(LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu đặc điểm bệnh lý của chó mắc viêm ruột tiêu chảy do parvovirus type 2 gây ra và chẩn đoán bệnh bằng kỹ thuật PCR

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ THU HẰNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ CỦA CHÓ MẮC VIÊM RUỘT TIÊU CHẢY DO PARVOVIRUS TYPE GÂY RA VÀ CHẨN ĐOÁN BỆNH BẰNG KỸ THUẬT PCR Chuyên ngành: Thú y Mã số: 8640101 Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Thị Lan NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2018 download by : skknchat@gmail.com LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan : Khoá luận tốt nghiệp với đề tài “ Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý chó mắc viêm ruột tiêu chảy Parvovirus type gây chẩn đoán bệnh kỹ thuật PCR” cơng trình nghiên cứu cá nhân tơi, khơng chép Tôi xin chịu trách nhiệm cơng trình nghiên cứu riêng ! Hà Nội, ngày 24 tháng 10 năm 2018 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Thu Hằng i download by : skknchat@gmail.com LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn, tơi nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy cô giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp gia đình Nhân dịp hồn thành luận văn, cho phép tơi bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc (người hướng dẫn khoa học) tận tình hướng dẫn, dành nhiều cơng sức, thời gian tạo điều kiện cho suốt trình học tập thực đề tài Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ môn , Khoa - Học viện Nông nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ tơi q trình học tập, thực đề tài hoàn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo, cán viên chức (cơ quan nơi thực đề tài) giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi suốt q trình thực đề tài Xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ tơi mặt, động viên khuyến khích tơi hồn thành luận văn./ Hà Nội, ngày 24 tháng 10 năm 2018 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Thu Hằng ii download by : skknchat@gmail.com MỤC LỤC Lời cảm ơn .i Lời cam đoan ii Mục lục ii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình viii Trích yếu luận văn ix Thesis abstract xi Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu đề tài 1.2.1 Mục tiêu chung 1.2.2 Mục tiêu cụ thể 1.3 Phạm vi nghiên cứu 1.4 Những đóng góp đề tài 1.5 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.5.1 Ý nghĩa khoa học 1.5.2 Ý nghĩa thực tiễn Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Một số tư liệu lồi chó 2.1.1 Nguồn gốc lồi chó 2.1.2 Một số đặc điểm sinh lý chó 2.1.3 Một số đặc điểm cấu tạo chức sinh lý dày - ruột 2.2 Bệnh chó Parvovirus type 12 2.2.1 Lịch sử bệnh 12 2.2.2 Phân loại số đặc tính sinh học Parvovirus 14 2.2.3 Dịch tễ học 16 2.2.4 Cơ chế sinh bệnh 17 2.2.5 Triệu chứng 19 2.2.6 Bệnh tích 20 2.2.7 Chẩn đoán 21 iii download by : skknchat@gmail.com 2.2.8 Phòng bệnh 24 2.2.9 Điều trị 25 2.2.10 Đại cương kỹ thuật làm tiêu vi thể nhuộm Hematoxylin – eosin (H – E) 26 2.2.11 Phương pháp PCR 27 Phần Vật liệu phương pháp nghiên cứu 32 3.1 Địa điểm nghiên cứu 32 3.2 Thời gian nghiên cứu 32 3.3 Đối tượng, vật liệu nghiên cứu 32 3.3.1 Đối tượng 32 3.3.2 Vật liệu nghiên cứu 32 3.3.3 Trang thiết bị dụng cụ 32 3.4 Nội dung nghiên cứu 33 3.4.1 Nghiên cứu tình hình chó mắc viêm ruột tiêu chảy Parvovirus type 33 3.4.2 Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý chó mắc viêm ruột tiêu chảy Parvovirus type 33 3.5 Phương pháp nghiên cứu 33 3.5.1 Phương pháp lâm sàng, ghi chép, mô tả 33 3.5.2 Phương pháp mổ khám quan sát đại thể 36 3.5.3 Phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) 37 3.5.4 Phương pháp làm tiêu vi thể 39 3.5.5 Phương pháp sử lý số liệu 41 Phần Kếtquảvà thảoluận 42 4.1 Tình hình mắc loại bệnh chó phịng khám 42 4.1.1 Phân loại nhóm bệnh chó mang đến khám điều trị 42 4.1.2 Kết chẩn đoán Parvovirus type kỹ thuật PCR với mẫu thu thập 44 4.1.3 Tình hình chó mắc bệnh viêm ruột tiêu chảy Parvovirus type theo lứa tuổi 46 4.1.4 Tình hình mắc bệnh viêm ruột tiêu chảy Parvovirus type chó tiêm phịng chó chưa tiêm phịng vacxin 48 iv download by : skknchat@gmail.com 4.2 Kết xác định đặc điểm bệnh lý chủ yếu chó mắc bệnh Parvovirus type 49 4.2.1 Xác định triệu chứng lâm sàng chó mắc bệnh Parvovirus type 49 4.2.2 Xác định tổn thương đại thể chó mắc bệnh Parvovirus type 51 4.2.3 Xác định tổn thương vi thể chó mắc bệnh Parvovirus type 54 Phần Kếtluậnvà kiếnnghị 59 5.1 Kếtluận 59 5.2 Kiếnnghị 59 Tàiliệuthamkhảo 60 v download by : skknchat@gmail.com DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt CPV – Canine Parvovirus type Cs Cộng DNA Deoxynucleicacide ELISA Enzyme Linked Imunosorbent Assay FPL Feline panleukopenia FPV Panleucopenie feline virus HE Hematoxyline Eosin HI Hemaglutination Inhibition Ig Immunoglobulin KN Kháng nguyên KT Kháng thể MEV Mink enteritis virus MVC Minute virus of canines PCR Polymerase chain reaction vi download by : skknchat@gmail.com DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Thành phần phản ứng PCR 38 Bảng 3.2 Thông tin cặp mồi định tính sử dụng nghiên cứu 38 Bảng 3.3 Chu trình nhiệt sản phẩm PCR sử dụng 38 Bảng 4.1 Phân loại nhóm bệnh chó mang đến khám điều trị phòng khám thú y Cộng đồng – Khoa thú y 42 Bảng 4.2 Tỷ lệ mắc loại bệnh truyền nhiễm phòng khám 44 Bảng 4.3 Kết phát Parvovirus type kỹ thuật PCR với mẫu thu thập 45 Bảng 4.4 Tỷ lệ chó mắc bệnh Parvovirus type theo lứa tuổi(n = 42) 47 Bảng 4.5 Tỷ lệ mắc bệnh chó chưa tiêm phịng tiêm phòng vacxin phòng bệnh Parvovirus 48 Bảng 4.6 Triệu chứng lâm sàng chó mắc Parvovirus type 49 Bảng 4.7 Các tổn thương đại thể chó mắc bệnh Parvovirus type 52 Bảng 4.8 Tổn thương vi thể chó mắc bệnh Parvovirus type 54 vii download by : skknchat@gmail.com DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Cấu tạo Parvovirus .15 Hình 2.2 Cơ chế sinh bệnh Parvovirus type chó .18 Hình 2.3 Bộ test thử CP 24 Hình 2.4 Thuốc nhuộm Hematoxylin - Eosin 27 Hình 3.1 Test thử CPV 35 Hình 3.2 Kết dương tính 35 Hình 4.1 Tỷ lệ chó mắc bệnh truyền nhiễm 44 Hình 4.2 Kết điện di sản phẩm PCR phát Parvovirus 45 Hình 4.3 Chó bị tiêu chảy phân có máu 51 Hình 4.4 Chó mệt mỏi, ủ rũ .51 Hình 4.5 Dịch nơn mửa chó bệnh 51 Hình 4.6 51 Hình 4.7 Lách biến dạng, tụ huyết 53 Hình 4.8 Ruột xuất huyết 53 Hình 4.9 Dạ dày chứa dịch .53 Hình 4.10 Tim nhão 53 Hình 4.11 Phổi sung huyết 53 Hình 4.12 Hạch màng treo sưng xuất huyết 53 Hình 4.13 Hoại tử tế bào biểu mơ ruột, HE, 200X 56 Hình 4.14 Hoại tử tế bào biểu mô ống ruột, HE, 200X .56 Hình 4.15 Hoại tử biểu mô tá tràng, HE, 100X 56 Hình 4.16 Hồi tràng thâm nhiễm tế bào viêm, HE, 200X 56 Hình 4.17 Tăng sinh nang lympho, thâm nhiễm tế viêm manh tràng, HE, 200X 56 Hình 4.18 Hoại tử niêm mạc manh tràng, HE, 400X 56 Hình 4.19 Sung huyết hạ niêm mạc kết tràng, HE, 200X 57 Hình 