TCVN SỮA CƠ ĐẶC VÀ SỮA ĐẶC CÓ ĐƯỜNG - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO - PHƯƠNG PHÁP KHỐI LƯỢNG (PHƯƠNG PHÁP CHUẨN)

TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 8109 : 2009 ISO 1737 : 2008 SỮA CƠ ĐẶC VÀ SỮA ĐẶC CĨ ĐƯỜNG - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO - PHƯƠNG PHÁP KHỐI LƯỢNG (PHƯƠNG PHÁP CHUẨN) Evaporated milk and sweetened condensed milk - Determination of fat content - Gravimetric method (Reference method) Lời nói đầu TCVN 8109 : 2009 hồn tồn tương đương với ISO 1737 : 2008; TCVN 8109 : 2009 Ban kỹ thuậ tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F12 Sữa sản phẩm sữa biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học Cơng nghệ cơng bố SỮA CƠ ĐẶC VÀ SỮA ĐẶC CÓ ĐƯỜNG - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO - PHƯƠNG PHÁP KHỐI LƯỢNG (PHƯƠNG PHÁP CHUẨN) Evaporated milk and sweetened condensed milk - Determination of fat content Gravimetric method (Reference method) CẢNH BÁO – Khi áp dụng tiêu chuẩn liên quan đến vật liệu, thiết bị thao tác gây nguy hiểm Tiêu chuẩn đưa hầu hết tất vấn đề an toàn liên quan đến việc sử dụng chúng Người sử dụng tiêu chuẩn phải tự thiết lập thao tác an tồn thích hợp xác định khả áp dụng giới hạn quy định trước sử dụn tiêu chuẩn Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp chuẩn để xác định hàm lượng chất béo tất loại sữa đặc sữa đặc có đường (sữa đặc có đường khơng đường dạng lỏng) Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 7150 (ISO 835), Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Pipet chia độ TCVN 7153 (ISO 1042), Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Bình định mức ISO 3889, Milk and milk products - Determination of fat content - Mojonnier type fat extraction flasks (Sữa sản phẩm sữa - Xác định hàm lượng chất béo kiểu Mojonnier) ISO 4788, Laboratory glassware - Graduated measuring cylinders (Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Ống đong chia độ) Thuật ngữ định nghĩa Trong tiêu chuẩn sử dụng thuật ngữ định nghĩa sau đây: 3.1 Hàm lượng chất béo sữa cô đặc sữa đặc có đường (fat content of evaporated milk and sweetened condensed milk) Phần khối lượng chất xác định phương pháp quy định tiêu chuẩn CHÚ THÍCH Hàm lượng chất béo tính phần trăm khối lượng Nguyên tắc Phần mẫu thử dung dịch etanol amoniac chiết ete dietyl dầu nhẹ Dung môi loại bỏ cách chưng cất cho bay Xác định khối lượng chất chiết CHÚ THÍCH Nguyên tắc thường gọi nguyên tắc Rose-Gottlieb Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích nước sử dụng nước cất nước khử khống nước có chất lượng tương đương, trừ có quy định khác Tất thuốc thử phải loại phân tích để lại lượng cặn không đáng kể thực phép thử theo quy định (xem 9.2.2) 5.1 Dung dịch amoniac, chứa NH3 khoảng 25% khối lượng, (20 = 910 g/l) CHÚ THÍCH Nếu khơng có sẵn dung dịch amoniac nồng độ sử dụng dung dịch có nồng độ biết trước cao (xem 9.4.2) 5.2 Etanol (C2H5OH), etanol bị metanol làm biến tính, có chứa phần thể tích etanol 94% (Xem A.5) 5.3 Dung dịch đỏ Congo Hòa tan g đỏ Congo (C32H22N6Na2O6S2) nước đựng bình định mức vạch dung tích 100 ml (6.14) Pha lỗng nước đến vạch CHÚ THÍCH Việc sử dụng dung dịch để phân biệt rõ lớp phân cách dung môi nước tùy chọn (xem 9.4.3) Có