Nhận danh các nhóm hoạt chất trong cánh hoa hồng vảng dựa theo phân tích sơ bộ hóa thực vật TRƯỜNG ĐẠI HỌC THƯƠNG MẠI

LỜI CẢM ƠN Với tất lòng biết ơn sâu sắc nhất, xin chân thành cảm ơn cô Vương Ngọc Chính tận tình hướng dẫn truyền đạt cho kiến thức, kinh nghiệm suốt thời gian thực luận văn tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý thầy cô khoa Khoa Học Ứng Dụng, trường Đại Học Tôn Đức Thắng tận tình dạy dỗ truyền đạt cho em kiên thức quý giá suốt trình học tập trường Xin chân thành cảm ơn thầy phịng thí nghiệm Kỹ Thuật Hữu Cơ, trường Đại Học Bách Khoa tạo điều kiện cho em làm luận văn trường Đại Học Bách Khoa Con xin cảm ơn gia đình ln bên cạnh động viên tạo điều kiện cho thực luận văn Cuối xin chân thành cảm ơn bạn thực luận văn phòng thí nghiệm Kỹ Thuật Hữu Cơ, trường Đại Học Bách Khoa hỗ trợ nhiệt tình giúp đỡ tơi hoàn thành luận văn MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH DANH MỤC ĐỒ THỊ LỜI MỞ ĐẦU CHƯƠNG I TỔNG QUAN I.1 Tổng quan hoa hồng vàng: I.1.2 Màu hoa: I.1.3 Màu cánh hoa: I.1.4 Thu hái bảo quản hoa: I.1.5 Thành phần: I.2 Carotenoid: I.2.1 Giới thiệu chung carotenoid: I.2.2 Cấu tạo- phân loại: I.2.3 Tính chất carotenoid : 10 I.2.4 Độ bền carotenoid : 11 I.3 Flavonol : .12 I.3.1 Giới thiệu flavonol : 12 I.3.2 Tính chất flavonol: 13 I.3.3 Hoạt tính flavonol y học: 15 I.4 Anthocyanin: .15 I.4.1 Giới thiệu anthocyanin: 15 I.4.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến màu sắc độ bền màu anthocyanin: 16 I.5 Hoa hồng dược phẩm: .17 I.6 Các cơng trình nghiên cứu hợp chất hoa hồng: .20 I.7 Nguyên tắc sở lý thuyết số phương pháp xác định đánh giá dùng luận văn: .21 I.7.1 Phương pháp đo màu theo hệ CIE: 21 I.7.2 Đo quang phổ hấp thu UV-vis: 24 I.7.2.1 Nguồn sáng: 24 I.7.2.2 Bộ phận phân tách ánh sáng: 25 I.7.2.3 Detector: 25 I.7.3 Phương pháp DPPH: 26 CHƯƠNG II PHƯƠNG PHÁP 28 NGHIÊN CỨU 28 II.1 Nhiệm vụ nghiên cứu: 29 II.2 Phương pháp nghiên cứu: 29 II.2.1 Hóa chất thiết bị : 29 II.2.2 Phương pháp: .30 II.3 Cách tiến hành: 32 II.3.1 Chuẩn bị nguyên liệu: 32 II.3.2 Xác định độ ẩm: 32 II.3.3 Khảo sát tìm điều kiện lưu trữ cánh hoa trước giai đoạn chiết tách nhóm hoạt chất: 32 II.3.4 Phân tích sơ hóa thực vật dựa vào tài liệu trường Đại Học Dược Rumani: 33 II.3.5 Xác định hàm lượng hoạt chất dịch chiết phương pháp quang phổ hấp thu UV-vis: .35 II.3.6 Chiết tách nhóm hoạt chất 36 II.3.6.1 Chiết tách carotenoid (dùng dung môi ether petrol): 36 II.3.6.2 Dùng diethyl ether để chiết bã hoa sau chiết ether petrol: .37 II.3.6.4 Dùng cồn để chiết bã hoa sau chiết ether petrol : 37 II.3.6.5 Dùng cồn để chiết tách sau chiết ether petrol diethyl ether : 37 II.4 Xác định hoạt tính kháng oxi hóa nhóm hoạt chất cao chiết phương pháp DPPH : .38 