(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh

(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh(Luận án tiến sĩ) Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của lợn mắc viêm phổi do Actinobaccilus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida và Streptococcus suis và sử dụng vacxin phòng bệnh

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM ¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯ ĐỖ TẤT ĐẠT NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ CỦA LỢN MẮC VIÊM PHỔI DO ACTINOBACILLUS PLEUROPNEUMONIAE, PASTEURELLA MULTOCIDA, STREPTOCOCCUS SUIS VÀ SỬ DỤNG VACXIN PHÒNG BỆNH LUẬN ÁN TIẾN SĨ NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2021 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM ¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯ ĐỖ TẤT ĐẠT NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ CỦA LỢN MẮC VIÊM PHỔI DO ACTINOBACILLUS PLEUROPNEUMONIAE, PASTEURELLA MULTOCIDA, STREPTOCOCCUS SUIS VÀ SỬ DỤNG VACXIN PHÒNG BỆNH Chuyên ngành: Bệnh lý học chữa bệnh vật nuôi Mã số: 64 01 02 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS NGUYỄN BÁ HIÊN PGS.TS CÙ HỮU PHÚ HÀ NỘI, 2021 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tôi, kết nghiên cứu trình bày luận án trung thực, khách quan chưa dùng để bảo vệ lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận án cám ơn, thơng tin trích dẫn luận án rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng Tác giả luận án Đỗ Tất Đạt i năm 2021 LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận án, tơi nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy cô giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp gia đình Cho phép tơi bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Bá Hiên PGS.TS Cù Hữu Phú tận tình hướng dẫn, dành nhiều cơng sức, thời gian tạo điều kiện cho tơi suốt q trình học tập thực đề tài Xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ môn Vi sinh vật Truyền nhiễm, Khoa Thú y - Học viện Nông nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ, tạo điều kiện cho tơi trình học tập, thực đề tài hồn thành luận án Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo, cán Bộ môn Vi trùng, Viện Thú y, Viện Công nghệ sinh học- Viện Hàn lâm Khoa học Việt Nam, Công ty CP thuốc thú y Marphavet giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi suốt q trình thực đề tài Xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp quan đoàn thể tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ mặt, động viên tơi hồn thành luận án./ Hà Nội, ngày tháng Tác giả luận án Đỗ Tất Đạt ii năm 2021 MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục i Danh mục chữ viết tắt v Danh mục bảng vii Danh mục hình ix Trích yếu luận án x Thesis abstract xii Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu đề tài 1.2.1 Mục tiêu chung 1.2.2 Mục tiêu cụ thể 1.3 Phạm vi nghiên cứu 1.3.1 Đối tượng nghiên cứu 1.3.2 Phạm vi nghiên cứu 1.4 Những đóng góp đề tài 1.5 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.5.1 Ý nghĩa khoa học 1.5.2 Ý nghĩa thực tiễn Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Tình hình nghiên cứu giới bệnh viêm phổi lợn vacxin phòng bệnh 2.