thực hành vi sinh ứng dụng

TR NG I H C K THU T CÔNG NGH TP HCM KHOA MÔI TR NG & CÔNG NGH SINH H C BÀI GI NG TH C HÀNH TS Nguy n Hòai H Dùng cho sinh viên ngành Công ngh Sinh h c N m xu t b n: 2009 ng M CL C Trang Gi i thi u môn h c Bài Vi khu n amơn hóa I Lý thuy t II Th c hành Môi tr ng - hóa ch t Ti n hành thí nghi m Quan sát ghi nh n k t qu III Bài n p Bài Vi khu n nitrate hóa I Lý thuy t II Th c hành Môi tr ng - hóa ch t 10 Ti n hành thí nghi m 10 Quan sát ghi nh n k t qu 10 III Bài n p 11 Bài Vi khu n ph n nitrate hóa 12 I Lý thuy t 12 II Th c hành 12 Mơi tr ng - hóa ch t 12 Ti n hành thí nghi m 13 Quan sát ghi nh n k t qu 13 III Bài n p 14 Bài Vi khu n c I Lý thuy t 15 II Th c hành 16 Môi tr ng - hóa ch t 16 Ti n hành thí nghi m 17 Quan sát ghi nh n k t qu 17 III Bài n p 18 Bài Vi khu n phân h y cellulose 19 nh nitơ 15 I Lý thuy t 19 II Th c hành 20 Mơi tr ng - hóa ch t 20 Ti n hành thí nghi m 20 Quan sát ghi nh n k t qu 20 Bài n p 21 Tài li u tham kh o 22 Ph l c 23 III GI I THI U MƠN H C Mơn th c hành vi sinh ng d ng nh m giúp sinh viên làm quen v i ph pháp phân l p, kh o sát vi sinh v t c ng d ng x lý môi tr ngh lên men Các vi sinh ng d ng th ng c phân l p t môi tr ng ng, công ng t nhiên, chúng có kh n ng s d ng c ch t khác nhau, chuy n hóa v t ch t t nhiên Ngu n phân l p chúng có th t t, n c, ng v t, th c v t hay th c ph m Phân l p, xác !nh ch c n ng, !nh danh chúng b c "u a chúng vào ng d ng Trong khuôn kh# th c hành môn vi sinh ng d ng sinh viên phân l p vi sinh v t ch$ y u t môi tr ng t t m t nh%ng c ch t thu n l i nh t &i v i s phát tri n c$a lo'i vi sinh v t khác S& l t i hàng tr m tri u, th m chí hàng t( t bào Ho't quan n nhi)u trình x y t, tr ng vi sinh g ng s&ng c$a vi sinh v t t có t có liên c h t vịng tu"n hồn c$a v t ch t t nhiên nh chu trình carbon, chu trình nit , phospho l u hu*nh Các b c chung c$a th c hành Phát hi n nhóm vi sinh v t m+u t bao g m 'i di n c$a m t s& nhóm phân lo'i Nghiên c u m t s& ,c i m sinh tr -ng hình thái t bào h c t bào c$a 'i di n thu c vi sinh v t phân l p c I DUNG TH C HÀNH BÀI 1: VI KHU.N AMƠN HĨA BÀI 2: VI KHU.N NITRATE HÓA BÀI 3: VI KHU.N PH/N NITRATE HÓA BÀI 4: VI KHU.N C0 1NH NIT2 BÀI 5: VI SINH V T PHÂN GI/I CELLULOSE BÀI 1: VI KHU N AMƠN HĨA I Lý thuy t Q trình amơn hóa q trình phân gi i protein h p ch t h%u c khác có ch a nit t'o thành amoniac Các vi sinh v t có kh n ng amơn hóa bao g m nhi)u lồi sinh bào t ho,c khơng sinh bào t , có kh n ng s d ng nhi)u ngu n v t ch t khác Ngoài nhi)u lo'i x' khu n n m khu n ty Tuy v y, nh%ng vi sinh v t ch( s d ng riêng m t lo'i protein khơng nhi)u Các vi sinh v t có kh n ng ti