thể sử dụng dung dịch thị dạng lỏng khác với điều kiện chúng không ảnh hưởng đến kết xác định 5.4 Ete dietyl (C2H5OC2H5), không chứa peroxit (Xem A.3) có chứa khơng nhiều mg/kg chất chống oxi hóa phù hợp với yêu cầu phép thử trắng (xem 9.2.2, A.1 A.4) CẢNH BÁO - Việc sử dụng ete dietyl dẫn đến tình nguy hại Cần tuân thủ quy định an toàn xử lý, sử dụng thải bỏ hóa chất 5.5 Dầu nhẹ, có nhiệt độ sơi khoảng từ 30 oC đến 60 oC, tương đương pentan (CH3[CH2]3CH3) có điểm sôi 36 oC, phù hợp với yêu cầu cho phép thử trắng (xem 9.2.2, A.1 A.4) Nên sử dụng pentan pentan có độ tinh khiết cao chất lượng ổn định 5.6 Dung môi hỗn hợp Ngay trước sử dụng, trộn thể tích ete dietyl (5.4) dầu nhẹ (5.5) Thiết bị, dụng cụ CẢNH BÁO - Vì việc xác định buộc phải sử dụng dung môi bay dễ cháy, nên thiết bị điện dùng phải tuân theo quy định an toàn sử dụng dung môi Sử dụng thiết bị, dụng cụ phịng thử nghiệm thơng thường cụ thể sau: 6.1 Cân phân tích, có khả cân xác đến mg, đọc đến 0,1 mg 6.2 Máy ly tâm, có bình cầu chiết chất béo có ống chiết (6.6) quay từ 500 min-1 đến 600.min-1 để tạo gia tốc hướng tâm khoảng 80 g đến 90 g miệng bình chiết ống chiết Việc sử dụng máy ly tâm tùy chọn, khuyến cáo sử dụng loại thiết bị (xem 9.4.6) 6.3 Thiết bị chưng cất làm bay hơi, để chưng cất dung mơi etanol từ bình cầu bình đun sơi, làm bay từ cốc đĩa (xem 9.4.13) nhiệt độ không 100 oC 6.4 Tủ sấy, đốt nóng điện, có cửa thơng gió mở hồn tồn, trì nhiệt độ 102 oC  oC tồn khoang sấy Lị gắn với nhiệt kế thích hợp 6.5 Nồi cách thủy, trì nhiệt độ 30 oC đến 40 oC từ 40 oC đến 60 oC 6.6 Bình cầu chiết chất béo kiểu Mojonnier, quy định ISO 3889 CHÚ THÍCH Cũng dùng ống nghiệm chiết chất béo, có si phơng nối với chai rửa, quy trình có khác quy định phần Phụ lục B Các bình phải đậy nút bần chất lượng tốt, đậy nắp làm vật liệu khác [ví dụ cao su silicon polytetrafloetylen] không bị ảnh hưởng thuốc thử sử dụng Nút bần phải chiết ete dietyl (5.4), giữ 15 nhiệt độ 60 o C lớn sau ngâm nước cho chúng bão hịa trước sử dụng 6.7 Giá, để giữ bình chiết chất béo (hoặc ống chiết chất béo ) (6.6) 6.8 Chai rửa, thích hợp để dùng với dung mơi hỗn hợp (5.6) Không dùng chai rửa làm chất dẻo 6.9 Bình thu nhận chất béo, ví dụ bình đun sơi (đáy phẳng), có dung tích từ 125 ml đến 250 ml, bình nón có dung tích 250 ml, đĩa kim loại Nếu sử dụng đĩa kim loại, tốt đĩa thép khơng rỉ, đáy phẳng, có rãnh rót, đường kính từ 80 mm đến 100 mm có chiều cao khoảng 50 mm 6.10 Chất trợ sôi, không chứa chất béo, sứ không xốp cacbua silicon (tùy chọn trường hợp dùng đĩa kim loại) 6.11 Ống đong, dung tích ml 25 ml, phù hợp với yêu cầu loại A ISO 4788, dụng cụ thích hợp khác sản phẩm có liên quan 6.12 Pipet chia độ, dung tích 10 ml, phù hợp với yêu cầu loại A TCVN 7150 ISO 835 6.13 Bộ kẹp, kim loại để giữ bình, cốc đĩa 6.14 Bình định mức, vạch dung tích 100 ml phù hợp với yêu cầu loại A TCVN 7153 (ISO 1042) Lấy mẫu Mẫu gửi đến phòng thử nghiệm phải mẫu đại diện mẫu không bị hư hỏng bị biến đổi chất lượng suốt trình vận chuyển bảo quản Việc lấy mẫu không quy định tiêu chuẩn Nên lấy mẫu theo TCVN 6400 (ISO 707) Tất mẫu phòng thử nghiệm phải bảo quản nhiệt độ khoảng từ oC đến oC từ lấy mẫu tiến hành thử nghiệm Bảo quản mẫu hộp kín nhiệt độ 20 oC Chuẩn bị mẫu thử 