Nghiên cứu đánh giá độc tính cấp, bán trường diễn và tác dụng chống viêm, giảm đau trên thực nghiệm của chế phẩm osviko luận văn thạc sĩ dược học

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VŨ MINH PHƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CẤP, BÁN TRƯỜNG DIỄN VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM, GIẢM ĐAU TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA CHẾ PHẨM OSVIKO LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VŨ MINH PHƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CẤP, BÁN TRƯỜNG DIỄN VÀ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM, GIẢM ĐAU TRÊN THỰC NGHIỆM CỦA CHẾ PHẨM OSVIKO LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH DƯỢC LIỆU – DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 8720206 Người hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Mạnh Tuyển TS Ngô Thị Quỳnh Mai Nơi thực đề tài: Trường Đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI 2023 LỜI CẢM ƠN Chế phẩm viên nang Osviko ứng dụng từ kết nghiên cứu đề tài ‘‘Xác định hoạt chất chống viêm dược liệu Hy thiêm để nghiên cứu nâng cao hiệu xuất chiết xuất hoạt chất từ dược liệu nâng cấp tiêu chuẩn sản phẩm chứa hy thiêm’’ PGS.TS Phương Thiện Thương làm chủ nhiệm đề tài, đề tài nghiệm thu 2022 Với tất kính trọng lịng biết ơn, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Mạnh Tuyển, Trưởng khoa Dược liệu - Dược học cổ truyền – Trường Đại học Dược Hà Nội hướng dẫn tơi tận tình q trình thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn PGS.TS Phương Thiện Thương TS Ngô Thị Quỳnh Mai ln quan tâm giúp đỡ, có góp ý tâm huyết thầy giúp tơi hồn thiện đề tài nghiên cứu Tôi chân thành cảm ơn tới khoa Dược liệu – Dược học cổ truyền, Trường Đại học Dược Hà Nội, Bộ môn Dược lý Trường Đại học Y Hà Nội tạo điều kiện sở vật chất, hệ thống tài liệu thuận lợi cho việc tra cứu, tìm kiếm thơng tin Tơi gửi lời cảm ơn đồng nghiệp ban lãnh đạo công ty, cán tập thể lớp CH26 đồng hành tơi q trình nghiên cứu Cuối tơi gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè ln hỗ trợ giúp đỡ, chia sẻ khó khăn trình tơi thực đề tài Học viên Vũ Minh Phương MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ VIÊM VÀ ĐAU THEO Y HỌC HIỆN ĐẠI .3 1.1.1 Viêm 1.1.2 Đau .8 1.2 TỔNG QUAN VỀ VIÊM VÀ ĐAU THEO Y HỌC CỔ TRUYỀN 16 1.2.1 Sơ lược quan niệm viêm theo Y học cổ truyền 16 1.2.2 Sơ lược chứng Tý theo quan niệm Y học cổ truyền 16 1.2.3 Các thể lâm sàng điều trị .18 1.3 THỰC TRẠNG NGHIÊN CỨU CÁC THUỐC Y HỌC CỔ TRUYỀN CÓ TÁC DỤNG CHỐNG VIÊM TRÊN THẾ GIỚI VÀ TRONG NƯỚC 23 1.3.1 Thực trạng nghiên cứu tác dụng chống viêm thuốc Y học cổ truyền giới 23 1.3.2 Thực trạng nghiên cứu thuốc Y học cổ truyền có tác dụng chống viêm Việt Nam 24 1.4 TỔNG QUAN VỀ CHẾ PHẨM VIÊN NANG OSVIKO .27 1.4.1 Thành phần .27 1.4.2 Phân tích thành phần 27 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .32 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 32 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu .32 2.1.2 Hóa chất nghiên cứu 32 2.1.3 Động vật thực nghiệm 32 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.2.1 Đánh giá tính độc tính cấp, độc tính bán trường diễn viên nang OSVIKO .33 2.2.2 Đánh giá tác dụng chống viêm, giảm đau Viên nang OSVIKO 34 Chương KẾT QUẢ .39 3.1 Kết đánh giá độc tính cấp, độc tính bán trường diễn viên nang OSVIKO 39 3.1.1 Độc tính cấp 39 3.1.2 Độc tính bán trường diễn 40 3.2 Kết đánh giá tác dụng chống viêm, giảm đau viên nang OSVIKO 53 3.2.1 Tác dụng chống viêm cấp mãn viên nang OSVIKO 53 3.2.2 Tác