NGUYỄN THỊ HUYỀN NGHIÊN cứu tác DỤNG TĂNG lực, CHỐNG LOÉT dạ dày và độc TÍNH TRÊN THỰC NGHIỆM của CAO sâm báo (abelmoschus sagittifolius (kurz) merr) KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HUYỀN NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG TĂNG LỰC, CHỐNG LOÉT DẠ DÀY VÀ ĐỘC TÍNH TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA CAO SÂM BÁO (Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2022 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HUYỀN Mã sinh viên: 1701275 NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG TĂNG LỰC, CHỐNG LOÉT DẠ DÀY VÀ ĐỘC TÍNH TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA CAO SÂM BÁO (Abelmoschus sagittifolius (Kurz) Merr) Người hướng dẫn: KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ PGS TS Đào Thị Vui Nơi thực hiện: Bộ môn Dược lực HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Nhân dịp hoàn thành khóa luận này, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy giáo, gia đình, anh chị, bạn bè người giúp đỡ, ủng hộ em thời gian qua Lời đầu tiên, cho phép em bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS TS Đào Thị Vui – Trưởng Bộ môn Dược lực, người thầy ln bảo, hướng dẫn nhiệt tình cho em suốt q trình thực khóa luận tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới ThS Trần Hồng Linh, người thầy bên cạnh sát sao, nhiệt tình hướng dẫn em trình thực khóa luận mơn Nhờ giúp đỡ, bảo cô, em rút nhiều kinh nghiệm học quý giá cho thân Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới DS Đinh Đại Độ, DS Đinh Thị Kiều Giang, DS Nguyễn Thị Thủy, bạn, em sinh viên, học viên nghiên cứu khoa học môn Dược lực - Trường Đại học Dược Hà Nội ln chia sẻ cơng việc giúp em hồn thành khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô giáo trường Đại học Dược Hà Nội quan tâm tạo điều kiện tốt cho sinh viên suốt trình học tập mái trường thân yêu Và cuối xin gửi lời cảm ơn tới người bạn lắng nghe, chia sẻ trải qua năm tháng sinh viên tươi đẹp, cảm ơn gia đình yêu dấu bên ủng hộ suốt đời Hà Nội, ngày 27 tháng 06 năm 2022 Huyền Nguyễn Thị Huyền MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan suy nhược thể, thuốc điều trị mơ hình nghiên cứu 1.1.1 Các yếu tố nguy suy nhược thể 1.1.2 Các thuốc điều trị suy nhược thể 1.1.3 Một số mơ hình nghiên cứu tác dụng tăng cường thể lực 1.1.3.1 Mơ hình chuột bơi Brekhman 1.1.3.2 Mơ hình trụ quay Rotarod 1.2 Tổng quan loét dày tá tràng, thuốc điều trị mơ hình nghiên cứu 1.2.1 Nguyên nhân chế bệnh sinh 1.2.2 Các thuốc điều trị loét dày tá tràng 1.2.3 Một số mơ hình nghiên cứu tác dụng chống loét dày tá tràng 13 1.2.3.1 Một số mơ hình gây lt phương pháp vật lý 13 1.2.3.2 Một số mô hình gây lt phương pháp hóa học 14 1.3 Tổng quan Sâm báo 15 1.3.1 Đặc điểm thực vật 16 1.3.2 Phân bố 16 1.3.3 Bộ phận dùng, thu hái chế biến 16 1.3.4 Thành phần hóa học 16 1.3.5 Công dụng liều dùng 17 