1. Trang chủ
  2. Luận Văn - Báo Cáo

Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

125 27 0
Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Ngày đăng: 13/05/2022, 16:48

Xem thêm:

Hình ảnh liên quan

1.1 Tình hình sản xuất và chọn tạo giống đậu tương - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

1.1.

Tình hình sản xuất và chọn tạo giống đậu tương Xem tại trang 19 của tài liệu.
1.1.1.2 Tình hình sản xuất đậu tương ở Việt Nam - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

1.1.1.2.

Tình hình sản xuất đậu tương ở Việt Nam Xem tại trang 20 của tài liệu.
Hình 1.3. Cấu tạo và mối liên hệ của các đường thuộc họ Raffinose - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 1.3..

Cấu tạo và mối liên hệ của các đường thuộc họ Raffinose Xem tại trang 28 của tài liệu.
Bước một (1): dưới tác động của enzyme GOLS, galactinol được hình thành từ hai thành phần ban đầu là UDP-galactose và myo-inositiol. - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

c.

một (1): dưới tác động của enzyme GOLS, galactinol được hình thành từ hai thành phần ban đầu là UDP-galactose và myo-inositiol Xem tại trang 32 của tài liệu.
Hình 1.5. Quá trình hoạt động của cơ chế CRISPR/Ca sở vi khuẩn chống lại sự xâm nhập của DNA ngoại lai [51]. - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 1.5..

Quá trình hoạt động của cơ chế CRISPR/Ca sở vi khuẩn chống lại sự xâm nhập của DNA ngoại lai [51] Xem tại trang 36 của tài liệu.
sửa chữa sẽ mang đột biến đó (Hình 1.7A) [51]. - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

s.

ửa chữa sẽ mang đột biến đó (Hình 1.7A) [51] Xem tại trang 38 của tài liệu.
Hình 1.8. Chỉnh sửa gen bằng hệ thống CRISPR/Cas9 trên một số loại cây trồng (giai đoạn tháng 8/2013-8/2018) [57]. - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 1.8..

Chỉnh sửa gen bằng hệ thống CRISPR/Cas9 trên một số loại cây trồng (giai đoạn tháng 8/2013-8/2018) [57] Xem tại trang 40 của tài liệu.
Hình 2.1. Sơ đồ minh họa nguyên lý kỹ thuật biến tính hồi tính dùng trong sàng lọc đột biến gen - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 2.1..

Sơ đồ minh họa nguyên lý kỹ thuật biến tính hồi tính dùng trong sàng lọc đột biến gen Xem tại trang 51 của tài liệu.
Bảng 2.3. Dự kiến khả năng phát hiện các alen đột biến thông qua phản ứng PCR sử dụng các chỉ thị phân tử - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Bảng 2.3..

Dự kiến khả năng phát hiện các alen đột biến thông qua phản ứng PCR sử dụng các chỉ thị phân tử Xem tại trang 57 của tài liệu.
Hình 3.1. Mối quan hệ phát sinh loài giữa các protein GOLS đã được xác định trong cây Arabidopsis, cà chua, ngô 23 trình tự protein GOLS - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.1..

Mối quan hệ phát sinh loài giữa các protein GOLS đã được xác định trong cây Arabidopsis, cà chua, ngô 23 trình tự protein GOLS Xem tại trang 60 của tài liệu.
Hình 3.5. Tỉ lệ tạo rễ tơ của các giống đậu tương chuyển gen - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.5..

Tỉ lệ tạo rễ tơ của các giống đậu tương chuyển gen Xem tại trang 64 của tài liệu.
Hình 3.7. Cảm ứng tạo rễ tơ của các giống đậu tương thí nghiệm với cấu trúc pFGC/gfp sau 5 ngày trên môi trường cảm ứng tạo rễ - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.7..

Cảm ứng tạo rễ tơ của các giống đậu tương thí nghiệm với cấu trúc pFGC/gfp sau 5 ngày trên môi trường cảm ứng tạo rễ Xem tại trang 65 của tài liệu.
Hình 3.8. Quy trình cảm ứng tạo rễ tơ in vitro trên các giống đậu tương thí nghiệm - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.8..

Quy trình cảm ứng tạo rễ tơ in vitro trên các giống đậu tương thí nghiệm Xem tại trang 66 của tài liệu.
Hình 3.9. Biểu hiện gen GFP chỉ thị trên rễ tơ cây đậu tương - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.9..

