Nghiên cứu khả năng tăng trưởng và tích lũy Lipid của vi tảo Picochlorum SP. Dưới ảnh hưởng của các điều kiện nuôi cấy.pdf

Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH NGUYÊN THỊ THẢO QUYÊN NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG TĂNG TRƯỞNG VÀ TÍCH LŨY LIPID CỦA VI TẢO PICOCHLORUM SP DƯỚI ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC ĐIÈU KIỆN NUÔI CẤY KHĨA LUẬN TĨT NGHIỆP Dược sĩ ĐẠI HỌC TP HỊ CHÍ MINH-2018 Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH NGUYÊN THỊ THẢO QUYÊN NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG TĂNG TRƯỞNG VÀ TÍCH LŨY LIPID CỦA VI TẢO PICOCHLORUM SP DƯỚI ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC ĐIỀU KIỆN NUÔI CÁY Chuyên ngành: Sản xuất phát triển thuốc Mã số: 52720401 KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP Dược sĩ ĐẠI HỌC Hướng dần khoa học: TS Võ Hồng Trung TP HỊ CHÍ MINH - 2018 KHỐ LUẬN TĨT NGHIỆP Hướng dẫn khoa học TS Võ Hồng Trung LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài: “Nghiên cứu khả tăng trưởng tích lũy lipid vi tảo Pìcochlorum sp ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy” cơng trình nghiên cứu cùa tơi hướng dần khoa học TS Võ Hồng Trung Các kết quả, so liệu nội dung nghiên cứu nêu khóa luận trung thực Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm nội dung khóa luận Sinh viên thực Nguyền Thị Thảo Quyên SVTH: Nguyên Thị Thảo Qun MSSV: 1311520865 KHỐ LUẬN TĨT NGHIỆP Hướng dẫn khoa học TS Võ Hồng Trung LỜI CẢM ƠN Em xin gởi lời cảm ơn chân thành đen Thầy TS Võ Hồng Trung đà tận tình hướng dần, bảo, truyền đạt cho em nhiều kiến thức, kinh nghiệm quý báu, tạo điều kiện tốt suốt thời gian em nghiên cứu làm khóa luận Em xin cảm ơn thầy cô tố mơn Hóa sinh - Độc chất, thầy giảng dạy trường Đại học Nguyền Tất Thành giúp đỡ em suốt trình học tập nghiên cứu Cảm ơn bạn sinh viên làm nghiên cứu mơn Hóa sinh - Độc chất: Trần Phú Đạt, Nguyễn Ngọc Hưng, Nìm Chí Trân hồ trợ, giúp đỡ nhiệt tình đe em hồn thành tốt, tiến độ trình nghiên cứu Trong suốt trình học tập thực đề tài em nhận động viên bạn bè người thân gia đình Em xin chân thành cảm ơn! SVTH: Ngun Thị Thảo Qun ii MSSV: 1311520865 KHỐ LUẬN TĨT NGHIỆP Hướng dẫn khoa học TS Võ Hồng Trung MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC BIẾU ĐÓ, sơ ĐỊ, HÌNH ẢNH viii ĐẬT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I TÓNG QUAN 1.1 Hình thái cấu trúc tế bào Pỉcochlorum sp 1.2 Quá trình tổng hợp lipid vi tảo 1.2.1 Sinh tổng hợp acid béo 1.2.2 Sinh tống hợp triacylglycerol 1.