8.1 Sữa cô đặc Lắc đảo chiều hộp chứa mẫu Mở hộp chứa mẫu rót từ từ mẫu sang hộp thứ hai (Có nắp đậy kín) Chuyển mẫu qua lại hai hộp để trộn, ý lấy hết chất béo thành phần khác mẫu dính lại thành đáy hộp thứ Cuối cùng, chuyển hết sản phẩm sang hộp thứ hai Khi mẫu đựng hộp kín, để hộp chưa mở nồi cách thủy (6.5) trì 40 oC đến 60 o C Cứ 15 lấy hộp lắc mạnh Sau 2h, lấy hộp để nguội đến nhiệt độ phòng Mở hẳn nắp dùng thìa dao trộn để trộn kỹ mẫu (Nếu chất béo bị tách khơng tiếp tục kiểm tra mẫu này) 8.2 Sữa đặc có đường Mở hộp đựng mẫu dùng thìa dao trộn để trộn kỹ Lắc hộp theo chiều lên xuống cho lớp phía phía góc hộp trộn với Chú ý lấy hết mẫu dính lại thành đáy hộp thứ Cuối cùng, chuyển hết sản phẩm sang hộp thứ hai (có nắp đậy kín) Đậy nắp hộp thứ hai Khi mẫu đựng hộp kín, để hộp chưa mở nồi cách thủy (6.5) trì 30 oC đến 40 o C Mở hộp, chuyển hết sữa cịn dính hộp sang đĩa đủ rộng để khuấy trộn kỹ thu sản phẩm đồng Khi mẫu đựng ống gập được, cắt ống chuyển lượng chứa bên ống sang bình Sau cắt mở hẳn ống chuyển hết sản phẩm ống sang bình 9 Cách tiến hành CHÚ THÍCH Cách khác, sử dụng ống chiết chất béo có gắn si phơng chai rửa (xem Chú thích 6.6) đưa Phụ lục B 9.1 Phần mẫu thử Trộn mẫu thử (Điều 8) cách khuấy sữa đặc có đường cách đảo ngược chai nhẹ nhàng ba lần bốn lần sữa cô đặc Cân ngay, từ 4,000 g đến 5,000 g mẫu sữa cô đặc từ 2,000 g đến 2,500 g sữa đặc có đường, xác đến mg, cho vào bình chiết chất béo (6.6) Phải chuyển tồn phần mẫu thử sang bầu (nhỏ) bình chiết chất béo 9.2 Phép thử trắng 9.2.1 Phép thử trắng phương pháp Tiến hành phép thử trắng đồng thời với phép xác định, sử dụng quy trình dùng loại thuốc thử, thay phần mẫu thử 10 ml nước (A.2) Khi mẫu trắng sử dụng cho mẻ mẫu thử gồm mẫu riêng rẽ khơng có điều kiện giống hồn tồn, cần đảm bảo quy trình cung cấp giá trị thử trắng để dùng tính tốn kết phù hợp hồn tồn với quy trình sử dụng cho mẫu thử riêng rẽ Nếu giá trị thu phép thử trắng vượt 1,0 mg, kiểm tra thuốc thử, trước chưa kiểm tra (9.2.2) Việc điều chỉnh giá trị lớn 2,5 mg cần nêu báo cáo thử nghiệm 9.2.2 Phép thử trắng thuốc thử Để kiểm tra chất lượng thuốc thử, tiến hành phép thử trắng quy định 9.2.1 Sử dụng thêm bình rỗng thu nhận chất béo, chuẩn bị theo quy định 9.3 với mục đích kiểm sốt khối lượng Các thuốc thử phải không để lại lượng cặn lớn 1,0 mg (xem A.1) Nếu thuốc thử để lại lượng cặn lớn 1,0 mg, xác định lượng cặn dung môi riêng rẽ cách chưng cất 100 ml ete dietyl (5.4) dầu nhẹ (5.5) Sử dụng bình thu nhận chất béo rỗng, chuẩn bị theo mơ tả với mục đích kiểm soát khối lượng, để thu khối lượng thực cặn không lớn 1,0 mg Rất dung mơi chứa chất bay mà bị giữ lại nhiều chất béo Nếu có dấu hiệu cho thấy có mặt chất thế, tiến hành phép thử trắng tất thuốc thử dung mơi, sử dụng bình thu nhận chất béo với khoảng 1g butterfat khan Nếu cần, chưng cất lại dung mơi có mặt g butterfat khan 100 ml dung môi Sử dụng dung môi sau chưng cất lại Thay thuốc thử, dung môi không đạt yêu cầu, chưng cất lại dung mơi 9.3 Chuẩn bị bình thu nhận chất béo Làm khơ bình thu nhận chất béo (6.9) vài hạt trợ sôi (6.10) tủ sấy (6.4) đặt 102 oC 1h CHÚ THÍCH Chất trợ sôi để giúp cho sôi nhẹ suốt trình loại bỏ dung mơi, đặc biệt trường hợp sử dụng bình thu nhận chất béo thủy