Nghiên cứu chuyển hóa selen vô cơ thành selen hữu cơ bằng nấm men

VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC RX£-* 20GS - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Thư viện Viện EỆfír4ể'Mơ Hà Nội “NGHIÊN CỨU CHUYẾN HĨA SELEN VƠ co THÀNH SELEN HỮU co BẢNG NẨM MEN" Giáo viên hưóTig dẫn: PGS TS Vũ Nguyên Thành Sinh viên thực hiện: Nguyễn Xuân Phuong Lớp: K20 -1302 Hà Nội - 2017 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoa Công Nghệ Sinh Học MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC BẢNG DANH MỤC Sơ ĐỊ, HÌNH VÈ DANH MỤC CHỪ CÁI VIẾT TẮT MỚ ĐẦU PHẦN 1: TÔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Vài nét nguyên tố Selen 1.1.1 Đặc điểm 1.1.2 Phân bố 1.1.3 Vai trò cùa Selen thế, 1.2 Tổng quan nấm men 1.2.1 Giá trị dinh dường củạ nâm.inen 1.2.2 Điều kiện sinh trưởng phát triến nấm men .6 1.2.3 Nguồn dinh dưỡng cho nấm men 1.2.4 Khả hấp thụ Selen nấm men 1.3 Khái quát nấm men giàu Selen 1.3.2 Tinh hình nghiên cứu sản phẩm nấmmen giàu selen 1.3.3 ứng dụng công dụng nấm men giàu selen 10 1.4 Khái quát cao nấm men 11 1.4.1 Cao nam men nấm men tự phân 11 1.4.2 ú’ng dụng cao nấm men 13 1.5 Các phương pháp phân tích Selen 14 1.5.1 Phương pháp phân tích khối lượng 14 1.5.2 Phương pháp quang phố hấp thụ nguyên tử 14 1.5.3 Phương pháp huỳnh quang Rơnghen 14 Nguyễn Xuân Phương - 1302 Viện Đại học Mở Hà Nội 1.5.4 Khoa Công Nghệ Sinh Học Phương pháp huỳnh quang nguyên tử .15 PHÀN 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cửu 16 2.1 Vật liệu, hóa chất, mơi trường ni cấy, dụng cụ thiết bị 16 2.1.1 Vật liệu môi trường nuôi cấy 16 2.1.2 Hóa chất 17 2.1.3 Dụng cụ thiết bị 17 2.2 Phạm vi nghiên cứu 18 2.3 Nội dung nghiên cứu 18 2.4 Phương phápnghiên cứu: 18 2.4.1 Phương pháp chuẩn bị hóa chất hỗ trợ phân tích 18 2.4.2 Phương pháp phân tích hàm lượng Selen có nấm men 19 2.4.3 Phương pháp nuôi cấy nấm men 24 2.4.4 Phương pháp bảo quản nấm men 27 2.4.5 Phương pháp thúy phân nấm men giàu Selen hữu Ị 27 PHÀN 3: KÉT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 3.1 Xây dựng phương pháp phân tích hàm lượng Selen có nấm men phù hợp với điều kiện phịng thí nghiệm 29 3.1.1 Phương pháp tách Selen từ nấm men HNO325% H2O230%: 29 3.1.2 Tách chiết Selen từ nấm men phương pháp đun cách cát 29 3.1.3 Phương pháp tách Selen từ nấm men phương pháp pháp mẫu bang máy phá mẫu Milestone 30 3.1.4 Ket hợp phá vỡ tế bào nấm men máy phá mẫu Milestone đun cách cát 31 3.2 Lựa chọn chủng nấm men có khả chuyến hóa Selen vơ 32 3.3 Xác định điều kiện môi trường phù hợp cho nấm men chuyển hóa Selen vơ thành Selen hữu 36 3.4 Thử nghiệm thủy phân nấm men giàu selen hữu 39 Nguyễn Xuân Phương - 1302 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoa Công Nghệ Sinh Học PHẢN 4: KẾT LUẬNVÀ KIÉN NGHỊ 46 4.1 Kết luận: 46 4.2 Kiến nghị: 