4.20 Sung huyết hạ niêm mạc trực tràng, HE, 200X 57 Hình 4.21 Thối hóa tế bào hạch màng treo ruột, HE, 200X 57 Hình 4.22 Tim sung huyết, HE, 200X 57 Hình 4.23 Lách sung huyết, xuất huyết, HE, 200X 57 Hình 4.24 Phổi sung huyết, viêm phổi kẽ, HE, 200X 57 Hình 4.25 Xuất huyết kẽ thận, HE, 200X 58 Hình 4.26 Niêm mạc dày sung huyết, HE, 100X 58 viii download by : skknchat@gmail.com TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Nguyễn Thị Thu Hằng Tên Luận văn: Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý chó mắc viêm ruột tiêu chảy Parvovirus type gây chẩn đoán bệnh kỹ thuật PCR Chuyên ngành: Thú y Mã số: 8640101 Tên sở đào tạo: Học viện Nơng nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu - Xác định đặc điểm bệnh lý chủ yếu chó mắc Parvovirus type - Ứng dụng quy trình chẩn đoán nhanh Parvovirus type phương pháp PCR Phương pháp nghiên cứu Nội dung nghiên cứu: Đối tượng nghiên cứu chó mắc bệnh Parvovirus type Trang thiết bị phục vụ nghiên cứu: Máy đúc tự động, máy cắt Microton, máy li tâm, máy votex, máy PCR, máy chạy điện di, máy chụp ảnh gel, tủ lạnh, máy đo thân nhiệt điện tử, kính hiển vi, tủ -800C, máy votex, tủ ấm 370C, máy ủ Hóa chất dùng nghiên cứu: Formol 10%, cồn, xylen, parafin, thuốc nhuộm haematoxylin, thuốc nhuộm eosin, dung dịch PBS, Red Gel, thạch Agarose, kít tách chiết ReliaPrepTM RNA Cell Miniprep System hãng Promega, kit PCR hãng Promega Nghiên cứu sử dụng phương pháp như: Phương pháp mổ khám kiểm tra bệnh tích đại thể; Phương pháp làm tiêu bệnh lý kiể m tra bê ̣nh tı́ch vi thể ;Phương pháp PCR; Kết nghiên cứu nhập xử lý qua MS Excel 2007 Kết kết luận Kết nghiên cứu cho thấy: - Trong thời gian nghiên cứu có 220 chó ốm mang đến khám, điều trị Phòng khám thú y Cộng đồng, nhóm bệnh phân loại nhóm bệnh truyền nhiễm chiếm tỷ lệ cao chó nhiễm bệnh Parvovirus chiếm tỷ lệ cao (58,85%) - Phương pháp PCR phát 42 mẫu dương tính với Parvovirus type tổng số 49 mẫu thu thập test thử nhanh phòng khám - Giống chó ngoại có tỷ lệ mắc bệnh Parvovirus cao giống chó nội so với giống chó lai - Chó từ tuần đến 24 tuần tuổi có tỷ lệ mắc bệnh cao (47,61%) ix download by : skknchat@gmail.com Parvovirus type Đối với chó năm tuổi, thể chống đỡ nhiễm virushay có vào thể chó virus bị diệt hiệu giá kháng thể cao thể chó, thể chó lớn không mẫn cảm với Parvovirus type Các mẫu phân từ chó lớn khơng phát thấy Parvovirus type Tỷ lệ mắc bệnh sai khác độ tuổi chó chó tuần tuổi thời kỳ bú sữa mẹ, nhận miễn dịch thụ động từ sữa đầu chó mẹ Chó mẹ hình thành kháng thể qua cảm thụ từ tự nhiên tiêm phòng vacxin phòng bệnh, miễn dịch truyền sang sữa đầu giúp vật phịng bệnh Đồng thời chó giai đoạn bú sữa mẹ chưa tập ăn ngồi nên bị rối loạn tiêu hoá, mắc bệnh giun sán Những chó giai đoạn đến 12 tuần tuổi giai đoạn chó chịu nhiều biến đổi: chó bắt đầu cai sữa mẹ tập quen dần với thức ăn, hệ tiêu hố bắt đầu thích nghi dần, thay đổi mơi trường sống (chó tặng, bán giai đoạn này) Những yếu tố ảnh hưởng đến sức khoẻ chúng nên mầm bệnh dễ xâm nhập phát triển Lúc chó trở nên dễ thụ cảm Do đó, kết khảo sát cho thấy, chó từ đến 12 tuần tuổi có tỷ lệnhiễm bệnh cao 4.1.4 Tình hình mắc bệnh viêm ruột tiêu chảy Parvovirus type chó tiêm phịng chó chưa tiêm phịng vacxin Xuất phát từ mục đích xác định mức độ phịng bệnh hộ ni chó, từ xây dựng phác đồ điều trị thích hợp cho hiệu điều trị cao Thực khảo sát để xác định xem chó bệnh tiêm vacxin phịng