LÊ THU HẰNG NGHIÊN cứu bào CHẾ và ĐÁNH GIÁ ORGANOGEL CHỨA EUTECTI PROGESTERON DÙNG QUA DA KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ THU HẰNG NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ ĐÁNH GIÁ ORGANOGEL CHỨA EUTECTI PROGESTERON DÙNG QUA DA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2022 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ THU HẰNG Mã sinh viên: 1701153 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ ĐÁNH GIÁ ORGANOGEL CHỨA EUTECTI PROGESTERON DÙNG QUA DA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Thạch Tùng Nơi thực hiện: Bộ môn Bào chế HÀ NỘI – 2022 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Nguyễn Thạch Tùng, người thầy hướng dẫn em từ ngày đầu chập chững bước vào đường nghiên cứu Em xin cảm ơn thầy ln ln trao đổi động viên em suốt trình thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô giáo, anh chị kĩ thuật viên mơn Bào chế hết lịng quan tâm, giúp đỡ tạo điều kiện tốt để em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn tới Ban giám hiệu, thầy cô giáo Trường Đại học Dược Hà Nội tâm huyết truyền đạt cho em kiến thức quý báu trình học tập trường Cuối em xin cảm ơn anh chị em sinh viên K70, K71, K73 nhóm nghiên cứu Em đặc biệt cảm ơn ThS Nguyễn Thị Hòa, DS Nguyễn Như Nam bạn Nguyễn Anh Minh, Đỗ Thị Lan, Nguyễn Hữu Mạnh, Nguyễn Thanh Tùng, em Nguyễn Quốc Hoài, người đồng hành em suốt quãng thời gian làm nghiên cứu khoa học môn Bào chế Em ln cảm thấy may mắn có gia đình bạn bè bên cạnh giúp đỡ, hỗ trợ, động viên em trình thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn Hà Nội, ngày 25 tháng 06 năm 2022 Sinh viên khóa 72 Lê Thu Hằng MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan progesteron 1.1.1 Cơng thức hóa học 1.1.2 Tính chất lý hóa .2 1.1.3 Tác dụng dược lý 1.1.4 Chỉ định 1.1.5 Một số chế phẩm thị trường 1.1.6 Một số nghiên cứu progesteron dùng qua da 1.2 Vài nét Eutecti 1.2.1 Định nghĩa .5 1.2.2 Đặc điểm hệ eutecti 1.2.2.1 Đặc điểm chung hệ eutecti 1.2.2.2 Đặc điểm điểm eutecti 1.2.3 Cơ chế tăng tính thấm qua màng sinh học (da) .5 1.2.3.1 Theo phương trình Kasting 1.2.3.2 Một số chế khác .7 1.3 Vài nét organogel 1.3.1 Phân loại 1.3.2 Cơ chế hình thành organogel 1.3.2.1 Organogel tạo thành từ tá dược phân tử khối lượng thấp 1.3.2.2 Organogel tạo thành từ polyme 10 1.3.3 Đặc điểm organogel tạo từ lecithin .10 1.3.4 Một số nghiên cứu hệ organogel dùng qua da 10 1.4 Tổng quan sinh khả dụng 11 1.4.1 Khái niệm sinh khả dụng .11 1.4.2 Đánh giá sinh khả dụng in vivo 11 1.4.2.1 Các thông số dược động học 12 1.4.2.2 Các phương pháp đánh giá sinh khả dụng in vivo 12 1.4.2.3 Một số động vật sử dụng nghiên cứu sinh khả dụng dạng thuốc dùng qua da 13 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .14 2.1 Nguyên liệu thiết bị 14 2.1.1 Nguyên vật liệu 14 2.1.2 Thiết bị nghiên cứu 14 2.1.3 Động vật thí nghiệm 15 2.2 Nội dung nghiên cứu 15 2.3 Phương pháp nghiên cứu 15 2.3.1 Phương pháp bào chế 15 2.3.1.1 Bào chế hệ eutecti progesteron menthol .15 2.3.1.2 Bào chế organogel chứa eutecti progesteron menthol 16 2.3.2 Phương pháp thiết kế thí nghiệm 16 2.3.2.1 Khảo sát công thức organogel chứa eutecti progesteron 16 2.3.2.2 Thiết kế thí nghiệm 17 2.3.3 Phương pháp đánh giá 17 2.3.3.1 Phương pháp định lượng progesteron sắc kí lỏng hiệu cao 17 2.3.3.2 Phương pháp đánh giá kích thước tiểu phân phân bố kích thước tiểu phân organogel trắng 18 2.3.3.2 Phương pháp đánh giá