1.3.6 Tác dụng dược lý 17 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Đối tượng nghiên cứu 19 2.1.1 Mẫu nghiên cứu 19 2.1.2 Động vật thí nghiệm 20 2.1.3 Hóa chất, dụng cụ thiết bị thí nghiệm 20 2.2 Nội dung nghiên cứu 21 2.3 Phương pháp nghiên cứu 21 2.3.1 Nghiên cứu tác dụng tăng cường thể lực cao Sâm báo 21 2.3.2 Nghiên cứu tác dụng chống loét dày cao Sâm báo 23 2.3.3 Nghiên cứu độc tính cao Sâm báo 25 2.3.3.1 Nghiên cứu độc tính cấp 25 2.3.3.2 Nghiên cứu độc tính bán trường diễn 26 2.4 Phương pháp xử lí số liệu 28 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 29 3.1 Kết đánh giá tác dụng tăng cường thể lực cao Sâm báo 29 3.1.1 Ảnh hưởng cao Sâm báo đến thời gian bám chuột nhắt trắng 29 3.1.2 Ảnh hưởng cao Sâm báo đến khối lượng chuột nhắt trắng 30 3.2 Kết đánh giá tác dụng chống loét dày cao Sâm báo 30 3.3 Kết nghiên cứu độc tính cao Sâm báo 32 3.3.1 Kết xác định độc tính cấp cao Sâm báo 32 3.3.2 Kết xác định độc tính bán trường diễn cao Sâm báo 33 3.3.2.1 Ảnh hưởng cao Sâm báo đến tình trạng chung tăng trưởng khối lượng chuột thí nghiệm 33 3.3.2.2 Ảnh hưởng cao Sâm báo đến thông số huyết học chuột thí nghiệm 36 3.3.2.3 Ảnh hưởng cao Sâm báo đến thơng số sinh hóa chuột thí nghiệm 37 3.3.2.4 Ảnh hưởng cao Sâm báo đến đại thể quan chuột thí nghiệm 38 3.3.2.5 Ảnh hưởng cao Sâm báo đến mô bệnh học gan, thận chuột thí nghiệm 39 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 43 4.1 Về tác dụng tăng cường thể lực cao Sâm báo 43 4.2 Về tác dụng chống loét dày cao Sâm báo 44 4.3 Về độc tính cao Sâm báo 46 4.3.1 Về độc tính cấp 46 4.3.2 Về độc tính bán trường diễn 47 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Tên viết đầy đủ Tên viết tắt ALT Alanin transaminase AST Aspartate transaminase HCT Hematocrit HGB Nồng độ hemoglobin HLA Human Leukocyte Antigen – Kháng nguyên bạch cầu người H.p Vi khuẩn Helicobacter pylori LD50 Liều trung bình gây chết 50% số lượng động vật thí nghiệm MCV Thể tích trung bình hồng cầu NSAIDs OECD Các thuốc chống viêm không steroid Tổ chức hợp tác phát triển kinh tế (Organization for Economic Cooperation and Development) PG Prostaglandin PLT Số lượng tiểu cầu PPI Thuốc ức chế bơm proton H+/K+ - ATPase RBC Số lượng hồng cầu SPSS Statistical Package for the Social Sciences WBC Số lượng bạch cầu DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Tên Trang 3.1 Thời gian bám trụ quay chuột thời điểm nghiên cứu 29 3.2 Trọng lượng trung bình chuột thời điểm ngày 1, ngày ngày 14 30 3.3 Ảnh hưởng cao Sâm báo lên pH dịch vị, thể tích dịch vị độ acid toàn phần chuột cống trắng 31 3.4 Ảnh hưởng cao Sâm báo lên tiêu đánh giá tổn thương loét chuột cống trắng 31 3.5 Kết thử độc tính cấp cao Sâm báo 32 3.6 Ảnh hưởng cao Sâm báo đến khối lượng thể chuột cống trắng đực 33 3.7 Ảnh hưởng cao Sâm báo đến khối lượng thể chuột cống trắng 34 3.8 Ảnh hưởng cao Sâm báo đến thông số huyết học chuột cống