hay chưa Kết thống kê trình bày bảng 4.5 Bảng 4.5 Tỷ lệ mắc bệnh chó chưa tiêm phòng tiêm phòng vacxin phòng bệnh Parvovirus Số lượng chó mắc bệnh Tỷ lệ (%) Chưa tiêm 23 54,76 Tiêm lần 13 30,95 Tiêm lần 14,29 Tổng 42 100 Tiêm phòng vacxin Qua kết bảng 4.5 cho thấy tổng số 42 chó mắc bệnh Parvovirus type có 23 chưa tiêm vacxin phòng bệnh 48 download by : skknchat@gmail.com Parvoviruschiếm tỷ lệ 54,76%, 13 tiêm phòng lần mắc bệnh chiếm tỷ lệ 30,95 %; tiêm phòng lần chiếm tỷ lệ 14,29% Có khác biệt tỷ lệ mắc bệnh chó tiêm phịng chó chưa tiêm phịng chống Parvovirustype Qua khảo sát cho thấy hầu hết chó mắc bệnh đưa đến khám điều trị chưa tiêm phòng vacxin tiêm phịng khơng đầy đủ, điều thấy ý thức phịng bệnh người ni chó chưa cao Có 30,95% tổng số chó bệnh tiêm phòng lần 14,29 % tiêm lần mắc bệnh Nhiều trường hợp sau tiêm vacxin lần lại phát bệnh trước tiêm thể nhiễm virus giai đoạn ủ bệnh tiêm phịng vơ tình lại kích thích bệnh phát triển nhanh Cịn trường hợp tiêm vacxin lần mà mắc bệnh tiêm phịng chưa cách, tiêm vacxin khơng quy trình bảo quản vacxin khơng cách làm hiệu lực Kết khảo sát cho thấy việc tiêm phòng vacxin hiệu quả, quan trọng, chó tiêm phịng vacxin nguy mắc bệnh tỷ lệ chết thấp 4.2 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH CÁC ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ CHỦ YẾU CỦA CHÓ MẮC BỆNH DO PARVOVIRUS TYPE 4.2.1 Xác định triệu chứng lâm sàng chó mắc bệnh Parvovirustype Trong thời gian thực đề tài, tiến hành theo dõi triệu chứng lâm sàng đồng thời tiến hành thu thập mẫu 42 chó mắc Parvovirus type Phịng khám thú y Cộng đồng Kết thống kê triệu chứng lâm sàng chó nhiễm Parvovirus type trình bày bảng 4.6 Bảng 4.6.Triệu chứng lâm sàng chó mắcParvovirus type STT Số theo dõi 42 42 42 42 42 42 Triệu chứng Ủ rũ, mệt mỏi Tiêu chảy, phân lẫn máu Bỏ ăn Nôn bọt trắng, vàng xanh Sốt Mắt hõm sâu, da đàn hồi Số có triệu chứng 42 38 36 34 25 35 Tỷ lệ (%) 100 90,47 85,71 80,95 59,52 83,3 Qua bảng 4.6 thấy số triệu chứng lâm sàng chủ yếu chó mắc Parvovirus type ủ rũ, nơn mửa, tiêu chảy máu, sốt, bỏ ăn Tuy nhiên, triệu 49 download by : skknchat@gmail.com chứng bệnh thay đổi phụ thuộc vào chủng virus, trạng thái miễn dịch giống, tính mùa vụ điều kiện quản lý chăm sóc Sốt biểu ghi nhận chó khảo sát, thân nhiệt dao động khoảng 39,0 - 40,50C Mặc dù sốt khơng phải triệu chứng điển hình cho bệnh chun biệt dấu hiệu thơng báo thể đáp ứng lại tác nhân gây bệnh, tỷ lệ chó có triệu chứng sốt chiếm 59,52%.Đồng thời, 100% chó bệnh xuất triệu chứng ủ rũ, mệt mỏi Bỏ ăn triệu chứng thường xun chó bệnh chiếm 85,71% Triệu chứng nơn mửa có tỷ lệ 80,95% Do virus gây bệnh hướng niêm mạc, niêm mạc đường tiêu hóa từ dày đến ruột bị virus tác động gây viêm nặng Theo Phạm Sỹ Lăng Phan Địch Lân (1992), trình viêm niêm mạc đường tiêu hóa làm cho dịch rỉ viêm tăng tiết đồng thời sản phẩm trình viêm tác động vào thần kinh thụ cảm niêm mạc đường tiêu hóa kích thích làm tăng nhu động ruột Chó bệnh nơn khan bọt dãi nhớt màu trắng xanh vàng Khi theo dõi 42 bệnh triệu chứng ỉa chảy, phân lẫn máu triệu chứng điển hình vật mắc bệnh, chiếm tỷ lệ 90,47% Theo Trần Minh Châuvà cs (1988), dạng đường ruột dạng vật hay gặp Con vật khô da, thiếu máu nặng hay trung bình, chó ủ rũ, có sốt Thơng thường sốt kéo dài từ chó bắt đầu chó mệt đến lúc ỉa chảy nặng Thân nhiệt giảm chó kiệt sức lịm dần Lúc đầu chó cịn ăn, chơi đùa, sau buồn bã, ăn bỏ ăn – ngày, chó ỉa chảy nặng Giai đoạn tiếp theo, phân có lẫn niêm mạc ruột, pha keo nhầy, Chó gầy sút nhanh, bỏ ăn hoàn toàn, tổn thương chủ yếu tá tràng, khơng tràng, có manh tràng, có dày, gọi bệnh viêm dày ruột khơng xác Qua quan sát chó mắc bệnh nghiên cứu diễn biến triệu chứng tương tự xảy Con vật tiêu chảy phân sền sệt, loãng, lẫn máu, giai đoạn cuối phân lỏng nhiều nước có máu tươi, mùi khắm ruột cá mè phơi nắng Tuỳ theo tiên lượng bệnh ngày vật có triệu chứng tiêu chảy chảy từ - lần, làm cho thể nước, chất điện giải, da tính đàn hồi giảm khả hấp thu chất dinh dưỡng Mặt khác, tình trạng sốt với tượng nơn mửa, ỉa chảy máu làm chó bệnh nước rối loạn điện giải nghiêm trọng, chó bệnh bị suy sụp nhanh thiếu máu 50 download by : skknchat@gmail.com Các triệu chứng lâm sàng chó mắc bệnh Parvovirustype Hình 4.3.Chó bị tiêu chảy phân có Hình 4.4 Chó mệt mỏi, ủ rũ máu Hình 4.5 Dịch nơn mửa chó bệnh Hình 4.6 4.2.2 Xác định tổn thương đại thể chó mắc bệnh Parvovirus type Để biết tổn thương đại thể chó mắc bệnh Parvovirustype 2, tiến hành mổ khám ca bệnh có kết dương tính với Parvovirus kỹ thuật PCR triệu chứng lâm sàng điển hình bệnh.Kiểm tra toàn quan kết trình bày bảng 4.7 51 download by : skknchat@gmail.com Bảng 4.7 Các tổn thương đại thể chó mắc bệnh Parvovirustype Các biến đổi bệnh lý giải phẫu đại thể STT Số mổ khám Số có tổn thương Tỷ lệ (%) Ruột đầy hơi, sung huyết, xuất huyết 5 100 Dạ dày chứa dịch, sung huyết, xuất huyết 5 100 Hạch màng treo ruột sung huyết, xuất huyết 5 100 Gan vàng, sưng Túi mật căng to 80,0 Lách biến dạng, tụ huyết 80,0 Dãn tim, tim xuất huyết 60,0 Phổi sung huyết, xuất huyết 60,0 Tích nước xoang ngực 40,0 Tích nước xoang bụng 40,0 Theo bảng 4.7 thấy mổ khám quan sát tổn thương đại thể chó mắc bệnh Parvovirus type 2, thấy tổn thương đại thể chủ yếu là: + Tim: Tim nhạt màu, thành tâm nhĩ tâm thất phải mềm mỏng bình thường, tim trở nên nhăn nheo sau lấy hết máu tim Tràn dịch màng tim + Phổi: Phổi có tượng tụ huyết, xuất huyết mức độ khơng điển hình Ngun nhân mơ phổi khơng phải điểm đích cho Parvovirus cơng mà chủ yếu làm giảm số lượng bạch cầu, giảm sức đề kháng thể tạo điều kiện thuận lợi cho kế phát vi khuẩn hội gây nên bệnh tích + Gan: Gan có màu vàng, sưng, tụ huyết, xuất huyết Túi mật căng to, dịch mật đặc + Lách: Lách có dạng không đồng nhất, xuất huyết điểm hoại tử vùng rìa, dai bình thường + Dạ dày: Dạ dày chứa đầy hơi, chứa nhiều dịch màu trắng màu vàng, sung huyết, xuất huyết, có tượng xuất huyết điểm niêm mạc + Ruột: Thành ruột bị bào mỏng bong tróc niêm mạc ruột, bề mặt ruột 52 download by : skknchat@gmail.com sần sùi Niêm mạc ruột xuất huyết điểm, có đoạn có tượng hoại tử Chất chứa ruột có màu hồng, đỏ sẫm màu vàng tùy theo mức độ viêm Hạch bạch huyết màng treo ruột sưng to xuất huyết Các tổn thương đại thể chó mắc bệnh Parvovirus type Hình 4.7 Lách biến dạng, tụ huyết Hình 4.8 Ruột xuất huyết Hình 4.9 Dạ dày chứa dịch Hình 4.10 Tim nhão Hình 4.11 Phổi sung huyết Hình 4.12 Hạch màng treo sưng xuất huyết 53 download by : skknchat@gmail.com 4.2.3 Xác định tổn thương vi thể chó mắc bệnh Parvovirus type Sau trình mổ khám quan sát tổn thương đại thể chó mắc Parvovirus type, chúng tơi tiến hành lấy mẫu bệnh phẩm quan sau: tim, phổi, gan, lách,dạ dày, hạch màng treo ruột, tá tràng, không tràng, hồi tràng, manh tràng, kết tràng, trực tràng, thận, bàng quang, não Bệnh phẩm ngâm formol 10%, đúc block, cắt