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO 47 Thư viện • Viện • Đại • học • Mở Hà Nội • Nguyễn Xuân Phương - 1302 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoa Công Nghệ Sinh Học DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1.Hàm lượng vitamin nấm men bia sấy khô |6| Bảng 1.2 Anh hướng nhiệt độ lên hiệu thủy phân nấm men 12 Bảng 2.1 Tỉ lệ dung dịch đệm Stock Selen 20 Bảng 2.2 Giá trị OD cùa nồng độ Selen 21 Bảng 2.4 Các chùng nấm men sử dụng để chọn lọc 24 Bảng 3.1 Kết định lượng selen sau tách chiết HNO3 25% H2O230% 29 Bảng 3.2 Kết định lượng Selen nấm men bàng phương pháp đun cách cát 30 Bảng 3.3 Ket định lượng selen nấm men bàng phương pháp phá mẫu máy 31 Bảng 3.4 Kết định lượng Selen trọng nấm men phương pháp phá mẫu máy đun cách cát í ’ 32 Bàng 3.5 Khối lượng chế phẩm nấm men giàu selen thu sau nuôi cấy môi trường YM 34 Bảng 3.6 Khối lượng chế phẩm nấm men giàu selen thu sau nuôi cấy môi trường Malt 5°Bx 34 Bảng 3.7 Các điều kiện trước sau nuôi nấm men giàu Selen 36 Bảng 3.8 Sinh khối thu hàm lượng Selen tồn phần vơ tự nấm men khô giàu Selen 37 Bảng 3.9 Anh hường của nồng độ selen vô bố sung ban đầu tới khả chuyển hóa selen nấm men 37 Bảng 10 Hiệu suất thủy phân nấm men giàu selen tính theo phương pháp sấy 43 Nguyễn Xuân Phương - 1302 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoa Công Nghệ Sinh Học DANH MỤC SO ĐỊ, HÌNH VÊ Hình 2.1 Đường chuẩn Selen 21 Hình 3.1 Sơ đồ ni cấy nấm men giàu selen 33 Hình 3.2 Trạng thái nấm men lúc 38 Hình 3.3 Trạng thái nấm men sau chun hóa selen vơ thành 38 Hình 3.4 Quy trình thùy phân nấm men phương pháp sinh học 39 Hình 3.5 Sơ đồ quy trình thủy phân phương pháp hóa học 41 Hình 3.6 Sau trình thủy phân kết thúc 42 Thư viện • Viện • Đại • học • Mở Hà Nội • Nguyễn Xuân Phương - 1302 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoa Công Nghệ Sinh Học DANH MỤC CHŨ CÁI VIÉT TẤT Ký hiệu Tên đầy đủ YM Yeast Malt GSHPx Glutathionine peroxydase CNTP Công nghệ thực phẩm FDA Food and Drug Administration HIV Human Immuno-deficiency Virus Thư viện • Viện • Đại • học • Mở Hà Nội • Nguyễn Xuân Phương - 1302 MỞ ĐÀU Vào năm đầu kỷ 20, Selen nhìn nhận ngun tố độc hại, gây què tử vong cho động vật ăn cò.Vai trò Selen nhiều nhà khoa học ý; lúc tác dụng Selen công nhận Ớ nồng độ định, Selen nhìn nhận nguyên tố vi lượng thiết yếu cho người động vật Thực tế, lĩnh vực chăn nuôi, người ta nhận thấy thức ăn thiếu Selen súc vật mắc bệnh loạn dường cơ, tăng tiết dịch, Theo kết nghiên cứu dịch tê học Nhật Bản, New Zealand, cho thấy số địa phương hàm lượng Selen phần ăn thấp tỷ lệ người mắc bệnh ung thư, bệnh tim mạch,vô sinh, viêm khớp, cao nơi khác Các cơng trình nghiên cứu ràng Selen có vai trị quan trọng q trình hơ hấp tế bào có liên quan đến sinh tống hợp Co - enzyme, thành phần cấu tạo nên