trắng 36 3.9 Ảnh hưởng cao Sâm báo đến thông số sinh hóa chuột cống trắng 37 3.10 Ảnh hưởng cao Sâm báo đến khối lượng quan so với khối lượng thể chuột cống trắng 38 3.11 Ảnh hưởng cao Sâm báo dùng liều lặp lại 28 ngày đến mô bệnh học gan chuột cống trắng đực 39 3.12 Ảnh hưởng cao Sâm báo dùng liều lặp lại 28 ngày đến mô bệnh học gan chuột cống trắng 40 3.13 Ảnh hưởng cao Sâm báo dùng liều lặp lại 28 ngày đến mô bệnh học thận chuột cống trắng đực 41 3.14 Ảnh hưởng cao Sâm báo dùng liều lặp lại 28 ngày đến mô bệnh học thận chuột cống trắng 42 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình Tên Trang 2.1 Sơ đồ quy trình chiết xuất cao khô rễ củ Sâm báo 19 2.2 Sơ đồ thiết kế nghiên cứu 21 2.3 2.4 2.5 3.1 3.2 Quy trình tiến hành thí nghiệm đánh giá tác dụng tăng cường thể lực cao Sâm báo Quy trình tiến hành thí nghiệm đánh giá tác dụng chống loét dày cao Sâm báo Quy trình tiến hành thí nghiệm đánh giá độc tính bán trường diễn cao Sâm báo Ảnh hưởng cao Sâm báo đến khối lượng thể chuột cống trắng đực Ảnh hưởng cao Sâm báo đến khối lượng thể chuột cống trắng 23 24 27 34 35 ĐẶT VẤN ĐỀ Suy nhược thể loét dày tá tràng vấn đề sức khỏe đáng báo động thời đại xã hội ngày cơng nghiệp hóa – đại hóa Hội chứng suy nhược thể báo cáo giới từ từ 200 năm nay, bệnh lý liên quan đến nhiều yếu tố mơi trường, thói quen sinh hoạt, tình trạng bệnh tật, rối loạn tâm thần Theo Trung tâm phịng kiểm sốt bệnh tật Hoa Kỳ, suy nhược thể định nghĩa tình trạng mệt mỏi bất thường, khơng cải thiện nghỉ ngơi, kéo dài sáu tháng trầm trọng sau hoạt động thể lực sang chấn tinh thần Hiện nay, biện pháp điều trị đặc hiệu cho bệnh nhân suy nhược thể mà thay vào điều trị triệu chứng nhằm giúp bệnh nhân cảm thấy dễ chịu nhanh chóng hồi phục sức khỏe [26], [29], [40] Bên cạnh đó, loét dày tá tràng bệnh mạn tính, biết đến từ lâu phổ biến nhiều quốc gia, có Việt Nam Bệnh đặc trưng ổ loét niêm mạc dày, tá tràng xâm lấn sâu qua lớp niêm mạc Trong xã hội đại, người lao động phải đối mặt với áp lực cao công việc, với chế độ ăn uống, sinh hoạt không điều độ, sử dụng nhiều chất kích thích cafe, thuốc lá, rượu bia hay việc lạm dụng thuốc giảm đau chống viêm không steroid, corticoid… làm gia tăng tỉ lệ mắc bệnh [16] Ước tính tỷ lệ loét dày tá tràng hàng năm giới từ 0,1% đến 0,3% tăng theo tuổi Ở người bị nhiễm Helicobacter pylori (H pylori), tỷ lệ loét khoảng 1% năm, cao từ đến 10 lần so với người không bị nhiễm [42] Mặc dù có tiến lớn chẩn đoán điều trị loét dày tá tràng, vấn đề sức khỏe đáng lo ngại Bệnh khơng gây đau đớn, khó chịu, ảnh hưởng đến chất lượng sống người bệnh mà nữa, không điều trị kịp thời, biến chứng nguy hiểm hẹp môn vị, xuất huyết dày, ung thư hay chí tử vong xảy [15], [36], [41] Các thuốc hóa dược có đóng góp đáng kể việc điều trị suy nhược thể loét dày tá tràng, nhiên, bên cạnh tác dụng điều trị, chúng gây nhiều tác dụng không mong muốn Trong đó, thuốc