BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y TẠ THU HÀ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG CỦA DƯỢC LIỆU HOÀI SƠN (Dioscorea hamiltonii Hook f ), HỌ CỦ NÂU (Dioscoreaceae) TRỒNG TẠI NHO QUAN, NINH BÌNH KHÓA L.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y TẠ THU HÀ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG CỦA DƯỢC LIỆU HOÀI SƠN (Dioscorea hamiltonii Hook.f.), HỌ CỦ NÂU (Dioscoreaceae) TRỒNG TẠI NHO QUAN, NINH BÌNH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SỸ ĐẠI HỌC HÀ NỘI - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y TẠ THU HÀ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG CỦA DƯỢC LIỆU HOÀI SƠN (Dioscorea hamiltonii Hook.f.), HỌ CỦ NÂU (Dioscoreaceae) TRỒNG TẠI NHO QUAN, NINH BÌNH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SỸ ĐẠI HỌC Cán hướng dẫn: ThS Nguyễn Văn Liệu HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Trong q trình thực khóa luận, với nỗ lực, cố gắng thân giúp tận tình thầy cơ, gia đình bạn bè để em hồn thành khóa luận cách tốt Đầu tiên, em xin bày tỏ lòng biết ơn gửi lời cảm ơn chân thành đến ThS Nguyễn Văn Liệu, người thầy trực tiếp hướng dẫn, tận tình dạy tạo điều kiện giúp đỡ em suốt trình nghiên cứu thực khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn tới Ban Giám đốc Học viện Quân Y, Viện Đào tạo Dược tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt năm học tập trường Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy cô giáo kĩ thuật viên Bộ môn Dược liệu - Dược học cổ truyền nói riêng tồn thể thầy cô giáo kĩ thuật viên Viện Đào tạo Dược, Học viện Quân Y dạy tận tình tạo điều kiện giúp đỡ em suốt trình học tập nghiên cứu Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, người thân bạn bè, người ln bên, động viên giúp đỡ em vượt qua khó khăn q trình thực khóa luận Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 12 tháng 07 năm 2022 Sinh viên Tạ Thu Hà MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT 11 DANH MỤC PHỤ LỤC 13 ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG - TỔNG QUAN 1.1 VỊ TRÍ PHÂN LOẠI CÂY HỒI SƠN 1.2 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT CÂY HOÀI SƠN 1.3 PHÂN BỐ VÀ SINH THÁI 1.4 THÀNH PHẦN HÓA HỌC 1.4.1 Allantoin 1.4.2 Acid amin 1.4.3 Polyphenol 1.4.4 Phenanthren 1.4.5 Saponin 1.4.6 Các hợp chất khác 10 1.4 TÁC DỤNG SINH HỌC 11 1.4.1 Tác dụng kháng khuẩn kháng nấm 11 1.4.2 Tác dụng chống oxy hóa 14 1.4.3 Tác dụng hạ đường huyết 16 1.4.4 Một số tác dụng sinh học khác 18 1.5 TÁC DỤNG VÀ CÔNG DỤNG THEO Y HỌC CỔ TRUYỀN 19 CHƯƠNG - NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 21 2.1.1 Nguyên liệu 21 2.1.2 Dung mơi, hóa chất, thuốc thử 21 2.1.3 Trang thiết bị dụng cụ nghiên cứu 22 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.2.1 Phương pháp mô tả 23 2.2.2 Phương pháp soi bột 23 2.2.3 Phương pháp định tính 23 2.2.4 Phương pháp xác định độ ẩm 24 2.2.5 Phương pháp xác định tro toàn phần 25 2.2.6 Phương pháp xác định tạp chất 25 2.2.7 Phương