Gluthathion peroxydase (GSHPx) - enzyme chống lại q trình oxy hóa lipid giảm hoạt hóa vitamin E, Hay gần đây, nhà nghiên cứu tìm bàng chứng cho thấy selen ảnh hường tới hệ thống miền dịch, có ảnh hưởng lớn tới sống bệnh nhân HlV.Selen coi chất chống oxy hóa quan trọng, giúp the loại bò gốc tự do, pcroxit độc hại Như vậy,Selen tham gia vào việc tăng cường hệ thống oxy hóa Sự thiếu hụt Selen the sể có the gây 40 bệnh người suy thoái võng mạc, suy giảm miễn dịch, ung thư, viêm khớp, tim mạch, Chính Selen có tác dụng lớn mà ngày có nhiều nghiên cứu, thử nghiệm tạo chế phẩm Selen Từ thử nghiệm bổ sung Selen cho động vật, sau nghiên cứu áp dụng người cho thấy điếm sáng cho việc khắc phục thiếu hụt Selen Thoạt đầu người ta sử dụng Selen vô Nguyễn Xuân Phương - 1302 cơ, ví dụ Selcnat Natri selenite Năm 1987, cục quản lý Thực phẩm Dược phấm Hoa Kỳ (FDA) chấp thuận sử dụng Sodium selenite Natri seỉenat ỡ mức 0,3 ppm thức ăn gia súc Tuy nhiên, ta phải cẩn trọng với độc tính cúa Selen vơ cơ, dùng q liều gây tai biến hay tử vong Những nghiên cứu cho thấy Selen dạng hữu có the dỗ dàng hấp thụ an toàn so với Selen vơ Trên giới có nhiều nghiên cứu việc tìm nguồn Selen dạng hữu Ngưởi ta tiến hành tìm cối, hàm lượng cối thay đôi theo mùa, đất đai, gây nên nhiều trở ngại Chính mà hướng ni cấy nấm men mơi trường có Selen vơ nên cần thiết hết Xuất phát từ tình hình thực tiền này, chúng tơi tiến hành nghiên cứu đề tài:“Nghiên cứu chun hóa Selen vơ thành Selen hữu nấm men” > Mục tiêu ngĩtocBện Viện Đại học Mở Hà Nội - Lựa chọn chủng điều kiện môi trường cho nấm men có khả chun hóa Selen vơ thành Selen hữu > Nội dung đề tài: - Xây dựng phương pháp phân tích hàm lượng Selen có nấm men phù hợp với điều kiện phịng thí nghiệm - Lựa chọn chủng nấm men có khả chuyển hố Selen vơ thành Selen hữu - Xác định điều kiện môi trường phù hợp cho nấm men chuyển hố Selen vơ thành Selen hữu - Thử nghiệm thủy phân nấm men giàu Selen hữu tạo sản phẩm nấm men giàu Selen hòa tan Nguyễn Xuân Phương - 1302 PHÀN 1: TÓNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Vài nét nguyên tố Selen ỉ 1.1 Đặc điểm Tên quốc tế: Selenium Kí hiộu hóa học: Se Nguyên tử lượng: 78,96 Selen nguyên tố hóa học thuộc nhóm VI A bảng tuần hồn ngun tố, có số thứ tự 34, cấu hình electron lớp ngồi là: 4s24p4 Các ngun tố nhóm với Selen là: Oxy, Lưu huỳnh, Telu Poloni |2, 12] Vạch phổ hấp thụđặc trưng nhạy Selen vạch 196,1 nm sử dụng dung kỹ thuật F - AAS ETA - A AS [10, 19, 20] Tính chất hóa học Selen giống Lứu huỳnh, chúng thể mức oxy hóa -2; +4; +6 tương ứng với hợp chất Sulíìd - Selenid; Sulíìt - Selenit; Sulfat - Selenat 1.1.2 Phăn hồ Trong thực vật, Selen thường tập trung thuộc họ Đậu, họ Cà phê, Nhàu, Keo giậu, lúa mì số lồi nấm.Trong động vật, Selen có nhiều cá đặc biệt da gan cá ngừ, cá nục, cá thu [2, 4, 12] 1.1.3 Vai