II.4.1 Nguyên tắc : .38 II.4.2 Phương pháp tiến hành : 38 II.4.2.1 Tiến hành xác định hoạt tính kháng oxi hóa phương pháp DPPH cho nồng độ (sàng lọc) : 38 II.4.2.2 Tiến hành xác định giá trị IC50 : 39 II.4.2.3 Thực với mẫu đối chiếu mẫu trắng : 39 II.4.3 Kết tính tốn: .40 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ 41 VÀ BÀN LUẬN 41 III.1 Khảo sát chế độ lưu trữ nguyên liệu: .42 III.2 Nhận danh nhóm hoạt chất cánh hoa hồng vàng dựa theo phân tích sơ hóa thực vật: 44 III.2.1 Sơ đồ nhận danh nhóm hoạt chất: 44 III.2.2 Kết nhận danh phản ứng màu: .45 III.3 Nhận danh nhóm hoạt chất cánh hoa hồng vàng: 45 III.3.1 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến q trình chiết tách dùng dung mơi ether petrol: 46 III.3.1.1 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ ether Petrol cánh hoa (FEP/CH)lên trình chiết tách: (phụ lục 7,12) 46 III.3.1.2 Khảo sát ảnh hưởng thời gian chiết lên trình chiết tách: (phụ lục 8,13) 48 III.3.1.3 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ lên trình chiết tách carotenoid: (phụ lục 9,14) 49 III.3.2 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến trình chiết tách dùng dung môi diethyl ehter: 52 Hình 3.3- Sơ đồ qui trình chiết flavonol khảo sát .52 III.3.2.1 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ diethyl ether cánh hoa hồng (FEt2O/CH) lên trình chiết tách: (phụ lục 10) .53 III.3.2.2 Khảo sát ảnh hưởng thời gian lên trình chiết tách: (phụ lục 11) .54 III.3.3 Tách hoạt chất lại bã sau chiết ether petrol diethyl ether: 57 III.4 Đánh giá hoạt tính kháng oxi hóa nhóm hoạt chất chiết tách theo phương pháp DPPH: 59 III.4.1 Chuẩn bị mẫu cao đánh giá tính kháng oxi hóa: 59 59 III.4.2 Xác định hoạt tính kháng oxi hóa theo phương pháp DPPH 65 DANH MỤC BẢNG Bảng II.1 Bố trí thí nghiệm khảo sát cho trình chiết tách carotenoid 36 Bảng II.2 Bố trí thí nghiệm khảo sát cho trình chiết tách flavonol 37 Bảng III.1 Hoa điều kiện khảo sát 42 Bảng III.2 Kết nhận danh nhóm hợp chất cánh hoa hồng vàng phản ứng màu 45 Bảng III.3- Hiệu suất chiết carotenoid từ cánh hoa hồng vàng 52 Bảng III.4- Hiệu suất chiết flavonol từ cánh hoa hồng vàng 57 Bảng III.5- Bảng hiệu suất thu cao 59 Bảng III.6- Kết kiểm tra DPPH nồng độ 1mg/ml 61 Bảng III.7- Kết đo IC50 mẫu vitamine C 62 Bảng III.8- Giá trị IC50 hợp chất chiết tách từ cánh hoa hồng vàng vitamine C 63 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Hoa hồng vàng Hình 1.2 Tetraterpenoid Hình 1.3 Zeaxanthin Hình 1.4 Rhodovibrin Hình 1.5 Rhodoxanthin Hình 1.6 Violaxanthin Hình 1.7 Flavoxanthin Hình 1.8 Trans-Crocetin 10 Hình 1.9 Catesin 14 Hình 1.10 Locoantoxianidol 14 Hình 1.11 Antoxianidol 14 Hình 1.12 Flavol 14 Hình 1.13 Flavonon 14 Hình 1.14 Flavanonol 14 Hình 1.15 