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam bệnh viêm phổi lợn vacxin phòng bệnh 12 2.3 Vi khuẩn Actinobacillus pleuropneumoniae bệnh viêm phổi lợn 14 2.3.1 Vi khuẩn A pleuropneumoniae 14 2.3.2 Bệnh viêm phổi vi khuẩn A pleuropneumoniae gây lợn 17 2.4 Vi khuẩn Pasteurella multocida bệnh viêm phổi lợn 19 2.4.1 Vi khuẩn P multocida 19 2.4.2 Bệnh viêm phổi lợn vi khuẩn P multocida gây 21 i 2.5 Vi khuẩn Streptococcus suis bệnh vi khuẩn gây lợn 25 2.5.1 Vi khuẩn S suis 25 2.5.2 Bệnh vi khuẩn S suis gây lợn 29 2.6 Các chất bổ trợ thường dùng sản xuất vacxin 30 2.6.1 Chất bổ trợ vacxin 30 2.6.2 Muối khoáng 33 2.6.3 Chất nhũ tương 33 2.6.4 Cytokine 35 2.6.5 Saponin 35 2.6.6 Các chất cao phân tử 35 Phần Vật liệu, nội dung và phương pháp nghiên cứu 36 3.1 Địa điểm nghiên cứu 36 3.2 Thời gian nghiên cứu 36 3.3 Vật liệu nghiên cứu 36 3.4 Nội dung nghiên cứu 37 3.4.1 Nghiên cứu triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể lợn mắc bệnh vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis gây 37 3.4.2 Nghiên cứu đánh giá khả ổn định đặc tính sinh học giống sản xuất vacxin phịng bệnh viêm phổi lợn vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis gây 37 3.4.3 Nghiên cứu quy trình sản xuất vacxin đa giá vơ hoạt nhũ dầu phòng bệnh viêm phổi lợn vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis gây 37 3.5 Phương pháp nghiên cứu 38 3.5.1 Phương pháp nghiên cứu triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể lợn mắc bệnh vi khuẩn A pleuropneumoniae, P mutocida S suis gây 38 3.5.2 Phương pháp nghiên cứu đánh giá khả ổn định đặc tính sinh học giống sản xuất vacxin phòng bệnh vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis gây 41 3.5.3 Phương pháp nghiên cứu quy trình sản xuất vacxin đa giá vơ hoạt nhũ dầu phòng bệnh viêm phổi lợn vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis gây 43 ii 3.5.4 Phương pháp xử lý số liệu 50 Phần Kết thảo luận 51 4.1 Kết nghiên cứu triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể lợn mắc bệnh vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis gây 51 4.1.1 Kết nghiên cứu triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể lợn mắc bệnh vi khuẩn A pneumoniae gây 51 4.1.2 Kết nghiên cứu triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể lợn mắc bệnh vi khuẩn P multocida gây 54 4.1.3 Kết nghiên cứu triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể lợn mắc bệnh vi khuẩn S suis gây 56 4.2 Kết đánh giá khả ổn định đặc tính sinh học giống sản xuất vacxin phòng bệnh vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis gây 59 4.2.1 Kết đánh giá khả ổn định đặc tính sinh học giống sản xuất vacxin phòng bệnh vi khuẩn A pleuropneumoniae gây 59 4.2.2 Kết đánh giá khả ổn định đặc tính sinh học giống sản xuất vacxin phịng bệnh vi khuẩn P multocida gây 65 4.2.3 Kết đánh giá khả ổn định đặc tính sinh học giống sản xuất vacxin phòng bệnh vi khuẩn S suis gây 70 4.3 Nghiên cứu quy trình sản xuất vacxin đa giá vơ hoạt nhũ dầu phòng bệnh viêm phổi lợn vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis gây 75 4.3.1 Nghiên cứu xây dựng quy trình sản xuất vacxin đa giá vơ hoạt nhũ dầu phịng bệnh viêm phổi lợn vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis gây 75 4.3.2 Kết đánh giá chất lượng vacxin bán thành phẩm 77 4.3.3 Kết so sánh khả sinh miễn dịch vacxin đa giá bổ trợ keo phèn vacxin đa giá bổ trợ nhũ dầu chống lại vi khuẩn A pleuropneumoniae, P multocida S suis 83 4.3.4 Kết xác định liều tiêm vacxin viêm phổi lợn 90 4.3.5 Kết xây dựng quy trình sản xuất vacxin đa giá vơ hoạt bổ trợ nhũ dầu phịng bệnh viêm phổi lợn 92 iii 4.3.6 Kết xây dựng quy trình sử dụng vacxin đa giá vơ hoạt bổ trợ nhũ dầu phòng bệnh viêm phổi cho lợn 99 Phần Kết luận và đề nghị 103 5.1 Kết luận 103 5.2 Đề nghị 104 Danh mục cơng trình khoa học cơng bố có liên quan đến luận án 105 Tài liệu tham khảo 106 Phụ lục .117 iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ viết đầy đủ aa Amino acid A pleuropneumoniae Actinobacillus pleuropneumoniae BHI Brain Heart Infusion BNNPTNT Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn Bp Base pair CI Confidence Interval CHLB Cộng hòa liên bang cs Cộng DNA Deoxyribonucleic acide dNTP