trò Selen đồi với thê Trước đây, Selen coi ngun tố có độc tính cao nhừng vùng đất giàu Selen thường gặp số bệnh súc vật người rụng lông, yếu cơ, Thế đến năm 1949, Claton Bauman nhận thấy hàm lượng Selcn phần ăn có tác dụng ngăn chặn phát sinh ung thư Nguyễn Xuân Phương - 1302 03 04 05 06 07 08 CNTP 7136(1) CNTP7136 (2) CNTP7137 (1) CNTP 7137 (2) CNTP 7040(1) CNTP 7040 (2) CNTP 7048(1) CNTP 7048 (2) CNTP 7047(1) CNTP 7047 (2) CNTP7138 (1) CNTP7138 (2) 4,39 5,13 5,17 5,07 4,05 3,96 3,75 3,82 3,35 3,39 4,45 4,45 0,79 0,83 0,77 0,73 0,82 0,86 0,62 0,60 0,55 0,57 0.75 0,72 3046 2644 2381 4828 2381 2695 6716 5827 3536 3638 3597 3866 Chú thích: Kí hiệu (1), (2) lần lặp lại thí nghiệm Thơng qua số liệu bảng trên, ta thấy chùng nấm men cho lượng sinh khối ổn định Nếu xét theo lượng sinh khối, chủng CNTP 7048 nuôi môi trường YM cho ta lượng chế phàm nấm ,men giàu Selen cao Tuy nhiên, chủng CNTP 7048 nuôi môi trường Malt 5°Bx lại không cho sinh khối cao mà thay vào chúng CNTP 7135 lại cho lượng sinh khối cao nhất, đồng thời chúng cho lượng sinh khối cao môi trường YM Đe lựa chọn chủng phù hợp ta cần đánh giá hàm lượng Selen chuyến hóa vào nấm men.Hàm lượng Selen nấm men cao đồng nghĩa với việc chất lượng nấm men giàu Selen tốt, với mục đích nghiên cứu cần đạt Dựa vào phương pháp phân tích đường chuẩn Selenxây dựng được, nấm men giàu Selen thu thí nghiệm ni cấy dược dem di phân tích có kết thể bảng 3.5 bảng 3.6 Trên môi trường YM, chủng CNTP 7138 chủng Bia Hà Nội hấp thụ Selen chủng CNTP 7137 có hàm lượng Selen cao nhất.Các chủng nấm Nguyễn Xuân Phương - 1302 35 lĩien nuôi môi trường Malt hấp thụ Selen chúng nuôi môi trường YM Chúng CNTP 7048 có hàm lượng Selen cao chùng nuôi môi trường Malt 5°Bx Tuy nhiên, lại lựa chọn chủng CNTP 7137 do: nuôi môi trường Malt 5°Bx, chúng nấm men khơng có hàm lượng Selen cao chùng Dù vậy, CNTP 7137 cho hàm lượng Selen cao, chưa ké đến hàm lượng sinh khối thu khơng Ớ mơi trường YM Malt 5°Bx, CNTP 7137 có lượng sinh khối cao ồn định, cộng thêm hàm lượng Selen có nấm men cao Chính vậy, lựa chọn chùng CNTP 7137 chủng nấm men có khả nàng chuyền hóa Selen vơ thành Selen hừu cao 3.3 Xác định điều kỉện mơi trường phù hợp cho nấm men chuyến hóa Selen vô CO’ thành Selen hữu CO' 3.3.1 Xác định môi trường _ ' , viền Viện DaLhoc MảHà Nôi TT „ , Trong q trình ni, chung tơi tiên hành kiêm tra độ pH, Bx cùa môi trường để kiểm sốt thay đổi mơi trường tổng lượng sinh khối thu đế xác định xem môi trường phù hợp nuôi cấy nấm men Kết thê bảng 3.8 3.7: Bảng 3.7 Các điều kiện CO’ trước sau nuôi nấm men giàu Selen Mẫu Môi trường nuôi pH dịch trước nuôi cấy pH dịch sau nuôi cấy Bx dịch trước nuôi cấy Bx dịch sau nuôi cấy SI Malt 10°Bx 5,35 5,8 10,20 3,0 S2 Glucose dinh dường 7,35 6,2 11,10 3,6 S3 Glucose dinh dường + cao nấm men 7,18 6,15 12,10 3,9 S4 