tinh; tùy ý trường hợp dùng đĩa kim loại Bảo vệ bình thu nhận chất béo để tránh bụi để nguội đến nhiệt độ phịng cân (bình thủy tinh để 1h, đĩa kim loại 30 min) Khơng nên đặt bình tủ hút ẩm để tránh chưa đủ nguội thời gian làm nguội bị kéo dài Dùng kẹp (6.13) đặt bình thu nhận chất béo lên cân Cân bình thu nhận chất béo xác đến 1,0 mg CHÚ THÍCH Tốt dùng kẹp để tránh làm thay đổi nhiệt độ 9.4 Tiến hành xác định 9.4.1 Tiến hành xác định Thêm nước nhiệt độ khoảng 50 oC vào phần mẫu thử đựng bình chiết chất béo (9.1) để thu tổng thể tích từ 10 ml đến 11 ml Dùng nước để rửa phần mẫu thử đáy bình Lắc nhẹ làm ấm đến khoảng 50 oC nồi cách thủy (6.5) phần mẫu thử phân tán hoàn toàn Làm nguội mẫu thử đến nhiệt độ phòng vòi nước 9.4.2 Cho thêm ml dung dịch amoniac (5.1), thể tích tương ứng dung dịch amoniac đậm đặc (xem Chú thích 5.1), vào phần mẫu thử bình chiết chất béo (9.4.1) Lắc kỹ phần mẫu thử đựng bầu nhỏ bình chiết chất béo 9.4.3 Thêm 10 ml etanol (5.2) Lắc kỹ cách nhẹ nhàng cách cho lượng chứa bình chiết chất béo chảy chảy lại bầu lớn bầu nhỏ; không chất lỏng dâng lên gần cổ bình Tốt nên cho thêm hai giọt dung dịch đỏ Congo (5.3) 9.4.4 Thêm 25 ml ete dietyl (5.4) Đậy bình nút bần bão hòa nước đậy nút làm chất liệu khác làm ẩm nước (xem 6.6) Lắc mạnh bình vịng khơng lắc q mạnh để tránh tạo nhũ Trong trình lắc, giữ bình tư nằm ngang bầu nhỏ hướng lên trên, định kỳ cho chất lỏng bầu lớn chảy sang bầu nhỏ Làm mát bình dịng nước chảy đến nhiệt độ phòng, cần Mở nút cách cẩn thận, tráng nút cổ bình cầu dung mơi hỗn hợp (5.6) Dùng chai rửa (6.8) cho nước rửa chảy vào bình 9.4.5 Cho thêm 25 ml dầu nhẹ (5.5) Đậy bình nút bần nút khác làm ướt lại nước (ngâm vào nước) Lắc bình cầu nhẹ nhàng vịng 30 s mơ tả 9.4.3 Thực việc lắc mô tả 9.4.4 9.4.6 Cho ly tâm bình chiết chất béo đậy kín từ đến gia tốc quay từ 80 g đến 90 g Nếu khơng có máy li tâm (6.2), đặt bình cầu đậy kín giá đỡ (6.7) 30 thấy có lớp bề mặt rõ rệt phân biệt rõ với lớp chất lỏng Nếu cần, làm mát bình cầu dòng nước chảy đến nhiệt độ phòng 9.4.7 Cẩn thận tháo nút ra, dùng dung mơi hỗn hợp (5.6) để tráng nút vào phía cổ bình chiết chất béo Dùng chai rửa (6.8) để tráng bình cho nước rửa chảy vào bình cầu Nếu mặt lớp phân cách thấp chỗ thắt cổ bình, cần nâng cao mức lên chút cách nhẹ nhàng cho thêm nước theo thành bình (xem Hình 1) để dung mơi gạn dễ dàng CHÚ THÍCH Trong Hình Hình mơ tả ba loại bình quy định ISO 3889 chọn, điều khơng có nghĩa ưu tiên loại khác 9.4.8 Giữ bình chiết bầu nhỏ, cẩn thận gạn nhiều tốt lớp bề mặt vào bình thu nhận chất béo (xem 9.3) có chứa chất trợ sôi (6.10) trường hợp bình nón bình đun sơi (cịn đĩa kim loại tùy ý) Khơng gạn chút chất lỏng vào bình (xem Hình 2) 9.4.9 Tráng phía ngồi cổ bình chiết dung mơi hỗn hợp (6.6), thu lấy nước rửa vào bình thu nhận chất béo Chú ý không để dung môi hỗn hợp tràn ngồi thành bình chiết Tốt nhất, nên loại bỏ dung môi phần dung mơi khỏi bình nhận cách chưng cất làm bay mô tả 9.4.13 CHÚ DẪN Dung môi Lớp phân cách Lớp phân cách Lớp chất lỏng Lớp chất lỏng a Ở lần chiết thứ hai lần chiết thứ ba a Ở lần chiết thứ hai lần chiết thứ ba b Ở lần chiết thứ b Ở lần chiết thứ Hình - Trước gạn Hình - Sau gạn 9.4.10 Cho ml etanol (5.2) vào lượng chất chứa bình chiết chất béo Dùng