t men phân gi i protein vào môi tr ng, th$y phân thành amino acid Khi ó, chúng s d ng amino acid q trình d! hóa #ng hóa Các s n ph m ,c tr ng c$a trình phân gi i protein NH3 H2S Quá trình phân gi i protein có th x y i)u ki n hi u khí k3 khí Trong i)u ki n hi u khí, h p ch t h%u c có ch a nit c phân gi i b-i loài gi&ng Bacillus Pseudomonas, 'i di n h Enterobacteriaceae, x' khu n n m khu n ty Trong ó, vai trị quan tr ng ch$ y u nh t gi&ng Bacillus Trong i)u ki n k3 khí lồi gi&ng Clostridium tham gia q trình chuy n hóa Cịn i)u ki n thơng khí h'n ch , q trình amơn hóa c th c hi n b i loài vi khu n tr c khu n k3 khí tùy nghi II Th c hành Vi c phát hi n xác !nh s& l ng vi sinh v t amơn hóa cách c y m+u phân tích vào mơi tr Vi c c y lên môi tr ng th'ch c th c hi n b ng ng l4ng r5n canh th!t-peptone c ti n hành b ng d!ch huy)n phù ã trùng Pasteur nh m tiêu di t t bào sinh d 6ng ch( gi% l'i bào t c$a 'i di n thu c gi&ng Bacillus – gi&ng ,c tr ng nh t cho trình amơn hóa Ngồi ra, vi c c y lên mơi tr ng th'ch cho phép nh n !nh khác c$a khu n l'c vi khu n khác Mơi trư ng - hóa ch t - Môi tr ng canh th!t- peptone: Cao th!t 5g Peptone 10g N 1000ml c c ,c tính - Mơi tr ng th'ch: Tr n vào môi tr ng l4ng 2% th'ch - Dung d!ch pha loãng m+u: dung d!ch n c mu&i sinh lý ti t trùng Gi y l c lo'i th m acetate chì - Gi y qu* - Các lo'i thu&c nhu m quan sát vi sinh v t: thu&c nhu m Gram thu&c nhu m bào t - Thu&c th Nessler: Hòa tan 50 g KI 35 ml n HgCl2 bão hòa cho pha lõang c c t không 'm Thêm dung d!ch n xu t hi n k t t$a Thêm 400 ml KOH 50% n l, l5ng, s d ng d!ch Ti n hành thí nghi m Chu n b môi tr - Môi tr ng: c phân vào kho ng 1/3 chi)u cao &ng nghi m, ng canh th!t-peptone kh trùng - atm, 15 phút - Các d i gi y qu* gi y l c th m acetat chì c cho vào 7a petri, h p kh trùng - 0,5 atm - Môi tr ng th'ch canh th!t-peptone: sau h p kh trùng c phân vào 7a petri, gi% - 30OC Chu n b m u: - M+u t c pha v i n vi sinh v t môi tr c thu d!ch huy)n phù ng l ng: - C y t d!ch pha loãng n ng 102, 103, 104, 105, 106 - L y 1ml d!ch pha lỗng c y vào &ng nghi m có ch a môi tr ng canh th!t- peptone ã kh trùng - - Dùng k8p l y d i gi y qu* gi y l c th m acetate chì gài vào gi%a nút bơng &ng nghi m - - nhi t - 30OC ngày êm M+u &i ch ng môi tr vi sinh v t môi tr ng không c y d!ch huy)n phù ng th ch: 102, 103, 104, 105, 106 - C y t d!ch pha loãng n ng - L y 0,1 ml d!ch pha loãng cho vào 7a petri có ch a mơi tr trùng - - Dùng que trang tr i )u lên b) m,t th'ch ng ã kh 30oC ngày êm - - nhi t - M+u &i ch ng môi tr ng không c y d!ch huy)n phù Quan sát ghi nh n k t qu Môi tr ng l ng: Quan sát: - S c môi tr ng - S t'o bông, k