pháp xác định chất chiết dược liệu 26 2.2.8 Phương pháp định lượng allantoin sắc ký lỏng hiệu cao 27 2.3 XỬ LÝ KẾT QUẢ 30 2.4 ĐỊA ĐIỂM THỰC HIỆN 30 CHƯƠNG - KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN 31 3.1 KẾT QUẢ MÔ TẢ 31 3.2 KẾT QUẢ SOI BỘT 32 3.3 KẾT QUẢ ĐỊNH TÍNH 32 3.3.1 Hiện tượng huỳnh quang 32 3.3.2 Sắc ký lớp mỏng 33 3.4 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH ĐỘ ẨM 34 3.5 KẾT QUẢ TRO TOÀN PHẦN 34 3.6 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH TẠP CHẤT 35 3.6.1 Dược liệu có màu vàng đỏ 35 3.6.2 Tạp chất 35 3.7 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH CÁC CHẤT CHIẾT ĐƯỢC TRONG DƯỢC LIỆU 35 3.7.1 Chất chiết nước 35 3.7.2 Chất chiết cồn 36 3.8 KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG ALLANTOIN BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO 37 3.8.1 Kết thẩm định phương pháp định lượng 37 3.8.2 Kết định lượng allantoin Hoài sơn 42 KẾT LUẬN 44 KIẾN NGHỊ 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO 47 PHỤ LỤC 50 DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang 1.1 CTCT số acid amin phân tích củ Hồi sơn 1.2 Hoạt động kháng khuẩn dịch chiết củ đực củ 12 loài D hamiltonii thu hái Tripura (Ấn Độ) 1.3 Hoạt tính kháng khuẩn dịch chiết D hamiltonii 13 1.4 Kết đo lượng đường máu chuột thử nghiệm 17 1.5 Kết đo lượng đường máu chuột thử nghiệm 17 1.6 Tác dụng gây độc tế bào củ Hoài sơn thu hái Vĩnh Phúc 19 2.1 Các dung môi, hóa chất, thuốc thử dùng nghiên cứu 21 2.2 Các thiết bị, dụng cụ nghiên cứu 22 3.1 Rf màu sắc vết sắc ký đồ mẫu dịch chiết đối chiếu dịch chiết thử bột Hoài sơn 33 3.2 Độ ẩm rễ củ Hoài sơn 34 3.3 Tro toàn phần rễ củ Hoài sơn 34 3.4 Tạp chất rễ củ Hoài sơn 35 3.5 Chất chiết rễ củ Hoài sơn nước 36 3.6 Chất chiết rễ củ Hoài sơn cồn 36 3.7 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống sắc ký 37 3.8 Sự tương quan diện tích pic nồng độ allantoin 40 3.9 Kết khảo sát độ lặp lại 42 3.10 Kết định lượng allantoin rễ củ Hoài sơn 43 DANH MỤC CÁC HÌNH STT Tên hình Trang 1.1 Ảnh vẽ Hoài sơn D hamiltonii Hook.f 1.2 CTCT allantoin phân lập từ Hoài sơn 1.3 CTCT cyclo-(phenylalanin-tyrosin) phân lập từ Hoài sơn 1.4 CTCT số hợp chất polyphenol phân lập từ Hoài sơn 1.5 CTCT số hợp chất phenanthren phân lập từ thân rễ Hoài sơn 1.6 CTCT số hợp chất saponin phân lập từ Hoài sơn 10 1.7 CTCT 1-monolinolenin phân lập từ củ Hoài sơn 11 1.8 Hoạt động kháng khuẩn củ đực củ số 12 loài thuộc chi Dioscorea 1.9 Biểu đồ thể giá trị IC50 khả thu dọn gốc tự dịch chiết methanol loài D hamiltonii với mẫu 15 đối chứng (acid ascorbic, trolox quercetin) 3.1 Ảnh chụp củ tươi (1a) rễ củ Hồi sơn cắt lát, sấy khơ 31 (1b) 3.2 Ảnh chụp đặc điểm bột rễ củ Hoài sơn 32 3.3 Ảnh chụp bột Hoài sơn soi ánh sáng tử ngoại 32 bước sóng 366 nm 3.4 Ảnh chụp vết mỏng sắc ký mẫu dịch chiết đối chiếu dịch chiết thử bột Hoài sơn 33 3.5 Sắc ký đồ mẫu trắng 38 3.6 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn allantoin nồng độ 12,5 µg/ml 39 3.7 Sắc ký đồ dung dịch thử 