etanol để tráng bên cổ bình lắc mô tả 9.4.3 9.4.11 Thực chiết lần hai cách lặp lại thao tác mô tả 9.4.4 đến hết 9.4.8 Chỉ dùng 15 ml ete dietyl (5.4) 15 ml dầu nhẹ (5.5) để thay cho 25 ml Dùng ete dietyl để tráng thành cổ bình chiết chất béo Nếu cần, nâng cao mặt lớp phân cách đến cổ bình (xem Hình 1) cách nhẹ nhàng cho thêm nước theo thành bình (xem Hình 1) để gạn hết dung mơi nhiều tốt (xem Hình 2) 9.4.12 Thực chiết lần ba, không cho thêm etanol, cách lặp lại thao tác mô tả 9.4.4 đến hết 9.4.8 Chỉ sử dụng 15 ml ete dietyl (5.4) 15 ml dầu nhẹ (5.5) Dùng ete dietyl để tráng bên cổ bình chiết chất béo Nếu cần, nâng cao mặt lớp phân cách đến cổ bình (xem Hình 1) cách nhẹ nhàng cho thêm nước theo thành bình để gạn dung mơi nhiều tốt (xem Hình 2) CHÚ THÍCH Lần chiết thứ ba bỏ qua sữa có hàm lượng chất béo nhỏ 1% khối lượng 9.4.13 Loại bỏ dung môi (kể etanol) hết tốt khỏi bình thu nhận chất béo cách chưng cất sử dụng bình đun sơi bình nón, cách làm bay sử dụng cốc có mỏ đĩa (xem 6.3) Tráng thành cổ bình nón, cách làm bay sử dụng cốc có mỏ đĩa (xem 6.3) Tráng thành cổ bình nón dung mơi hỗn hợp (5.6) trước bắt đầu chưng cất 9.4.14 Sấy bình thu nhận chất béo, bình nón bình đun sơi đăt chúng nằm nghiêng để dung mơi được, 1h để tủ sấy (6.4) nhiệt độ 102 oC Lấy bình thu nhận chất béo khỏi lò sấy kiểm tra xem chất béo hay chưa Nếu chất béo khơng trong, chất béo bị coi có tạp chất phải lặp lại tồn quy trình Nếu chất béo trong, bảo vệ bình thu nhận chất béo khỏi bụi để nguội bình (khơng thể để bình hút ẩm) đến nhiệt độ phịng cân (đối với bình thủy tinh tối thiểu 1h đĩa kim loại tối thiểu 30 min) Khơng lau bình thu nhận chất béo trước lúc cân Dùng kẹp (6.13) để đặt bình lên cân Cân bình thu nhận chất béo xác đến 1,0 mg 9.4.15 Sấy bình thu nhận chất béo, bình nón bình đun sơi đặt chúng nằm nghiêng để dung mơi được, 30 tủ sấy (6.4) nhiệt độ 102 oC Để nguội cân lại theo 9.4.14 Nếu cần, lặp lại quy trình đun nóng cân chênh lệch khối lượng bình thu nhận chất béo hai lần cân liên tiếp nhỏ 1,0 mg Ghi khối lượng tối thiểu khối lượng bình thu nhận chất béo chất chiết 10 Tính biểu thị kết 10.1 Tính Tính hàm lượng chất béo mẫu, wf, tính phần trăm khối lượng theo công thức (1): wf  (m1  m2 )  (m3  m4 ) 100% m0 m0 khối lượng phần mẫu thử (9.1), tính gam (g); m1 khối lượng bình thu nhận chất béo chất chiết được, xác định 9.4.15, tính gam (g); m2 khối lượng bình thu nhận chất béo chuẩn bị (9.3), tính gam (g); m2 khối lượng bình thu nhận chất béo chuẩn bị (9.3), tính gam (g); m3 khối lượng bình thu nhận chất béo sử dụng thử mẫu trắng (9.2) chất chiết xác định 9.4.15, tính gam (g); m4 khối lượng bình thu nhận chất béo (9.3) sử dụng phép thử trắng (9.2), tính gam (g) 10.2 Biểu thị kết Làm tròn kết đến hai chữ số thập phân 11 Độ chụm 11.1 Phép thử liên phòng thử nghiệm Các chi tiết phép thử liên phòng thử nghiệm phù hợp với ISO 5725 : 1986 1) (xem [2]) độ chụm phương pháp công bố [3] Các giá trị độ lặp lại độ tái lập biểu thị cho 95% mức xác suất áp dụng cho dải nồng độ chất khác với dải nồng độ chất nêu 11.2 Độ lặp lại Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử nghiệm riêng rẽ độc lập, thu sử dụng phương pháp, vật liệu thử giống hệt nhau, người phân tích, sử dụng thiết bị, khoảng thời