có nguồn gốc từ thảo dược thường có tác dụng êm dịu, an tồn, tác dụng không mong muốn giá thành hợp lý Chính vậy, xu hướng nghiên cứu tìm kiếm hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học cao từ dược liệu để làm thuốc cần thiết Sâm báo thuốc quý, mọc hoang vùng núi Báo (tỉnh Thanh Hóa), từ lâu người dân dùng làm thuốc bổ chữa suy nhược thể, ăn, gầy yếu, rối loạn tiêu hóa, đau dày [4], [13]…Các nghiên cứu nước Sâm báo cho thấy, cao chiết nước từ rễ củ lồi có vai trò quan trọng điều trị loét dày như: chống loét, bảo vệ niêm mạc, hồi phục loét dày nhiều mơ hình gây lt khác Bên cạnh đó, cao nước cao ethanol Sâm báo cịn có tác dụng tăng cường thể lực [8], [10], [24] Thật vậy, tăng cường thể lực trở thành vấn đề quan trọng có ý nghĩa thực tiễn điều trị bệnh nói chung điều trị loét dày nói riêng Bởi thể trạng khỏe mạnh không giúp thể gia tăng sức đề kháng tác nhân gây bệnh, mà tăng cường yếu tố bảo vệ, tái tạo niêm mạc hỗ trợ cho việc điều trị loét dày hiệu Căn vào nghiên cứu thực nghiệm trước mong muốn tạo thực phẩm bảo vệ sức khỏe đặc trưng địa phương, tỉnh Thanh Hóa phối hợp Bộ mơn Dược lực trường Đại học Dược Hà Nội tiến hành đề tài “Nghiên cứu tác dụng tăng cường thể lực, chống loét dày độc tính thực nghiệm cao Sâm báo”, mà mẫu cao sử dụng kết hợp hai cách chiết cồn nước, với mục tiêu sau: Nghiên cứu tác dụng tăng cường thể lực cao Sâm báo Nghiên cứu tác dụng chống loét dày cao Sâm báo Nghiên cứu độc tính cấp độc tính bán trường diễn cao Sâm báo Bảng 3.13 Ảnh hưởng cao Sâm báo dùng liều lặp lại 28 ngày đến mô bệnh học thận chuột cống trắng đực Lơ chuột Hình ảnh vi thể thận Chứng Đặc điểm vi thể mảnh cắt từ mô thận 3/3 mẫu: cầu thận ống thận có cấu trúc bình thường Mã chuột: 113 3/3 mẫu: Cầu thận ống thận bình thường Sâm báo liều 1,35g/kg Mã chuột: 33 3/3 mẫu: cầu thận ống thận có cấu trúc bình thường Sâm báo liều 2,7g/kg Mã chuột: 10 41 Bảng 3.14 Ảnh hưởng cao Sâm báo dùng liều lặp lại 28 ngày đến mô bệnh học thận chuột cống trắng Lơ chuột Hình ảnh vi thể thận Chứng Đặc điểm vi thể mảnh cắt từ mô thận 3/3 mẫu: cầu thận ống thận có cấu trúc bình thường Mã chuột: 104 3/3 mẫu: cầu thận ống thận có cấu trúc bình thường Sâm báo liều 1,35g/kg Mã chuột: 84 3/3 mẫu: cầu thận ống thận có cấu trúc bình thường Sâm báo liều 2,7g/kg Mã chuột: 68 Nhận xét: Trên hình ảnh tiêu mô tả đặc điểm vi thể, khơng nhận thấy có khác biệt rõ rệt lô chuột uống cao Sâm báo so với lô chứng 42 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 4.1 Về tác dụng tăng cường thể lực cao Sâm báo Trong xã hội ngày phát triển, suy nhược thể trở thành vấn đề đáng lo ngại Hiện nay, biện pháp điều trị đặc hiệu cho bệnh nhân suy nhược thể, chủ yếu điều trị triệu chứng Việc nghiên cứu dược liệu sử dụng theo kinh nghiệm dân gian để điều trị chứng suy nhược thể vấn đề cần thiết có ý nghĩa thực tiễn Trong đó, tác dụng hướng đến dược liệu tăng cường thể lực Như