BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYÊN TÁT THÀNH MAI HÀ THANH BÌNH KHẢO SÁT HỆ VI NÁM TỪ ĐẤT THUỘC MỘT SỐ CÒNG VIÊN TẠI TP HÓ CHÍ MINH THÊ HIỆN HOẠT TÍNH KHÁNG KHUÁN VÀ KHÁNG CANDIDA Chuyên ngàn[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYÊN TÁT THÀNH MAI HÀ THANH BÌNH KHẢO SÁT HỆ VI NÁM TỪ ĐẤT THUỘC MỘT SỐ CỊNG VIÊN TẠI TP.HĨ CHÍ MINH THÊ HIỆN HOẠT TÍNH KHÁNG KHUÁN VÀ KHÁNG CANDIDA Chuyên ngành: Quản lý cung ứng thuốc KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP Dược sĩ ĐẠI HỌC Hướng dẫn khoa học: ThS Lê Quang Hạnh Thư Tp Hồ Chí Minh-2018 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu cùa Các số liệu, kết nêu khóa luận trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Sinh viên thực Mai Hà Thanh Bình LỜI CẢM ƠN Nghiên cứu hồn thành Bộ mơn Vi sinh - Ký sinh trùng, trường Đại học Nguyễn Tất Thành Trong trình nghiên cứu, em nhận nhiều giúp đỡ quý báu thầy bạn bè Với tất lịng biết ơn chân thành sâu sắc, em kính gửi lời cảm ơn đen Cô ThS Lê Quang Hạnh Thư, người tận tâm hướng dần khoa học, động viên khích lệ em suốt thời gian thực đề tài Xin chân thành cảm ơn quý thầy cô chị kỳ thuật viên môn Vi sinh - Ký sinh trùng nhiệt tình hồ trợ tạo điều kiện thuận lợi đe em hoàn thành kế hoạch nghiên cứu Em xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu trường Đại học Nguyền Tất Thành Ban Chủ nhiệm khoa Dược đà tạo điều kiện thuận lợi cho em hoàn thành nghiên cứu Em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới tồn the gia đình, bạn bè người thân ln quan tầm, khích lệ, động viên em suốt trình học tập Xin trân trọng cảm ơn! Tp Hồ Chí Minh, ngày 24/09/2018 Mai Hà Thanh Bình MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC i DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC Sơ ĐỔ VÀ HÌNH V DANH MỤC BẢNG vii ĐẶT VÁN ĐỀ CHƯƠNG TỐNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỐNG QUAN VÈ VI NÁM SỢI 1.1.1 Đặc điếm vi nấm sợi 1.1.2 Nguồn lợi vi nấm sợi đất 1.2 TỎNG QUAN VÈ ĐIỀU KIỆN ĐỊA LÝ - KHÍ HẬU CỦA TP.HCM 1.3 TỐNG QUAN VỀ HỆ VI NÁM SỢI TRONG ĐÁT 1.3.1 Nghiên cứu giới 1.3.2 Nghiên cứu nước CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 11 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CÚƯ, TRANG THIẾT BỊ, HÓA CHÁT 11 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 11 2.1.2 Dung mơi - hóa chất 11 2.1.3 Vi sinh vật thử nghiệm 11 2.1.4 Môi trường nuôi cấy 11 2.1.5 Trang thiết bị 12 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 12 2.2.1 Phân lập vi nấm mầu đất thuộc Tp.HCM 12 2.2.1.1 Phương pháp thu xử lý mẫu 12 2.2.1.2 Phân lập vi nấm 13 2.2.2 Định danh vi nấm sợi 14 2.2.3 Thử nghiệm khảo sát tính kháng khuấn kháng nấm Candida chất biến dưỡng từ vi nấm 15 2.2.3.1 Hoạt hóa vi sinh vật thử nghiệm 15 2.2.3.2 Phương pháp khảo sát tính kháng khuẩn - kháng nấm Candida 16 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 17 3.1 KẾT QUẢ 17 3.1.1 Phân lập vi nấm 17 3.1.2 Định danh vi nấm 17 3.1.2.1 Chi Penỉcilliutn sp 17 3.1.2.2 Chi Aspergillus sp 23 3.1.2.3 Chi Paecilomyces sp 28 3.1.2.4 Chi Trichoderma sp 28 3.1.2.5 Chi Mucor sp 30 3.1.2.6 Chi Fusarium sp 30 3.1.2.7 Chi Plĩoma sp 31 3.1.2.8 Chi Curvuỉaria sp 32 3.1.2.9 Chi Cladosporium sp 32 3.1.2.10 Các mầu không đủ sở định danh 33 3.1.3 Khảo sát hoạt tính kháng vi sinh vật chất biến dưỡng từ vi nấm 43 3.1.3.1 Hoạt tính kháng khuẩn 43 3.1.3.2 Hoạttính kháng nấm Candida 47 3.2 BÀN LUẬN .50 3.2.1 