t c'n - N#i váng b) m,t Ph n ng sinh hóa: - Th v i thúơc th Nessler: nh4 m t gi t thu&c th Nessler lên 7a s tr5ng, thêm m t que c y "y n $ peptone broth Quan sát màu k t t$a: tv Màu vàng nh't – ammoniac Vàng s m – nhi)u ammoniac Nâu – r t nhi)u ammoniac - Dùng gi y qu* th s sinh NH3 (làm gi y qu* hóa xanh) - Quan sát màu gi y l c th m acetate chì: s sinh H2S làm gi y l c th m acetate chì hóa en - So sánh &i ch ng thí nghi m ghi k t qu vào b ng sau: pha loãng - Ch n m t c môi T o T oc n Sinh NH3 trư ng pha lỗng có t: l vi sinh v t cao nh t làm tiêu b n soi kính hi n vi Mơi tr Sinh H2S ng th ch: Ghi nh n: ng khu n l'c 7a - m;i - S& l - Quan sát hình thái khu n l'c, mơ t , ghi nh n vào b ng sau: pha loãng S khu n l c pha lỗng Hình khu n l c thái Xu t hi n bào t - Làm tiêu b n soi kính hi n vi - So sánh hình thái quan sát tr - c gi%a tiêu b n t môi tr ng l4ng mơi ng th'ch Ch p hình khu n l'c, t bào III Bài n p - N p k t qu ghi chép thí nghi m hình ch p khu n l'c, t bào - Nêu ng d ng vi khu n amơn hóa BÀI 2: VI KHU N NITRATE HĨA I Lý thuy t Nitrate hóa q trình oxi hóa NH3 thành HNO3, cung c p n ng l sinh v t ho't ng Quá trình oxi hóa x y v i q trình ng cho vi ng hóa CO2 H"u h t vi sinh v t t d 6ng hóa n ng vơ c thu c lo'i hi u khí b5t bu c )u có kh n ng th c hi n q trình Nitrate hóa qua giai o'n: "u tiên giai o'n oxi hóa NH3 thành nitrite b-i m t s& 'i di n thu c nhóm vi khu n nitrite hóa: Nitrosomonas, Nitrosocystis, Nitrosococcus, Nitrosolobus, T t c chúng )u gi&ng v) m,t sinh lý, sinh hóa, ch( khác v) m,t hình thái h c c u trúc t bào Các 'i di n c$a gi&ng Nitrosomonas không sinh n i bào t , t bào nh4 bé hình b"u d c Trên môi tr ng l4ng, Nitrosomonas tr i qua m t s& pha, phát tri n tùy thu c m t s& i)u ki n Hai pha ch$ y u pha di pha t p oàn khu n keo-các t bào khơng di ng- t bào có hay chùm tiên mao ng Giai o'n c$a trình nitrate hóa oxi hóa nitrite thành nitrate b-i m t s& vi khu n: Nitrobacter winogradski, N agilis, Nitrospina gracilis, Nitrococcus mobilis T bào ,c tr ng c$a Nitrobacter d!ch ni th trịn, hình h't u, ho,c hình tr ng, có th di ng có d'ng hình que ng ho,c không di ng Khi i)u ki n không thu n l i chúng có th hình thành nh%ng t p oàn khu n keo Nitrospina gracilis nh%ng tr c khu n th &i v i vi c oxi hóa c ch t-NH3 nitrite II Th c hành Vi c phát hi n vi khu n nitrate hóa c"n phân tích lên mơi tr mơi tr c th c hi n b ng cách c y d!ch huy)n phù ng ch n l c vô c Winogradski Ngu n C nh t ng CO2 có khơng khí thành ph"n c$a CaCO3 Nguyên li u n ng l ng ngu n N cho vi khu n gây giai o'n "u c$a q trình nitrate hóa NH3 mu&i amơn, cịn &i v i vi khu n gây giai o'n hai nitrite