làm tiêu để xác định biến đổi vi thể chó mắc Parvovirustype Chúng tiến hành 15 tổ chức trên, quan đúc block, bock cắt slide nhuộm HE để xem bệnh tích Kết tổng hợp biến đổi bệnh lý vi thể chó mắc bệnh Parvovirus type trình bày bảng 4.8 Bảng 4.8 Tổn thương vi thể chó mắc bệnh Parvovirustype Tổn thương quan Cơ quan Số Sung block huyết nghiên (%) cứu Xuất huyết (%) Thâm nhiễm tế bào viêm (%) Thối hóa tế bào (%) Hoại tử Tăng sinh tế bào nang (%) lympho (%) Tim 15 86,67 66,67 33,33 13,33 Phổi 15 53,33 60,00 66.67 53,33 0 Gan 15 66,67 66,67 73,33 53,33 53,33 13,33 Lách 15 53,33 40,00 66,67 33,33 Dạ Dày 15 100 100 100 86,67 80,00 53,33 Hạch màng treo ruột 15 100 80,00 100 86,67 60,00 Tá tràng 15 100 100 100 93,33 73,33 53,33 Không tràng 15 100 100 100 93,33 73,33 53,33 Hồi tràng 15 100 100 100 93,33 73,33 53,33 Manh tràng 15 100 100 100 73,33 66,67 33,33 Kết tràng 15 100 100 100 73,33 53,33 46,67 Trực tràng 15 100 100 100 66,67 53,33 46,67 Thận 15 0 13,33 33,33 0 Bàng quang 15 0 20,00 0 Não 15 13,33 0 0 54 download by : skknchat@gmail.com Qua bảng 4.7 cho thấy chó mắc Parvovirus type 2các tổn thương vi thể chủ yếu sung huyết, xuất huyết, thâm nhiễm tế bào viêm, thối hóa, hoại tử tế bào chiếm tỷ lệ cao, tổn thương bệnh lý khác chiếm tỷ lệ thấp Các biến đổi bệnh tích chủ yếu thường gặp quan dày, ruột hạch màng treo ruột Các quan cịn lại có biến đổi bệnh tích tỷ lệ không cao Cụ thể sau: Niêm mạc dày, ruột non: sung huyết, xuất huyết nặng tất tiêu nghiên cứu chiếm tỷ lệ 100% Các tế bào biểu mô niêm mạc dày, ruột bị bào mịn, bong tróc, đứt nát Các mao mạch giãn rộng, chứa đầy hồng cầu có xâm nhập tế bào thực bào như: bạch cầu đơn nhân lớn, bạch cầu đa nhân trung tính Nhung mao ruột biến dạng, bị bào mịn Các tuyến bã nhờn giãn rộng chứa nhiều dịch nhầy, tế bào tuyến trương to tăng cường chức phân tiết, tế bào tuyến tiết dịch nhầy tăng sinh, phình to Hạch màng treo ruột: sung huyết, xuất huyết, có thâm nhiễm bạch cầu lympho Gan: sung huyết, xuất huyết chiếm tỷ lệ 70% Tế bào gan thối hóa, hoại tử thường thối hóa mỡ Mạch quản gan giãn chứa đầy hồng cầu, hồng cầu thoát khỏi lòng mạch quản nằm xen kẽ với tế bào gan Tim: tim sung huyết, xuất huyết tỷ lệ chiếm khoảng 80% Lách: sung huyết, xuất huyết tỷ lệ từ 50 – 60%, ngồi có tượng thối hóa khơng bào thâm nhiễm tế bào viêm Phổi: sung huyết, xuất huyết, thâm nhiễm tế bào viêm tỷ lệ 55 - 65% Ruột già: sung huyết, xuất huyết thối hóa, hoại tử tế bào chiếm tỷ lệ cao 75 - 100% Tế bào biểu mô niêm mạc ruột già bong tróc, lơng nhung bị bào mịn, đứt nát Có tượng thâm nhiễm tế bào viêm Thận: có tượng viêm kẽ thận, thận thối hóa kính Não: quan sát sung huyết màng não nhiên chiếm tỷ lệ 18,75% 55 download by : skknchat@gmail.com Các tổn thương vi thể chó mắc bệnh Parvovirustype Hình 4.13 Hoại tử tế bào biểu mơ ruột, HE, 200X Hình 4.14 Hoại tử tế bào biểu mơ ống ruột, HE, 200X Hình 4.15 Hoại tử biểu mơ tá tràng, HE, 100X Hình 4.16 Hồi tràng thâm nhiễm tế bào viêm, HE, 200X Hình 4.17 Tăng sinh nang lympho, thâm nhiễm tế viêm manh tràng, Hình 4.18.Hoại tử niêm mạc manh tràng, HE, 400X HE, 200X 56 download by : skknchat@gmail.com Hình 4.19 Sung huyết hạ niêm mạc kết tràng, HE, 200X Hình 4.20 Sung huyết hạ niêm mạc trực tràng, HE, 200X Hình 4.21 Thối hóa tế bào hạch Hình 4.22 Tim sung huyết, HE, màng treo ruột, HE, 200X 200X Hình 4.23 Lách sung huyết, xuất Hình 4.24 Phổi sung huyết, viêm huyết, HE, 200X phổi