Malt l°Bx + thành phần Glucose dinh dường 7,29 6,17 12,0 3,4 Nguyễn Xuân Phương - 1302 36 Bảng 3.8 Sinh khối thu hàm lượng Selen tồn phần vơ tự nấm men khô giàu Selen Mẩu SI S2 S3 S4 Sinh khối đặc • sau ni cấy 47,86 47,74 47,26 49,48 Sinh khối khơ sau ni cấy Selen tồn phần (g) (pg/g) 3294 3138 3659 3210 10,00 8,81 8,71 10,20 Selenvô tự (gg/g) 87 60 72 62 Kết quà bảng 3.7 bảng 3.8 cho ta thấy mơi trường S3 S4 mơi trường có dinh dưỡng cao, hàm lượng đường cao môi trường Sl, S2.GÚC môi trường cho lượng nấm men dồi dào, đặc biệt môi trường S4 Kế trước say sau sấy mơi trường Malt l°Bx với thành phần Glucose dinh dưỡng cho lượng sinh khối cao Vì vậy, chúng tơi lựa chọn mơi trường Malt l°Bx với thành phần Glucose dinh dưỡng • • • • • 3.3.2 Nồng độSelentrên môi truồng Tiến hành khảo sát nồng độ Selen môi trường từ 270 Lig/ml, 210 pg/ml, 150 pg/ml, 90 pg/ml 50 pg/ml Bảng 3.9 Ảnh hưòng của nồng độ Selen vơ CO' bổ sung ban đầu tói khả chuyển hóa Selen nấm men Mẩu SI S5 S6 S7 S8 270 210 150 90 50 Hàm lượng Selen toàn phần (pg/g) 3579 3542 2631 1874 974 Hàm lượng Selenvô tự (pg/g) 87 75 61 52 42 Nồng độ Selen mơi trưịng ban đầu (pg/ml) Nguyễn Xuân Phương - 1302 37 Nhận xét:Nhìn số liệu báng 3.8, ta thấy mơi trường Sl, S5, S6, S7 S8 cho sản phẩm nấm men có hàm lượng Selen thấp dần tương ứng với hàm lượng Selen bồ sung 1Ù270, 210, 150, 90 50|ig/ml Hàm lượng Selen bố sung vào môi trường ảnh hướng nhiều tới lượng Selen có bên mà nấm men chuyển hóa Selen vơ thành Selen hừu Khi tăng nồng độ Selen vô từ 210pg/ml lên 270 pg/ml hàm lượng Selen toàn phần nấm men khơ thu tăng khơng đáng kể.Do đó, chúng tơi lượng chọn 210pg/ml nồng độ Selen vơ thích hợp đê bổ sung vào môi trường nuôi cấy nấm men giàu Selen Hình 3.2.Trạng thái nấm men lúc giò' - — - — • “ - x 1*1 Hình 3.3 Trạng thái nâm men sau chun hóa Selen vô CO’ thành Nguyễn Xuân Phương - 1302 38 hữu Hình3.2 3.3 thể rõ thay đối màu nấm men sau bổ sung thêm Selen vào mơi trường Điều có the nấm men hấp thụ Selen thay đồi màu từ trắng sang hồng đỏ gạch 3.4 Thử nghiệm thủy phân nấm men giàu Selen hữu CO’ Quy trình thúy phân nấm men: Hình 3.4.Quy trình thủy phân nấm men phưong pháp sinh học Nguyễn Xuân Phương - 1302 39 Nấm men pha loãng Nguyễn Xuân Phương - 1302 40 Hình 3.5.SO’ đồ quy trình thủy phân phương pháp hóa học Nấm men pha loãng Hấp nhiệt độ 121 °C * 0.75% H2SO4 Sau thủy phân nấm men bia theo phương pháp mục 2.4.5, ta thu nấm men dạng lỏng, nước dịch có màu nâu Nguyễn Xuân Phương - 1302 41 Hình 3.6.Sau trình thủy phân kết thúc viện Viện Đa Sau thu dịch sau ly tâm, dịch đo Bx cân g dịch, sấy khô 105°C cân lượng chất khơ cịn lại sau sấy đê xác định tong chất khơ hịa tan địch thủy phân Nguyền Xuân Phương - 1302 42 Ket hiệu suất thủy phân theo phương pháp khác nhau: Bảng 3.10 Hiệu suất thủy phân nấm men giàu Selen tính