i)u ki n c"n thi t &i v i s phát tri n c$a vi khu n nitrate hóa vi c thơng khí "y $ vào mơi tr ng ni c y Mơi trư ng - hóa ch t - Môi tr ng Winogradski phân l p Nitrosomonas spp (NH4)2SO4 g/l K2HPO4 g/l MgSO4.7 H2O 0,5 g/l FeSO4 7H2O 0,4 g/l NaCl g/l Chia vào bình th$y tinh 50ml, cho vào m;i bình m t CaCO3 H p kh trùng - atm - Môi tr ng phân l p Nitrobacter spp NaNO2 1,0 g MgSO4 7H2O 0,5 g FeSO4 7H2O 0,03 g NaCl 0,3 g Na2CO3 1,0 g K2HPO4 1,0 N 1L c Ch(nh pH v) 7,3 - Dung d!ch pha loãng m+u - Tinh th diphenylamin - H2SO4 m ,c Ti n hành thí nghi m - Chu n b! mơi tr ng: Môi tr ng ã h p kh trùng - Xác !nh vi sinh v t môi tr c phân vào &ng nghi m ng l4ng: Pha loãng m+u 102 - 105 M;i pha loãng l y 1ml m+u c y vào &ng nghi m có ch a môi tr trùng - - 30OC 2-3 tu"n - Làm &ng nghi m &i ch ng Quan sát ghi nh n k t qu : ng kh BÀI VI KHU N PH N NITRATE HÓA I Lý thuy t Ph n nitrate hóa q trình vi sinh v t th c hi n vi c kh nitrate thành nit phân t , ng th i oxi hóa ch t h%u c nh ng, r v i ch t nh n i n t cu&i NO3- N ng l vi sinh v t s d ng trình ho't u, axit h%u c thành CO2 H2O ng sinh oxi hóa c ch t c ng s&ng c$a Q trình ph n nitrate hóa có th x y i)u ki n hi u khí l+n k3 khí, nh ng ,c bi t m'nh i)u ki n k3 khí Các vi sinh v t th c hi n trình phân b& r t r ng rãi t nhiên Ph"n l n chúng thu c lo'i d! d 6ng hóa n ng h%u c , k3 khí tùy nghi g m m t s& gi&ng Pseudomonas, Achromobacter, Micrococcus … II Th c hành Vi c phát hi n vi khu n ph n nitrate hóa m+u lên mơi tr c th c hi n b ng ph ng pháp c y ng ch a h p ch t C - d'ng oxi hóa, có nitrate h p ch t khác c"n cho trình sinh t#ng h p c$a t bào Các vi khu n s d ng nitrate làm ch t nh n electron nh ng không dùng làm ngu n N trình kh NO3- thành NH4+ Vì v y, mơi tr ng ng óa, khơng th ng ni c y vi khu n ph n nitrate hóa, i ta cho thêm peptone, asparagine ho,c mu&i amơn h'n ch l u khí q trình ni c y Mơi tr - Mơi tr ng- hóa ch t ng Giltay: Dung d!ch A: Asparagine (C4HgN2O3 H2O) 1g KNO3 1g N 0,25 l c máy: Dung d!ch B: Citric acid ho,c 5g Citrate kali 8,5 g KH2PO4 1g MgSO4.7H2O 1g CaCl2.6H2O: 0,2g FeCl2 4H2O v t N c máy: 0,25l N u s d ng acid citric c"n b# sung KOH 10% v i phenolphthalein làm ch t ch( th! Hòa 0,25l dung d!ch A 0,25l dung d!ch B, sau ó thêm n máy n 1L dung d!ch môi tr c ng Giltay hồn t t Ti n hành thí nghi m - Chu n b! môi tr ng: môi tr ng Giltay v i thành ph"n nh c phân vào &ng nghi m, h p kh trùng 0,5 atm - Pha loãng m+u 103- 107 - L y 1ml m+u c y sâu vào áy &ng nghi m có ch a mơi tr ng ã kh trùng - 0ng &i ch ng không c y m+u - - 30OC ngày êm Quan sát ghi nh n k t qu D u hi u ch$ y u nh t cho s phát tri n c$a vi khu n nitrate hóa