đề cập trên, Sâm báo thuốc quý từ lâu nhân dân biết đến sử dụng để làm thuốc bổ trường hợp thể suy nhược, ăn, ngủ, gầy yếu, trẻ em chậm lớn giúp nâng cao thể lực [4] Năm 2007, tác giả Đào Thị Vui tiến hành nghiên cứu tác dụng tăng cường thể lực dựa mơ hình chuột bơi Brekhman hai dạng cao nước cao ethanol Sâm báo, với liều 10g/kg dược liệu cho kết quả: hai loại cao làm tăng thời gian bơi gắng sức chuột sau tuần; với mức liều này, cao nước Sâm báo có tác dụng tốt cao ethanol [24] Chính vậy, chúng tơi tiến hành nghiên cứu tác dụng tăng cường thể lực cao Sâm báo mà mẫu cao tạo thành sản phẩm kết hợp hai cách chiết cồn nước Trên thực nghiệm, mơ hình thường sử dụng phổ biến để đánh giá tác dụng tăng lực chế phẩm nghiên cứu gồm có: mơ hình chuột bơi (Brekhman,1951); mơ hình nghiên cứu tác dụng tăng thích nghi, tăng khả chịu lạnh chuột cống non chuột cống già (Wang, 2000); mơ hình trụ quay Rotarod [22] Để đánh giá tác dụng tăng cường thể lực cao Sâm báo, lựa chọn mơ hình trụ quay Rotarod Rotarod phương pháp đánh giá sức chịu đựng, khả chống đỡ lại quay liên tục trụ quay, Dunham Miya đề xuất năm 1956 Mơ hình xuất từ lâu sử dụng nhiều giới Thực tế Việt Nam, phương pháp số tác giả như: Nguyễn Thị Bích Ngọc (2015) sử dụng để nghiên cứu tác dụng tăng lực Sâm cau (Curculigo orchioides Gaertn); Đinh Thị Vân (2019) nghiên cứu tác dụng tăng lực Đinh lăng thu hái Thái Bình; Phạm Thị Vân Anh cộng (2021) đánh giá tác dụng tăng lực viên nang Banikha [2], [15], [18]… Trong mơ hình này, chúng tơi sử dụng thuốc sulbutiamin 100mg/kg làm chứng dương (thuộc vitamin nhóm B, định số tình trạng suy nhược thể) Chế phẩm nghiên cứu cao Sâm báo sử dụng mức liều 1,35g/kg mức liều gấp đơi liều 2,7g/kg cân nặng chuột Thí nghiệm tiến hành vòng 14 ngày, nhằm nghiên cứu tác dụng tăng cường thể lực cao Sâm báo có phụ thuộc vào liều dùng thời gian dùng hay không Hai thông số đánh giá sử dụng thời gian bám trụ quay chuột tính từ lúc bắt đầu cho chuột lên trụ quay 43 chúng bị rơi xuống thời điểm: trước uống thuốc (T0), ngày thứ (T1), ngày thứ (T7), ngày thứ 14 (T14) cân nặng chuột trước uống thuốc, sau uống thuốc ngày, 14 ngày Kết thu cho thấy, khơng có khác biệt có ý nghĩa thời gian bám trụ quay chuột hai lô uống cao Sâm báo so với lô chứng sau 60 phút sau ngày dùng thuốc (p>0,05) Sau 14 ngày dùng thuốc: cao Sâm báo liều 2,7g/kg làm tăng thời gian bám trụ quay chuột so với lô chứng (p0,05) Điều cho thấy, tác dụng làm tăng thời gian bám cao Sâm báo thể mức liều cao (2,7g/kg), dùng lặp lại, liên tục khoảng thời gian dài, tác dụng tức Hơn nữa, cân nặng chuột lơ thí nghiệm sau ngày sau 14 ngày tăng so với trước uống thuốc khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lô chứng thời điểm (p>0,05) Điều khẳng định chuột phát triển khỏe mạnh bình thường Bên cạnh đó, rễ củ Sâm báo có chứa thành phần: tinh bột, chất nhầy, acid béo, acid amin, phytosterol, sesquiterpen, coumarin, saponin, protid