kẽ, HE, 200X 57 download by : skknchat@gmail.com Hình 4.25 Xuất huyết kẽ thận, HE, 200X Hình 4.26 Niêm mạc dày sung huyết, HE, 100X 58 download by : skknchat@gmail.com PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 KẾTLUẬN Qua trình nghiên cứu đề tài chúng tơi có số kết luận sau: - Trong nhóm bệnh chó mang đến khám, điều trị phòng khám thú y Cộng đồng, nhóm bệnh truyền nhiễm chiếm tỷ lệ cao bệnh Parvovirus type chiếm tỷ lệ cao (55,81%) - Đã phát 42 mẫu dương tính với Parvovirustype kỹ thuật PCR chiếm tỷ lệ 87,50% tổng số 49 mẫu thu thập qua test thử nhanh - Giống chó ngoại có tỷ lệ mắc bệnh Parvovirustype cao giống chó nội so với giống chó lai - Chó từ tuần đến 24 tuần tuổi có tỷ lệ mắc bệnh cao (47,61%) - Chó tiêm phịng vacxin phịng bệnh Parvovirustype có tỷ lệ mắc bệnh thấp so với chó chưa tiêm phịng - Các triệu chứng thường gặp chó mắc bệnh Parvovirustype vật ủ rũ, mệt mỏi, nôn, ỉa chảy phân lỗng lầy nhầy có lẫn máu tươi có mùi đặc trưng - Các tổn thương đại thể chủ yếu chó mắc bệnh Parvoviruslà ruột đầy hơi, sung huyết, xuất huyết; dày đầy hơi, chứa nhiều dịch, sung huyết xuất huyết; hạch màng treo ruột sưng, xuất huyết; gan vàng, sưng, túi mật căng to; lách không đồng xuất huyết - Các tổn thương vi thể chó mắc bệnh Parvovirustype sung huyết, xuất huyết, thâm nhiễm tế bào viêm, thối hóa tế bào, hoại tử tế bào, tăng sinh nang lympho 5.2 KIẾNNGHỊ - Tiếp tục điều tra khảo sát đặc điểm dịch tễ bệnh Parvovirus type 2,nhằm khuyến cáo quy trình phịng bệnh hiệu - Cần phân lập nghiên cứu đặc điểm sinh học Parvovirus làm sở cho sản xuất vacxin, kháng huyết để phòng điều trị có hiệu bệnh, giảm thiệt hại cho người ni chó - Khi nhập giống chó ngoại cần kiểm soát chặt chẽ bệnh truyền nhiễm nguy hiểm, tránh tượng lây lan dịch bệnh vào nước ta 59 download by : skknchat@gmail.com TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt: Nguyễn Như Pho (2003) Bệnh Parvovirus Care chó NXB Nơng nghiệp, Hà Nội Nguyễn Văn Thanh, Vũ Như Quán Nguyễn Hoài Nam (2012) Giáo trình Bệnh chó mèo NXB Đại học Nông nghiệp, Hà Nội Phạm Sỹ Lăng (2006) Kỹ thuật ni chó phịng bệnh cho chó NXB Lao động Xã hội, Hà Nội Phạm Sỹ Lăng Phan Địch Lân (1992) Kỹ thuật ni chó cảnh NXB Nông nghiệp, Hà Nội Tô Dung Xuân Giao (2006) Kỹ thuật ni chó mèo phịng bệnh thường gặp NXB Lao động Xã hội, Hà Nội Trần Thanh Phong (1996) Một số bệnh truyền nhiễm chó Tủ sách trường Đại học Nơng Lâm TP.Hồ Chí Minh TS Phạm Hồng Sơn (2006) Giáo trình Vi sinh vật học thú y NXB Đại học Huế Vương Đức Chất Lê Thị Tài (2004) Bệnh thường gặp chó mèo cách phịng trị NXB Nơng nghiệp, Hà Nội II Tài liệu tiếng Anh: Amelia G and L.L Andrew (2010) Canine Parvovirus, vetsmall.theclinics.com 10 Binn L N (1970) Recovery and characterization of a minute virus of canines Infect Immun 1(5).pp 503-508 11 Buonavoglia C (2001) Evidence for evolution of canine parvovirus type in Italy Journal Gen Virol 82(Pt 12).pp 3021-3025 12 Colin R.P (1988) The Global Spread and Replacement of Canine Parvovirus Strains (http://jgv.microbiologyresearch.org/content/journal/jgv/10.1099/0022- 1317-69-5-1111) 13 Cooksey C (2010) Hematoxylin and related compounds an annotated bibliography concerning their origin, properties, chemistry, and certain applications Biotech Histochem 85(1).pp 65-82 14 Decaro N and C Buonavoglia (2012) Infectious Diseases of Wild Mammals and Birds in Europe Wiley-Blackwell, pp.182-184 60 download