theo phương pháp sấy Săn phấm thủy )hân Trước thủy phân STT Phương pháp thủy phân Tự phân Enzyme % Neutrase, 0,1 % Gigegrain, 0,3% Cassava Độ ấm (%) Khối lượng men đặc (g) 74,33 100 Tổng chất khô trước thủy phân (g) 25,67 Khối lượng xác men đặc (g) ' pH Tổng chất khơ hịa tan (g) Hiệu suất thủy phân (%) 73.71 5,48 6,25 25,4 Tim; n Viện^ỀỌi học OHii Nội 68’36 5,52 10,9 34,8 Enzyme 1% Neutrase 0,1% Gigếgrain, 0,3% V-RE G3 70,47 100 29,53 65,74 5,40 9.41 31,8 Enzyme 1% Neutrase, 0,1% Gigegrain 70,49 100 29,51 68,19 5.45 9,16 31,1 Enzyme 1.5% Neutrase, 0,3% Cassava 79,10 100 20,90 68,36 5.52 9,36 44.8 Sử dụng H2SO4 0,75% latm, Ih NaOH 1,5% latm, Ih 78,81 100 21,19 37,91 5,07 13,98 66.0 Nguyền Xuân Phương - 1302 43 Bảng 3.11.Hiệu suất thúy phân nấm men giàu Selen tínhtheo Bx Trưóc thủy phân Mầu thủy phân STT Độ ẩm (%) Tự phân Sử dụng enzyme 1% Neutrase, 0.1% Gigegrain, 0.3% Cassava Tổng chất khô trước thủy phân (g) Khối lượng dịch sau ly tâm (g) Bx (%) Tổng chất khô (g) Hiệu suất thủy phân (%) 61,78 16,8 6,25 40,39 23,97 76,03 Ộ7.22 nr viện V lên Đại học n lở Hà Nội 19,0 10,9 53,28 74,33 25,67 Sản phẩm thủy phân Sử dụng enzyme % Neutrase, 0,1% Gigegrain, 0,3% V-RE G3 70,47 29,53 77,18 15,4 9,41 40,24 Enzyme 1% Neutrase, 0,i% Gigegrain 70,49 29,51 68,16 16,8 9,16 38,80 Enzyme 1,5% Neutrase, 0.3% Cassava 79,10 20,90 67,22 17 9,36 50,67 H2SO40,75% latm.lh NaOH 1,5% latm, Ih 78,81 21,19 168,94 10.4 13,98 82,91 Nguyền Xuân Phương - 1302 44 Thông qua bảng 3.10, ta có thổ thấy được, phương pháp sử dụng hóa chất đạt hiệu suất thủy phân cao Đổi với phương pháp sinh học việc sứ dụng 1,5% Neutrase 0,3% Cassava có hiệu suất cao tất tỉ lệ sử dụng enzyme Phương pháp tự phân đạt hiệu quà thấp xúc tác để thúc đẩy q trình Tương tự vậy, ta thấy hiệu suất thủy phân tính theo Bx ti lệ thuận với hiệu suất thủy phân tính theo phương pháp sấy Tuy nhiên, chiết quang kế thường đo xác hàm lưựng đường muối, chiếm hàm lượng cao khoảng 85-95% dung dịch, dịch thủy phân lại gồm nhiều chất hịa tan khác Do phương pháp khơng xác 100% Như thủy phân nấm men, ta sử dụng phương pháp sử dụng hóa chất để đạt hiệu ẹao r, A Tiĩử viẹn • Viện • Đại • học • Mở Hà NỘI ■ Nguyễn Xuân Phương - 1302 45 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoa Công Nghệ Sinh Học PHẦN 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận: Đã xây dựng phương pháp phân tích hàm lượng Selen có nấm men giàu Selen phù hợp với phịng thí nghiệm Đã so sánh khả hấp thụ chun hóa Selen vơ cùa chúng nấm men sư tập giống Viện công nghiệp thực phẩm Xác định môi trường Glucose dinh dưỡng cao nấm men mơi trường thích họp đe nuôi cấy nấm men giàu Selen nồng độ Selen vô bo sung 210pg/mllà phù họp cho nấm men chuyến hóa Selen vơ thành hữu có hiệu Sơ xây dựng phương pháp thủy phân nấm men thành sản phẩm nấm men hòa tan Đã phát