khả giải phóng PGT qua da chuột 18 2.3.3.3 Phương pháp đánh giá sinh khả dụng in vivo động vật thí nghiệm 19 2.3.3 Phương pháp tính tốn xử lí kết .22 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .23 3.1 Đánh giá phương pháp định lượng progesteron 23 3.1.1 Đánh giá phương pháp định lượng progesteron sắc kí lỏng hiệu cao HPLC .23 3.1.1.1 Tính tuyến tính 23 3.1.1.2 Độ lặp lại 23 3.1.2 Đánh giá phương pháp định lượng progesteron LC – MS/MS 24 3.1.2.1 Khoảng tuyến tính đường chuẩn 24 3.1.2.2 Độ lặp lại độ thu hồi 25 3.2 Nghiên cứu bào chế organogel chứa eutecti progesteron dùng qua da 26 3.2.1 Nghiên cứu bào chế organogel trắng 26 3.2.2 Sàng lọc tỉ lệ thành phần organogel chứa eutecti progesteron .29 3.2.3 Thiết kế thí nghiệm 30 3.2.4 Kết đánh giá biến đầu xử lí kết bảng thí nghiệm 31 3.2.5 Phân tích kết 32 3.2.5.1 Đánh giá ảnh hưởng biến đầu vào 32 3.2.5.2 Xu hướng ảnh hưởng biến đầu vào tới biến đầu 34 3.3 Đánh giá sinh khả dụng thông số dược động học công thức organogel chứa eutecti tối ưu 36 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .38 DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT Chữ viết tắt Từ/cụm từ viết tắt PGT Progesteron AUC0-∞ Cmax Tmax LMWO Tá dược tạo organogel có khối lượng phân tử thấp LO Organogel tạo từ lecithin PLO Organogel tạo từ pluronic lecithin TCNSX Tiêu chuẩn nhà sản xuất TCCS Tiêu chuẩn sở 10 HPLC Sắc kí lỏng hiệu cao 11 LC-MS/MS Sắc kí lỏng khối phổ lần 12 Flux Thông lượng khuếch tán 13 Tlag Thời gian trễ 14 USP Dược điển Mỹ Diện tích đường cong biểu diễn nồng độ thời gian từ thời điểm đến ∞ Nồng độ PGT cực đại huyết tương thời gian để PGT đạt nồng độ cực đại huyết tương DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số chế phẩm thị trường chứa PGT Bảng 1.2 Các nghiên cứu progesteron .3 Bảng 2.1 Nguyên liệu hóa chất nghiên cứu .14 Bảng 2.2 Thiết bị sử dụng trình nghiên cứu 14 Bảng 2.3 Thành phần công thức eutecti – organogel 16 Bảng 2.4 Chương trình dung mơi phương pháp sắc kí lỏng khối phổ 21 Bảng 3.1 Mối tương quan diện tích pic nồng độ PGT 23 Bảng 3.2 Khảo sát độ lặp lại phương pháp định lượng PGT sắc kí lỏng hiệu cao HPLC 24 Bảng 3.3 Khảo sát độ lặp lại độ thu hồi phương pháp LC-MS/MS 25 Bảng 3.4 Kích thước tiểu phân số đa phân tán mẫu organogel trắng 26 Bảng 3.5 Khảo sát giới hạn organogel chứa eutecti .29 Bảng 3.6 Khảo sát giới hạn organogel chứa eutecti .30 Bảng 3.7 Các biến đầu vào 30 Bảng 3.8 Kết biến đầu 11 công thức 31 Bảng 3.9 Các giá trị R2 Q2 mơ hình thí nghiệm 32 Bảng 3.10 Hệ số hồi quy ảnh hưởng biến đầu vào đến biến đầu 32 Bảng 3.11 Thông số dược động học PGT mơ hình thỏ 36 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo progesteron Hình 1.2 Phân loại gel Hình 1.3 Cơ chế hình thành organogel cốt rắn Hình 1.4 Cơ chế hình thành organogel cốt lỏng Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ diện tích pic sắc kí progesteron phương pháp HPLC 23 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn mối tương quan nồng độ dung dịch chuẩn với tỷ lệ 25 diện tích pic chất chuẩn diện tích pic nội chuẩn phương pháp LC-MS/MS 25 Hình 3.3 Kích thước tiểu phân số đa phân tán hệ organogel trắng 27 Hình 3.4 Kích thước tiểu phân hệ organogel thay đổi thay đổi tỉ lệ pha nước/pha dầu 27 Hình 3.5 Hình ảnh hệ organogel bào chế với tỉ lệ pha nước/pha dầu khác 28 Hình 3.6 Kết thử giải phóng dược chất từ cơng thức qua màng da chuột 31 Hình 3.7 Mức độ phân tán liệu thử giải phóng 33 Hình 3.8 Đồ thị