Phân lập định danh vi nấm 50 3.2.2 Hoạt tính sinh học chất biến dưỡng từ vi nấm đất 52 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 54 4.1 KÉT LUẬN 54 4.2 ĐÈ NGHỊ 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO ii PHỤ LỤC 1: Danh mục vi nấm phân lập từ đất thuộc Tp.HCM PL-1 PHỤ LỤC 2: Môi trường nuôi cấy PL-2 PHỤ LỤC 3: Kết thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn PL-3 PHỤ LỤC 4: Ket thử nghiệm hoạt tính kháng nấm Candida PL-4 iii DANH MỤC CHỮ VIÉT TẤT Ec Escherichia coli LPCB Lactophenol coton blue MHA Mueller Hinton Agar MRSA Staphylococcus aureus đề kháng methicillin Pa Pseudomonas aeruginosa PDA Potato Dextrose Agar Sa Staphylococcus aureus SDA Sabouraud Dextrose Agar Sf Streptococcus faecalis TSA Tryptic Soy Agar TSB Tryptic Soy Broth Tp.HCM Thành phố Hồ Chí Minh IV DANH MỤC Sơ ĐỒ VÀ HÌNH Trang Sơ đồ 2.1 Sơ đồ định danh nấm sợi [25] 15 Hình 3.1 Khóm nấm Penicỉllium sp mơi trường PDA đặc điểm hiển vi 22 Hình 3.2 Khóm nấm A.niger môi trường PDA 23 Hình 3.3 Đặc điếm hiến vi A.niger 01 lóp thề bình 24 Hình 3.4 Đặc điểm hiến vi A.niger 02 lóp the bình 24 Hình 3.5 Khóm nấm A.flavus mơi trường PDA 25 Hình 3.6 Đặc điểm hình thái hiển vi chủng A.flavus GD4-3 25 Hình 3.7 Khóm nấm A.fumigatus PDA 26 Hình 3.8 Đầu bào tử cùa A.fumigatus (lOOOx) 26 Hình 3.9 Đặc điểm hình thái hiển vi Aspergillus sp GD5-3 27 Hình 3.10 Đặc diem hình thái hien vi Aspergillus sp.GD5-4 27 Hình 3.11 Chủng Paecỉlomyces sp GD4-6 28 Hình 3.12 Khóm nấm Trichoderma sp PDA 29 Hình 3.13 Đặc điểm hiển vi Trichoderma sp 29 Hình 3.14 Đặc điểm hình thái hiển vi Mucoĩ sp TD1-3 30 Hình 3.15 Chủng Fusarium sp HVT2-2 31 Hình 3.16 Chúng Phoma sp TD2-3 31 Hình 3.17 Chùng Curvularia sp GD2-6 32 Hình 3.18 Chủng Cladosporỉum sp HVT5-7 33 Hình 3.19 Chủng TD2-9 33 Hình 3.20 Chủng GD4-4 34 Hình 3.21 Khóm nấm GD4-10 GD4-11 PDA 34 Hình 3.22 Đặc điểm hiển vi cùa chủng GD4-10 35 Hình 3.23 Đặc điểm hiển vi cùa chùng HVT1-8 35 Hình 3.24 Đặc điểm hình thái hiến vi chủng GDI-4 36 Hình 3.25 Đặc điểm hiển vi chủng HVT3-6 37 Hình 3.26 Chủng TD2-12 37 V Hình 3.27 Đặc điểm hiển vi cùa chùng GD3-6 HVT1-9 38 Hình 3.28 Đặc điểm hiển vi chùng GD4-7 38 Hình 3.29 Chủng TD3-2 39 Hình 3.30 Chủng GD3-7 40 vi DANH MỤC BANG Trang Bang 2.1 Bảng ký hiệu chủng vi nấm phân lập từ mẫu đất Tp.HCM 14 Bảng 3.1 Số lượng vi nấm phân lập từ 15 mẫu đất thuộc Tp.HCM 17 Bảng 3.2 Hình thái khóm nấm đặc điểm hiển vi Penỉciỉlium sp 18 Bảng 3.3 Hình thái khóm nấm đặc điểm hiển vi chủng GD3-9, GD4-5, HVT2-4, HVT3-8, HVT5-10, TD2-6, TD2-7, TD2-14, HVT1-7, HVT21 HVT3-7 41 Bảng 3.4 Vi nấm có hoạt tính kháng khuấn 44 Bảng 3.5 Vi nấm có hoạt tính kháng nấm Candida 48 Bảng 3.6 Tỷ lệ phân bố vi nấm phân lập từ đất thuộc Tp.HCM 51 vii ... tài “KHẢO SÁT HỆ VI NẤM TỪ ĐẤT THUỘC MỘT SĨ CƠNG VI? ?N TẠI TP. HỊ CHÍ MINH THẾ HIỆN HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẤN VÀ KHÁNG CANDIDA? ?? Mục tiêu đề tài gồm: - Phân lập vi nấm từ đất vườn so vùng thuộc Tp. HCM... 2017-2018 KHẢO SÁT HỆ VI NẤM TỪ ĐÁT THUỘC MỘT SĨ CƠNG VI? ?N TẠI TP. HỊ CHÍ MINH THÉ HIỆN HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN VÀ KHÁNG CANDIDA Mai Hà Thanh Bình Hướng dần khoa học: ThS Lê Quang Hạnh Thư Từ khóa: vi nấm. .. nghiên cứu: vi nấm sợi phân lập từ so nguồn đất thuộc Tp. HCM Địa diem lấy đất gom công vi? ?n Tao Đàn, công vi? ?n Gia Định cơng vi? ?n Hồng Văn Thụ Phương pháp nghiên cứu: - Phân lập vi nấm sợi: pha