Flavonol 14 Hình 1.16 Izoflavon 14 Hình 1.17 Chalcon 15 Hình 1.18 Auron 15 Hình 1.19 Cấu trúc, λmax anthocyanin phổ biến tự nhiên 17 Hình 1.20 Khơng gian màu CIE-Lab CIE-Lch 21 Hình 1.21 Khơng gian màu CIELab mặt phẳng 22 Hình 1.22 Khơng gian màu CIELch 23 Hình 1.23 Sơ đồ máy quang phổ UV-vis 25 Hình 1.24 DPPH 26 Hình 1.25 Phổ vis DPPH trước sau phản ứng với hoạt chất 26 Hình 2.1 Máy đo độ ẩm Staorius MB45 29 Hình 2.2 Máy đo độ hấp thu UV-vis Helios epsion 29 Hình 2.3 Thiết bị chiết tách 30 Hình 2.4 Sơ đồ bước thực 31 Hình 2.5 Sơ đồ phân tích sơ hóa thực vật 35 Hình 3.1 Sơ đồ nhận danh nhóm hoạt chất phản ứng màu 44 Hình 3.2 Sơ đồ qui trình chiết carotenoid khảo sát 46 Hình 3.3 Sơ đồ qui trình chiết flavonol khảo sát 52 Hình 3.4 Sơ đồ qui trình tách nhóm hoạt chất dạng cao 59 DANH MỤC ĐỒ THỊ Đồ thị III.1- Sự biến đổi ΔΕ theo thời gian lưu trữ hoa hồng vàng 43 Đồ thị III 2- Biểu diễn ảnh hưởng tỉ lệ ether petrol cánh hoa lên trình chiết tách 47 Đồ thị III.3- Phổ Vis dịch chiết ether petrol khảo sát tỉ lệ 48 Đồ thị III.4- Biểu diễn ảnh hưởng thời gian lên trình chiết tách 49 Đồ thị III.5- Phổ Vis dịch chiết ether petrol khảo sát thời gian 49 Đồ thị III.6- Biểu diễn ảnh hưởng nhiệt độ lên trình chiết tách 50 Đồ thị III.7- Phổ Vis dịch chiết ether petrol khảo sát nhiệt độ 51 Đồ thị III.8- Biểu diễn ảnh hưởng tỉ lệ diethyl ether lên trình chiết tách 53 Đồ thị III.9- Phổ Vis dịch chiết diethyl ether khảo sát tỉ lệ 54 Đồ thị III.10- Biểu diễn ảnh hưởng thời gian 55 Đồ thị III.11- Phổ Vis dịch chiết diethyl ether khảo sát thời gian 56 Đồ thị III.12- Phổ Vis dịch chiết EtOH1 EtOH2 58 Đồ thị III.13- Phổ Vis cao tương ứng 61 Đồ thị III.14- Đường chuẩn tính IC50 hợp chất chiết tách từ cánh hoa hồng vàng vitamine C 62 MỞ ĐẦU Cùng với phát triển lớn mạnh khoa học kỹ thuật, đời sống ngày nâng cao người thêm trọng đến sống sức khỏe thân xu hướng sử dụng hợp chất thiên nhiên dược phẩm, mỹ phẩm, thực phẩm chức năng,… ngày nhiều Các hợp chất thiên nhiên việc cho màu sắc đẹp dùng thực phẩm tạo màu sắc có màu tự nhiên cho sản phẩm mỹ phẩm cịn vị thuốc dân gian giúp chữa chống số bệnh ung thư, chống viêm, chống oxi hóa… Những hoạt chất từ thiên nhiên góp phần nâng cao hiệu điều trị bệnh, khơng có tác dụng phụ đến người sử dụng hồn tồn khơng ảnh hưởng đến mơi trường Từ lợi ích trên, nhà khoa học nghiên cứu chiết tách hợp chất phương pháp từ nguồn nguyên liệu khác Với nhiều ưu điểm bật hoa hồng nguồn nguyên liệu quan tâm nghiên cứu nhiều giới Trong luận văn đưa quy trình chiết tách đánh giá hoạt tính kháng oxi hóa nhóm hoạt tính hoa hồng vàng Đà Lạt Hy vọng với kết nghiên cứu đạt luận văn sở cho nghiên cứu sâu đề tài liên quan đến hợp chất thiên nhiên từ hoa hồng PHỤ LỤC Phụ lục 2- Khảo sát độ biến