39 3.8 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc tuyến tính nồng độ 41 diện tích pic allantoin Bảng 3.5 Chất chiết rễ củ Hoài sơn nước Lượng chất chiết Mẫu Khối lượng mẫu thử (g) 4,0093 9,82 4,0017 10,01 4,0003 9,77 nước (%) ̅ ± SD X 9,87 ± 0,13 RSD (%) 1,31 Nhận xét: lượng chất chiết rễ củ Hoài sơn nước khoảng 9,87% Kết phù hợp lượng chất chiết nước áp dụng đối dược liệu theo quy định DĐVN V khơng 5% tính theo dược liệu khô kiệt 3.7.2 Chất chiết cồn Tiến hành thử nghiệm mục 2.2.7.2 Kết trình bày bảng 3.6 Bảng 3.6 Chất chiết rễ củ Hoài sơn cồn Mẫu Khối lượng mẫu thử (g) Lượng chất chiết cồn (%) 4,0130 7,56 4,0020 7,41 4,0020 7,29 ̅ ± SD X 7,42 ± 0,13 RSD (%) 1,75 36 Nhận xét: lượng chất chiết rễ củ Hoài sơn cồn khoảng 7,42% Kết phù hợp lượng chất chiết cồn áp dụng dược liệu theo quy định DĐVN V 4% tính theo dược liệu khơ kiệt 3.8 KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG ALLANTOIN BẰNG SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO 3.8.1 Kết thẩm định phương pháp định lượng 3.8.1.1 Tính tương thích hệ thống Tiêm lần dung dịch chuẩn allantoin nồng độ 12,5 µg/ml vào hệ thống HPLC, tiến hành sắc ký theo điều kiện xây dựng Kết khảo sát tính tương thích hệ thống sắc ký trình bày bảng 3.7 Bảng 3.7 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống sắc ký STT Thời gian lưu (phút) Diện tích pic (µV*s) Hệ số bất đối Số đĩa lý thuyết (N) 9,420 1460869 1,239 11671 9,453 1472649 1,250 11984 9,420 1472713 1,242 11716 9,420 1458535 1,206 11765 9,460 1484282 1,254 11876 9,400 1417509 1,219 11555 ̅ ± SD X 9,429 ± 0,023 1461093 ± 23291 1,235 ± 0,019 11761 ± 152,0 RSD (%) 0,243 1,738 1,514 1,292 37 Nhận xét: kết khảo sát cho thấy RSD (%) diện tích pic allantoin, số đĩa lý thuyết, hệ số bất đối phép thử nằm khoảng cho phép (< 2%), giá trị thời gian lưu nằm giới hạn < 1% Điều chứng tỏ hệ thống sử dụng phù hợp đảm bảo ổn định cho phép phân tích định lượng allantoin 3.8.1.2 Độ đặc hiệu chọn lọc Kết khảo sát độ đặc hiệu thể hình ảnh sắc ký đồ mẫu trắng, dung dịch chuẩn dung dịch thử hình 3.5, hình 3.6 hình 3.7 Hình 3.5 Sắc ký đồ mẫu trắng 38 Hình 3.6 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn allantoin nồng độ 12,5 µg/ml Hình 3.7 Sắc ký đồ dung dịch thử Nhận xét: sắc ký đồ dung dịch chuẩn dung dịch thử chứa allantoin cho pic khoảng thời gian 9,4 phút sắc ký đồ mẫu trắng không xuất pic khoảng thời gian tương ứng với thời gian lưu allantoin Điều chứng tỏ phương pháp lựa chọn đặc hiệu cho phân tích định lượng allantoin 39 3.8.1.3 Khoảng tuyến tính Kết khảo sát phụ thuộc tuyến tính nồng độ diện tích pic allantoin khoảng nồng độ từ 12,5 µg/ml đến 125,0 µg/ml Khối lượng cân chất chuẩn allantoin 5,3 mg Bảng 3.8 Sự tương quan diện tích pic nồng độ allantoin STT Nồng độ (µg/ml) Diện tích pic (µV*s) Nồng độ theo đường chuẩn (µg/ml) Độ chệch ∆i (%) 13,05 1460869 12,85 -1,55 26,01 2899382 26,15 0,53 52,21 5910281 53,99 3,41 78,31 8566229 78,55 0,30 104,41 10774083 98,96 -5,22 130,51 14564589 134,01 2,68 40 16000000 