s sinh khí, làm c gi m pH c$a mơi tr ng - Quan sát &ng nghi m - - Ki m tra vi c kh pha loãng khác ghi nh n vào b ng nitrate mơi tr ng b ng ph n ng sinh hóa v i diphenylamine pha lỗng c mơi Sinh khí trư ng 10 pH môi NO3- trư ng 104 105 106 107 - Ch n &ng nghi m cho k t qu t&t nh t làm tiêu b n, quan sát kính hi n vi ghi nh n hình thái h c c$a vi khu n ph n nitrate hóa phân l p - Ki m tra vi c kh nitrate môi tr ng b ng ph n c ng sinh hóa v i diphenylamine: L y vài tinh th diphenylamine hòa tan vào m t gi t H2SO4 ,c, sau ó thêm vào m t gi t d!ch nghiên c u N u có m,t nitrate s> xu t hi n màu xanh th+m III Bài n p - N p k t qu ghi chép thí nghi m hình ch p khu n l'c, t bào - Nêu ng d ng vi khu n ph n nitrate hóa BÀI VI SINH V T C !NH NIT" I Lý thuy t C& !nh N kh n ng ng hóa N phân t c$a m t s& vi sinh v t dùng làm ngu n ki n t'o t bào Các vi sinh v t c& !nh N s&ng t do, có nhi)u s&ng c ng sinh n&t s"n h t, hay u, hai h quan tr ng nh t Azotobacteraceae Rhizobiaceae Trong thí nghi m s> phân l p vi khu n c& !nh 'm t thu c h Azotobacteraceae Trong h Azotobacteraceae có hai gi&ng vi khu n c& !nh 'm t i)u ki n hi u khí Azotobacter Azomonas T t c loài thu c gi&ng Azotobacter Azomonas )u s&ng d! d 6ng, dùng nhi)u ngu n carbon khác nhau, monosacharide, disacharide, polysacharide (dextrin, tinh b t), nhi)u r u acid h%u c , h p ch t có vịng th m…Ngu n nit có th nit phân t , c@ng có th mu&i amơn, nitrate, nitrite, amino acid Tùy thu c n ng h p ch t có nit mơi tr trình c& !nh nit phân t s> b! c ch nhi)u hay l n &i v i P Ca, c@ng nh ng th i chúng có nhu c"u c& !nh nit m'nh m> chúng c"n Mo B Ph"n l n loài Azotobacter ch( phát tri n không g,p chúng - ng mà c - pH l n h n 6, v y h"u nh t chua Azotobacter c"n khác nên c@ng g,p chúng - vùng m cao h n so v i nhi)u vi khu n t khô h'n Gi&ng Azotobacter theo Khóa phân l'oi Bergey g m lịai chính: A chroococcum, A vilelandii, A beijerinckii, A nigricans, A armenicanus A paspali; ó gi&ng Azomonas g m lịai chính: A agilis, A insignis A macrocytpgenes Có th phân bi t lòai qua kh n ng sinh kén, kh n ng di ng, kh n ng t#ng h p s5c t&, kh n ng phát hùynh quang (B ng 1) B ng Phân bi t lòai thu c gi ng Azotobacter Azomonas d a vào c i#m hình thái S$c t tan nư c z A Gi ng Lòai A Kén + Nâu Di ng + en - Nâu L c Vàng Lam- l c tr5ng en – tím – tím hùynh hùynh quang quang - - - - - Azomonas chroococcum A vilelandii + + - - +/- +/- + - A beijerinckii + - - - - - - - A nigricans + - +/- + +/- - - - A armenicanus + + - + + - - - A paspali + + - - + - + - A agilis - + - - - - + + A insignis - + +/- - +/- - +/- - A - + - - - - +/- +/- macrocytpgene s Qua b ng ta nh n