Microsoft Word NHI nttu nckh 04 bao cao tong ket de tai F BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ NĂM 2021 2022 Tên đề tài Khảo s[.]
NTTU-NCKH-04 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ NĂM 2021 - 2022 Tên đề tài: Khảo sát hoạt tính ức chế tyrosinase cao chiết nho Vitis vinifera L (Vitaceae) Số hợp đồng: 2021.01.88 Chủ nhiệm đề tài: NGUYỄN THANH TỐ NHI Đơn vị công tác: Khoa Dược Thời gian thực hiện: tháng TP Hồ Chí Minh, ngày 31 tháng 05 năm 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ NĂM 2021 - 2022 Tên đề tài: Khảo sát hoạt tính ức chế tyrosinase cao chiết nho Vitis vinifera L (Vitaceae) Số hợp đồng: 2021.01.88 Chủ nhiệm đề tài: NGUYỄN THANH TỐ NHI Đơn vị công tác: Khoa Dược Thời gian thực hiện: tháng Các thành viên phối hợp cộng tác: STT Họ tên Chuyên ngành ii Cơ quan công tác Ký tên MỤC LỤC DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU iv DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ, HÌNH ẢNH v TÓM TẮT KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU vi MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TYROSINASE 1.1.1 Cơ chế hoạt động tyrosinase 1.1.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt động tyrosinase 1.1.3 Các chất ức chế tyrosinase 1.1.4 Cơ chế ức chế enzym tyrosinase 1.1.5 Tiềm sử dụng chất ức chế tyrosinase 1.2 NHO VITIS VINIFERA L 10 1.2.1 Nguồn gốc 10 1.2.2 Phân loại 10 1.2.3 Đặc điểm sinh học 10 1.2.4 Phân bố 11 1.2.5 Một số công dụng, thành phần hóa học hoạt tính sinh học nho 12 1.3 Tình hình nghiên cứu nước 13 CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Đối tượng nghiên cứu 14 2.2 Hóa chất 14 2.3 Dụng cụ thiết bị 14 2.3.1 Dụng cụ 14 2.3.2 Thiết bị 14 2.4 Nội dung Thu mẫu dược liệu 15 2.4.1 Phương pháp thu hái, xử lí dược liệu 15 2.4.2 Phương pháp định tính sơ thành phần hóa thực vật bột dược liệu 15 2.5 Nội dung Chiết cao dược liệu 15 2.6 Nội dung Khảo sát hoạt tính ức chế tyrosinase cao chiết dược liệu 16 2.6.1 Phương pháp sàng lọc hoạt tính ức chế enzym tyrosinase cao 16 2.6.2 Xác định IC50 cao tiềm 17 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 18 3.1 Kết thu hái dược liệu 18 i 3.2 Kết định tính sơ thành phần hóa học bột nho 19 3.3 Kết sàng lọc hoạt tính ức chế tyrosinase in vitro 25 3.4 Kết xác định IC50 cao tiềm acid Kojic 27 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 31 4.1 KẾT LUẬN 31 4.2 KIẾN NGHỊ 31 ii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tiếng Anh Nghĩa Tiếng Việt EC Enzym Commission DMSO Dimethyl Sulfoxide C Concentration IC50 Half maximal inhibitory Nồng độ chất ức concentration Tiểu ban enzyme Nồng độ chế 50% chức sinh học sinh hóa cụ thể iii DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Bảng Hóa chất sử dụng đề tài 14 Bảng 2 Thiết bị sử dụng đề tài 15 Bảng Thành phần phản ứng sàng lọc hoạt tính ức chế tyrosinase cao chiết 17 Bảng Sự khác biệt hình thái nho xanh nho đỏ 19 Bảng Kết định tính sơ thành phần hóa học bột nho 20 Bảng 3.3 Kết phân tích sơ thành phần hóa học bột nho đỏ 23 Bảng 3.4 Kết phân tích sơ thành phần hóa học bột nho xanh……… 24 Bảng 3.5 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao chloroform nho đỏ (ĐCF) 25 Bảng 3.6 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao cồn 96 nho đỏ (Đ96) 25 Bảng 3.7 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao nước nho đỏ (ĐN) 25 Bảng 3.8 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao chloroform nho xanh (XCF) 25 Bảng 3.9 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao cồn 96 nho xanh (X96) 26 Bảng 3.10 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao nước nho xanh (XN) 26 Bảng 3.11 Hoạt tính ức chế tyrosinase axit Kojic 26 Bảng 12 Sàng lọc hoạt tính ức chế tyrosinase cao nho 26 Bảng 3.13 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao cồn 96 nho đỏ 27 Bảng 3.14 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao cồn 96 nho xanh 28 Bảng 3.15 Hoạt tính ức chế tyrosinase axit Kojic 28 Bảng 3.16 IC50 cao tiềm so với acid kojic thử nghiệm ức chế tyrosinase 28 iv DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ, HÌNH ẢNH Hình 1.1 Cấu trúc trung tâm hoạt động enzym tyrosinase Hình Sơ đồ biểu diễn đường sinh tổng hợp Melanin Hình 1.3 Cây nho Vitis vinifera L 10 