y = 108151x + 71416 R² = 0.9957 14000000 12000000 Diện tích pic 10000000 8000000 6000000 4000000 2000000 0 20 40 60 80 100 120 140 Nồng độ (µg/ml) Hình 3.8 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc tuyến tính nồng độ diện tích pic allantoin Nhận xét: khoảng nồng độ khảo sát (12,5 - 125,0 µg/ml) có phụ thuộc tuyến tính chặt chẽ diện tích pic nồng độ chất cần định lượng Phương trình hồi quy y = 108151x + 71416 với hệ số R2 = 0,9957 Độ chệch điểm nồng độ dùng xây dựng đường chuẩn không vượt ± 15% Như vậy, đường chuẩn xây dựng đáp ứng yêu cầu phép phân tích định lượng HPLC 3.8.1.4 Độ lặp lại Tiến hành phân tích dung dịch thử lặp lại lần ngày với điều kiện sắc ký lựa chọn Kết thể bảng 3.9 41 Bảng 3.9 Kết khảo sát độ lặp lại STT Khối lượng dược liệu (g) Diện tích pic (µV*s) Hàm lượng allantoin dược liệu (mg/g) 1,0008 6475745 6,73 1,0014 6605923 6,86 1,0007 6601122 6,86 1,0003 6550150 6,81 1,0011 6494867 6,74 1,0005 6501450 6,76 X ± SD 6,79 ± 0,06 RSD (%) 0,86% Nhận xét: kết thể bảng 3.9 cho thấy giá trị độ lặp lại ngày < 2% Điều chứng tỏ phương pháp chọn đảm bảo độ lặp thử nghiệm thực điều kiện khoảng thời gian ngắn 3.8.2 Kết định lượng allantoin Hoài sơn Trên sở phương pháp lựa chọn, áp dụng để định lượng allantoin mẫu dược liệu rễ củ Hoài sơn Kết định lượng allantoin rễ củ Hoài sơn thể bảng 3.10 42 Bảng 3.10 Kết định lượng allantoin rễ củ Hồi sơn STT Khối lượng cân (g) Diện tích pic thử (µV*s) Hàm lượng (mg/g) 1,0008 6475745 6,73 1,0014 6605923 6,86 1,0007 6601122 6,86 X 6,82 Từ kết bảng 3.10, kết luận lượng allantoin rễ củ Hồi sơn khoảng 6,82 mg/g tính theo dược liệu khô kiệt 43 KẾT LUẬN Đề tài đánh giá số tiêu chất lượng dược liệu Hoài sơn (D hamiltonii) sau: * Mơ tả: Rễ củ phình to, có nhiều hình dạng, phổ biến hình trụ thẳng cong, dài khoảng cm - m, đường kính - 10 cm Vỏ màu vàng nâu, nhẵn, thể chất Mặt cắt ngang màu trắng ngà, khơng có xơ, nhiều bột Rễ củ cắt lát dày 0,3 - 0,7 cm, mặt màu trắng vàng nhạt, thể chất giòn dễ vỡ, vết bẻ màu trắng, nhiều tinh bột * Soi bột: Bột rễ củ Hoài sơn có màu nâu, soi kính hiển vi thấy: nhiều hạt tinh bột hình trứng hình chng, có vân đồng tâm, rốn lệch tâm, hình chấm vạch Tinh thể calci oxalat hình kim Mảnh mơ mềm gồm tế bào màng mỏng, chứa tinh bột Mảnh mạch mạng * Định tính: Hiện tượng huỳnh quang Soi bột Hồi sơn ánh sáng tử ngoại bước sóng 366 nm thấy phát quang màu trắng sáng Sắc ký lớp mỏng Sắc ký lớp mỏng cho vết dung dịch thử màu giá trị Rf với dung dịch đối chiếu sắc ký đồ Các vết tách rõ màu * Độ ẩm Độ ẩm mẫu Hoài sơn đem khảo sát 12,03% * Tro toàn phần Tro toàn phần Hoài sơn 3,43% * Tạp chất Tạp chất chứa dược liệu Hoài sơn 0,43% 44 * Lượng chất chiết dược liệu Chất chiết Hoài sơn nước 9,87% chất chiết Hoài sơn cồn 7,42% * Định lượng allantoin sắc ký lỏng hiệu cao Phương pháp lựa chọn có tương quan tuyến tính chặt chẽ diện tích pic nồng độ allantoin khoảng nồng độ khảo sát Phương pháp có độ đặc hiệu cao với thời gian lưu allantoin khoảng 9,4 phút, pic tách riêng biệt, rõ nét Phương pháp có độ lặp lại ngày cao Hàm lượng allantoin mẫu rễ củ Hoài sơn định lượng 6,82 mg/g tính theo dược liệu khô kiệt 45 KIẾN NGHỊ Do thời gian thực đề tài có hạn nên kết nghiên cứu em đóng góp phần cơng trình nghiên cứu Hồi sơn Vì vậy, em xin đưa số đề xuất sau: - Ứng dụng tiêu khảo sát để đánh giá chất lượng Hoài sơn - Tiếp tục khảo sát, tối ưu hóa điều kiện sắc ký lỏng hiệu cao 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO T K Lim (2016) Edible Medicinal and Non-Medicinal Plants: Volume 10, Modified Stems, Roots, Bulbs (xuất lần thứ 1) Springer, 261 - 265 Trương Thị Đẹp (2007) Thực vật dược (xuất lần thứ 1) NXB Giáo dục, 182 - 295 Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương cs (2006) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam Tập I (xuất lần thứ 2) NXB Khoa học Kỹ thuật, 557 - 560 Viện Dược liệu (2022) Trung tâm thông tin - Thư viện http://vienduoclieu.org.vn/tttv/danh-muc-cay-thuoc/cay thuoc/Dioscorea_persimilis_1576, truy cập ngày 25/05/2022 Salehi B., Sener B., Kilic M et al (2019) Dioscorea plants: A genus rich in vital nutra-pharmaceuticals-a review Iranian Journal of Pharmaceutical Research: IJPR 18 (1): 68 DOI: 10.22037/ijpr.2019.112501.13795 Đỗ Tất Lợi (2004) Những thuốc vị thuốc Việt Nam (xuất lần thứ 7) NXB Y học, 848 – 850 PubChem (2022) National Library of Medicine https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/204, truy cập ngày 23/07/2022 Trần Thị Oanh, Nguyễn Thị Vân Anh (2014) Xác định hàm lượng Allantoin củ mài (Dioscorea persimilis Dioscoreaceae) sắc ký lỏng hiệu cao Nghiên cứu dược & Thông tin thuốc 3: 82 - 87.21 Nguyễn Thị Hiền, Chu Thị Thu Hà, Hà Thị Vân Anh cs (2015) Thành phần hóa học Củ mài thu Mê Linh, Vĩnh Phúc Tạp chí dược liệu 20 (1) 10 Wu Z G., Jiang W., Nitin M et al (2016) Characterizing diversity based on nutritional and bioactive compositions of yam germplasm (Dioscorea spp.) commonly cultivated in China Journal of food and drug analysis 24(2): 367 375 11 11Zhao, C., Zhou, B., Miao, J et al (2019) Multicomponent analysis and activities for evaluation of Dioscorea oppositifolia and Dioscorea hamiltonii Food and Agricultural Immunology 30(1): 1148 - 1161 DOI: https://doi.org/10.1080/09540105.2019.1674786 12 12N T T Nguyen., H H Nguyen, H T Nguyen et al (2020) Cytotoxic phenanthrenes and phenolic constituents from the tubers of Dioscorea persimilis Phytochemistry Letters 40: 139 143 DOI: 10.1016/j.phytol.2020.10.005 13 13Archana P Raina, RC Misra (2019) Evaluation of diosgenin, a bioactive compound from natural source of Dioscorea species: A wild edible tuber plant Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry 2020 9(1): 1120 – 1124 14 Nguyen Van Dan (1990) Medicinal Plants in Viet Nam (published for the first time) Science and Technology Publishing House, 146 - 147 15 Paul C., Debnath A., Chakraborty K et al (2020) Sex-specific variations in phytochemicals and antimicrobial potentiality of Dioscorea Future Journal of Pharmaceutical Sciences 