gian ngắn, không 5% trường hợp lớn phần khối lượng chất béo của: a) 0,02 %, sản phẩm có hàm lượng chất béo < %; b) 0,03 %, sản phẩm có hàm lượng chất béo từ % đến %; c) 0,04 %, sản phẩm có hàm lượng chất béo từ % đến 10 %; d) 0,50 % tỷ lệ chất béo mẫu sản phẩm có hàm lượng chất béo > 10 %; 11.3 Độ tái lập Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử nghiệm riêng rẽ độc lập, thu tiến hành thử vật liệu thử giống hệt nhau, người phân tích khác thực hiện, sử dụng thiết bị khác phịng thử nghiệm khác nhau, khơng q 5% trường hợp lớn phần khối lượng chất béo của: a) 0,03 %, sản phẩm có hàm lượng chất béo < %; b) 0,04 %, sản phẩm có hàm lượng chất béo từ % đến %; c) 0,06 %, sản phẩm có hàm lượng chất béo từ % đến 10 %; d) % tỷ lệ chất béo mẫu sản phẩm có hàm lượng chất béo > 10 %; 12 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm thông tin sau: a) thông tin cần thiết nhận biết đầy đủ mẫu thử; b) phương pháp lấy mẫu sử dụng, biết; c) phương pháp thử sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này; d) tất điều kiện thao tác không quy định tiêu chuẩn này, xem tùy ý, với tình bất thường ảnh hưởng đến kết quả; e) việc điều chỉnh, giá trị lớn 2,5 mg thu phép thử trắng phương pháp; f) kết thử nghiệm thu đáp ứng yêu cầu độ lặp ghi kết cuối thu Phụ lục A 1) ISO 5725 : 1986 (hiện bị hủy bỏ) sử dụng để thu số liệu độ chụm (Tham khảo) Một số ý cách tiến hành A.1 Phép thử trắng để kiểm tra thuốc thử (xem 9.2.2) Trong phép thử trắng này, bình thu nhận chất béo dùng để kiểm tra khối lượng sử dụng để đảm bảo thay đổi điều kiện môi trường phịng cân ảnh hưởng nhiệt độ bình thu nhận chất béo không làm ảnh hưởng đến việc xem xét có mặt hay khơng có mặt chất khơng bay có phần chiết thuốc thử Bình dùng bình đối trọng trường hợp cần có hai đĩa cân Mặt khác, chênh lệch khối lượng biểu kiến (m - m4 cơng thức 10.1) bình kiểm chứng phải xem xét kiểm tra khối lượng bình thu nhận chất béo dùng phép thử trắng Do đó, thay đổi khối lượng biểu kiến bình thu nhận chất béo, điều chỉnh theo thay đổi khối lượng biểu kiến bình kiểm tra, khơng tăng q 1,0 mg Rất dung mơi có chứa chất bay bị giữ lại nhiều chất béo Nếu thấy có mặt chất thế, cần tiến hành phép thử trắng tất thuốc thử dung mơi sử dụng bình chất béo với khoảng 1g butterfat khan Nếu cần, chưng cất lại dung mơi với có mặt g butterfat 100 ml dung môi Chỉ dùng dung môi khoảng thời gian ngắn sau chưng cất lại A.2 Tiến hành phép thử trắng đồng thời với việc xác định (xem 9.2.1) Giá trị thu mẫu thử trắng, tiến hành đồng thời với việc xác định, cho phép giá trị biểu kiến chất chiết từ phần mẫu thử (m - m2) điều chỉnh cho có mặt chất không bay chiết từ thuốc thử có thay đổi điều kiện mơi trường phịng cân chênh lệch nhiệt độ bình thu nhận chất béo phòng cân hai lần cân (9.4.15 9.3) Trong điều kiện thích hợp (giá trị thấp phép thử trắng thuốc thử, nhiệt độ cân phịng cân, thời gian bình thu nhận chất béo đủ nguội), giá trị luôn nhỏ 1,0 mg sau bỏ qua phần tính kết trường hợp xác định thông thường Cũng thường gặp giá trị lớn đến 2,5 mg (dương âm) Sau điều chỉnh giá trị này, kết Khi phải điều chỉnh giá trị lớn 2,5 mg phải nêu lên phần báo cáo thử nghiệm (Điều 12) Nếu giá trị thu phép thử trắng thường lớn 1,0 mg cần kiểm tra lại thuốc thử trước chưa kiểm tra Thuốc thử có lẫn tạp chất có vết cần phải thay làm lại (xem 9.2.2 A.1) A.3 Thử peroxit Để thử peroxit, cho ml dung dịch kali iodua 100 g/l chuẩn bị vào 10 ml ete dietyl (5.4) đựng ống đong nhỏ có nắp thủy tinh trước tráng ete Lắc ống đong sau để n Khơng quan sát thấy màu vàng lớp Có thể sử dụng phương pháp thử nghiệm thích hợp khác peroxit Để đảm bảo cho ete dietyl không chứa peroxit, xử lý ete ba ngày trước sử dụng sau: Cắt kẽm thành dải để chúng chạm đến nửa chai đựng ete, dùng khoảng 8000 mm2 kẽm cho 1l ete dietyl Trước sử dụng, nhúng toàn dải kẽm dung dịch chứa 10 g đồng (lít) sulfat ngậm phân tử nước (CuSO4.5H20) ml/l axit sulfuric đậm đặc [98 % khối lượng] lít Rửa kỹ dải nhẹ nhàng nước, đặt dải mạ đồng ướt vào chai đựng ete dietyl để chúng chai Có thể dùng phương pháp khác với điều kiện không làm ảnh hưởng đến kết xác định A.4 Ete dietyl có chứa chất chống oxi hóa Ete dietyl có chứa khoảng mg chất chống oxi hóa kilogam có sẵn số quốc gia, đặc biệt dùng để xác định chất béo Hàm lượng khơng dùng cho mục đích đối chứng Tại số quốc gia có bán sẵn ete dietyl chứa hàm lượng chất chống oxi hóa cao hơn, ví dụ: đến mg/kg Những loại nên sử dụng xác định thông thường phải tiến hành phép thử trắng đồng thời với phép xác định, để điều chỉnh sai số hệ thống lượng dư chất chống oxi hóa gây Đối với mục đích đối chiếu, loại ete dietyl phải chưng cất trước sử dụng A.5 Etanol Có thể sử dụng etanol tiến hành với điều kiện etanol khơng làm ảnh hưởng đến kết việc xác định Phụ lục B (Tham khảo) Cách tiến hành khác dùng ống chiết chất béo có xi phơng có nối với chai rửa B.1 Khái quát Nếu sử dụng ống chiết chất béo có si phơng có nối với chai rửa tiến hành theo quy định phụ lục Các ống phải có nắp đậy nút bần chất lượng tốt quy định bình cầu 6.6 (xem Hình B.1 ví dụ) B.2 Cách tiến hành B.2.1 Chuẩn bị mẫu thử Xem Điều B.2.2 Phần mẫu thử Tiến hành theo 9.1 dùng ống chiết chất béo (xem Chú thích 6.6 Hình B.1) Phần mẫu thử phải cố gắng chuyển hết vào đáy ống chiết chất béo B.2.3 Phép thử trắng Xem 9.2 A.2 B.2.4 Chuẩn bị bình thu nhận chất béo Xem 9.3 B.2.5 Xác định B.2.5.1 Sau thêm amoniac, tiến hành xác định Thêm nước nhiệt độ khoảng 50 oC vào phần mẫu thử đựng ống chiết chất béo (B.2.2) để thu tổng thể tích từ 10 ml đến 11 ml Dùng nước để rửa phần mẫu thử đáy ống Lắc nhẹ làm ấm đến khoảng 50 oC nồi cách thủy (6.5) phần mẫu thử phân tán hoàn toàn Làm nguội mẫu thử đến nhiệt độ phòng vòi nước B.2.5.2 Cho thêm ml dung dịch amoniac (5.1), thể tích tương đương dung dịch amoniac đậm đặc (xem Chú thích 5.1) vào phần mẫu thử đựng ống chiết chất béo (B.2.5.1) Lắc kỹ với phần mẫu thử xử lý trước đáy ống nghiệm B.2.5.3 Cho thêm 10 ml etanol (5.2) Lắc kỹ cách nhẹ nhàng đáy ống chiết chất béo Nếu cần nên thêm giọt dung dịch đỏ Congo (5.3) B.2.5.4 Thêm 25 ml ete dietyl (5.4) Đậy nắp ống chiết chất béo nút bần bảo hòa nước (6.6) nắp làm chất liệu khác làm ướt nước (xem 6.6) Lắc mạnh ống nghiệm không mạnh (để tránh tạo nhũ) cách đảo chiều khoảng Nếu cần, làm mát ống nghiệm dòng nước chảy Mở nút cách cẩn thận, sử dụng chai rửa (6.8) để tráng nút cổ ống nghiệm dung môi hỗn hợp (5.6) cho nước rửa chảy vào ống B.2.5.5 Thêm 25 ml dầu nhẹ (5.5), đậy ống chiết chất béo nút bần nút khác thấm lại