đổi màu theo thời gian điều kiện nhiệt độ phịng, khơng ánh sáng Ngày 10 Lần đo L a b c h Lần 83.38 -9.2 56.52 57.26 99.2 Lần 84.03 -8.51 53.06 53.73 99 Lần 84.77 -10.96 50.33 51.5 102.2 Lần 84.37 -10.81 55.59 56.63 100.9 TB 84.138 -9.87 53.875 54.78 100.33 Lần 84.48 -11.88 55.8 57.05 102 Lần 83.8 -11.47 50.18 51.47 102.8 Lần 83.79 -10.56 56.01 56.99 100.6 Lần 83.79 -9.91 49.62 50.59 101.3 TB 83.965 -10.96 52.903 54.025 101.68 Lần 84.23 -10.28 48.16 49.24 102 Lần 78.54 -5.8 39.93 40.34 98.2 Lần 80.32 -6.37 43.95 44.4 98.2 Lần 82.86 -8.5 46.69 47.45 100.2 TB 81.488 -7.738 44.683 45.358 99.65 Lần 69.38 0.27 36.69 36.69 89.7 Lần 69.2 0.09 34.46 34.46 89.9 Lần 66.57 1.74 35.36 35.4 87.3 Lần 66.25 1.47 34.09 34.12 87.6 TB 67.85 0.8925 35.15 35.168 88.625 Lần 57.08 4.51 26.36 26.74 86.4 Lần 58.78 3.8 29.69 29.93 82.8 Lần 57.42 3.73 27.06 27.31 82.2 Lần 60.28 2.92 30.06 30.2 84.5 TB 58.39 3.74 28.293 28.545 83.975 - 69 - PHỤ LỤC Phụ lục - Khảo sát độ biến đổi màu theo thời gian điều kiện nhiệt độ mát, không ánh sáng Ngày 10 Lần đo L a b c h Lần 84.85 -12.35 50.78 52.26 103.6 Lần 84.9 -12.1 44.62 46.23 105.1 Lần 83.79 -12.33 42.08 43.84 106.3 Lần 84.25 -13.23 49.81 51.53 104.8 TB 84.448 -12.5 46.823 48.465 104.95 Lần 84.32 -11.93 53.93 55.23 102.4 Lần 84.89 -12.24 50 51.47 103.7 Lần 85.77 -14.15 53.32 55.16 104.8 Lần 85.57 -13.67 47.26 49.19 106 TB 85.138 -13 51.128 52.763 104.23 Lần 84.59 -10.2 54.46 55.4 100.5 Lần 84.75 -11.49 51.56 52.86 102.7 Lần 84.77 -10.93 48.33 49.55 102.7 Lần 85.04 -11.69 48.12 49.39 102.9 TB 84.788 -11.08 50.618 51.8 102.2 Lần 83.7 -9.85 53.54 54.43 100.4 Lần 84.43 -10.77 52.09 53.19 101.6 Lần 84.08 -9.72 49.55 50.49 101 Lần 84.42 -11.16 47.81 49.09 103 TB 84.158 -10.38 50.748 51.8 101.5 Lần 84.15 -9.87 49.12 49.12 99.67 Lần 83.12 -9.23 48.67 49.67 99.98 Lần 83.23 -8.98 49.45 48.75 100.12 Lần 83.49 -8.95 50.12 48.12 100.32 TB 83.498 -9.258 49.34 48.915 100.02 - 70 - PHỤ LỤC Phụ lục 4- Bước sóng hấp thu số caroteoid Carotenoid λmax nm ββ -carotenoid 429 452 478 A 435 462 487 B 435 461 485 C 450 476 EtOH 425 450 477 H, P 424 448 476 A 432 456 485 B 433 457 484 C 423 444 473 EtOH 422 445 473 H, P 439 461 491 A 447 447 510 B 446 475 509 C 440 460 489 EtOH 437 462 494 H, P 425 451 482 B 417 440 470 EtOH 416 440 470 P 440 470 503 C 431 456 489 P ζ caroten 377 399 425 EtOH 7,8,7’,8’ tetrahydrolycopene 378 400 425 H,P β - carotene βψ - carotene ε - ε carotene εψ carotene Dung môi - 71 - PHỤ LỤC ζ caroten (‘unsymmertricail) (7,8,11,12 374 395 420 H, P 413 435 462 C 401 423 447 EtOH 400 422 450 P 432 458 487 B 435 458 485 C 422 445 474 EtOH 421 445 474 P 429 455 485 B 433 453 483 C 420 441 470 EtOH 420 440 470 H, P 448 474 505 A 455 487 522 B 458 484 518 C 446 472 