by : skknchat@gmail.com 15 Goddard A (2008) Prognostic usefulness of blood leukocyte changes in canine parvoviral enteritis Journal Vet Intern Med 22(2), pp 309-316 16 Hoelzer K And C.R Parrish (2010) The emergence of parvovirus of canivores, vet Res 17 HoskinsJ.D (1997) Update on canine parvoviral enteritis 92(8), pp 694-709 18 Houston D M., C S Ribble and L L Head (1996) Risk factors associated with parvovirus enteritis in dogs: 283 cases (1982-1991) Journal Am Vet Med Assoc 208(4), pp 542-6 19 Johnson Amy (2014) Small Animal Pathology for Veterinary Technicians Wiley-Blackwell, 10-13 20 Lamm C G and G B Rezabek (2008) Parvovirus infection in domestic companion animals Vet Clin North Am Small Anim Pract 38(4) pp 837-850 21 Macartney L (1984) Canine parvovirus enteritis 1: Clinical, haematological and pathological features of experimental infection Vet Rec 115(9) pp 201-210 22 Meunier P C (1985) Pathogenesis of canine parvovirus enteritis: sequential virus distribution and passive immunization studies Vet Pathol 22(6) pp 617-624 23 Parrish C R (1985) "Natural variation of canine parvovirus", Science 230(4729) pp 1046-1048 24 Parrish C R (1991) Rapid antigenic-type replacement and DNA sequence evolution of canine parvovirus Journal Virol 65(12) pp 6544-6552 25 Pollock R V and , M J Coyne (1993) Canine parvovirus Vet Clin North Am Small Anim Pract 23(3).pp 555-568 26 Prittie J (2004) Canine parvovirus enteritis: a review of diagnosis, management and prevention, Journal vet Emerg Crit Care 27 Roberts H.R and A.I Cedarbaum (1978) The liver and blood coagulation, hepatic test abnormalities Veterinary laboratory Medicine, Interpretation and Dianosis, Philadelphia 28 Robinson W.F., C.R Huxtable D.A Pass (1979) Clinial andelectrocardiographic findings in suspected viral myocarditic of pups Aust vet Journal 29 Rollock R.V and L.E Carmichael (1982) Maternally derived immunity to canine parvovirus infection transfer, decline and interference with vaccination Journal Am Vet Med Assoc 61 download by : skknchat@gmail.com 30 Shakespeare A S (1999) The incidence of gastroenteritis diagnosis among sick dogs presented to the OnderstepoortVeterinaryAcademicHospital correlated with meteorological data J S Afr Vet Assoc 70(2) pp 95-97 31 Smith-Carr S., D K Macintire and L J.Swango (1997).Canine parvovirus Part I.Pathogenesis and vacxination 19 pp 125-133 32 Streck A.F (2013) An update TagMan real-time PCR for canine and feline parvovirus.Journal Virol methods 33 The Merck Veterinary Manual (2005) 9th Edition Published by Merck & Co., Inc Whitehouse Station, NJ 2005 34 Truyen U (2006) Evolution of canine parvovirus – a need for new vacxins Vet Microbiol 117(1) pp 9-13 62 download by : skknchat@gmail.com ... viêm ruột tiêu chảy Parvovirus type gây chẩn đoán bệnh kỹ thuật PCR? ??để tiến hành nghiên cứu số đặc điểm bệnh lý điển hình bệnh CPV -2 chó chẩn đốn xác có mặt Parvovirusbằng kỹ thuật PCR 1 .2. MỤCTIÊUCỦAĐỀTÀI... Nội dung nghiên cứu 33 3.4.1 Nghiên cứu tình hình chó mắc viêm ruột tiêu chảy Parvovirus type 33 3.4 .2 Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý chó mắc viêm ruột tiêu chảy Parvovirus type ... “ Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý chó mắc viêm ruột tiêu chảy Parvovirus type gây chẩn đoán bệnh kỹ thuật PCR? ?? cơng trình nghiên cứu cá nhân tôi, không chép Tôi xin chịu trách nhiệm cơng trình nghiên