Biểu hiện gen GFP chỉ thị trên rễ tơ cây đậu tương Xem tại trang 70 của tài liệu.
Hình 3.10. Sản phẩm khuếch đại bằng các cặp mồi đặc hiệu được điện di trên gel agarose 1.5% trong đệm TAE 1X - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.10..

Sản phẩm khuếch đại bằng các cặp mồi đặc hiệu được điện di trên gel agarose 1.5% trong đệm TAE 1X Xem tại trang 71 của tài liệu.
được trình bày ở Hình 3.12 và Bảng 3.2. - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

c.

trình bày ở Hình 3.12 và Bảng 3.2 Xem tại trang 74 của tài liệu.
Hình 3.13. Phân tích sản phẩm PCR của các dòng đậu tương đột biến gen thế hệ T0 bằng kỹ thuật biến tính - hồi tính trên gel polyacrylamide 15%. - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.13..

Phân tích sản phẩm PCR của các dòng đậu tương đột biến gen thế hệ T0 bằng kỹ thuật biến tính - hồi tính trên gel polyacrylamide 15% Xem tại trang 76 của tài liệu.
Hình 3.15. Sự phân ly của các đột biến ở thế hệ T1 và T2 của dòng DT1.1 - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.15..

Sự phân ly của các đột biến ở thế hệ T1 và T2 của dòng DT1.1 Xem tại trang 79 của tài liệu.
Hình 3.18. Kết quả phân tích sản phẩm PCR của chỉ thị phân tử với các cây đột biến T2 - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.18..

Kết quả phân tích sản phẩm PCR của chỉ thị phân tử với các cây đột biến T2 Xem tại trang 87 của tài liệu.
Hình 3.19. Kết quả phân tích sản phẩm PCR của chỉ thị phân tử GOLS-seg F1 và GOLS-seg F3 với các cây đột biến T2 - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.19..

Kết quả phân tích sản phẩm PCR của chỉ thị phân tử GOLS-seg F1 và GOLS-seg F3 với các cây đột biến T2 Xem tại trang 89 của tài liệu.
3.5.1. Phân tích sinh trưởng, phát triển và hình thái của các dòng đậu tương mang đột biến - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

3.5.1..

Phân tích sinh trưởng, phát triển và hình thái của các dòng đậu tương mang đột biến Xem tại trang 92 của tài liệu.
Hình 3.22. Biểu đồ thể hiện sự sinh trưởng và khối lượng hạt của các dòng đậu tương đột biến - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.22..

Biểu đồ thể hiện sự sinh trưởng và khối lượng hạt của các dòng đậu tương đột biến Xem tại trang 93 của tài liệu.
Hình 3.23. Khảo sát khả năng nảy mầm của hạt đậu tương đột biến gen - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.23..

Khảo sát khả năng nảy mầm của hạt đậu tương đột biến gen Xem tại trang 94 của tài liệu.
Hình 3.24. Tổng số cacbohydrat hòa tan và tổng số RFOs được đo bằng HPLC - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.24..

Tổng số cacbohydrat hòa tan và tổng số RFOs được đo bằng HPLC Xem tại trang 96 của tài liệu.
Hình 3.25. Thành phần carbohydrate trong hạt đậu tương - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.25..

Thành phần carbohydrate trong hạt đậu tương Xem tại trang 97 của tài liệu.
Hình 3.26. Tỉ lệ carbohydrate dạng stachyose và sucrose trên tổng khối lượng carbohydrate hòa tan trong hạt đậu tương - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.26..

Tỉ lệ carbohydrate dạng stachyose và sucrose trên tổng khối lượng carbohydrate hòa tan trong hạt đậu tương Xem tại trang 98 của tài liệu.
Hình 3.27. Tỉ lệ các thành phần khác trong hạt đậu tương - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.27..

Tỉ lệ các thành phần khác trong hạt đậu tương Xem tại trang 99 của tài liệu.
Hình 3.29. Xác định các dòng đột biến không mang gen chuyển - Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPRCas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03, GmGOLS19 trên cây đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt.

Hình 3.29..

Xác định các dòng đột biến không mang gen chuyển Xem tại trang 102 của tài liệu.

Trích đoạn

Các dòng M3.1 và M4.1 của giống Marverick

Phân tích sinh trưởng, phát triển và hình thái của các dòng đậu tương

Phân tích khả năng nảy mầm của các dòng đột biến gen

Phân tích thành phần của hạt của các dòng đậu tương mang đột biến

Xác định các đột biến đồng hợp tử không mang gen chuyển

Khả năng xuất hiện đột biến định hướng muộn thông qua hệ thống

Đột biến gen GmGOLS và sự nảy mầm của hạt đậu tương

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan