Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và tác dụng hạ đường huyết từ phần trên mặt đất của cây thài lài trắng (commelina diffusa burm f )

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI –––––––––––––––––––––– LÊ HỒNG DƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG HẠ ĐƯỜNG HUYẾT TỪ PHẦN TRÊN MẶT ĐẤT CỦA CÂY THÀI LÀI TRẮNG (Commelina diffusa Burm.f.) LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI –––––––––––––––––––––– LÊ HỒNG DƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG HẠ ĐƯỜNG HUYẾT TỪ PHẦN TRÊN MẶT ĐẤT CỦA CÂY THÀI LÀI TRẮNG (Commelina diffusa Burm.f.) LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: DƯỢC LIỆU - DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 8720206 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Vũ Đức Lợi PGS.TS Bùi Hồng Cường HÀ NỘI 2022 LỜI CẢM ƠN Trong q trình nghiên cứu hồn thiện luận văn, em nhận nhiều giúp đỡ, quan tâm từ Thầy Cô, nghiên cứu viên Trường Đại học Dược Hà Nội Trường Đại học Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội, đồng nghiệp, gia đình bạn bè Lời đầu tiên, em xin bày tỏ kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Vũ Đức Lợi PGS.TS Bùi Hồng Cường, người thầy dành thời gian, tâm huyết hướng dẫn động viên em suốt trình học tập nghiên cứu khoa học Em xin chân thành cảm ơn anh chị, cán nghiên cứu Trường Đại học Dược Hà Nội Trường Đại học Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội giúp đỡ đóng góp ý kiến cho em để hoàn thiện luận văn Nhân dịp này, em gửi lời cảm ơn tới Ban Giám Hiệu, Phòng Sau Đại học, Thư viện Trường Đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi để em hoàn thành luận văn chương trình học Trường Em xin chân thành cảm ơn tới Ban Giám hiệu Phòng Tổ chức cán Trường Đại học Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện để em tham gia học cao học Để hoàn thành luận văn này, em xin cảm ơn đề tài khoa học công nghệ cấp Đại học Quốc Gia Hà Nội, mã số: QG.20.81 hỗ trợ kinh phí tạo điều kiện tốt cho em Vì cịn thiếu kinh nghiệm, tình hình dịch bệnh khó khăn, luận văn em khơng thể tránh thiếu sót Em kính mong nhận ý kiến đóng góp, bảo quý giá Thầy Cô Hội đồng để luận văn em hoàn thiện Em xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày 09 tháng 04 năm 2022 Học viên Lê Hồng Dương MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Bệnh đái tháo đường 1.1.1 Tình hình mắc bệnh đái tháo đường 1.1.2 Nguyên nhân gây bệnh đái tháo đường tuýp 1.1.3 Cơ chế bệnh sinh đái tháo đường tuýp 1.1.4 Các liệu pháp điều trị bệnh đái tháo đường tuýp 1.2 Chi Commelina L 1.2.1 Vị trí phân loại chi Commelina 1.2.2 Phân bố chi Commelina 1.2.3 Đặc điểm thực vật chi Commelina 1.2.4 Thành phần hóa học chi Commelina 10 1.2.5 Tác dụng dược lý chi Commelina 11 1.2.6 Công dụng theo y học cổ truyền chi Commelina 13 1.3 Cây Thài lài trắng (Commelina diffusa Burm.f.) 13 1.3.1 Danh pháp Thài lài trắng 13 1.3.2 Phân bố Thài lài trắng 13 1.3.3 Đặc điểm thực vật Thài lài trắng 14 1.3.4 Thành phần hóa học Thài lài trắng 15 1.3.5 Tác dụng dược lý Thài lài trắng 16 1.3.6 Công dụng theo y học cổ truyền Thài lài trắng 19 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Đối tượng nghiên cứu 20 2.1.1 Nguyên liệu 20 2.1.2 Động vật thí nghiệm 20 2.1.3 Hóa chất 20 2.1.4 Trang thiết bị 21 2.2 Phương pháp nghiên cứu 21 2.2.1 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm thực vật 21 2.2.2 Phương pháp chiết xuất, phân lập xác định cấu trúc hợp chất 22 2.2.3 Phương pháp đánh giá độc tính cấp tác dụng hạ đường huyết in vivo 24 2.2.4 Phương pháp xử lý số liệu 27 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 28 3.1 Kết nghiên cứu đặc điểm thực vật 28 3.1.1 Mô tả đặc điểm hình thái 28 3.1.2 Đặc điểm vi phẫu thân 32 3.1.3 Đặc điểm vi phẫu 34 3.1.4 Đặc điểm bột dược liệu 35 3.2 Kết nghiên cứu thành phần hóa học 37 3.2.1 Chiết xuất 37 3.2.2 Phân lập hợp chất 38 3.2.3 Xác định cấu trúc hợp chất 39 3.3 Kết đánh giá độc tính cấp tác dụng hạ đường huyết in vivo 46 3.3.1 Đánh giá độc tính cấp 46 3.3.2 Đánh giá tác dụng hạ đường huyết 46 CHƯƠNG BÀN LUẬN 53 4.1 Về đặc điểm thực vật 53 4.2 Về thành phần hóa học 54 4.3 Về độc tính cấp tác dụng hạ đường huyết 57 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu H-NMR 13 C-NMR DCM DEPT EtOAc HDL-C HFD HMBC HPLC HSQC Ý nghĩa Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (1H Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy) Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon-13 (13C Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy) dichloromethan Phổ DEPT (Distortionless Enhancement by Polarization Transfer) Ethyl acetat Cholesterol lipoprotein tỉ trọng cao (High Density Lipoprotein Cholesterol) Chế độ ăn giàu chất béo (high fat diet) Phổ tương quan đa liên kết hạt nhân (Heteronuclear Multiple Bond Correlation) Sắc kí lỏng hiệu cao Phổ tương quan lượng tử đơn hạt nhân (Heteronuclear Single Quantum Correlation) IC50 Nồng độ ức chế 50% (50% inhibitory concentration) LD50 Liều gây chết 50% (50% lethal dose) LDL-C MeOH Cholesterol lipoprotein Lipoprotein Cholesterol) Methanol tỉ trọng thấp (Low Density NFD Chế độ ăn bình thường (normal fat diet) NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (Nuclear magnetic resonance) RP-18 Reversed phase C-18 STZ Streptozotocin TLC Sắc kí lớp mỏng DANH MỤC BẢNG BIỂU Tên bảng Trang Bảng 1.1 Thành phần hóa học số loài thuộc chi Commelina 10 Bảng 2.1 Chế độ ăn NFD HFD tính 100 g thức ăn 26 Bảng 3.1 Số liệu phổ NMR hợp chất CDE16 tài liệu tham khảo 40 Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR hợp chất CDW27.2 tài liệu tham khảo 43 Bảng 3.3 Kết thử độc tính cấp từ cao EtOAc Thài lài trắng 46 Bảng 3.4 Kết trọng lượng chuột lô nghiên cứu (g) 47 Bảng 3.5 Kết xét nghiệm glucose huyết (mmol/L) 48 Bảng 3.6 Kết xét nghiệm cholesterol (mmol/L) 49 Bảng 3.7 Kết xét nghiệm LDL-C (mmol/L) 50 Bảng 3.8 Kết xét nghiệm HDL-C (mmol/L) 50 Bảng 3.9 Kết xét nghiệm triglycerid