503 EtOH 444 470 502 P – tetrahydrolycopene) Crocetin Lutein Lutein – 5,6 epoxide Lycopene - 72 - PHỤ LỤC Phụ lục 5- Các mũi hấp thu số flavonol flavonol 3-methoxy flavone 3,4'- dihydroxy flavone 3,2'- dihydroxyflavone 3,5,7- trihydroxyflavone(galangin) 3,7,3',4'- tetrahydroxyflavone EtOH lmax (log ε) 320, 299 246 (4.25) 361(4.39) 353(4.21), 360(4.07), 267.5(4.23) 370(4.43), amurensin 377(4.23), 270(4.28) nor-b-anhydroicaritin 365(4.32), 271(4.38) 4',5- di-O- methylamurensin 365(5.42), 265(4.42) 4'-O-methylpenduletin 367, 266 mumenin 367, 320, 260 3,5-di-O-methylmumenin 344, 310, 260 4'-O-methylpenduletin 315(4.22), 252.5(4.33) 360(3.99), 262.5(4.14) penduletin 303(3,92) 233(4.28) 3,5,7,2'- tetrahydroxyflavone penduletin (4.21) 341(4.36), 271(4.28), 212(4.58) 332(4.34), 272(4.36), 212(4.6) 336(4.39), 272(4.34), 312(3.94) morin 380(4.15), 263(4.22) penta-O-methylmorin 325, 242 - 73 - PHỤ LỤC distemonanthin 390(4.33), 312(3.94) quercetin 3-L- arabinoside 360(4.24), 260(4.32) isoquercitin 360(4.32), 258(4.41) isorhamnetin 360, 306, 254 quercetin 4'- glucoside 366, 254 azalein 339(4.23), 251(4.32) xanthorhamnin 362(4.22), 258(4.33) 3,3'- di-O-methylquercetin 360(4.31) 7,3'-di-O-methylquercetin 268(4.24), 343, 303, 256, 249 dactylin 340, 262, 252 5,7- 360(4.31), methylenedioxyflavone 256(4.29) 7,3',4'-tri-O-methylquercetin 367, 303, 254 3,7,3',4'-tetra-O-methylquercetin 5,7,3',4'-tetra-O-methylquercetin 3,5,7,3'-tetra-O-methylquercetin 268(4.24), 257(4.32) dihydroxy-3-methoxy-3',4'- 353(4.25), 3,7,4'-tri-O-methylquercetin 256(4.31) 375(3.27), 255(4.37) 3,5,3'- tri-O-methylquercetin 3,7,3'- tri-O-methylquercetin 374(4.34) 338(3.88), 269(4.23), 269(4.23), 256(4.29) 352(4.34), 269(4.29), 254(4.37) 360(4.31), 250(4.3) 345(4.34), 263(4.22), 251(4.32) - 74 - PHỤ LỤC 3,5,3',4'-tetra-O-methylquercetin 341, 626, 249 penta-O-methylquercetin 339, 264, 249 Isokanugin oxyanin-A 340(4.32), 250(4.35) 349(3.49), 378(4.29), 255(4.21) hexa-O-methylmyricetin 332, 262 3,3',4',5,7-penta-O-methylmyricetin 345, 305, 265 goosypetin-7-glucoside gosypetin-8-glucoside 5,8,3'-trimethoxy-3,7,4'trimethoxyflavone 3,7,4'-trihydroxy-5,8,3'trimethoxyflavone wharingin 386(4.15), 388(4.2), 380(4.15), 262(4.12) 351, 272, 253 371, 274, 256 377(4.27), 273(4.27), 261(4.32) methylenedioxyflavone 231(4.34) tetramethoxyflavone 350, 278, 262 325(4.23), 5,8-dihydroxy-3,7,3',4'- 341, 278(4.23), 262(4.26) 5,7,8-trihydroxy-3-methoxy-3',4' ternatin 302(3.74), 258(4.06) Myricetin gossypetin 263(4.21), 368(4.28), 285(4.31), 273(4.29), 259(4.33) 330, 280, 255 - 75 - PHỤ LỤC 5-hydroxy-3,7,8,3',4'- 360(4.18), pentamethoxyflavone 255(4.34) 7-hydroxy-5,8,3,3',4'pentamethoxyflavone hexa-O-methylgossypentin meliternin 