nhiều nguyên tố vi lượng Tinh bột nguồn nguyên liệu cung cấp lượng cho hoạt động sống thể lưu trữ dạng glycogen gan Khi vận động sức, thể tăng cường huy động lượng từ nguồn dự trữ để gia tăng sức bền cho Ngoài ra, acid béo, acid amin, protid nguyên tố vi lượng thành phần dinh dưỡng thiết yếu cho thể, acid béo đóng vai trò quan trọng cải thiện mệt mỏi thể chất tinh thần bệnh nhân suy nhược thể Như vậy, cao Sâm báo với mức liều 2,7g/kg, uống liên tục 14 ngày có tác dụng tăng cường thể lực chuột nhắt trắng mô hình trụ quay Rotarod Từ kinh nghiệm dân gian qua kết thực nghiệm thu chứng minh rằng, việc sử dụng Sâm báo để làm thuốc bổ, tăng cường thể lực hồn tồn có sở Như vậy, nghiên cứu đóng góp vào hướng phát triển sản phẩm nâng cao sức khỏe từ Sâm báo thu hái tỉnh Thanh Hóa đối tượng hay mệt mỏi, suy nhược thể, sức đề kháng kém, ốm dậy hay trường hợp mắc bệnh mạn tính 4.2 Về tác dụng chống loét dày cao Sâm báo Loét dày tá tràng cân yếu tố công (HCl, pepsin, muối mật, vi khuẩn Hp, ) yếu tố bảo vệ (chất nhầy, bicarbonat, prostaglandin, hệ thống mạch máu, tái tạo niêm mạc ), hậu lớp tế bào biểu mơ bị tổn thương Nếu q trình tái tạo tế bào biểu mơ khơng đáp ứng tổn thương cấp tính hình thành xuất ổ loét [16], [17], [36] Nghiên cứu tác dụng chống 44 loét bảo vệ niêm mạc dày chế phẩm thực dựa nhiều loại mơ hình thực nghiệm invitro invivo, mơ hình lại có ưu điểm đặc trưng cho chế khác nhau, kể đến mơ hình thắt mơn vị Shay, mơ hình gây lt stress, mơ hình gây loét thiếu máu cục - tái tưới máu, mơ hình gây lt indomethacin, acid acetic, ethanol, mơ hình nghiên cứu tác dụng kháng vi khuẩn Hp…Các mơ hình sử dụng phổ biến giới Việt Nam Các nghiên cứu trước Sâm báo cho thấy: cao nước Sâm báo có tác dụng bảo vệ dày, làm giảm độ acid dịch vị số loét, ức chế phát triển vi khuẩn Hp mơ hình thực nghiệm khác [8], [10], [24] Để tiếp tục đánh giá tác dụng chống loét dày cao Sâm báo, chúng tơi lựa chọn mơ hình gây lt phương pháp thắt môn vị chuột cống trắng, đề xuất Shay cộng (1945) Mô hình thắt mơn vị Shay mơ hình kinh điển sử dụng để đánh giá tác dụng chống loét dày tá tràng thuốc để so sánh tác dụng thuốc với mô hình khác Khi thắt mơn vị, tình trạng ứ đọng acid dịch vị dày xuất hiện, từ gây lt dày tá tràng Mơ hình mơ tình trạng tăng tiết acid giống bệnh hẹp môn vị lâm sàng [14], [32] Các ưu điểm phương pháp gồm có: thủ thuật đơn giản, vết loét xuất sớm, tỷ lệ loét cao, đánh giá ảnh hưởng thuốc đến tiết acid dịch vị mức độ tổn thương niêm mạc [35] Vì vậy, chúng tơi tiến hành nghiên cứu tác dụng chống loét dày cao Sâm báo dựa mơ hình gây lt cách thắt môn vị, sử dụng hai mức liều 1,35g/kg 2,7g/kg cân nặng chuột, thuốc đối chiếu cimetidin liều 100mg/kg cân nặng chuột (thuốc kháng thụ thể histamin – H2, có tác dụng làm giảm tiết acid dịch vị) Thông số đánh giá pH dịch vị, thể tích dịch vị (ml/100g), độ acid tồn phần (mEq/l), số vết