thể mối liên quan hệ số hồi quy biến đầu 34 Hình 3.9 Ảnh hưởng biến đầu vào lên thông lượng khuếch tán thời gian trễ 35 Hình 3.10 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc nồng độ PGT huyết tương thỏ theo thời gian chế phẩm thị trường hệ eutecti – organogel 37 ĐẶT VẤN ĐỀ Progesteron hormon nội sinh thuộc nhóm steroid có thể người, chứng minh đạt hiệu tốt lâm sàng điều trị bệnh lý vô sinh thiếu hụt hormon, suy buồng trứng, u lành tính tuyến vú… Trên thị trường nay, có nhiều dạng bào chế với đường dùng khác chứa progesteron đường uống, đường tiêm, kem đặt âm đạo… Khi sử dụng đường uống, sinh khả dụng dược chất thấp (khoảng 2,4%) chuyển hóa mạnh qua gan, độ tan khả thấm [6] Dạng bào chế qua da chứa progesteron xem dạng bào chế phù hợp tránh chuyển hóa bước qua gan thuận tiện sử dụng Tuy nhiên, bôi thuốc lên da, progesteron bị chuyển hóa nhanh enzyme 5α-reductase thành 5α-dihydro progesteron lượng nhỏ thuốc dạng cịn hoạt tính vào tuần hồn [40] Đồng thời, progesteron dược chất có phân tử lượng lớn có khả thấm [43] Do đó, phát triển cơng thức dùng qua da progesteron cịn có nhiều thách thức Trong nghiên cứu trước, Dược sĩ Nguyễn Thị Ngân tiến hành bào chế đánh giá hệ eutecti – hydrogel dược chất mơ hình progesteron Kết cho thấy hệ eutecti chứa progesteron giúp tăng khả thấm qua da thí nghiệm in vitro, nhiên kết đánh giá sinh khả dụng in vivo động vật thí nghiệm cịn thấp Hệ sử dụng để mang eutecti gel Carbopol 1% thân nước, tương thích với eutecti không cải thiện khả thấm qua da Trong đó, hệ organogel cải thiện vấn đề mà hệ hydrogel gặp phải nhờ ưu điểm tương hợp sinh học với da, thành phần có pha dầu pha nước nên tương thích với eutecti cải thiện tính thấm dược chất qua da [46] Vì vậy, nhóm nghiên cứu tiến hành lựa chọn organogel tạo từ lecithin làm hệ mang eutecti Trên sở đó, đề tài “Nghiên cứu bào chế đánh giá organogel chứa eutecti progesteron dùng qua da” thực với mục tiêu: Nghiên cứu bào chế organogel chứa eutecti progesteron dùng qua da Sơ đánh giá sinh khả dụng organogel chứa eutecti progesteron bào chế so sánh với chế phẩm đối chiếu dùng đường uống thị trường 3.2.5.2 Xu hướng ảnh hưởng biến đầu vào tới biến đầu Hình 3.8 Đồ thị thể mối liên quan hệ số hồi quy biến đầu ➢ Như nêu phần trên, biến tỉ lệ PGT ảnh hưởng có ý nghĩa đến thơng lượng khuếch tán thời gian trễ Từ hình 3.8, nhận thấy tăng tỉ lệ PGT, thông lượng khuếch tán tăng thời gian trễ giảm Thông lượng khuếch tán tăng tăng tỉ lệ PGT, điều giải thích dựa theo định luật Fick Phương trình định luật Fick mơ tả q trình khuếch tán ổn định qua màng sau: 𝐽= 𝐾𝐷 (𝐶0 − 𝐶𝑖 ) ℎ Trong J thơng lượng khuếch tán đơn vị diện tích, D hệ số khuếch tán thuốc qua lớp da, K hệ số phân bố, h chiều dày lớp màng, C0 nồng độ thuốc ban đầu đặt lên bề mặt da, Ci nồng độ thuốc bên da Do đó, tăng tỉ lệ dược chất cơng thức làm tăng chênh lệch nồng độ thuốc hai mặt màng khuếch tán Từ làm tăng thông lượng khuếch tán dược chất Trong nghiên cứu bào chế thuốc mềm (kem, gel) chứa ibuprofen dùng qua da, Bolla cộng [15] nhận thấy với dạng bào chế, lượng dược chất thấm sau 24 cơng thức có hàm lượng ibuprofen 5% cao gấp lần cơng thức có hàm lượng tương ứng 3% Tác giả giải thích tăng cường thẩm thấu ibuprofen cơng thức có nồng độ dược chất cao giúp trì gradient nồng độ khoảng thời gian dài, từ làm tăng lượng dược chất khuếch tán qua màng 34 Khi tỉ lệ PGT tăng thời gian trễ giảm Điều giải thích lượng dược chất tăng làm tăng tốc độ thấm dược chất qua màng, kéo theo thời gian trễ giảm xuống tương ứng ➢ Đối với biến đầu vào X2 – tỉ lệ pha nước hệ nền, khơng có ảnh hưởng có ý nghĩa thống kê đến biến đầu Khi tăng tỉ lệ pha nước hệ nền, thơng lượng khuếch tán có xu hướng giảm Có thể giải thích cho xu hướng sau, tỉ lệ pha nước hệ tăng đồng nghĩa với tỉ lệ pha dầu hệ giảm, tức tỉ lệ tá dược B tăng tỉ lệ lecithin tá dược A giảm Hệ quan sát chất đặc hơn, tỉ lệ thành phần có tác dụng tăng thấm giảm Ngồi ra, tăng tỉ lệ pha nước, hệ organogel tăng tính phân cực, giảm tương hợp với lớp lipid kép da, làm giảm khả khuếch tán dược chất vào tổ chức da Một số nghiên cứu đặc tính lưu biến cơng thức bào chế có mối liên quan đến khả giải phóng dược chất Tác giả Wang cộng [48] nghiên cứu hệ gel – vi nhũ tương chứa eutecti paeonol menthol qua da nhận thấy cơng thức có độ nhớt thấp cho khả thấm tốt Độ nhớt thấp tương ứng với tính lưu động cao dẫn tới tăng khả giải phóng dược chất Trong nghiên cứu El-Kamel [21] ảnh hưởng Pluronic F127 (PF127) đến khả giải phóng in vitro sinh khả dụng in vivo, tăng nồng độ PF127 độ nhớt tăng lên, cơng thức có độ nhớt thấp cho sinh khả dụng in vivo cao Hình 3.9 Ảnh hưởng biến đầu vào lên thông lượng khuếch tán thời gian trễ 35 Ở mức tỉ lệ PGT lớn 5% tỉ lệ pha nước hệ 77%, thông lượng khuếch tán dược chất qua màng da chuột cao Ở mức tỉ lệ PGT lớn 9%, thời gian trễ thấp nhất, tỉ lệ PGT nhỏ 2% thời gian trễ cao Trong tỉ lệ pha nước khơng có ảnh hưởng đến thời gian trễ, giống với kết trình bày ➢ Dựa mơ hình lựa chọn, tiến hành tối ưu chức dự đoán phần mềm MODDE 12.0, cơng thức tối ưu có tỉ lệ PGT 7,37907% tỉ lệ pha nước hệ 72,8745% Công thức tối ưu lựa chọn để đánh giá sinh khả dụng mơ hình thỏ Kết trình bày phần 3.3 3.3 Đánh giá sinh khả dụng thông số dược động học công thức organogel chứa eutecti tối ưu Tiến hành đánh giá sinh khả dụng đường bôi qua da lưng công thức tối ưu sinh khả dụng đường uống chế phẩm Utrogestan® thị trường, bước tiến hành trình bày mục 2.3.3.3 Kết thể bảng 3.11 hình 3.10: Bảng 3.11 Thông số dược động học PGT mơ hình thỏ Chế phẩm thị trường đường Thơng số Hệ eutecti – organogel Liều 10 mg/kg 10 mg/kg Tmax 4,00 ± 0,61 9,00 ± 2,45 phút Cmax 72,54 ± 14,79 ng/ml 407,74 ± 322,15 ng/ml AUC0-∞ 708,54 ± 120,20 ng.giờ/ml 291,01 ± 224,41 ng.giờ/ml MRT 9,93 ± 0,37 1,66 ± 0,68 λz 0,0794 ± 0,00289 giờ-1 0,395 ± 0,206 giờ-1 36 uống Nồng độ PGT huyết tương (ng/ml) 450 400 350 300 250 200 150 100 50 0 10 15 20 Thời gian (giờ) Chế phẩm thị trường dùng đường uống 25 30 35 Hệ eutecti - organogel Hình 3.10 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc nồng độ PGT huyết tương thỏ theo thời gian chế phẩm thị trường hệ eutecti – organogel Nhận xét: Từ kết trên, nhận thấy Tmax chế phẩm thị trường cơng thức eutecti – organogel tối ưu có khác biệt rõ rệt PGT dùng đường uống đạt đỉnh sau vài phút (9 phút), PGT dùng qua da đạt đỉnh sau khoảng thời gian dài đáng kể (4 giờ) Điều phù hợp với dược động học đường dùng qua da – dược chất thấm từ từ qua da, sau vài đạt nồng độ đỉnh huyết tương, đường uống – dược chất vào hệ tiêu hóa, hấp thu nhanh, bị chuyển hóa thải trừ nhanh Cmax công thức eutecti – organogel dùng qua da thấp khoảng 5,6 lần so với đường uống Tuy nhiên, diện tích đường cong AUC0-∞ hệ eutecti – organogel so với chế phẩm thị trường dùng đường uống 243,48% – cao gấp khoảng 2,43 lần Đồng thời, hệ eutecti – organogel cịn trì nồng độ dược chất tương đối định khoảng thời gian