6(1): - 12 DOI: https://doi.org/10.1186/s43094020-00076-4 16 D S V G K Kaladhar, V Narsinga Rao, Sreenu Barla et al (2010) Comparative Antimicrobial Studies of Dioscorea Hamiltonii hook.f.tuber with Azadirachta Indica Stem Journal of Pharmaceutical Science and Technology 2(8): 284 - 187 17 Padhan B., Nayak J K., Panda D (2020) Natural antioxidant potential of selected underutilized wild yams (Dioscorea spp.) for health benefit Journal of food science and technology 57(6), 2370 - 2376 DOI: https://doi.org/10.1007/s13197-020-04470-x 18 Aušra Adomėnienė, Petras Rimantas Venskutonis (2016) Dioscorea spp.: Comprehensive Review of Antioxidant Properties and Their Relation to Phytochemicals and Health Benefits Molecules 27(8): 2530 DOI: 10.3390/molecules27082530 19 Trần Chí Linh, Đái Thị Xuân Trang (2019) Đánh giá hoạt tính kháng oxy hóa kháng đái tháo đường in vitro cao chiết từ Cị sen (Miliusa velutina) Tạp chí KHOA HỌC & CƠNG NGHỆ ĐHTN 207(14): 99 - 106 20 Guangxi University of Chinese Medicine (2014) Preparation method and application of effective part of dioscorea persimilis for decreasing blood sugar Publication of CN103520425A, 22/01/2014 21 Trần Hữu Dũng (2012) Nghiên cứu chế biến phần ăn chứa tinh bột Củ mài (Rhizoma Dioscorea persimilis) hỗ trợ điều trị bệnh nhân đái tháo đường týp Giải thưởng Sáng tạo Khoa học Công nghệ tỉnh Thừa Thiên Huế lần thứ VI, Đại học Y Dược - Đại học Huế 22 Nguyễn Thị Huyền (2020) Đánh giá số tiêu chất lượng rễ Sâm đùi gà (Decaschistia intermedia Craib) Khóa luận dược sỹ đại học, Học viện Quân Y 23 Trần Mạnh Cường (2011) Áp dụng phương pháp sắc ký cột sắc ký lớp mỏng vào giảng dạy hóa học phổ thơng Luận văn thạc sỹ, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên 24 N M Chng (1987) Laboratory Manual on Analytical Methods and Procedures for Fish and Fish Products (published for the first time) Marine Fisheries Research Department, Southeast Asian Fisheries Development Center, A – 2.1 25 Yoon K D., Yang M H., Chin Y W et al (2008) Determination of allantoin in Dioscorea Rhizoma by high performance liquid chromatography using cyano columns Natural Product Sciences, 14(4), 254-259 26 The International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use (2022) Validation of analytical procedures: text and methodology Q2(R2) PHỤ LỤC PHỤ LỤC KẾT QUẢ GIÁM ĐỊNH TÊN KHOA HỌC ... đề tài ? ?Đánh giá chất lượng dược liệu Hoài sơn (Dioscorea hamiltonii Hook.f.), họ Củ nâu (Dioscoreaceae) trồng Nho Quan, Ninh Bình? ?? với mục tiêu: Đánh giá chất lượng dược liệu Hoài Sơn trồng Văn...BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y TẠ THU HÀ ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG CỦA DƯỢC LIỆU HOÀI SƠN (Dioscorea hamiltonii Hook.f.), HỌ CỦ NÂU (Dioscoreaceae) TRỒNG TẠI NHO QUAN, NINH BÌNH... ẩm rễ củ Hoài sơn 34 3.3 Tro toàn phần rễ củ Hoài sơn 34 3.4 Tạp chất rễ củ Hoài sơn 35 3.5 Chất chiết rễ củ Hoài sơn nước 36 3.6 Chất chiết rễ củ Hoài sơn cồn 36 3.7 Kết khảo sát tính tương thích