3-hydroxy-5,7,8,3',4'pentamethoxyflavone quercetagetin 5,4'-dihydroxy-3,6,7,3'tetramethoxyflavone 6-hydroxy-5,7,3'-trimethoxy-3',4'methylenedioxyflavone 272(4.33) 351, 270, 251 351(4.34), 273(4.26), 252(4.34) 351(4.29), 273(4.26), 256(4.35) 370, 273, 254 361(4.34), 272(4.15), 259(4.34) 365, 274, 258 337(4.35), 272(4.07), 245(4.24) melsisimplexin 336(4.29),235(4.3) hexa-O-methylquercetagetin 335(4.42), 240(4.37) 3,5,6,7,8,3',4'-heptamethoxyflavone 342, 270, 254 - 76 - PHỤ LỤC Phụ lục 6- Thăm dò điều kiện chiết trước khảo sát A 0.14 0.12 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 0.00 400 500 600 700 nm Ghi : Phổ dịch chiết ether petrol Phổ dịch chiết diethyl ether Phổ dịch chiết cồn nguội Phổ dịch chiết cồn nóng Phụ lục 7- Kết khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ dung mơi Fdm/ngl lên q trình tách chiết carotenoid λ =440nm Fdm/ngl Lần Lần TB 6/1 0.146 0.128 0.137 8/1 0.174 0.158 0.166 10/1 0.206 0.176 0.191 12/1 0.184 0.174 0.179 - 77 - PHỤ LỤC Phụ lục 8- Kết khảo sát ảnh hưởng thời gian lên trình chiết tách carotenoid tỉ lệ 10/1 λ =440nm T (phút) Lần Lần TB 45 0.134 0.1 0.117 60 0.158 0.172 0.165 75 0.192 0.19 0.191 90 0.09 0.156 0.123 Phụ lục 9- Kết khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ lên trình chiết tách carotenoid tỉ lệ 10/1 λ =440nm t (oC) Lần Lần TB 40 0.184 0.184 0.184 50 0.206 0.196 0.201 60 0.336 0.228 0.282 70 0.316 0.162 0.239 Phụ lục 10- Kết khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ dung môi diethyl eter Fdm/ngl lên trình tách chiết Fdm/ngl Lần Lần TB 6/1 0.422 0.517 0.4695 8/1 0.586 0.552 0.569 10/1 0.619 0.586 0.6025 12/1 0.567 0.559 0.563 - 78 - PHỤ LỤC Phụ lục 11- Kết khảo sát ảnh hưởng thời gian lên trình tách chiết dung môi diethyl eter T (phút) Lần Lần TB 60 0.411 0.434 0.4225 75 0.419 0.529 0.474 90 0.606 0.585 0.5955 105 0.36 0.436 0.398 Phụ lục 12- Phổ hấp thu UV-vis mũi carotenoid tỉ lệ khác Fdm/ngl 6/1 8/1 10/1 12/1 Lần A1 λ1 A2 λ2 A3 λ3 0.055 419 0.073 440 0.068 468 0.053 419 0.064 440 0.058 468 0.046 416 0.064 441 0.058 468 0.064 416 0.08 441 0.072 468 0.063 419 0.088 441 0.064 468 0.068 419 0.092 441 0.08 468 0.05 417 0.088 441 0.08 468 0.074 417 0.089 441 0.08 468 - 79 - PHỤ LỤC Phụ lục 13- Phổ hấp thu UV-vis mũi carotenoid thời gian khác T (phút) 45 60 75 90 Lần A1 λ1 A2 λ2 A3 λ3 0.078 416 0.1 440 0.086 467 0.102 416 0.134 440 0.122 467 0.126 418 0.172 441 0.154 468 0.124 418 0.158 441 0.14 468 0.138 416 0.19 441 0.168 469 0.148 416 0.194 441 0.176 469 0.076 418 0.09 440 0.074 468 0.126 418 0.158 440 0.136 468 Phụ lục 14- Phổ hấp thu UV-vis mũi carotenoid nhiệt độ khác t (oC) 40 50 60 70 Lần A1 λ1 A2 λ2 A3 λ3 0.104 417 0.136 440 0.118 468 0.138 417 0.174 440 0.156 468 0.148 417 0.184 440 0.162 468 