 5,4 g/l + 30g saccharose/l pH = 5,6 – 5,8 Cây có rễ khỏe trồng giá thể đất: mùn cưa hun (1:3) ñiều kiện nhà lưới Phương pháp xử lý số liệu Kết thí nghiệm xử lý thống kê phần mềm Excell 2003 IRRISTAT 5.0 Kết thảo luận 3.1 Ảnh hưởng 2,4–D TDZ đến tạo mơ sẹo Kết bảng cho thấy kết hợp 2,4-D TDZ cho kết tốt công thức với tỷ lệ mẫu tạo mơ sẹo đạt 85,3% Tiếp đến công thức với 72,5% công thức có tỷ lệ 61,6% mơ sẹo hình thành Ở cơng thức giảm tỷ lệ TDZ xuống 0,5 mg/l cho kết tạo mô sẹo thấp Tuy nhiên, nồng độ TDZ cơng thức 3, 1,0 mg/l công thức có nồng độ 2,4-D thấp cơng thức khác cho thấy nồng độ 2,4-D có ảnh hưởng đến khả tạo mô sẹo từ dâu tây Bảng Ảnh hưởng 2,4-D TDZ ñến khả tạo mô sẹo dâu tây CT TDZ (mg/l) 2,4D (mg/l) Tỷ lệ mẫu tạo mơ sẹo (%) Hình thái mô sẹo Trắng, xốp 0,5 0,1 56,8d 0,5 0,2 57,6d Trắng, xốp 0,5 61,0c Trắng, xốp Trắng, cứng 0,5 1,0 0,1 72,5b 1,0 0,2 85,3a Trắng, cứng 1,0 0,5 61,6c Trắng, cứng CV% 4,3 LSD05 1,7 CT: Công thức Kết phân hạng so sánh Duncan: a, b, c, d có mức ý nghĩa P ≤ 0.05 Mỗi cơng thức thí nghiệm lặp lại lần A B C D E F Hình Khả phát sinh mô sẹo môi trường MS bổ sung 2,4-D TDZ sau tuần nuôi cấy A.0,1 mg/l(2,4-D) + 0,5 mg/l (TDZ); B.0,2 mg/l (2,4-D) +0,5 mg/l (TDZ); C.0,5 mg/l (2,4-D) + 0,5 mg/l (TDZ); D.0,1 mg/l (2,4-D) + 1,0 mg/l (TDZ); E.0,2 mg/l (2,4-D) +1,0 mg/l (TDZ); F 0,5 mg/l (2,4-D) + 1,0 mg/l (TDZ) Quan sát mơ sẹo CT5 - E có chất lượng tốt Tạo mô sẹo bước q trình ni cấy in vitro thực vật Với mục đích tái sinh dâu tây thơng qua mơ sẹo, chúng tơi tiến hành ni cấy mảnh mơi trường MS có bổ sung 2,4D TDZ nồng độ khác Trạng thái mơ sẹo sau tuần ni cấy ghi nhận hình Vai trị auxin cytokinin q trình hình thành mơ sẹo ni cấy mơ báo cáo (Popescu et al., 1997; Letham et al., 1974; Akiyoshi et al.,1983; Ara et al., 2012) Gần ñây kết tái sinh dâu tây thông qua mô sẹo sử dụng 2,4-D TDZ ñã ñược báo cáo (Dương Tấn Nhựt et al., 2004; Yildirim Turker, 2014) Dương Tấn Nhựt cộng (2004) cho kết hợp 2,4-D 0,1 mg/l TDZ 1,0 mg/l có khả phát sinh mô sẹo cao nuôi cấy dâu tây mơi trường MS Kết thí nghiệm chúng tơi cho thấy nồng ñộ 2,4-D cao (0,5 – 1,0 mg/l) thấp ñều ảnh hưởng ñến tỷ lệ mẫu hình thành mơ sẹo chất luợng mơ sẹo (Bảng 1) Kết ñược ghi 36 Lã Văn Hiền, Vũ Mạnh Tuyền, Bùi ðình Lãm nhận Dương Tấn Nhựt et al (2004) Yildirim Turker (2014) Với kết thu ñược 2,4-D 0,2 mg/l kết hợp với TDZ 1,0 mg/l phù hợp cho nghiên cứu tạo mô sẹo từ 3.2 Ảnh hưởng BAP, Kinetin TDZ ñến tái sinh nhân chồi Bảng Ảnh hưởng BAP, TDZ ñến tái sinh nhân