cao EtOAc (mmol/L) 51 DANH MỤC HÌNH ẢNH TT Tên hình Trang Hình 1.1 Hình ảnh Thài lài trắng 15 Hình 3.1 Hình ảnh vườn Thài lài trắng 28 Hình 3.2 Hình ảnh phần mặt đất Thài lài trắng 29 Hình 3.3 Đặc điểm quan sinh dưỡng Thài lài trắng 30 Hình 3.4 Đặc điểm quan sinh sản Thài lài trắng 31 Hình 3.5 Đặc điểm vi phẫu thân Thài lài trắng 33 Hình 3.6 Đặc điểm vi phẫu Thài lài trắng 35 Hình 3.7 Đặc điểm bột dược liệu Thài lài trắng 36 Hình 3.8 Sơ đồ chiết xuất cao phân đoạn từ Thài lài trắng 38 Hình 3.9 Sơ đồ phân lập hợp chất từ cao EtOAc Thài lài trắng 39 Hình 3.10 Cấu trúc hợp chất CDE16 42 Hình 3.11 Cấu trúc hợp chất CDW27.2 45 Hình 3.12 Các tương tác phổ HMBC hợp chất CDW27.2 45 ĐẶT VẤN ĐỀ Đái tháo đường vấn đề y tế toàn cầu cấp bách kỷ 21, gánh nặng tài cho chăm sóc y tế cản trở trình đạt mục tiêu phát triển bền vững, đặc biệt nước thu nhập thấp trung bình Trên tồn giới, năm 2015, tỷ lệ người bị đái tháo đường chiếm khoảng gần - 8% dân số, chi phí y tế tồn cầu cho việc điều trị đái tháo đường biến chứng 673 tỷ USD Số bệnh nhân mắc bệnh dự báo tăng 55% vào năm 2040, với chi phí y tế tồn cầu lên tới 802 tỷ USD Tại Việt Nam, năm 2015 có khoảng triệu người mắc bệnh, năm 2040 số người mắc bệnh lên tới triệu người Chi phí y tế đầu người 162,7 USD [19] Chính vậy, cần phải có nghiên cứu để phát triển sản phẩm hỗ trợ điều trị bệnh đái tháo đường, đáp ứng nhu cầu thực tế người dân Trên giới, nhiều nước nghiên cứu sử dụng số lồi thảo dược chăm sóc sức khỏe nói chung điều trị đái tháo đường tuýp nói riêng Tại Việt Nam, nhu cầu sử dụng thuốc điều trị đái tháo đường cao, nhu cầu phát triển nguồn nguyên liệu trị bệnh đái tháo đường lớn Do đó, cần có nhiều nghiên cứu, sàng lọc, lựa chọn thuốc theo hướng điều trị đái tháo đường, nhằm bổ sung tài liệu phục vụ cho việc hỗ trợ điều trị bệnh đái tháo đường tuýp Theo kinh nghiệm dân gian, số thuốc nhân dân ta sử dụng từ lâu với mục đích điều trị bệnh đái tháo đường tuýp Trong đó, Thài lài trắng sử dụng có số nghiên cứu bước đầu tác dụng hạ glucose huyết [4] Dược liệu mọc phổ biến Việt Nam tỉnh: Hà Nội (Tam Đảo), Quảng Trị, Long An,… có khả thích nghi cao với điều kiện khí hậu thổ nhưỡng dễ sinh trưởng phát triển [11], [18], [30] Vì vậy, tiềm cho việc phát triển nguồn nguyên liệu tạo sản phẩm từ thuốc lớn Tuy nhiên, nghiên cứu tác dụng hạ đường Phụ lục Bộ phổ chất CDW27.2 (phổ 1H-NMR, 13C-NMR, HSQC, HMBC) ... tài: ? ?Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học tác dụng hạ đường huyết từ phần mặt đất Thài lài trắng (Commelina diffusa Burm.f.)? ?? nghiên cứu với mục tiêu sau: Nghiên cứu đặc điểm thực. .. DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI –––––––––––––––––––––– LÊ HỒNG DƯƠNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ TÁC DỤNG HẠ ĐƯỜNG HUYẾT TỪ PHẦN TRÊN MẶT ĐẤT CỦA CÂY... 1.3 Cây Thài lài trắng (Commelina diffusa Burm.f.) 13 1.3.1 Danh pháp Thài lài trắng 13 1.3.2 Phân bố Thài lài trắng 13 1.3.3 Đặc điểm thực vật Thài lài trắng 14 1.3.4 Thành