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến tổng họp lipid vi tảo 1.3.1 Chất dinh dưỡng 1.3.2 Nồng độ muối 1.3.3 pH 1.3.4 Nhiệt độ 10 1.3.5 Anh sáng 10 1.4 Vai trò vi tảo Picochloruni sp 11 1.4.1 Dược phẩm thực phẩm chức 11 1.4.2 Nhiên liệu sình học 12 1.4.3 Nuôi trồng th ủy sản 13 1.4.4 Xử lý ni ôi trường 13 CHƯƠNG II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cúu 15 SVTH: Nguyên Thị Thảo Quyên iỉi MSSV: 1311520865 KHỐ LUẬN TĨT NGHIỆP Hướng dẫn khoa học TS Võ Hồng Trung 2.1 Picochlorum sp điều kiện môi trường nuôi cấy 15 2.2 Phương pháp phân tích 15 2.2.1 Quan sát hình thái tế bào 15 2.2.2 Phân tích tăng trưởng 15 2.2.3 Xác định tốc độ tăng trưởng đặc hiệu 16 2.2.4 Phân tích sắc tố 16 2.2.5 Xác đinh hàm lượng lipid tong phương pháp Sulfo­ phospho-vanillin 16 2.3 Phương pháp bố trí thí nghiệm 18 2.3.1 Chuẩn bị mẫu Picochlorum sp cho thí nghiệm: 18 2.3.2 Picochlorunt sp môi trường MD4 bổ sung nguồn nitơ (NO3‘) Phosphor (H2PO4) khác 18 2.3.3 Picochlorunt sp môi trường MD4 bổ sung nguồn nitơ phosphor (phân bón NPK) nồng độ khác 19 2.3.4 Picochlorunt sp môi trường MD4 điều kiện ức chế khác 20 2.4 Xử lý số liệu 21 CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 22 3.1 Kết 22 3.1.1 Picochlorunt sp môi trường MD4 bố sung nguồn nitơ (NO3‘) phosphor (H2PO4) khác 22 3.1.2 Picochlorunt sp môi trường MD4 bố sung nguồn nitơ phosphor (phân bón NPK) nồng độ khác 27 3.1.3 Picochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ức chế khác 35 SVTH: Nguyên Thị Thảo Qun iv MSSV: 1311520865 KHỐ LUẬN TĨT NGHIỆP Hướng dẫn khoa học TS Võ Hồng Trung 3.2 Bàn luận 42 3.2.1 Pìcochloruttt sp mơi trường MD4 bổ sung nguồn nitơ (NO3‘) phosphor (H2PO4 ) khác 42 3.2.2 Pìcochloruttt sp mơi trường MD4 bổ sung nguồn nitơ phosphor (phân bón NPK) nồng độ khác 43 3.2.3 Pìcochloruttt sp môi trường MD4 điều kiện ức chế khác 45 CHƯƠNG IV KẾT LUẬN VÀ ĐÈ NGHỊ 47 4.1 Kết luận 47 4.2 Kiến nghị 47 TÀI LIỆU THAM KHẢO 48 PHỤ LỤC PL-1 PHỤ LỤC PL-2 PHỤ LỤC PL-3 PHỤ LỤC PL-4 PHỤ LỤC PL-5 PHỤ LỤC PL-6 PHỤ LỤC PL-7 PHỤ LỤC PL-8 SVTH: Nguyên Thị Thảo Quyên V MSSV: 1311520865 KHỐ LUẬN TĨT NGHIỆP Hướng dẫn khoa học TS Võ Hồng Trung DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỪ VIẾT TẮT A AlCQl A A Kí hiệu Chú thích TAG Triacylglycerol % Phần trăm pg/mL Microgam/Mililít pg Picogam pg pL Microgam mg/mL Miligam/Mililít PSU Practical salinity unit pmol Micromol ppt parts-per-trillion M Mol SVTH: Nguyên Thị Thảo Quyên Microlít vi MSSV: 1311520865 KHỐ LUẬN TĨT NGHIỆP Hướng dẫn khoa học TS Võ Hồng Trung DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Picochlorum sp môi trường MD4 0,5 M bo sung nguồn nitơ (NO3‘) Phosphor (H2PO4) khác 19 Bảng 2.2 Các điều kiện môi trường bo sung nong độ NPK khác 20 Bảng 2.3 Pỉcochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ức chế khác 21 Bảng 3.1 Mật độ tế bào Pỉcochlorum sp môi trường MD4 bổ sung nguồn nitơ (NO3‘) Phosphor (H2POT) khác 25 Bảng 3.2 Mật độ tế bào Picochlorum sp môi trường MD4 bo sung nguồn nitơ phosphor (phân bón NPK) nồng độ khác 29 Bảng 3.3 Hàm lượng lipid tích Picochlorum sp môi trường MD4 bổ sung nguồn nitơ phosphor (phân bón NPK) nồng độ khác 34 Bảng 3.4 Hàm lượng lipid tế bào Picochlorum sp môi trường MD4 bo sung nguồn nitơ phosphor (phân bón NPK) nồng độ khác 34 Bảng 3.5 Mật độ tế bào Picochlorum sp điều kiện nuôi cấy ức chế khác 36 Bảng 3.6 Hàm lượng lipid the tích Picochlorum sp điều kiện nuôi cấy ức chế khác .41 Bảng 3.7 Hàm lượng lipid tế bào Pỉcochlorum sp điều kiện ức chế khác 41 SVTH: Nguyên Thị Thảo Qun vii MSSV: 1311520865 KHỐ LUẬN TĨT NGHIỆP Hướng dẫn khoa học TS Võ Hồng Trung DANH MỤC BIẾU ĐĨ, sơ ĐỊ, HÌNH ẢNH Hình 1.1 Hình dạng tế bào Picochlonưn sp HM1 kính hiến vi quang học (A) kính hiến vi điện tử truyền qua (B) Hình 1.2 Các tế bào Picochlorum sp quan sát kính hiển vi quang học với độ phóng đại (a) 100X (b) l,ooox, (c) kính hiển vi huỳnh quang mức phóng đại l,ooox Mũi tên cho thấy giọt lipid tế bào Hình 1.3 Con đường tong hợp acid béo lục lạp Hình 1.4 Giản đồthể hiệncon đườngsinh tổng hợptriacylglyceroltrong vi tảo Hình 2.1 Cấu tạo khung đếm vị trí đếm tế bào Picochlorum sp.bằng buồng đếm hồng cầu 15 Hình 2.2 Xác định hàm lượng lipid tong phưong pháp Sulfo-phospho- vanillin (SPV) 17 Hình 2.3 Ni vi tảo mơi trường MD4 0,5M chuẩn bị cho thí nghiệm 18 Hình 3.1 Hình dạng te bào Picochỉorum sp mơi trường MD4 0,5 M bo sung nguồn nitơ (NO3‘) phosphor (H2PO4) khác 22 Hình 3.2 Mật độ tế bào Picochlorum sp môi trường MD4 bổ sung nguồn nitơ (NO3‘) phosphor (H2PO4 ) khác 24 Hình 3.3 Tốc độ tăng trưởng đặc hiệu Picochlorum sp môi trường MD4 bổ sung nguồn nitơ (NO3‘) phosphor (H2PO4‘) khác 24 Hình 3.4 Hàm lượng lipid Picochlorutn sp the tích (a) tế bào (b) mơi trường MD4 bố sung nguồn nito (NO3‘) phosphor (H2PO4) khác 26 Hình 3.5: Mật độ tế bào cùa Picochlorum sp môi trường MD4 bổ sung nguồn nitơ phosphor (phân bón NPK) nong độ khác 28 Hình 3.6 Tốc độ tăng trưởng đặc hiệu cùa Picochlorum sp môi trường MD4 bo sung nguồn nitơ phosphor (phân bón NPK) nồng độ khác 28 Hình 3.7: Hàm lượng diệp lục tố a Picochlorum sp thể tích (a) te bào (b) môi trường MD4 bố sung nguồn nitơ phosphor (phân bón NPK) nong độ khác 30 SVTH: Nguyên Thị Thảo Quyên viii MSSV: 1311520865 ... GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH NGUYÊN THỊ THẢO QUYÊN NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG TĂNG TRƯỞNG VÀ TÍCH LŨY LIPID CỦA VI TẢO PICOCHLORUM SP DƯỚI ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC ĐIỀU KIỆN NUÔI CÁY... ? ?Nghiên cứu khả tăng trưởng tích lũy lipid vi tảo Pìcochlorum sp ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy” công trình nghiên cứu cùa tơi hướng dần khoa học TS Võ Hồng Trung Các kết quả, so liệu nội dung nghiên. .. nuôi trồng thủy sản sản xuất nhiên liệu sinh học Picochlorum sp có khả tăng trưởng mạnh tích lũy lipid cao điều kiện ni cấy khác Vì vậy, đề tài ? ?Nghiên cứu khả tăng trưởng tích lũy lipid Vỉ tảo