Deoxyribonucleoside triphosphate ELISA Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay FAO Food and Agriculture Organization HT Huyết KHKT Khoa học kỹ thuật M hyopneumoniae Mycoplasma hyopneumoniae NAD Nicotinamide adenine dinucleotide NXB Nhà xuất OIE Office International des Epizooties P multocida Pasteurella multocida PCR Polymerase Chain Reaction PLLO Pleuropneumonia-like organism RNA Ribonucleic acid RT-PCR Reverse transcription polymerase chain reaction S suis Streptococcus suis TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam THB Todd Hewitt Broth TN Thí nghiệm TSB Tryptic Soy Broth TT Thông tư v Chữ viết tắt Chữ viết đầy đủ TYE Tryptone Yeast Extract Broth TW Tryptone water USA United States of America USD United States dollar VNUA Vietnam National University of Agriculture vi Kiểm tra độ khiết tính chất mọc vi khuẩn giữ giống Sau chia canh trùng vào Effendorf Dùng que cấy chọc vào phần canh trùng thừa lọ BHI, ria lại thạch máu, cất tủ ấm 370C/24h Sau 24 h, kiểm tra đĩa thạch vi khuẩn mọc trình giữ giống thạch lỏng đảm bảo đạt u cầu Quy trình đơng khơ giớng vi khuẩn I Chuẩn bị giống vi khuẩn Pasteurella multocida serotype A D II Chuẩn bị dụng cụ môi trường để đông khô Môi trường: - Thạch BHI 5% máu bê cừu - Skim milk (2gram/100ml nước cất) Dụng cụ: - Ống đơng khơ (có nút bơng) vơ trùng - Pipet Pasteur - Serotype có nút vặn - Tăm bơng vơ trùng - Đèn khị - Máy hút chân không - Máy kiểm tra chân không Cách tiến hành: Cấy chủng vi khuẩn Pasteurella multocida cần đông khô lên môi trường thạch BHI 5% máu, với điều kiện khuẩn lạc phải (370C/ 18 giờ) Pha Skim milk nước cất chia nhỏ vào serotype có nút vặn (1ml/serotype), hấp vô trùng 1210C/15 phút Dùng tăm bơng vơ trùng thu hoạch hết khuẩn lạc có đĩa thạch máu, sau gạt tăm bơng vào serotype Skim milk (mỗi chủng vi khuẩn sử dụng serotype Skim milk) Dùng pipet Pasteur hút Skim milk vào ống đơng khơ, tùy mục đích sử dụng mà dùng hay nhiều serotype đông khô Chú ý dùng pipet Pasteur hút lên hút xuống Skim milk phần đáy ống thấm Skim milk Dùng kéo cắt phần thừa nút ống đông khô Đồng thời dùng que nhọn đẩy nút bơng xuống phía dưới, gần chạm vào phần bơng đáy ống đơng khơ 121 Bật đèn khị Cho lửa đèn khị vào vị trí ống đơng khơ, xoay trịn, nhiệt độ nóng chảy thích hợp, dùng hai tay kéo bên ống đông khô Giữ ống đông khô ngăn đá tủ lạnh 12 Cắm ống đông khô vào máy hút chân không, bật máy hút vòng 12 Sau 12 giờ, thu hoạch ống đông khô Kiểm tra ống đông khô Dùng máy kiểm tra chân không, thấy ống đơng khơ có màu sáng xanh chứng tỏ khơng có khơng khí ống Ngược lại, ống đơng khơ có khơng khí bên trong, ống đơng khơ không đảm bảo chất lượng Bảo quản: Ống đông khô bảo quản nhiệt độ thường, tránh để lẫn với vật nặng hay sắc nhọn E PHƯƠNG PHÁP GIỮ GIỐNG VI KHUẨN STREPTOCOCCUS SUIS CHO KHÁNG NGUYÊN TÍNH CAO VÀ ỔN ĐỊNH Quy trình giữ giớng vi khuẩn thạch lỏng 1.1 Chuẩn bị - Giống vi khuẩn - Thạch máu cừu 5% - Nước thịt BHI (Brain heart infusion) - Effendorf vô trùng - Pipet tip vô trùng - Pipetman - Glycerol vô trùng 1.2 Tiến hành - Cấy giống vi khuẩn cần giữ lên môi trường thạch máu cừu 5% (chú ý cấy tách khuẩn lạc riêng rẽ), nuôi tủ ấm 370C/24h - Chọn khuẩn lạc điển hình vi khuẩn (đứng tách riêng) cấy vào môi trường nước thịt BHI - Để tủ ấm 370C từ – 10h 122 - Sau – 10h bổ sung Glycerol (theo tỷ lệ BHI:85% Glycerol: 15%) vào canh trùng nuôi cấy - Lắc canh trùng với Glycerol - Dùng pipetman hút canh trùng chia vào Effendorf (1-1,5ml/tube) - Dán nhãn - Giữ nhiệt độ âm sâu 1.3 Kiểm tra độ khiết tính chất mọc vi khuẩn giữ giống Sau chia canh trùng vào Effendorf Dùng que cấy chọc vào phần canh trùng thừa lọ BHI, ria lại thạch máu, cất tủ ấm 370C/24h Sau 24 h, kiểm tra đĩa thạch vi khuẩn mọc