th y t t c Azotobacter )u sinh kén, ng c l'i v i Azomonas C ba lịai thu c gi&ng Azomonas )u có hình thái khu n l'c t bào r t gi&ng A chroococcum H"u h t chúng t#ng h p s5c t& phát hùynh quang (phát hi n chi u tia c c tím λ = 364 nm bu ng t&i) II Th c hành Vi c phát hi n Azotobacter Azomonas c th c hi n môi tr ng ch n l c Thompson-Skerman không ch a nit h p ch t, i)u ki n hi u khí Mơi tr ng- hóa ch t - Môi tr ng Thompson-Skerman (N2-free glucose) t ng sinh K2HPO4: 1g MgSO4: 0,2g FeSO4: 0,2g CaCl2: 0,1g Na2MoO4: 0,001g Glucose: 10g N 1000ml c máy: - Môi tr ng Thompson-Skerman (N2-free glucose) phân l p K2HPO4: 1g MgSO4: 0,2g m cao CaCl2: 0,1g Na2MoO4: 0,001g Glucose: 10g N 1000ml c máy: Agar: 3% th tích mơi tr - Chu n b! môi tr ng ng Thompson-Skerman v i thành ph"n nh trên, h p kh trùng - 121oC 15 phút atm - Bu ng t&i có èn c c tím Ti n hành thí nghi m - Giai o n t ng sinh: Cân 1g t cho vào erlen có 50 ml mơi tr ng Thompson- Skerman t ng sinh ã h p kh trùng v i thành ph"n nh 4-7 ngày 30OC - Giai an sau t ng sinh: ki m tra xem có vi khu n mong múơn khơng: soi kính X 100 hay soi d"u quan sát tìm t bào hình oval hay que - Giai o n phân l p: C y truy)n t môi tr ng riêng l= hay c,p ôi ng t ng sinh vào môi tr ng Thompson-Skerman phân l p ã phân vào 7a petri h p kh trùng 3-5 ngày, 30oC Quan sát ghi nh n k t qu - Quan sát ghi nh n hình thái vi khu n ,c tr ng sau giai o'n t ng sinh Hình d ng t bào Bào t Kích thư c S s$p x p Hình v% t t bào bào L L … - Ghi nh n lo'i khu n l'c khác xu t hi n sau giai o'n phân l p Mô t khu n l'c ó: Khu ch Khu n Hình l c d ng B& m t Màu Hu'nh tán màu s$c quang vào môi trư ng S lư(ng khu n l c lo i - Ch n khu n l'c ,c tr ng nh t làm tiêu b n gi t ép ) quan sát bao nh"y Soi kính hi n vi v t kính 40X ) ki m tra hình thái vi khu n: kích th c l n, th ng ng thành có bao nh"y - Ghi nh n ,c i m vào b ng: Hình d ng t bào Bào t Kích thư c S s$p x p Hình v% t t bào L L … III Bài n p - N p k t qu ghi chép thí nghi m hình ch p khu n l'c, t bào - Nêu ng d ng vi khu n c& !nh nit bào BÀI 5:VI SINH V T PHÂN GI/I CELLULOSE I Lý thuy t Cellulose thành ph"n c u t'o c b n c$a thành t bào th c v t Vi c t#ng h p cellulose có quy mơ ph c t'p h n h b ng niêm khu n Trong t chua, vai trò phân gi i n m thu c gi&ng Chaelomium, Trichoderma, Fusarium, Aspergillus II Th c hành H"u h t t t c nh%ng loài phân gi i cellulose thu c nhóm hi u khí a m Vi c phát hi n xác !nh sô l ng vi sinh v t phân gi i cellulose i)u c ti n hành b ng cách c y d!ch huy)n phù nghiên c u lên 7a ki n hi u khí ch a mơi tr ng ch n l c Hutchinson có ngu n carbon nh t cellulose Nuôi c y i)u ki n hi u khí Mơi trư ng hóa