0.15 417 0.184 440 0.16 468 0.154 418 0.206 440 0.182 468 0.154 418 0.196 440 0.176 468 0.23 438 0.184 468 0.338 438 0.278 468 - 80 - PHỤ LỤC Phụ lục 15 - Kết hàm lượng carotenoid flavonol chiết từ cánh hoa hồng vàng Hợp chất lần neurosporene isoquercetin w (%) V (ml) A (nm) λ H (%) 88.79 250 0.668 440 1.140 88.39 250 0.661 440 1.128 84.66 100 0.586 355 2.605 84.1 100 0.605 354 2.689 Htb (%) 1.134 2.647 Phụ lục 16- Kết đo IC50 mẫu TH2 C A1 A2 Q1 Q2 Qtb σ 0.099 0.103 98.9 98.7 98.85 0.14 0.1 0.107 0.133 95.9 96.0 95.93 0.11 0.05 1.001 1.028 55.2 54.0 54.59 0.90 0.01 1.827 1.827 16.4 16.4 16.42 0.00 0.005 1.919 2.064 12.1 5.3 8.69 4.82 0.001 2.218 2.133 -1.9 2.0 0.05 2.82 (mg/ml) Phụ lục 17- Kết đo IC50 mẫu TH3 C A1 A2 Q1 Q2 Qtb σ 0.115 0.113 98.2 98.3 98.22 0.07 0.1 0.261 0.264 94.1 94.0 94.05 0.09 0.05 2.160 2.170 14.2 13.8 14.01 0.30 (mg/ml) - 81 - PHỤ LỤC 0.01 2.304 2.294 8.2 8.6 8.37 0.30 0.005 2.365 2.409 5.6 3.7 4.67 1.31 0.001 2.431 2.445 2.8 2.2 2.52 0.42 Phụ lục 18- Kết đo IC50 mẫu TH4 C A1 A2 Q1 Q2 Qtb σ 0.187 0.115 94.7 98.2 96.44 2.45 0.1 1.281 1.247 51.2 52.6 51.91 1.01 0.05 1.972 1.984 22.1 21.6 21.88 0.36 0.01 2.132 2.058 15.4 18.5 16.95 2.20 0.005 2.327 2.335 7.2 6.9 7.03 0.24 0.001 2.408 2.431 3.8 2.8 3.30 0.68 (mg/ml) Phụ lục 19- Kết đo IC50 mẫu TH5 C A1 A2 Q1 Q2 Qtb σ 0.122 0.119 97.8 98.0 97.91 0.10 0.1 0.334 0.333 92.9 93.0 92.95 0.03 0.05 1.381 1.396 45.5 44.8 45.11 0.48 0.01 1.910 1.915 21.5 21.2 21.36 0.16 0.005 2.051 2.100 15.1 12.9 13.97 1.57 0.001 2.291 2.301 4.2 3.7 3.97 0.32 (mg/ml) - 82 - PHỤ LỤC Phụ lục 20- Kết đo IC50 mẫu TH6 C A1 A2 Q1 Q2 Qtb σ 0.116 0.125 98.1 97.7 97.91 0.31 0.1 0.429 0.467 88.6 86.9 87.76 1.22 0.05 1.868 1.822 23.4 25.5 24.42 1.47 0.01 1.954 1.968 19.5 18.8 19.16 0.45 0.005 2.333 2.321 2.3 2.8 2.56 0.38 0.001 2.347 2.380 1.7 0.2 0.91 1.06 (mg/ml) Phụ lục 21- Kết đo IC50 Vitamine C C A1 A2 Q1 Q2 Qtb σ 0.080 0.086 100.1 99.8 99.94 0.18 0.1 0.085 0.084 99.9 99.9 99.87 0.03 0.05 0.086 0.087 99.8 99.8 99.79 0.03 0.01 1.410 1.395 44.3 44.9 44.59 0.44 0.005 2.149 2.146 13.3 13.4 13.34 0.09 0.001 2.400 2.409 2.7 2.4 2.56 0.27 (mg/ml) - 83 - ... Oxicarotenoid capsanthin Rhodoxanthin CH CH HO H 3C CH CH CH H 3C CH O H 3C CH Rhodoxanthin Hình 1.5 Rhodoxanthin Epoxycarotenoid có thi? ?n nhiên dạng 5, 5, epoxit Ví dụ: viloaxanthin flavoxanthin, cịn... Hoa hồng vàng Hình 1.2 Tetraterpenoid Hình 1.3 Zeaxanthin Hình 1.4 Rhodovibrin Hình 1.5 Rhodoxanthin Hình 1.6 Violaxanthin Hình 1.7 Flavoxanthin Hình 1.8 Trans-Crocetin 10 Hình 1.9 Catesin 14... sau:[6,7] Các carotenoid hydrocarbon bão hòa cryptoxanthin, lutein zeaxanthin Nhóm hydroxyl dạng tự ester hóa -8- CHƯƠNG I TỔNG QUAN Hình 1.3- Zeaxanthin Các carotenoid metoxyl hóa Rhodovibrin chúng