dụng giảm đau viên nang OSVIKO 57 Chương BÀN LUẬN 61 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ALT : Alanine transaminase AST : Aspartate transaminase DĐVN : Dược điển Việt Nam IL : Interleukin HPLC : High Performance Liquid Chromatography OECD : Organization for Economic Cooperation and Development PG : Prostaglandin PVP : Polyvinylpyrrolidon TCCS : Tiêu chuẩn sở TCNSX : Tiêu chuẩn nhà sản xuất TNF : Tumor Necrosis Factors VKDT : Viêm khớp dạng thấp YHCT : Y học cổ truyền YHHĐ : Y học đại LD50: : Liều gây chết trung bình DANH MỤC CÁC BẢNG, BIỂU Bảng Nội dung Trang 3.1 Kết nghiên cứu độc tính cấp viên nang OSVIKO 39 3.2 Ảnh hưởng OSVIKO đến thể trọng chuột cống trắng 41 3.3 Ảnh hưởng OSVIKO đến số lượng hồng cầu chuột 42 cống 3.4 Ảnh hưởng OSVIKO đến hàm lượng huyết sắc tố 42 máu chuột cống trắng 3.5 Ảnh hưởng OSVIKO đến hematocrit máu chuột 43 cống trắng 3.6 Ảnh hưởng OSVIKO đến thể tích trung bình hồng cầu 43 máu chuột cống trắng 3.7 Ảnh hưởng OSVIKO đến số lượng bạch cầu chuột 44 cống 3.8 Ảnh hưởng OSVIKO đến công thức bạch cầu máu 44 chuột cống 3.9 Ảnh hưởng OSVIKO đến số lượng tiểu cầu máu 45 chuột cống 3.10 Ảnh hưởng OSVIKO đến hoạt độ AST máu chuột 46 cống 3.11 Ảnh hưởng OSVIKO đến hoạt độ ALT máu chuột 46 cống 3.12 Ảnh hưởng OSVIKO đến nồng độ bilirubin toàn phần 47 máu chuột cống trắng 3.13 Ảnh hưởng OSVIKO đến nồng độ albumin huyết tương 48 chuột 3.14 Ảnh hưởng OSVIKO đến nồng độ cholesterol toàn phần máu chuột cống trắng 48 3.15 Ảnh hưởng OSVIKO đến nồng độ creatinin máu 49 chuột cống trắng 3.16 Hình thái vi thể thận 51 3.17 Ảnh hưởng viên nang OSVIKO đến mức độ phù chân 53 chuột 3.18 Ảnh hưởng viên nang OSVIKO đến thể tích, số lượng 54 bạch cầu, lượng protein dịch rỉ viêm 3.19 Ảnh hưởng viên nang OSVIKO đến trọng lượng khối u hạt 56 lô chuột thử nghiệm 3.20 Ảnh hưởng viên nang OSVIKO lên thời gian phản ứng 57 chuột nhắt trắng phương pháp mâm nóng 3.21 Ảnh hưởng viên nang OSVIKO lên thời gian phản ứng 58 chuột nhắt trắng phương pháp vẫy đuôi 3.22 Ảnh hưởng viên nang OSVIKO lên số quặn đau chuột nhắt trắng 59 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Nội dung Hình 2.1 Sơ đồ thiết kế nghiên cứu Trang 33 Hình thái vi thể gan chuột cống trắng lơ chứng (a, b: chuột 3.1 cống trắng số 203, 210) (HE x 400) (HE x 400: Nhuộm 50 Hematoxylin - Eosin, độ phóng đại 400 lần) 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 Hình thái vi thể gan chuột cống trắng lơ thử (a, b: chuột cống trắng số 228, 230) sau 30 ngày uống chế phẩm (HE x 400) Hình thái vi thể gan chuột cống trắng lô thử (a, b: chuột cống trắng số 211, 215) sau 30 ngày uống chế phẩm (HE x 400) Hình thái vi thể thận chuột cống trắng lô chứng (a, b: chuột cống trắng số 203, 204) (HE x 400) Hình thái vi thể thận chuột cống trắng lô thử (a, b: chuột cống trắng số 223, 228) sau 30 ngày uống chế phẩm (HE x 400) Hình thái vi thể thận chuột cống trắng lô thử (a, b: chuột cống trắng số 211, 215) sau 30 ngày uống chế phẩm (HE x 400) 51 51 52 52 52 ĐẶT VẤN ĐỀ Triệu chứng thường xuất sớm phổ biến nhiều bệnh lý viêm đau, gây ảnh hưởng không nhỏ đến chất lượng sống người bệnh Viêm vừa phản ứng bảo vệ thể chống lại yếu tố gây bệnh, vừa phản ứng bệnh lý trình viêm gây tổn thương, hoại tử, rối loạn chức quan Khi viêm mức độ nặng gây nhiều biến chứng nguy hiểm, ảnh hưởng đến sức khỏe người bệnh [4] Viêm khớp gây đau đớn, tàn phế, giảm suất lao động chất lượng sống đồng thời làm gia tăng chi phí chăm sóc y tế gây thiệt hại kinh tế [40] Sử dụng thuốc thực phẩm bảo vệ sức khỏe để điều trị, hỗ trợ điều trị nhu cầu thiếu nhằm cải thiện sức khỏe, nâng cao chất lượng sống cho người bệnh Bệnh nhân thường định dùng thuốc chống viêm steroid không steroid, sử dụng lâu dài gây nhiều tác dụng khơng mong muốn tim mạch, tiêu hóa, thận – tiết niệu chuyển hóa Một số thuốc hạn chế nhược điểm giá thành cao, gây khó khăn cho chi trả người bệnh [3], [5], [25], [26] Một thực tế nay, nhiều thuốc, thuốc Y học dân tộc ông cha sử dụng từ ngàn xưa để chữa bệnh lý xương khớp đem lại hiệu cao, lại an toàn, rẻ tiền dễ áp dụng Nhằm khai thác tiềm từ thảo dược bảo vệ chăm sóc sức khỏe người bệnh có liên quan đến viêm đau, viên nang OSVIKO phát triển với thành phần gồm hy thiêm, độc hoạt, tang ký sinh, cốt toái bổ, dây đau xương, thiên niên kiện … Theo Y học cổ truyền dược liệu có cơng khu phong trừ thấp, thống, bổ can thận; đó, hy thiêm có tác dụng giảm đau, chống viêm thực nghiệm [2], [6], [9], [20], [28], [47] Chế phẩm xây dựng với định hướng hỗ trợ giảm triệu chứng viêm, làm chậm q trình thối hóa khớp, hỗ trợ tăng khả vận động người bị bệnh xương khớp, cải thiện tính linh hoạt khớp, hỗ trợ giảm đau nhức xương khớp, giảm triệu chứng viêm khớp, đau lưng, mỏi gối - Nhân viên IPC kiểm tra: Hình thức cảm quan viên nang, khối lượng viên tối thiểu lần/ca ghi kết vào Nhật ký kiểm sốt viên - Sau hồn thành q trình đóng nang, nhân viên đóng nang báo cáo số lượng viên nhập số lượng bán thành phẩm vào kho, chuẩn bị cho trình ép vỉ Bước 7: Ép vỉ Chuẩn bị: - Máy ép vỉ DDP–250S, vận hành theo SOP hướng dẫn - Kiểm tra vệ sinh dụng cụ, thiết bị theo quy định - Phiếu kiểm nghiệm bán thành phẩm, màng PVC, màng nhôm, hồ sơ lô sản xuất Chạy máy: - Cài đặt thông số máy ép vỉ, tốc độ 30-35 vỉ/phút - Vận hành máy: Cho viên thuốc làm vào khuôn ép, cho máy chạy - Kiểm tra: Vỉ phải dán đều, khơng phồng dộp, khơng hở, số kiểm sốt & ngày sản xuất-hạn dùng rõ ràng Kiểm sốt q trình ép vỉ: - Nhân viên chạy máy ép vỉ kiểm tra hình thức vỉ thuốc: phải dán đều, vỉ thuốc phẳng khơng phồng dộp, khơng hở, số kiểm sốt & ngày sản xuất-hạn dùng rõ ràng - Nhân viên IPC kiểm tra: Hình thức vỉ, độ kín, tối thiểu lần/ca ghi kết vào Nhật ký kiểm soát viên - Vỉ đạt tiêu chuẩn chuyển sang phịng đóng gói cấp Bước 8: In thơng tin lơ hộp, nhãn thùng carton đóng gói - Kiểm tra nội dung in hộp cho phù hợp với sản phẩm - In số lô, ngày sản xuất, hạn dùng lên hộp theo thông tin máy in phun, ghi lại vào phiếu theo dõi xiv - Gấp toa hướng dẫn, ghi vào phiếu theo dõi - Vào hộp với số lượng vỉ/hộp kèm toa hướng dẫn, gài hộp cho khít, chắn - In thông tin người vào hộp, ngày sản xuất, hạn dùng, số lô lên thùng carton Kiểm tra thông tin in thùng cho phù hợp - Gửi mẫu kiểm nghiệm thành phẩm, nhập kho có kết xv PHỤ LỤC 3: TIÊU CHUẨN VIÊN NANG OSVIKO Tính chất: Viên nang cứng, bên có bột có màu vàng đến nâu đen, có mùi đặc trưng dược liệu Đồng khối lượng: chênh lệch so với khối lượng viên trung bình khơng q 7,5% Mất khối lượng làm khô: Không 9% Độ rã: Khơng q 30 phút Định tính: Chế phẩm phải thể phép thử định tính Hy thiêm, Hồng cầm, độc hoạt, tang kí sinh, dây đau xương Kim loại nặng: Không 20 phần triệu Định lượng: Chế phẩm không 4mg tổng hàm lượng kirenol darutosid, tính theo chế phẩm khô kiệt Độ nhiễm khuẩn: Chỉ tiêu: Yêu cầu: Tổng số vi khuẩn hiếu khí: Khơng q 104 CFU/g Tổng số nấm: Không 102 CFU/g Vi sinh vật gây bệnh: Không 102 CFU vi khuẩn Gram âm dung nạp mật g Salmonella 10 g: Khơng có Escheria coli, Staphylococcus aureus Khơng có 1g: xvi PHỤ LỤC 5: PHIẾU KIỂM NGHIỆM CAO VÀ THÀNH PHẨM VIÊN NANG OSVIKO xvii xviii xix xx xxi xxii xxiii xxiv xxv xxvi xxvii 28