chồi BAP (mg/l) CT BAP + TDZ (mg/l) Tỷ lệ mô sẹo tái sinh (%) Hệ số nhân chồi (chồi) Hình thái chồi CT Tỷ lệ mơ sẹo tái sinh (%) Hệ số nhân chồi (chồi) Hình thái chồi 0,0 0,0d 0,0 + 0,2 + 0,0 15,6e 4,3 +++ 0,1 5,5c 4,4 ++ 0,2 + 0,1 35,5d 4,8 +++ 0,2 11,7a 4,8 +++ 0,2 + 0,3 47,0c 8,4 +++ 0,3 8,5b 3,0 +++ 0,2 + 0,5 88,1b 8,0 +++ 0,5 7,7bc 3,2 +++ 0,2 + 1,0 91,7a 10,2 +++ 1,0 6,2c 0,5 + 1,0 86,2b 9,7 ++ 1,0 + 0,5 77,0bc 9,2 ++ - - 3,1 ++ - - - CV% 4,7 7,2 CV% 5,0 4,1 LSD05 2,3 2,8 LSD05 1,3 2,6 CT: Công thức Chất lượng chồi :(+) Vàng nhỏ, (++) Xanh nhỏ, (+++) Xanh mập Kết phân hạng so sánh Duncan: a, b,bc, c, d có mức ý nghĩa P ≤ 0.05 Mỗi cơng thức thí nghiệm lặp lại lần Bảng thể ảnh hưởng BAP ñến tái sinh nhân chồi dâu tây, sử dụng ñơn lẻ BAP mơi trường MS có nồng độ từ 0,1 đến 1,0 mg/l cho thấy tỷ lệ mô sẹo tái sinh chồi 5,5% đến 11,7% Trong đó, cơng thức với nồng ñộ BAP 0,2 mg/l cho tỷ lệ mô sẹo tái sinh 11,7% giảm dần công thức (Bảng 2) Hệ số nhân chồi ñạt 4,8 chồi công thức giảm dần công thức có nồng độ BAP cao Hơn nữa, BAP 0,2 mg/l kết hợp với TDZ nồng ñộ 0,1–1,0 mg/l cho thấy số luợng mô sẹo tái sinh cao so với cơng thức sử dụng BAP đơn lẻ Nồng độ TDZ tăng cơng thức đến công thức ứng với tỷ lệ mô sẹo tái sinh tăng dần từ 35,5% đến 91,7% Trong cơng thức BAP 0,2 mg/l TDZ 1,0 mg/l cho kết tỷ lệ tái sinh chồi tốt Tuy nhiên, tỷ lệ tái sinh chồi giảm công thức tỷ lệ BAP/TDZ thay ñổi (Bảng 2) Bảng Ảnh hưởng Kinetin, TDZ ñến tái sinh nhân chồi Kinetin (mg/l) CT 0,0 0,2 Kinetin + TDZ (mg/l) Tỷ lệ mô sẹo tái sinh (%) Hệ số nhân chồi (chồi) Hình thái chồi 0,0d 0,0 + 49,4 a 4,8 ++ Tỷ lệ mô sẹo tái sinh (%) Hệ số nhân chồi (chồi) Hình thái chồi 0,0 + 1,0 18,2d 4,08 +++ 0,1 + 1,0 59,7 a 4,38 +++ a 4,38 +++ CT b 4,4 +++ 0,2 + 1,0 60,6 0,3 20,1 0,5 17,0c 3,3 +++ 0,3 + 1,0 52,1b 4,07 +++ 1,0 17,8c 3,9 +++ 0,5 + 1,0 51,5bc 3,91 +++ 1,0 + 1,0 46,4c 3,89 +++ - - - - - CV% 5,7 7,3 CV% 2,0 5,3 LSD05 3,5 4,1 LSD05 1,1 2,0 CT: Công thức Chất lượng chồi : (+) Vàng nhỏ, (++) Xanh nhỏ, (+++) Xanh mập Kết phân hạng so sánh Duncan: a, b,bc, c, d có mức ý nghĩa P ≤ 0.05 Mỗi cơng thức thí nghiệm lặp lại lần ISSN 1859-1531 - TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ ðẠI HỌC ðÀ NẴNG, SỐ 3(112).2017-Quyển A B C D E F G H I Hình Khả tái sinh nhân chồi môi trường MS có bổ sung BAP TDZ Giai đoạn mơ sẹo môi trường khác (A) 2,4–D 0,5 mg/l + TDZ 1,0 mg/l; (B) 2,4–D 0,2 mg/l + TDZ 0,5 mg/l; (C) 2,4 – D 0,2 mg/l + TDZ 1,0 mg/l sau tuần ni cấy Giai đoạn tái sinh chồi