nước (bằng cách ngâm vào nước) Lắc nhẹ ống 30 s mô tả B.2.5.4 B.2.5.6 Cho ly tâm ống chiết chất béo đậy nút máy ly tâm (6.2) từ đến gia tốc 80 g đến 90 g Nếu khơng có máy ly tâm, đặt ống nghiệm giá đỡ (6.7) 30 thấy có lớp lên bề mặt rõ rệt phân biệt rõ với lớp chất lỏng Nếu cần, làm mát ống dòng nước chảy đến nhiệt độ phòng B.2.5.7 Cẩn thận tháo bỏ nút nắp, tráng nút cổ ống chiết chất béo dung mơi hỗn hợp (5.6) Sử dụng chai rửa (6.8) cho nước rửa chảy vào ống B.2.5.8 Lắp khớp nối si phông nối với chai rửa vào ống chiết chất đẩy ống nối bên khoảng mm cao mặt tiếp xúc lớp Ống nối phía bên phải song song với trục ống chiết chất béo Cẩn thận gạn nhiều tốt lớp bề mặt ống chiết chất béo bình thu nhận chất béo (xem 9.3) có chứa chất trợ sơi (6.10) trường hợp bình đun sơi bình nón (cịn đĩa kim loại tùy ý) Khơng để lớp chất lỏng lẫn vào Tráng phía ngồi khớp nối dung mơi hỗn hợp, thu lấy nước rửa vào bình thu nhận chất béo CHÚ THÍCH Lớp nối phía chuyển khỏi ống chiết chất béo, ví dụ cách dùng bầu cao su nối với thân ngắn để tạo áp lực B.2.5.9 Tháo khớp nối khỏi cổ ống chiết chất béo Nâng nhẹ ống nối tráng phần thấp ống nối bên dung môi hỗn hợp (5.6) Hạ thấp chèn lại ống nối chuyển nước rửa vào bình thu nhận chất béo Tráng rửa lại khớp nối dung mơi hỗn hợp, cho nước rửa vào bình thu nhận chất béo Tốt loại bỏ dung môi phần dung mơi khỏi bình nhận cách chưng cất làm bay 9.4.13 B.2.5.10 Tháo khớp nối khỏi cổ ống Nâng nhẹ ống nối thêm ml etanol vào lượng chứa ống chiết chất béo Dùng etanol để tráng thành khớp nối lắc mô tả B.2.5.3 B.2.5.11 Thực chiết lần hai cách lặp lại thao tác mô tả B.2.5.4 đến hết B.2.5.10 Thay 25 ml 15 ml ete dietyl (5.4) 15 ml dầu nhẹ (5.5) Dùng ete dietyl để tráng thành khớp nối Trong suốt trình tháo khớp nối khỏi ống chiết chất béo sau lần chiết lần trước B.2.5.12 Thực chiết lần ba, không cho thêm etanol, cách lặp lại thao tác mô tả B.2.5.4 đến B.2.5.10 Lặp lại, dùng 15 ml ete dietyl 15 ml dầu nhẹ Dùng ete dietyl để tráng thành khớp nối mơ tả B.2.5.11 CHÚ THÍCH Lần chiết ba nên bỏ qua sữa cô đặc có đường có hàm lượng béo nhỏ 1% B.2.5.13 Tiến hành mô tả 9.4.13 đến 9.4.15 a) có gắn ống si phơng CHÚ DẪN b) có gắn bình rửa Dung dịch tháo khớp nối 105 ml  ml Độ dày thành 1,5 mm  0,5 mm Hình B.1 - Các ví dụ ống chiết chất béo Thư mục tài liệu tham khảo [1] TCVN 6400 (ISO 707), Sữa sản phẩm sữa - Hướng dẫn lấy mẫu [2] ISO 5725 : 1986, Precision of test methods - Determination of repeatability and reproducibility for a standard test method by inter-laboratory tests [3] International Dairy Federation Interlaboratory Collaborative Studies, Second series Bull Int Dairy Fed 1988 (235)  ... hợp lớn phần khối lượng chất béo của: a) 0,03 %, sản phẩm có hàm lượng chất béo < %; b) 0,04 %, sản phẩm có hàm lượng chất béo từ % đến %; c) 0,06 %, sản phẩm có hàm lượng chất béo từ % đến 10... lượng chất béo < %; b) 0,03 %, sản phẩm có hàm lượng chất béo từ % đến %; c) 0,04 %, sản phẩm có hàm lượng chất béo từ % đến 10 %; d) 0,50 % tỷ lệ chất béo mẫu sản phẩm có hàm lượng chất béo > 10... lệch khối lượng bình thu nhận chất béo hai lần cân liên tiếp nhỏ 1,0 mg Ghi khối lượng tối thiểu khối lượng bình thu nhận chất béo chất chiết 10 Tính biểu thị kết 10.1 Tính Tính hàm lượng chất béo