dài, thích hợp để sử dụng với mục đích trị liệu tồn thân Như vậy, thí nghiệm chứng minh ý nghĩa cải thiện mức độ hấp thu PGT sử dụng dạng bào chế eutecti – organogel qua da so với chế phẩm dùng đường uống thị trường 37 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Đề tài “Nghiên cứu bào chế đánh giá organogel chứa eutecti progesteron dùng qua da” sau thực đạt số kết sau: ➢ Bào chế organogel chứa eutecti progesteron ➢ Tối ưu hóa thành phần cơng thức eutecti – organogel với tỉ lệ thành phần sau: Thành phần Tỉ lệ (%) Eutecti Organogel trắng Pha dầu Pha nước PGT 7,38 Menthol 41,81 Lecithin 6,89 Tá dược A 6,89 Tá dược B 7,41 Nước 29,62 Cơng thức tối ưu có thông lượng khuếch tán – flux đạt 289,00 g/cm2.giờ thời gian trễ 5,39 ➢ Kết đánh giá sinh khả dụng mơ hình thỏ cho thấy công thức tối ưu đạt mức độ hấp thu AUC0-∞ cao gấp 2,43 lần chế phẩm thị trường sử dụng đường uống, trì nồng độ dược chất ổn định khoảng thời gian dài KIẾN NGHỊ ➢ Tiếp tục hồn thiện cơng thức bào chế eutecti – organogel ➢ Đánh giá số đặc điểm hệ eutecti – organogel: cấu trúc hóa lý, đặc tính lưu biến 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Bộ môn Bào chế (2021), Bào chế sinh dược học 2, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội, pp 31 Bộ môn Bào chế (2020), Bào chế sinh dược học 1, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội, pp 42, 60-62 Bộ môn Vật lý - Hóa lý (2012), Giáo trình hóa lý dược, Đại học Dược Hà Nội, pp 20-23, pp 42-45 Bộ Y tế (2018), Dược thư quốc gia Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội, pp Bộ Y tế (2017), Dược điển Việt Nam V, Nhà xuất Y học, Hà Nội, pp 796 Bộ Y tế (2006), Dược lý học, Nhà xuất Y học, Hà Nội, pp 316 Đào Minh Hạnh (2020), Sơ nghiên cứu xây dựng tương quan in vitro - in vivo hệ eutecti - hydrogel chứa progesteron, Khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Nguyễn Thị Ngân (2017), Nghiên cứu phát triển hệ eutecti - hydrogel để tăng tính thấm qua da progesteron, Khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội Nguyễn Thị Ngọc Thơ (2018), Tiếp tục nghiên cứu đánh giá hydrogel chứa eutecti progesteron, Khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội 10 Vũ Thị Thanh Thủy (2021), Nghiên cứu bào chế hệ nano tự nhũ hóa chứa progesteron, Luận văn Thạc sĩ Dược học, Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Tài liệu Tiếng Anh 11 Agrawal V., Gupta V., et al (2010), "Preparation and evaluation of tubular micelles of pluronic lecithin organogel for transdermal delivery of sumatriptan", AAPS PharmSciTech, 11(4), pp 1718-25 12 Alsaab Hashem, Bonam Sindhu Prabha, et al (2016), "Organogels in Drug Delivery: A Special Emphasis on Pluronic Lecithin Organogels", Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, pp 13 Biruss B., Valenta C (2008), "The advantage of polymer addition to a non- ionic oil in water microemulsion for the dermal delivery of progesterone", Int J Pharm, 349(1-2), pp 269-73 14 Biruss B., Valenta C (2006), "Skin permeation of different steroid hormones from polymeric coated liposomal formulations", Eur J Pharm Biopharm, 62(2), pp 210-9 15 Bolla P K., Clark B A., et al (2020), "Evaluation of Formulation Parameters on Permeation of Ibuprofen from Topical Formulations Using Strat-M((R)) Membrane", Pharmaceutics, 12(2), pp 16 Chiou W L., Riegelman S (1971), "Pharmaceutical applications of solid dispersion systems", J Pharm Sci, 60(9), pp 1281-1302 17 Clavier G M., Pozzo