quy luật chuyến màu nấm men sau bô sung Selen vào môi trường núổi cấy: Nồng độ Seien cang cao ttíì nấm men hấp thụ nhiều từ Selen tồn phần cao 4.2 Kiến nghị: Do thời gian thực tập có hạn, điều kiện tiến hành thí nghiệm cịn hạn chế nên đưa số kiến nghị sau: Nghiên cứu thêm phương pháp điều kiện loại bỏ thành phần Selen vô tự sau thu hồi Nghiên cứu chứng minh thay đồi màu cùa nấm men chúng hấp thụ Sclen từ môi trường Nghiên cứu công nghệ thu hồi bào quản Selen hữu dạng lan Nguyễn Xuân Phương - 1302 46 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoa Công Nghệ Sinh Học TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bùi Long Biên (1995), Phân lích hóa học định lượng, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nội Đàm Trung Bảo (1983), Selen sinh học, NXB Y học, Hà Nội, Tr 174-189 Đàm Trung Bảo, Hồng Tích Huyền, Phạm Ngun Vinh (1999), Chất chống oxy hóa, NXB Y học, Hà Nội Lê Thành Phước (1999), Chong gốc tự - Một mục tiêu y dược đại, Trường Đại học Dược Hà Nội Lê Thành Phước, Nguyễn Quang Thưởng (1998), Phức chất gốc tự y dược, Trường Đại học Dược Hà Nội Lương Đức Phẩm (2007) Nấm men công nghiệp, NXB KHKT, Hà Nội, "Tv Thư viện viển Đại học Mơ Ha NỘi 2005 Nguyền Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty, Giáo trình sình vật học NXB Giáo dục Nguyễn Thị Thu Vân (2004), Phăn tích định lượng, tập 2, NXB Đại Học Quốc Gia TPHCM Nguyền Vãn Việt (chú biên), Nguyễn Thị Hiền, Trương Thị Hòa, Lên Lan Chi, Nguyễn Thị Hà Nấm men bia ứng dụng, Nhà xuất Nông Nghiệp, Hà Nội, 10 Phạm Luận (1987), Cơ sở ỉý thuyết cùa phương pháp phân tích phổ hấp thụ nguyên lử, Tài liệu dùng cho sinh viên cao học Hóa phân tích, Trường Đại học Tổng hợp Hà Nội 11 Satake K, 2002 Tận dụng men bia dư thừa nhà máy bia Công nghệ xử lý chất thải tận dụng nấm men ngành sán xuât bia Hội thảo Nguyễn Xuân Phương - 1302 47 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoa Công Nghệ Sinh Học Tp.HCM, Việt Nam, 13/03/2002 Tố chức xức tiến thương mại Nhật Bán (Jotro) viện nghiên cứu bia nước giái khát (RIB) 12 Vũ Thị Phương Thảo (2002), Tơng quan Sen dạng thuốc chứa Selen, Luận văn tốt nghiệp Dược sĩ Đại học, Trường đại học Dược Hà Nội Tiếng Anh 13 Baeten J, Mostad s, hughes M (2001) Selenium deficiency is associated with shedding of HIV-1- infected cells in the female genital tract JAIDS 14 Bao M, Hu S.K (2002) Study on the photometric determination of micro amounts of selenium bt the reaction system of thiocyanate/rhodamine/Tween-20, Analytical Abstracts, Vol 64, no 10, p.1439 15 Barnett J.A(2004), A history of research on yeast taxonomy, School of Biological Sciences, University of East Anglia, UK 16 Beck H.p, Kostova D and Zhang B (2006), Agronomy Research, vol 4, no 2, p 493-498 17 Beck M, Nelson H, Shi Q (200Ỉ),Selenium deficiency increases the pathology of an