loét, điểm loét, số loét phần trăm ức chế loét lô thử so với lô chứng bệnh Kết nghiên cứu cho thấy cao Sâm báo hai mức liều 1,35g/kg 2,7g/kg không làm thay đổi pH dịch vị, thể tích dịch vị, độ acid tồn phần so với lơ chứng bệnh (p>0,05) Như vậy, hai mức liều nghiên cứu mà sử dụng không ảnh hưởng đến tiết acid dịch vị chuột Đối với tiêu coi quan trọng việc đánh giá tác dụng chống loét dày: Cao Sâm báo hai mức liều nghiên cứu làm giảm điểm loét số lt có ý nghĩa so với lơ chứng bệnh (p0,05) Bên cạnh đó, rễ củ Sâm báo có chứa hàm lượng lớn chất nhầy, yếu tố bảo vệ dày thông qua việc bao phủ niêm mạc, ngăn chặn công acid pepsin vào sâu bên [4] Như sơ đánh giá cao chiết dùng nghiên cứu có tác dụng chống loét dày làm tăng cường yếu tố bảo vệ 45 Năm 2007, tác giả Đào Thị Vui tiến hành nghiên cứu tác dụng chống loét cao nước Sâm báo liều 10g/kg dược liệu mơ hình thắt mơn vị cho kết quả: độ acid tự giảm 20,5%, độ acid toàn phần giảm 13,8%, số lt giảm 79,5%; mơ hình gây loét ethanol: ức chế tới 91,5% số loét; mơ hình gây lt indomethacin: giảm 73,6% số lt so với lơ chứng; mơ hình gây loét mạn acid acetic: diện tích ổ loét giảm 70,7% sau 15 ngày điều trị [24] Chỉ số loét hai mức liều cao Sâm báo nghiên cứu chúng tơi có thấp so với nghiên cứu Có thể thời gian tiến hành thí nghiệm ngày, mà thuốc dược liệu, tác dụng không nhanh, mạnh thuốc tân dược thường cần thời gian sử dụng dài Nhưng bù lại, tác dụng chống lt dày, cao Sâm báo cịn có tác dụng tăng cường thể lực Thật vậy, tăng cường thể lực đặc biệt có ý nghĩa việc hỗ trợ điều trị loét dày tá tràng Vì mắc bệnh này, khả hấp thu chất dinh dưỡng vào thể bị giảm, triệu chứng khó tiêu kèm theo đau đớn khiến cho bệnh nhân không muốn ăn uống, lâu dài khiến người bệnh mệt mỏi, thiếu dinh dưỡng, sức khỏe giảm sút Chính vậy, việc nâng cao sức khỏe giúp thể đề kháng tốt với tác nhân gây bệnh tăng cường yếu tố bảo vệ giúp trình hồi phục loét nhanh Từ kết thu đề tài này, để đánh giá tác dụng chống loét dày cao Sâm báo nghiên cứu tiếp theo, xem xét việc sử dụng Sâm báo khoảng thời gian dài mơ hình gây lt khác 4.3 Về độc tính cao Sâm báo 4.3.1 Về độc tính cấp Mục đích thử độc tính cấp nhằm cung cấp thông tin cho việc xếp loại mức độ độc thuốc, dự đoán triệu chứng dự kiến biện pháp điều trị ngộ độc cấp; thiết lập phạm vi an toàn thuốc nghiên cứu [6] Năm 2007 tác giả Đào Thị Vui tiến hành đánh giá độc tính cấp cao Sâm báo với liều tăng dần từ 100g/kg đến 180g/kg cân nặng chuột nhắt trắng (quy dược liệu), khơng nhận thấy có biểu ngộ độc thời gian theo dõi khơng có chuột chết vịng 72 Khơng xác định LD50 cao nước Sâm báo theo đường uống chuột nhắt trắng [24] Nhìn chung, nghiên cứu độc tính cấp cao Sâm báo cịn ít, để đánh giá tính an toàn cao Sâm báo kết hợp hai cách chiết nước cồn, tiến hành nghiên cứu độc tính cấp dựa mơ hình cổ điển Thí nghiệm tiến hành 20 chuột nhắt trắng, chia làm nhóm, nhóm 10 Sau 72 uống