J L., et al (2000), "Organogelators for making porous sol–gel derived silica at two different length scales", Journal of Materials Chemistry, 10(7), pp 1725-1730 18 Committee JF (2019), BNF 74 (British National Formulary), Pharmaceutical Press, pp 751 19 Crandall Wilson Trafton, Topical moisturizing composition and method 1995: United States 20 Dumortier G., Grossiord J L., et al (2006), "A review of poloxamer 407 pharmaceutical and pharmacological characteristics", Pharm Res, 23(12), pp 2709-28 21 El-Kamel A H (2002), "In vitro and in vivo evaluation of Pluronic F127-based ocular delivery system for timolol maleate", Int J Pharm, 241(1), pp 47-55 22 Elnaggar Y S., El-Refaie W M., et al (2014), "Lecithin-based nanostructured gels for skin delivery: an update on state of art and recent applications", J Control Release, 180, pp 10-24 23 Godin B., Touitou E (2007), "Transdermal skin delivery: predictions for humans from in vivo, ex vivo and animal models", Adv Drug Deliv Rev, 59(11), pp 1152-61 24 Law D., Wang W., et al (2003), "Properties of rapidly dissolving eutectic mixtures of poly(ethylene glycol) and fenofibrate: the eutectic microstructure", J Pharm Sci, 92(3), pp 505-15 25 Liu K., Yan N., et al (2008), "Supramolecular gels based on organic diacid monoamides of cholesteryl glycinate", J Colloid Interface Sci, 327(1), pp 233-42 26 Lopes L B., Murphy N., et al (2009), "Enhancement of transdermal delivery of progesterone using medium-chain mono and diglycerides as skin penetration enhancers", Pharm Dev Technol, 14(5), pp 524-9 27 Mackay K M., Williams A C., et al (2001), "Effect of melting point of chiral terpenes on human stratum corneum uptake", Int J Pharm, 228(1-2), pp 89-97 28 Mady F M., Essa H., et al (2016), "Formulation and clinical evaluation of silymarin pluronic-lecithin organogels for treatment of atopic dermatitis", Drug Des Devel Ther, 10, pp 1101-10 29 Murdan S (2005), "Organogels in drug delivery", Expert Opin Drug Deliv, 2(3), pp 489-505 30 Murdan S., A review of Pluronic Lecithin Organogel as a topical and transdermal drug delivery system, in Hospital Pharmacist 2005 p 267-270 31 O Gronwald, S Shinkai (2001), "Sugar-integrated gelators of organic solvents", Chemistry, pp 32 Parhi R., Suresh P., et al (2016), "Pluronic lecithin organogel (PLO) of diltiazem hydrochloride: effect of solvents/penetration enhancers on ex vivo permeation", Drug Deliv Transl Res, 6(3), pp 243-53 33 Pénzes T., Blazsó G., et al (2005), "Topical absorption of piroxicam from organogels in vitro and in vivo correlations", Int J Pharm, 298(1), pp 47-54 34 Pubchem Progesterone, Truy cập ngày 24/06/2022, https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/Progesterone 35 Rahman Md Akhlaquer, Hussain Arshad, et al (2011), "Lecithin- microemulsion based Organogels as Topical Drug Delivery System", International Journal of Current Research and Review, pp 36 Sagiri S S., Behera B., et al (2013), "Organogels as Matrices for Controlled Drug Delivery: A Review on the Current State", Soft Materials, 12(1), pp 47-72 37 Shaikh I M., Jadhav S L., et al (2009), "Aceclofenac organogels: in vitro and in vivo characterization", Curr Drug Deliv, 6(1), pp 1-7 38 Shchipunov Yu A (2001), "Lecithin organogel: A micellar system with unique properties", Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, 183185, pp 541-554 39 Shchipunov Yurii A., Shumilina Elena V (1995), "Lecithin bridging by hydrogen bonds in the organogel", Materials Science and Engineering: C, 3(1), pp 43-50 40 Sitruk-Ware R (1989), "Transdermal delivery of steroids", Contraception, 39(1), pp 1-20 41 Stott P W., Williams A C., et al (1998), "Transdermal delivery from eutectic systems: enhanced permeation of a model drug, ibuprofen", J Control Release, 50(13), pp 297-308 42 Todo H (2017), "Transdermal Permeation of Drugs in Various Animal Species", Pharmaceutics, 9(3), pp 43 Tuleu C., Newton M., et al (2004), "Comparative bioavailability study in dogs of a self-emulsifying formulation of progesterone presented in a pellet and liquid form compared with an aqueous suspension of progesterone", J Pharm Sci, 93(6), pp 14951502 44 Vigato Aryane Alves, Querobino Samyr Machado, et al (2019), "Physico- Chemical Characterization and Biopharmaceutical Evaluation of Lipid-PoloxamerBased Organogels for Curcumin Skin Delivery", Frontiers in pharmacology, 10, pp 1006-1006 45 Vintiloiu A., Lafleur M., et al (2008), "In situ-forming oleogel implant for rivastigmine delivery", Pharm Res, 25(4), pp 845-52 46 Vintiloiu A., Leroux J C (2008), "Organogels and their use in drug delivery - a review", J Control Release, 125(3), pp 179-92 47 Wang Guijun, Hamilton Andrew D (2002), "Synthesis and Self-Assembling properties of polymerizable organogelators", Chem Eur J., pp 48 Wang W., Cai Y., et al (2017), "Microemulsions based on paeonol-menthol eutectic mixture for enhanced transdermal delivery: formulation development and in vitro evaluation", Artif Cells Nanomed Biotechnol, 45(6), pp 1-6 49 Willimann H (1992), "Lecithin organogels as matrix for transdermal transport of drugs", Journal of Pharmaceutical Sciences, pp 50 Yalkowsky Samuel H., Valvani Shri C (1980), "Solubility and partitioning I: Solubility of nonelectrolytes in water", Journal of Pharmaceutical Sciences, 69(8), pp 912-922 PHỤ LỤC Phụ lục Hình ảnh sắc kí đồ phương pháp định lượng HPLC Phụ lục Hình ảnh sắc kí đồ phương pháp LC-MS/MS Phụ lục Thông số kĩ thuật phương pháp phân tích LC-MS/MS Phụ lục Độ lặp lại tối đa độ thu hồi chấp nhận nồng độ khác (AOAC) Phụ lục Bảng thiết kế thí nghiệm phần mềm MODDE 12.0 Phụ lục Kết thử giải phóng qua màng da chuột 11 công thức (n=3) Phụ lục Kết đánh giá sinh khả dụng in vivo mơ hình thỏ PHỤ LỤC Phụ lục Hình ảnh sắc kí đồ phương pháp định lượng HPLC Hình PL 1.1 Hình ảnh sắc kí đồ dung dịch chuẩn PGT 30 g/ml Hình PL 1.2 Hình ảnh sắc kí đồ mẫu thử giải phóng PGT qua màng da chuột Phụ lục Hình ảnh sắc kí đồ phương pháp LC-MS/MS Hình PL 2.1 Sắc kí đồ mẫu chuẩn mẫu thử định lượng nồng độ thuốc máu động vật thí nghiệm phương pháp LC-MS/MS Phụ lục Thông số kĩ thuật phương pháp phân tích LC-MS/MS Thơng số Nguồn ion Chế độ ion hóa Chế độ ghi phổ Nhiệt độ nguồn MS (0C) Nhiệt độ nguồn MS (0C) Nhiệt độ nguồn khí gas (0C) Cường độ dịng mao quản (nA) Áp suất chân không (Torr) Áp suất luồng khí N2 tinh khiết (psi) Giá trị ESI Dương MRM 100 100 300 2678 1,89E-5 20 Phụ lục Độ lặp lại tối đa độ thu hồi chấp nhận nồng độ khác (AOAC) Bảng PL 4.1 Độ lặp lại tối đa chấp nhận nồng độ khác (AOAC) TT Hàm lượng % Tỷ lệ chất Đơn vị RSD % 100 100% 1,3 10 10-1 10% 1,8 10-2 1% 2,7 0,1 10-3 0,1% 3,7 0,01 10-4 100 µg/ml 5,3 0,001 10-5 10 µg/ml 7,3 0,0001 10-6 µg/ml 11 0,00001 10-7 100 ng/ml 15 0,000001 10-8 10 ng/ml 21 10 0,0000001 10-9 ng/ml 30 Bảng PL 4.2 Độ thu hồi chấp nhận nồng độ khác (AOAC) TT Hàm lượng % Tỷ lệ chất Đơn vị Độ thu hồi % 100 100% 98 – 102 ≥ 10 10-1 10% 98 – 102 ≥1 10-2 1% 97 – 103 ≥ 0,1 10-3 0,1% 95 – 105 0,01 10-4 100 µg/ml 90 – 107 0,001 10-5 10 µg/ml 80 – 110 0,0001 10-6 µg/ml 80 – 110 0,00001 10-7 100 ng/ml 80 – 110 0,000001 10-8 10 ng/ml 60 – 115 10 0,0000001 10-9 ng/ml 40 – 120 Phụ lục Bảng thiết kế thí nghiệm phần mềm MODDE 12.0 Biến đầu vào Công thức Tỉ lệ PGT (%) Biến đầu Tỉ lệ pha nước hệ (%) N1 70 N2 10 70 N3 80 N4 10 80 N5 75 N6 10 75 N7 5,5 70 N8 5,5 80 N9 5,5 75 N10 5,5 75 N11 5,5 75 Thông lượng khuếch tán – Flux (g/cm2.giờ) Thời gian trễ Tlag (giờ) Phụ lục Kết thử giải phóng qua màng da chuột 11 công thức (n=3) Công thức N1 N2 N3 N4 N5 N6 N7 N8 N9 N10 N11 Lượng dược chất thấm qua da chuột theo thời gian (g/cm2) 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 5,292 11,367 0,652 16,620 1,617 5,787 11,728 2,855 8,676 4,668 4,977 12,610 74,757 3,456 82,056 4,821 85,620 34,110 20,649 56,819 67,203 26,733 34,296 261,304 9,195 239,927 14,919 281,637 108,667 69,962 162,073 264,691 102,105 51,748 405,364 13,206 358,608 24,287 423,511 188,110 116,733 248,059 439,154 173,437 71,545 563,470 18,037 478,042 34,876 583,676 300,904 173,564 348,156 650,778 273,692 95,188 721,473 24,244 596,875 47,995 805,853 455,417 245,498 466,175 874,768 403,028 24 1220,201 4790,863 659,682 2068,600 1330,376 5186,409 4047,553 4145,919 4197,939 5390,984 4852,060 Phụ lục Kết đánh giá sinh khả dụng in vivo mơ hình thỏ Thời điểm (giờ) 10 12 26 29 32 Thời gian (phút) 15 30 45 60 90 120 180 240 360 Nồng độ PGT huyết tương (ng/ml) – hệ eutecti – organogel (qua da) Con Con Con Con TB SD 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 41,8954 73,4563 44,7711 92,4902 63,15325 24,19786 39,9016 79,9698 40,0732 95,2625 63,80178 28,19838 31,067 108,2136 32,2466 67,8679 59,84878 36,48622 18,6311 50,8006 29,2583 39,9072 34,6493 13,8342 17,2031 35,7381 22,4148 28,9463 26,07558 8,03591 8,2581 25,1588 16,9897 24,1435 18,63753 7,816448 9,2925 12,7906 4,0026 8,0446 8,532575 3,627077 4,1259 7,6873 3,3910 6,5674 5,4429 2,020447 3,3658 6,4713 4,7747 5,1986 4,9526 1,280176 Nồng độ PGT huyết tương (ng/ml) – Utrogestan (đường uống) Con 0,0000 39,8921 17,4442 9,6468 5,2719 3,7973 1,9341 1,2013 1,8382 0,0000 0,0026 Con Con 0,0000 0,0000 237,1252 185,8141 1686,59 194,6336 1040,9675 74,7322 565,2657 73,7316 294,8782 31,5579 143,9689 14,6233 97,4029 5,011 52,3666 3,8325 25,3308 2,3872 8,6315 Con Con TB SD 9,2358 7,1949 3,7173 6,1188 8,0533 2,8828 0,7521 1,352 3,1646 1,3556 3,0698 33,2159 11,1249 2,8154 0,9667 1,4161 1,4428 7,7791 0,9555 1,3761 0,0000 72,33073 386,0518 252,018 130,8408 76,2854 36,3520 23,0845 13,6694 6,65668 2,7506 0,0000 139,4649 918,9418 549,8672 305,2433 151,9456 74,9307 52,1014 28,3012 13,6535 4,4560 ... organogel chứa eutecti progesteron dùng qua da? ?? thực với mục tiêu: Nghiên cứu bào chế organogel chứa eutecti progesteron dùng qua da Sơ đánh giá sinh khả dụng organogel chứa eutecti progesteron bào chế. .. Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ THU HẰNG Mã sinh viên: 1701153 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ ĐÁNH GIÁ ORGANOGEL CHỨA EUTECTI PROGESTERON DÙNG QUA DA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS.TS... hấp thu PGT sử dụng dạng bào chế eutecti – organogel qua da so với chế phẩm dùng đường uống thị trường 37 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Đề tài ? ?Nghiên cứu bào chế đánh giá organogel chứa eutecti progesteron