influenza virus infection, p 1481-1483 18 Champagne c.p, Gaudreau H, Conway J, Chartier N, Fonchy E (1999), Evaluation of yeast extracts as growth media supplements for lactococci and lactobacilli by using automated spectrophotometry The Journal of General and Applied Microbiology, vol 45, no 1, p 17-21 19 Hitachi Ltd (1995), Instruction manual model HFS-3 hydride formation system, Japan 2O Hitachi Ltd (1997), Flame Atomization Analysis Guide for Polarized Zeeman Atomic Absorption Spectrometry, Japan Nguyền Xuân Phương - 1302 48 Viện Đại học Mở Hà Nội 21 Hurwitz B, Klaus J, Khoa Công Nghệ Sinh Học Llabrc M (2007) Suppression of human immunodeficiency virus type viral load with selenium supplementation 22 John A, Theodore c (1969), Flame Emission and Atomic Absorption Spectrometry, vol & 2, Marcel Delker INC USA 23 Rajashree K, Muthukurnar T, (2013), Selection of culture medium and conditions for the production of selenium enriched Saccharomyces cerevisiae 24 Kolthoff LN & Phillip J.E, Treaside on Analyfical Chemistry, p 140-201 25 Kuen Y.c, Oliver K.M (1984), Determination of tellurium and selenium in atmospheric aerosol samples by graphit furnace atomic absorption spectrometry, Analytical Chemistry, vol 56, p.2721-2723 26 Lovell M, Xiong s, Lyubartseve G, Markesbery w (2009), “(in Sel-Plex diet) decreases amyloid burden and RNA and DNA oxidative damage APP/PS1 viện Viện Đại học Mở Hà Nội 27 Mosulishvili L.M (2001), Experimental substantiation of the possibility of developing selenium and iodine containing parmaceuticals base on bluegreen algae Spirulina platensis, Journal of Pharmaceutial and Biomedical Analysis, No 30, p 87-97 28 Narayna B, Mathew M, Gopalakrishna Bhat N, Veedu Sreekumar N (2002), Spectrophotometric Determination of Selenium using Potassium Iodide and Starch as reagents,Microchimica Acta, India 29 Rand M.c, Greenberg A.E, Taras M.J (1976), Standard Methods for the examination of water and wastewater 30 Schrauzer G (2000), Selenomethionine: A review of its nutritional significance, metabolism and toxicity, vol 130, p 1653-1656 31 Solirios R, Wolfhard w, Gumer K (1980), Analytical Chemistry, vol 50, p 1292-1296 Nguyền Xuân Phương - 1302 49 ... hóa Selen vơ thành Selen hữu nấm men 2.3 Nội dung nghiên cứu > Nội dung 1: Nghiên cứu phương pháp phân tích hàm lượng Selen có nấm men > Nội dung 2: Lựa chọn chùng nấm men có khả chuyến hóa selen. .. Selen vơ thành Selen hữu - Xác định điều kiện môi trường phù hợp cho nấm men chuyển hố Selen vơ thành Selen hữu - Thử nghiệm thủy phân nấm men giàu Selen hữu tạo sản phẩm nấm men giàu Selen hòa tan... hành nghiên cứu đề tài:? ?Nghiên cứu chun hóa Selen vơ thành Selen hữu nấm men? ?? > Mục tiêu ngĩtocBện Viện Đại học Mở Hà Nội - Lựa chọn chủng điều kiện mơi trường cho nấm men có khả chun hóa Selen vô