Mục tiêu của đề tài Thử độc tính cấp tính và độc tính bán trường diễn của dẫn chất Nano - PLGA - Honokiol nghiên cứu thử nghiệm độc tính cấp tính của dẫn chất Nano - PLGA - Honokiol trên chuột nhắt trắng; thử nghiệm độc tính bán trường diễn của dẫn chất Nano - PLGA - Honokiol trên chuột nhắt trắng.
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC BÙI THỊ HƯƠNG THỬ NGHIỆM ĐỘC TÍNH CẤP TÍNH VÀ ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN ĐỐI VỚI DẪN CHẤT NANO - PLGA -HONOKIOL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Hà Nội - 2022 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC BÙI THỊ HƯƠNG THỬ NGHIỆM ĐỘC TÍNH CẤP TÍNH VÀ ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN ĐỐI VỚI DẪN CHẤT NANO - PLGA - HONOKIOL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Khóa: QH.2017 Y Người hướng dẫn: TS Lê Thị Thùy Dương TS Phạm Thị Hồng Nhung Hà Nội - 2022 LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình thực nghiệm hồn thành khóa luận này, em nhận nhiều giúp đỡ vô quý báu thầy cô giáo Trường Đại học Y Dược - Đại học Quốc gia Hà Nội, Viện Công nghệ sinh học Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc gia Hà Nội, gia đình bạn bè Trước hết, em xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn tới TS Lê Thị Thùy Dương, Phịng Sinh hóa thực vật - Viện Cơng nghệ sinh học, người trực tiếp hướng dẫn, dành nhiều thời gian, hết lịng bảo tận tình, tạo điều kiện, đóng góp ý kiến giúp em hoàn thành đề tài cách tốt suốt thời gian vừa qua Em xin chân thành cảm ơn TS Phạm Thị Hồng Nhung các thầy cô Bộ môn Y Dược học sở Trường Đại học Y Dược - Đại học Quốc gia Hà Nội dành nhiều thời gian tâm huyết, quan tâm giúp đỡ em Các thầy cô gương sáng tác phong làm việc lối sống đạo đức cho em học tập, noi theo Tiếp đó, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới cô Bùi Thị Vân Khánh - Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội giúp đỡ, hướng dẫn cũng tạo điều kiện để em hoàn thiện thu thập số liệu đầy đủ cho khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn tới tồn thể Ban giám hiệu, thầy Trường Đại học Y Dược - Đại học Quốc Gia Hà Nội, cán phịng Hóa sinh thực vật - Viện Công nghệ sinh học giúp đỡ, tạo điều kiện cho em làm khóa luận tốt nghiệp giúp đỡ em hồn thành chương trình học tập Cuối cùng, em vơ biết ơn gia đình bạn bè ln ở bên động viên, khích lệ sát cánh, giúp em có thêm động lực cố gắng để có kết ngày hơm Hà Nội, ngày 06 tháng năm 2022 Sinh viên Bùi Thị Hương DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT Kí tự viết tắt Tên đầy đủ ĐCSH Đối chứng sinh học GLOBOCAN Dự án Cơ quan nghiên cứu ung thư quốc tế thuộc WHO (Global Cancer Observatory) GOT Glutamat Oxaloacetat Transaminase GPT Glutamat pyruvat transaminase HDL - C High Density Lipoprotein Cholesterol Hono Honokiol LD50 Lethal dose 50% ( Liều gây chết 50% số động vật thí nghiệm) LDL - C Low Density Lipoprotein Cholesterol Nano - Hono Nano - Poly axit lactic-co-glycolic - Honokiol PLGA Poly axit lactic-co-glycolic DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Tỉ lệ tử vong chuột sau 72 tiêm tĩnh mạch Nano - PLGA Honokiol 18 Bảng 3.2 Trọng lượng trung bình chuột qua ngày cân 20 Bảng 3.3 Chỉ số huyết học lô chuột nghiên cứu 22 Bảng 3.4 Chỉ số hóa sinh lơ chuột nghiên cứu 244 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Tỷ lệ mắc tử vong ung thư giới năm 2020 Hình 1.2 Thống kê ung thư Việt Nam năm 2020 Hình 1.3 Cơng thức cấu tạo Poly lactic-co-glycolic acid Hình 1.4 Công thức cấu tạo Honokiol Hình 1.5 Sơ đồ biểu diễn dược động học Honokiol Hình 3.1 Biểu đồ thay đổi trọng lượng thể chuột 21 Hình 3.2 Hình ảnh vi thể gan ở lô chuột nghiên cứu 26 Hình 3.3 Hình ảnh vi thể thận ở lơ chuột nghiên cứu 27 Hình 3.4 Hình ảnh vi thể lách ở lơ chuột nghiên cứu 28 Mục lục ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tình hình bệnh ung thư 1.2 Công nghệ nano điều trị ung thư 1.3 Hoạt chất Honokiol 1.3.1 Một số đặc điểm Honokiol 1.3.2 Dược động học Honokiol 1.3.3 Hoạt động kháng ung thư Honokiol 10 1.4 Hệ dẫn Nano - Honokiol 11 1.4.1 Nghiên cứu in vitro hệ dẫn Nano - Honokiol 11 1.4.2 Nghiên cứu in vivo hệ dẫn Nano - Honokiol 12 1.5 Độc tính