ảnh 15 : Protein đặc hiệu của văcxin bại liệt bất hoạt sản xuất trên tế bào thận khỉ (IPVK), Vero (IPV ), văcxin chuẩn (Imovax) bằng ph−ơng pháp Western Blot
Bằng ph−ơng pháp Western Blot đã kiểm tra văcxin Bại liệt bất hoạt sản xuất trên 2 loại tế bào thận khỉ và vero, so sánh với mẫu chuẩn IMOVAX của Pháp
Kháng thể sử dụng cho ph−ơng pháp Western Blot đ−ợc lấy từ huyết thanh trẻ em đã uống văcxin bại liệt sống giảm độc lực (Phòng thí nghiệm giám sát Bại liệt viện Vệ sinh Dịch tễ cung cấp) đã cho thấy phản ứng rất mạnh và nằm ở vùng 25 kDa → 35 kDa (VP1 = 35,5 ; VP2 = 35 và VP3 = 26,4) là vùng protein đặc hiệu của virut bại liệt.
Bằng ph−ơng pháp kính hiển vị điện tử chúng tôi kiểm tra chất l−ợng các lô văcxin đơn typ bằng viẹec quan sát hình thái cấu trúc của virut trong văcxin. Kỹ thuật miễn dịch hiển vi điện tử (JEM) không những cho phép quan sát trực tiếp, xác định kích th−ớc và hình dạng virut mà còn cho thấy sự gắn giữa các kháng thể đặc hiệu và các kháng nguyên trên bề mặt hạt virut.
Với việc sử dụng các kháng thể đặc hiệu IgG gắn vàng để định vị các kháng nguyên bề mặt của virut JEM đã kết hợp đ−ợc các −u điểm của tính đặc hiệu cao của phản ứng huyết thanh học với độ chính xác cao của ảnh hiển vi điện tử.
Bằng ph−ơng pháp nhuộm tiêu bản và kỹ thuật miễn dịch hiển vi điện tử truyền qua trên văcxin bại liệt bất hoạt – phòng Kính hiển vi điện tử – viện Vệ sinh dịch tễ đã quan sát và đánh giá chất l−ợng và tính kháng nguyên.
ảnh 16a/ Sau tinh chế – typ 1 16b/ Miễn dịch HVĐT gắn vàng – typ 1
ảnh 18a/ Sau tinh chế – typ 3 18b/ Miễn dịch HVĐT gắn vàng – typ 3 Bằng ph−ơng pháp kính hiển vi, cho thấy các virut typ I, II, III sau tinh chế rất sạch (độ phóng đại 200.000 lần), có độ tinh khiết cao.
Bằng ph−ơng pháp hiển vi điện tử gắn kháng thể gắn vàng, ph−ơng pháp sử dụng kháng thể bại liệt đặc hiệu của 3 týp kháng nguyên có gắn vàng do vậy độ đặc hiệu của ph−ơng pháp là rất lớn.
Kết quả từ các hình ảnh (ảnh 16, 17, 18) cho thấy văcxin sau tinh chế rất sạch, ảnh miễn dịch hiển vi điện tử gắn vàng chứng minh rằng kháng nguyên thu đ−ợc sau tinh chế t−ơng ứng đều là kháng nguyên bại liệt týp 1, 2 và 3.