Hình 2.1 Quy trình chuẩn bị dịch chiết sơ thành phần hóa thực vật bột nho 16 Hình Hình thái nho xanh Hình Hình thái nho đỏ A Mặt B Mặt 18 A Mặt B Mặt 18 Hình 3.3 Phản ứng định tính dương tính sơ thành phần hóa thực vật bột nho đỏ 19 Hình 3.4 Phản ứng định tính dương tính sơ thành phần hóa thực vật bột nho xanh 20 Hình Đường chuẩn tương quan nồng độ acid kojic hoạt tính ức chế tyrosinase 29 Hình Đường chuẩn tương quan nồng độ cao cồn 96% nho xanh hoạt tính ức chế tyrosinase 29 Hình Đường chuẩn tương quan nồng độ cao cồn 96 % nho đỏ hoạt tính ức chế tyrosinase 30 v TÓM TẮT KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU STT Công việc thực Kết quà đạt Thu hái, xử lý dược liệu Bột dược liệu thô nho đỏ nho xanh Định tính sơ thành phần hóa Bảng kết định tính sơ thành thực vật bột dược liệu phần hóa thực vật bột dược liệu Khảo sát dung môi chiết Chiết cao dược liệu dung môi chloroform, cồn 96% nước Sàng lọc hoạt tính ức chế Bảng % ức chế tyrosinase tyrosinase cao chiết cao chiết thử nghiệm Xác định IC50 cao chiết có Bảng IC50 cao chiết tiềm tiềm so với axit kojic STT so với axit kojic Sản phẩm đăng ký Sản phẩm đạt Bài báo khoa học đăng tạp Bài báo khoa học đăng tạp chí chí uy tín nước uy tín nước Thời gian thực hiện: tháng Thời gian nộp báo cáo: 31/05/2022 vi MỞ ĐẦU Ở người, melanin tìm thấy chủ yếu da, tóc, võng mạc, tiết tế bào sắc tố phân bố lớp đáy biểu bì Vai trò melanin bảo vệ da khỏi tác hại tia tử ngoại, đặc biệt tia cực tím B cách hấp thụ tán xạ ánh sáng mặt trời loại bỏ gốc oxy hóa tự Các rối loạn khác da kết tích tụ mức sắc tố biểu bì Tăng sắc tố tăng tế bào tạo sắc tố tăng hoạt động enzym hình thành sắc tố Enzym tyrosinase (EC 1.14.18.1) phân bố rộng rãi nấm, động vật thực vật, enzym monooxygenase có chứa đồng tham gia vào hai phản ứng riêng biệt trình chuyển hóa melanin; hydroxyl hóa monophenol thành Odiphenol, hai oxi hóa O-diphenol thành O-quinon; sau đó, Oquinon tham gia loạt phản ứng để tạo thành melanin [19] Chính mà chất ức chế tyrosinase sử dụng rộng điều trị bệnh tăng sắc tố mỹ phẩm thực phẩm yếu tố làm trắng da, ngăn ngừa hư hỏng nhanh thực phẩm Arbutin axit kojic biết đến chất ức chế tyrosinase thường sử dụng mỹ phẩm sản phẩm làm trắng da Về mặt lâm sàng, chất khử sắc tố áp dụng cho trị liệu tăng sắc tố Tuy nhiên, axit Kojic gây nhạy cảm da arbutin có khả gây độc tế bào [30, 8, 38] Do việc tìm chất ức chế tyrosinase có nguồn gốc thiên nhiên quan tâm nghiên cứu Vitis vinifera L (Vitaceae) lồi thực vật thuộc chi Vitis, có nguồn gốc từ Vùng Địa Trung Hải Phẩn lớn loài sử dụng công nghiệp nấu rượu, làm thực phẩm Các phận nho nho, rượu vang sản phẩm phụ yếu - bã nho – nghiên cứu rộng rãi Bên cạnh đó, q trình chế biến nho công nghiệp dẫn đến phụ phẩm, chẳng hạn nho Từ xa xưa, nho V vinifera sử dụng y học hoạt tính sinh học khác bao gồm bảo vệ gan, chống co thắt, tác dụng hạ đường huyết điều hòa mạch máu, như, kháng khuẩn, kháng nấm, kháng viêm, kháng ung thư, kháng virus đặc biệt chất chống oxy hóa [38] Các nghiên cứu trước cho thấy diện số axit hữu cơ, axit phenolic, flavonols, tannin, procyanidin, anthocyanin, lipid, enzym, vitamin, carotenoid, tecpen, đường khử không khử [38, 14] Như vậy, nho V vinifera, nguồn đầy hứa hẹn hợp chất có đặc tính dinh dưỡng tiềm sinh học, đồng thời vấn đề xử lý phát sinh từ lượng lớn sản phẩm phụ tạo ngành sản xuất rượu vang nước trái giải Đề tài “Khảo sát hoạt tính ức chế tyrosinase cao chiết nho Vitis vinifera L (Vitaceae)” thực nhằm đánh giá tác động ức chế enzym tyrosinase cao chiết từ nho Vitis vinifera L., Vitaceae ... giải Đề tài ? ?Khảo sát hoạt tính ức chế tyrosinase cao chiết nho Vitis vinifera L (Vitaceae)? ?? thực nhằm đánh giá tác động ức chế enzym tyrosinase cao chiết từ nho Vitis vinifera L., Vitaceae CHƯƠNG... nho đỏ (Đ96) 25 Bảng 3.7 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao nước nho đỏ (ĐN) 25 Bảng 3.8 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao chloroform nho xanh (XCF) 25 Bảng 3.9 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao. .. tyrosinase cao nho 26 Bảng 3.13 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao cồn 96 nho đỏ 27 Bảng 3.14 Hoạt tính ức chế tyrosinase cao cồn 96 nho xanh 28 Bảng 3.15 Hoạt tính ức chế tyrosinase axit