nhân nhanh chồi thể (D, G) BAP 0,1 mg/l + TDZ 1,0 mg/l ; (E, H) Kinetin 0,2 mg/l + TDZ 1,0 mg/l; (F, I) BAP 0,2 mg/l + TDZ 1,0 mg/l Kết cho thấy kinetin nồng ñộ 0,2 mg/l ñến 1,0 mg/l có khả kích thích hình thành chồi dâu tây thông qua tỷ lệ chồi tái sinh dao ñộng từ 17% ñến 49,4% Kinetin nồng ñộ thấp (0,2 mg/l) cho thấy hiệu tái sinh chồi nhân chồi tốt so với cơng thức có nồng ñộ kinetin cao (Bảng 3) Sự kết hợp TDZ kinetin thu ñược tỷ lệ chồi tái sinh dao ñộng 18,2% ñến 60,6% Tỷ lệ chồi tái sinh hệ số nhân chồi có sai khác cơng thức thí nghiệm, tăng nồng độ kinetin từ 0,0 – 1,0 mg/l thu ñược tỷ lệ chồi phát sinh hệ số nhân chồi có xu hướng giảm dần, cụ thể cơng thức đối chứng kinetin nồng ñộ 0,0 mg/l TDZ 1,0 mg/l cho tỷ lệ chồi phát sinh 18,2% Các công thức có tỷ lệ chồi phát sinh giảm dần, kết 52,1%, 51,5%, 46,4% Môi trường bổ sung TDZ 1,0 mg/l kết hợp kinetin 0,2 mg/l cho hệ số nhân cao 60,6% Tương tự, hệ số nhân chồi tương ứng giảm dần từ công thức ñến 5, từ 4,38 xuống 3,89 chồi Mặt khác, kinetin nồng ñộ thấp (0,2 – 0,5 mg/l) hỗ trợ cho q trình kéo dài chồi dâu tây ñược báo cáo (Zakaria et al., 2014) Vì vậy, kinetin nồng ñộ 0,2 mg/l 37 kết hợp với TDZ 1,0 mg/l có hiệu nhân chồi giúp chồi phát triển chiều cao Sự phát sinh hình thái mơ thực vật chịu điều hịa tỷ lệ cytokinin auxin Nhiều nghiên cứu sử dụng BAP ñơn lẻ cho nhân giống dâu tây ñã ñược báo cáo (Dương Tấn Nhựt et al., 2004; Biswas et al., 2008; Ara et al., 2012; Yildirim and Turker, 2014) Vai trị auxin có ý nghĩa việc phân chia tế bào, kích thích phát triển tế bào cytokinin kiểm sốt hình thành chồi (Zakaria et al., 2014) Tuy nhiên, nhiều nghiên cứu trước cân cytokinin auxin có tác dụng tốt cho giai đoạn nhân chồi (Letham et al., 1974; Ara et al.,2012) BAP nồng ñộ thấp 0,1 – 0,2 mg/l kết hợp với TDZ 1,0 mg/l cho việc tái sinh chồi dâu tây ñã ñược công bố (Zakaria et al., 2014; Yildirim Turker, 2014) Theo Yildirim Turker (2014), việc tái sinh chồi có kết hợp BAP 0,2 mg/l TDZ 1,0 mg/l cho hiệu cao so với việc sử BAP ñơn lẻ nhân giống dâu tây Bên cạnh nhiềunghiên cứu chứng minh vai trị TDZ hình thành chồi dâu tây (Passey et al., 2003; Dương Tấn Nhựt, 2004; Zakaria et al., 2014; Yildirim Turker, 2014) Trong nghiên cứu TDZ 1,0 mg/l kết hợp với BAP 0,2 mg/l kinetin 0,2 mg/l cho thấy hiệu tái sinh nhân chồi dâu tây 3.3 Ảnh hưởng IBA ñến khả rễ IBA ñược biết ñến với chức cảm ứng phát sinh rễ nhiều loại trồng ñược nghiên cứu thử nghiệm với nồng ñộ từ 0,3 – 1,0 mg/l Kết thí nghiệm cho thấy