ch t - Môi tr ng Hutchinson (g) KNO3 2,5 K2HPO4 1,0 MgSO4 0,3 CaCl2 0,1 NaCl 0,1 FeCl3 0,01 Agar 3% N 1000ml c máy Ti n hành thí nghi m - Chu n b! 7a petri có mơi tr ng Hutchinson v i thành ph"n nh trên, h p kh trùng - atm - Gi y l c c5t thành nh%ng khoanh trịn kích th ct ng ng 7a petri H p kh trùng - atm - M+u t pha v i n c máy - C y 0,1 ml d!ch huy)n phù t l y d!ch huy)n phù pha loãng 102 n 106, trang )u lên b) m,t b ng que c y trang - Dùng k8p s5t ã kh trùng ng n l a g5p khoanh gi y l c vô trùng ,t áp sát lên b) m,t M;i pha loãng l p l'i l"n, - Nuôi c y 30OC 12-14 ngày êm Quan sát ghi nh n k t qu y n5p 7a petri - Quan sát m s& l ng khu n l'c vi sinh v t m c c khoanh gi y l c m;i 7a petri - Xác !nh xem khu n l'c c$a nhóm vi sinh v t (niêm khu n, x' khu n hay n m khu n ty) chi m u th gi y l c phân bi t khu n l'c nh4 c$a x' khu n n m, có th quan sát kính hi n vi v i v t kính 10X Nh n xét s khác gi%a lo'i vi sinh v t phát hi n c Khu n Hình Kích Màu l c d ng thư c s$c S khu n l c lo i ghi nh n ư(c (khu n l c/ )a) Lo'i Lo'i - Mô t khác khu n l'c khác c$a niêm khu n, ghi nh n d u hi u Ch n khu n l'c ,c tr ng nh t làm tiêu b n v i s i cellulose t nh%ng ch; gi y l c b! phân gi i nhi)u nh t L u ý hình d'ng t bào sinh d 6ng vi kén ho,c bào t n m m&c III Bài n p - N p k t qu ghi chép thí nghi m hình ch p khu n l'c, t bào - Vi sinh v t nuôi c y - Qua quan sát hình thái, màu s5c bào t cu&ng sinh bào t n m m&c, th phân l n m m&c c thu c nhóm vi isnh v t nào? TÀI LI U THAM KH O Ebgorov Th c t p vi sinh v t h c NXB 'i h c qu&c gia Moscow Benson: Microbiological Applications Lab Manual, Eighth Edition The McGraw−Hill Companies, 2001 PH L C Bài Vi khu n phân gi i amôn M+u t trùng 80oC, 10 phút pha lõang Khu n l'c Bacillus megaterium r i tr i 7a Khu n l'c Bacillus substilis Bacillus substilis nhu m bào t Bacillus cereus var Mycoides A) Khu n l'c B) T bào k t chu;i có bào t Bài Vi khu n nitrate hóa Nitrosomonas europea (Kính hi n vi quang h c, t ng ph n pha X2500) n vi i n t X Nitrobacter winogradskyi (Kính hi n vi Nitrobacter winogradskyi (Kính hi n vi i n quang h c, t ng ph n pha X2500) t X 213000) Bài Vi khu n ph n nitrate hóa Khu n l'c Paracoccus denitrificans T bào Paracoccus denitrificans n l'c Pseudomonas aeruginosa Bài Vi khu n c nh T bào Pseudomonas aeruginosa m Khu n l'c Azotobacter spp Bài Vi sinh vât phân h y cellulose Vi khu n th y phân cellulose (niêm khu n) Cytophaga hutchinsonii, T) bào Azotobacter spp hình que kén hình c"u, oval Khu n l'c Sorangium cellulosum N m phân h y cellulose T bào Sorangium cellulosum Trichoderma harzianum Trichoderma viride Trichoderma flavofuscum