cấp tính, độc tính bán trường diễn nghiên cứu thuốc 13 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 Đối tượng nghiên cứu 15 2.2 Phương pháp nghiên cứu 15 2.3 Vật liệu, thiết bị nghiên cứu 16 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 18 3.1 Kết nghiên cứu độc tính cấp Nano - PLGA - Honokiol 18 3.2 Kết nghiên cứu độc tính bán trường diễn Nano - PLGA – Honokiol 20 3.2.1 Tác động Hono Nano - Hono đến trọng lượng thể chuột thí nghiệm 20 3.2.2 Tác động Hono Nano - Hono đến số huyết học 22 3.2.3 Tác động Hono Nano - Hono đến chức gan, thận 23 3.2.4 Tác động Hono Nano - Hono đến cấu trúc đại thể vi thể chuột 25 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO 31 ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư kết q trình phân chia tế bào tràn lan có liên quan đến tổ chức chu kỳ tế bào dẫn đến tăng sinh tế bào không kiểm soát Ngồi ra, cũng liên quan đến rối loạn điều hịa q trình chết tế bào theo chương trình (apoptosis), phản ứng viêm cuối lây lan di Theo GLOBOCAN 2020 (dự án Cơ quan nghiên cứu ung thư quốc tế) uớc tính có khoảng 19,3 triệu ca mắc 10 triệu ca tử vong ung thư toàn giới vào năm 2020 Những số tiếp tục tăng thời gian tới tạo thành gánh nặng lớn cho hệ thống chăm sóc sức khỏe Các phác đồ điều trị phổ biến cho bệnh nhân ung thư bao gồm phẫu thuật, hóa trị xạ trị, lại thiếu tính chọn lọc tế bào ung thư gây nhiều tác dụng phụ khác làm ảnh hưởng đến điều trị, cũng gây tổn hại cho tế bào khỏe mạnh Vì việc nghiên cứu, phát triển ứng dụng hệ dẫn thuốc nano để chuyển tải thuốc đến vị trí cần thiết thể dùng điều trị khối u ung thư cần thiết Mục đích việc sử dụng hệ dẫn thuốc nano là: Thu hẹp phạm vi phân bố thuốc thể làm giảm tác dụng phụ thuốc giảm lượng thuốc điều trị Hệ dẫn thuốc nano có nhiều ưu điểm tăng hấp thu, tăng sinh khả dụng; tăng độ ổn định dược chất; tăng tính an tồn Tiểu phân nano có kích thước nhỏ, lượng tự bề mặt lớn diện tích tiếp xúc lớn nên khả tốc độ hịa tan tăng, nhờ làm tăng sinh khả dụng thuốc Một loại polyme nghiên cứu rộng rãi poly axit lactic-co-glycolic (PLGA), Cục Quản lý Thực phẩm Dược phẩm Hoa Kỳ (FDA) chấp nhận cho ứng dụng y tế Chất chứng minh có tiềm hệ thống phân phối thuốc cho nhiều tác nhân điều trị (hóa trị, thuốc chống viêm chống oxy hóa) Honokiol (Hono) hợp chất có hoạt tính sinh học thu từ số loài thuộc chi Magnolia (officinalis, obovata grandiflora) thuộc họ Magnoliaceae Gần đây, Hono phát với các đặc tính kháng khuẩn, chống viêm, chống huyết khối, kháng u bảo vệ thần kinh mơ hình tiền lâm sàng mà khơng gây độc tính đáng kể Hono ở dạng tinh khiết đánh giá an toàn cho người dùng sử dụng qua đường uống Đối với dạng hạt nano, hệ thống phân phối thuốc thiết kế bao bọc Hono cho thấy giảm phát triển khối u rõ rệt, đồng thời chứng minh tính an tồn động vật phương pháp đầy hứa hẹn điều trị ung thư Khi tiến hành thử nghiệm nhằm đưa dẫn chất ứng dụng điều trị, cần phải biết mức độ gây hại chất các quan thể Đánh giá độc tính cấp tính, độc tính bán trường diễn sở để xây dựng nên khoảng liểu phù hợp cho thử nghiệm Ngồi ra, q trình cịn cung cấp thơng tin tính an tồn cho các giai đoạn I, II, III thuốc đưa vào thử nghiệm lâm sàng Tuy nhiên, chưa có nhiều nghiên cứu độc tính cấp độc tính bán trường diễn hệ dẫn PLGA Honokiol ở dạng hạt nano Do đó, chúng tơi tiến hành thực đề tài “Thử độc tính cấp tính độc tính bán trường diễn dẫn chất Nano - PLGA Honokiol” với nội dung sau: Thử nghiệm độc tính cấp tính dẫn chất Nano - PLGA - Honokiol chuột nhắt trắng Thử nghiệm độc tính bán trường diễn dẫn chất Nano - PLGA Honokiol chuột nhắt trắng ... tính cấp tính độc tính bán trường diễn dẫn chất Nano - PLGA Honokiol? ?? với nội dung sau: Thử nghiệm độc tính cấp tính dẫn chất Nano - PLGA - Honokiol chuột nhắt trắng Thử nghiệm độc tính bán... THỊ HƯƠNG THỬ NGHIỆM ĐỘC TÍNH CẤP TÍNH VÀ ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN ĐỐI VỚI DẪN CHẤT NANO - PLGA - HONOKIOL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Khóa: QH.2017 Y Người hướng dẫn: TS Lê... 3.1 Kết nghiên cứu độc tính cấp Nano - PLGA - Honokiol 18 3.2 Kết nghiên cứu độc tính bán trường diễn Nano - PLGA – Honokiol 20 3.2.1 Tác động Hono Nano - Hono đến trọng lượng