trình giữ giống thạch lỏng đảm bảo đạt u cầu Quy trình đơng khơ giớng vi khuẩn III Chuẩn bị giống vi khuẩn IV Chuẩn bị dụng cụ môi trường để đông khô Môi trường: - Thạch máu bê cừu - Skim milk (2 gram/100ml nước cất) Dụng cụ: - Ống đơng khơ (có nút bơng) vơ trùng - Pipet Pasteur - Serotype có nút vặn - Tăm bơng vơ trùng - Đèn khị - Máy hút chân khơng - Máy kiểm tra chân không V Cách tiến hành: 10 Cấy chủng vi khuẩn cần đông khô lên môi trường thạch máu, với điều kiện khuẩn lạc phải 11 Pha Skim milk nước cất chia nhỏ vào serotype có nút vặn (1ml/serotype), hấp vô trùng 1210C/15 phút 123 12 Dùng tăm vô trùng thu hoạch hết khuẩn lạc có đĩa thạch máu, sau gạt tăm bơng vào serotype Skim milk (mỗi chủng vi khuẩn sử dụng serotype Skim milk) 13 Dùng pipet Pasteur hút Skim milk vào ống đơng khơ, tùy mục đích sử dụng mà dùng hay nhiều serotype đông khô Chú ý dùng pipet Pasteur hút lên hút xuống Skim milk phần đáy ống thấm Skim milk 14 Dùng kéo cắt phần thừa nút ống đông khô Đồng thời dùng que nhọn đẩy nút xuống phía dưới, gần chạm vào phần bơng đáy ống đơng khơ 15 Bật đèn khị Cho lửa đèn khị vào vị trí ống đơng khơ, xoay trịn, nhiệt độ nóng chảy thích hợp, dùng hai tay kéo bên ống đông khô 16 Giữ ống đông khô ngăn đá tủ lạnh 12 17 Cắm ống đông khô vào máy hút chân không, bật máy hút vòng 12 18 Sau 12 giờ, thu hoạch ống đông khô VI Kiểm tra ống đông khô Dùng máy kiểm tra chân không, thấy ống đông khô có màu sáng xanh chứng tỏ khơng có khơng khí ống Ngược lại, ống đơng khơ có khơng khí bên trong, ống đơng khơ khơng đảm bảo chất lượng VII Bảo quản: Ống đông khô bảo quản nhiệt độ thường, tránh để lẫn với vật nặng hay sắc nhọn 124 G PHƯƠNG PHÁP TĂNG CƯỜNG GIỐNG VI KHUẨN STREPTOCOCCUS SUIS CHO KHÁNG NGUYÊN TÍNH CAO VÀ ỔN ĐỊNH Tăng cường qua động vật thí nghiệm: - Chuột bạch: trọng lượng 20gram/con - Nước thịt BHI (Brain Heart Infusion) bổ sung 2% huyết ngựa - Vi khuẩn S suis cấy đĩa thạch máu bê - Vét khuẩn lạc vi khuẩn S suis vào 10ml BHI bổ sung 2% huyết ngựa - Để tủ ấm 370C/24 - Tiêm phúc xoang chuột với liều tiêm 0,5ml/con, chủng vi khuẩn tiêm 02 chuột - Theo dõi chuột - Nếu chuột chết, mổ khám kiểm tra bệnh tích, lấy bệnh phẩm máu tim, ria cấy lại thạch máu nước thịt BHI Để tủ ấm 370C/24 Kiểm tra hình thái khuẩn lạc, làm phản ứng sinh hóa test để khẳng định lại vi khuẩn S suis - Giữ giống vi khuẩn S suis từ máu tim chuột Tăng cường giống vi khuẩn S suis động vật - Lợn có trọng lượng 10-12kg/con - Cấy giống S suis giữ từ thạch lỏng thạch máu đĩa, để tủ ấm 370C/24 Sau 24h, cấy chuyển sang thạch máu đĩa lần 2, chủng vi khuẩn cấy lên đĩa thạch máu - Chuẩn bị 200ml nước BHI bổ sung 2% huyết ngựa - Vét toàn khuẩn lạc vi khuẩn S suis cấy đĩa thạch máu vào 200ml nước BHI - Để tủ ấm 370C/24 - Sau 24h, đếm số lượng vi khuẩn S suis có 1ml canh trùng ni cấy - Tiêm 30ml canh trùng/01 lợn với đường tiêm tĩnh mạch cổ - Theo dõi triệu chứng bệnh lợn sau tiêm canh trùng - Lợn chết, mổ khám kiểm tra bệnh tích, lấy bệnh phẩm gồm: não, dịch khớp, máu tim phổi - Ria cấy lại thạch máu nước THB - Phân lập lại vi khuẩn S suis từ bệnh phẩm lợn chết - Giữ giống S suis 125 ... ĐẠT NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ CỦA LỢN MẮC VIÊM PHỔI DO ACTINOBACILLUS PLEUROPNEUMONIAE, PASTEURELLA MULTOCIDA, STREPTOCOCCUS SUIS VÀ SỬ DỤNG VACXIN PHÒNG BỆNH Chuyên ngành: Bệnh lý học... luận án: Nghiên cứu số đặc điểm bệnh lý lợn mắc viêm phổi Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida, Streptococcus suis sử dụng vacxin phòng bệnh Chuyên ngành: Bệnh lý học chữa bệnh. .. liệu 2.1 Tình hình nghiên cứu giới bệnh viêm phổi lợn vacxin phòng bệnh 2.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam bệnh viêm phổi lợn vacxin phòng bệnh 12 2.3 Vi khuẩn