chế phẩm nghiên cứu, tất chuột trạng thái bình thường 100% động vật sống sau 14 ngày theo dõi Kết cho thấy cao Sâm báo với liều 8,1g cao/kg cân nặng chuột tương đương với 30g/kg dược liệu liều cao thể cho chuột nhắt trắng uống mà không thấy xuất biểu độc tính cấp Câu hỏi 46 đặt đánh giá mức liều vậy? Một hạn chế mà gặp phải q trình nghiên cứu thể chất cao tạo thành đặc Cao Sâm báo dùng nghiên cứu sản phẩm kết hợp phương pháp chiết nước cồn, điều giúp chiết kiệt hoạt chất, hàm lượng chất nhầy rễ củ Sâm báo cao (35-40%), nhiên, yếu tố ảnh hưởng khơng tốt đến thể chất cao tạo thành Vì vậy, nghiên cứu sở cho nghiên cứu độc tính cấp cao chiết từ rễ củ Sâm báo tương lai, việc quan tâm đến thể chất cao tạo thành để đánh giá độc tính cấp với mức liều cao có ý nghĩa 4.3.2 Về độc tính bán trường diễn Theo hướng dẫn Bộ Y tế tổ chức OECD, tiến hành đánh giá độc tính bán trường diễn cao Sâm báo hai mức liều 1,35g/kg 2,7g/kg cân nặng chuột thời gian 28 ngày Động vật nghiên cứu lựa chọn chuột cống trắng giống đực, 4.3.2.1 Về ảnh hưởng cao Sâm báo đến tình trạng chung tăng trưởng khối lượng thể chuột Trong suốt trình nghiên cứu, theo dõi tình trạng chung chuột tất lơ , khơng nhận thấy có biểu bất thường, ăn uống hoạt động bình thường, phản xạ tốt với kích thích, mắt linh hoạt, niêm mạc hồng, lơng mượt, khơng tiết chất nhầy mũi, miệng, nước tiểu khơng có bất thường, phân khô Cân nặng chuột tất lơ tăng khơng có khác biệt có ý nghĩa khối lượng thể lơ thử so với lô chứng giống thời điểm (p>0,05) Như vậy, hai mức liều cao Sâm báo uống liên tục 28 ngày không ảnh hưởng đến tình trạng chung cân nặng chuột 4.3.2.2 Về ảnh hưởng cao Sâm báo đến thông số huyết học chuột thí nghiệm Máu gồm thành phần: hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu huyết tương Máu với hệ tuần hoàn tạo thành hệ thống vận chuyển liên lạc tế bào thể, trì định nội môi tạo điều kiện thuận lợi cho hoạt động tế bào [7] Nếu mẫu nghiên cứu có ảnh hưởng đến quan tạo máu trước hết làm thay đổi thành phần máu Các số hồng cầu bao gồm số lượng hồng cầu (RBC), nồng độ hemoglobin (HGB), tỷ lệ hematocrit (HCT), thể tích trung bình hồng cầu (MCV) giúp phát bất thường kích thước, hình dáng màu sắc hồng cầu, bên cạnh chúng cịn có giá trị việc chẩn đoán thiếu máu Bạch cầu thành phần hệ thống bảo vệ thể, số bạch cầu số lượng bạch cầu (WBC) tỷ lệ % tế bào lympho (LYM), việc phản ánh chức quan tạo máu, thông số đánh giá hoạt động hệ miễn dịch Tiểu cầu cấu trúc hoạt động có vai trị quan 47 trọng q trình đông máu Thuốc ảnh hưởng đến số lượng tiểu cầu ảnh hưởng đến q trình đơng máu thể Các thông số nghiên cứu bao gồm: RBC, HGB, HCT, MCV, WBC, LYM PLT Đánh giá ảnh hưởng cao Sâm báo lên thông số huyết học cho thấy: hai mức liều cao Sâm báo hai giống không ảnh hưởng đến thông số: WBC, LYM, RBC, HGB, HCT, PLT chuột Riêng số MCV hai lô chuột uống cao Sâm báo chuột giống có giảm so với lơ chứng (p