Định lượng ketoprofen trong các mẫu nano β-cyclodextrin–alginate–ketoprofen đã tổng hợp được bằng phân tích sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC).
Chuẩn bị dung dịch phân tích
Pha động: 1000 mL pha động bao gồm 180 mL methanol, 270 mL acetonitril và 550 mL dung dịch amonium acetate 0,5 mg/mL.
- Thêm 20 mg ketoprofen vào 5 mL methanol cho được dung dịch ketoprofen 4 mg/mL dùng làm mẫu chuẩn. Chuẩn bị 1 mL mẫu chuẩn này và trước khi bơm vào máy mẫu đã được lọc qua màng milipore.
- Chuẩn bị 1 mL mẫu chuẩn tương tự như trên cho các hàm lượng 2 mg/mL, 1 mg/mL và 0,5 mg/mL.
Bảo quản các dung dịch này ở nhiệt độ không quá 25°C và tránh ánh sáng. Chuẩn bị dung dịch đo mẫu
Ngâm 100 mg các mẫu nano β-cyclodextrin–alginate–ketoprofen nồng độ 5%, 10%, 12% trong 5 mL diethyl ether khoảng 1-2 giờ để chiết ketoprofen có trong mẫu.
Nước lọc mẫu được đuổi dung môi thu một chất rắn. Pha chất rắn trong 1 mL methanol và lọc dịch methanol qua màng milipore trước khi bơm vào máy.
Kết quả chạy HPLC
Bảng 11 Kết quả chạy HPLC của dung dịch ketoprofen chuẩn
Nồng độ ketoprofen (mg/mL) Diện tích peak (%)
0,5 1 2 4 44,44 50,42 63,95 71,74
Hình 31 Kết quả chạy HPLC của ketoprofen chuẩn ở các nồng độ 0,5, 1, 2 và 4 mg/mL
Bảng 12 Kết quả chạy HPLC của dung dịch mẫu
Hàm lượng ketoprofen trong các mẫu nano (%) Diện tích peak (%)
5 10 12 62,94 73,53 76,19
Kết quả phân tích HPLC đối với dịch chiết diethyl ether thu từ các mẫu nano đã tổng hợp đều thấy xuất hiện peak của ketoprofen (Hình 32). Kết quả các mẫu phân tích HPLC có lượng ketoprofen phóng thích là 2%, 4,5% và 5% tương ứng với lượng ketoprofen 5%, 10% và 12% đã dùng trong tổng hợp các mẫu nano β-cyclodextrin– alginate–ketoprofen.