cơng thức (IBA 0,5 mg/l) có kết tỷ lệ chồi rễ số rễ/chồi tốt (62,8% 4,2 rễ/chồi) Môi trường bổ sung IBA cho số rễ trung bình/chồi, tỷ lệ chồi rễ, chiều dài rễ tăng lên rõ rệt so với đối chứng Ở cơng thức (đối chứng) khơng bổ sung IBA có tỷ lệ chồi rễ thấp cơng thức có bổ sung IBA, số rễ trung bình/chồi đạt 2,1 rễ, chiều dài rễ 1,87cm Nồng ñộ IBA tăng từ 0,7 - 1,0 mg/l tỷ lệ chồi rễ giảm dần từ 47,5% xuống 36,8%, số rễ dao ñộng từ 3,5 – 3,6 rễ/chồi Tuy nhiên, chiều dài rễ lại tăng theo nồng ñộ IBA từ 0,3 ñến 1,0 mg/l Theo Yildirim Turker (2014) ñưa kết IBA nồng ñộ 0,5 mg/l cho tỷ lệ chồi rễ cao 90% giống dâu tây (Fragaria vesca L.) Sự khác biệt ảnh hưởng yếu tố giống Từ kết ñạt ñược cho thấy nồng độ IBA 0,5 mg/l phù hợp để kích thích rễ dâu tây Bảng Ảnh hưởng IBA ñến khả rễ CT IBA (mg/l) Tỷ lệ chồi rễ (%) Chiều dài rễ (cm) Số rễ/ chồi 0,0 12,5 1,87 2,1 0,3 41,9 2,05 3,5 0,5 62,8 2,31 4,2 0,7 47,5 2,45 3,5 1,0 36,8 2,58 3,6 CV% 5,0 6,4 4,8 LSD05 1,8 2,1 2,4 CT: Công thức Kết phân hạng so sánh Duncan: a, b, c, d, ecó mức ý nghĩa P ≤ 0.05 Mỗi cơng thức thí nghiệm lặp lại lần 38 Lã Văn Hiền, Vũ Mạnh Tuyền, Bùi ðình Lãm [2] [3] [4] [5] A B C D E [6] Hình Hình thành rễ mơi trường MS bổ sung nồng độ IBA khác A: IBA 0,1 mg/l; B: IBA 0,3 mg/l; C: IBA 0,5 mg/l; D: IBA 0,7 mg/l; E: 1,0 mg/l Sau10 tuầnnuôicấychồirarễtốt côngthức IBA 0,5 – 1,0 mg/l Số rễ dao ñộng – rễ/ Kết luận Từ kết nghiên cứu khả hình thành mô sẹo tái sinh dâu tây từ cho thấy, phát sinh mô sẹo chịu ảnh hưởng 2,4-D TDZ hiệu tái sinh, nhân chồi chịu chi phối nồng ñộ BAP, kinetin TDZ Kết nghiên cứu ñã xác ñịnh ñược 2,4-D 0,2 mg/l kết hợp với TDZ 1,0 mg/l hỗ trợ phát sinh mơ sẹo tốt Khả hình thành chồi từ mơ sẹo đạt hiệu cao môi trường MS bổ sung BAP 0,2 mg/l kinetin 0,2 mg/l kết hợp TDZ 1,0 mg/l ðồng thời IBA 0,5 mg/l cho thấy hiệu rễ tốt sử dụng cho q trình cảm ứng rễ Do vậy, ñiều chỉnh hợp lý chất ñiều hoà sinh truởng mang lại hiệu cao nhân giống dâu tây TAI LIỆU THAM KHẢO [1] Ara T, Karim R, Karim MR, Islam R, Hossain M, 2012 Callus induction and shoot regeneration in strawberry (Fragaria x [7] [8] [9] [10] [11] [12] [13] ananassa Duch.) International Journal of Biosciences (IJB) (10): 93-100 Biswas MK, Islam R, Hossain M, 2008 Micro propagation and field evaluation of strawberry in Bangladesh Journal of Agricultural Technology 4:167-82 Debnath SC, 2005 Strawberry sepal: another explant for thidiazuron-induced adventitious shootregeneration.In Vitro Cell Dev Biol Plant 41: 671-676 Debnath SC, 2006 Zeatin overcomes thidiazuron-induced inhibition of shoot elongation and promotes rooting in strawberry culture in vitro J Hortic Sci Biotechnol 81: 349-54 Dương Tấn Nhựt, Lê Thị Thanh Xuân, Nguyễn Hồng Vũ, Nguyễn Văn Bình, Nguyễn Trí Minh, Nguyễn Thị Thanh Hằng , 2004 Cải tiến hệ thống nhân giống dâu tây ni cấy túi nilon Tạp chí Cơng nghệ sinh học 2(2): 227-234 Graham J, McNicol RJ, Grieg K, 1995 Towards genetic based insect resistance in strawberry using the Cowpea tryps in inhibitor gene Ann Appl Biol 127:163-173 Husaini AM, Abdin MZ, 2007 Interactive effect of light, temperature and TDZ on the regeneration potential of leaf discs of Fragaria× ananassa Duch In Vitro Cell Dev Biol Plant 43:576-584 Lis EK, 1993 Strawberry plant regeneration by organogenesis from peduncle and stolon segements Acta Hortic 348:435-438 Nehra NS, Stushnoff C, Kartha KK, 1990 Regeneration of plants from immature leaf-derived callus of strawberry (Fragaria × ananassa) Plant Science66 (1): 119-126 Letham DS, 1974 Regulators of cell division in plant tissues The cytokinins of coconut milk Physiol Plant 32: 66-70 Passey AJ, Barrett KJ, James DJ, 2003 Adventitious shoot regeneration from seven commercial strawberry cultivars (Fragaria x ananassa Duch.) using a range of explant types PlantCell Rep 21: 397-401 Yildirim AB, Turker AU, 2014 Effects of regeneration enhancers on micropropagation ofFragaria vesca L and phenolic content comparison of field-grown andin vitro-grown plant materials by liquid chromatography-electrospray tandem mass spectrometry (LC–ESIMS/MS) Scientia Horticulturae 169: 169–178 Zakaria H, Hussein GM, Abdel Hadi AH, and Abdallah NA, 2014 Improvedregeneration and transformation protocols for three strawberry cultivars GM crops & Food: Biotechnology inagriculture and the Food chain 5(1): 27–35 (BBT nhận bài: 21/02/2017, hoàn tất thủ tục phản biện: 21/03/2017) ... 2,4-D TDZ sau tuần nuôi cấy A.0,1 mg/l(2,4-D) + 0,5 mg/l (TDZ); B.0,2 mg/l (2,4-D) +0,5 mg/l (TDZ); C.0,5 mg/l (2,4-D) + 0,5 mg/l (TDZ); D.0,1 mg/l (2,4-D) + 1,0 mg/l (TDZ); E.0,2 mg/l (2,4-D)... 3,2 +++ 0,2 + 1,0 91,7a 10,2 +++ 1,0 6,2c 0,5 + 1,0 86,2b 9,7 ++ 1,0 + 0,5 77,0bc 9,2 ++ - - 3,1 ++ - - - CV% 4,7 7,2 CV% 5,0 4,1 LSD05 2,3 2,8 LSD05 1,3 2,6 CT: Công thức Chất lượng chồi :(+)... 0,3 + 1,0 52,1b 4,07 +++ 1,0 17,8c 3,9 +++ 0,5 + 1,0 51,5bc 3,91 +++ 1,0 + 1,0 46,4c 3,89 +++ - - - - - CV% 5,7 7,3 CV% 2,0 5,3 LSD05 3,5 4,1 LSD05 1,1 2,0 CT: Công thức Chất lượng chồi : (+) Vàng