- 01 Thac Sl, bao ve nam 2005, vdi de tai lu$n van:
402 SINH HOC CO THEVA DINH Hl/ONG U^G DUNG
precatorius L.), dao bien {Canavalia maritima)... da duac chiing toi lua
chpn cho cac nghien cu-u theo huong i>ng dung.
Tinh sach lectin hat dao bien Kit qua xac dinh hoat do lectin cho thiy djch chilt tho hat dao biln co kha gay ngung kit hong cau nhom mau A on dinh nhit trong so cac nhom mau, cdn PBs pH 7,4 la d^m thich hop nhit cho viec tach va tinh ehi lectin. Djch chilt tho (DCT) hat dao biln da dup-c sir dung de tinh che lectin bang sic ky tren cpt trao doi ion DEAE 52. Ket qua trong so bon dinh protein thu
6wc?c, chi duy nhit dinh co ham luong
cao nhat (riit ra a n6ng dp NaCl 0,56- 0,64 M) la CO hogt tinh lectin {chiem 50% tong hoat do). Dinh nay sau khi dup-c sic ky tilp tuc tren cpt Ipc gel Sephadex G-75 da cho che phim lectin vo-i hieu suit hoat dp khoang 15% va dp tinh sach tang len hon sau lln so voi dich chilt tho ban cau Tren hinh 1 la ket qua phan tieh bing SDS-PAGE cac phan doan lectin. Co the thiy miu tho (cpt 2) chua rat nhieu protein vai khdi luang va ham lu-p-ng khac nhau. Dinh hoat dp sau sic ky trao doi ion (cpt 3) da loai di nhilu protein tap nhung van con bay bang polypeptide khac nhau (cot 3). Culi cung, dinh lectin thu duoc 6 bude sle ky loe gel ehi con rrot bang
duy nhit e6 khdi luong phan tu
khoang 23 kDa (cot 4), ehung to do tinh sach rit cao ciia c h i phim. Nghien CLPU mot s6 tinh chat ciia lectin dao biln
Tru-o-c tien, chiing toi nghien cuu anh hu-o-ng cua nhiet dp va pH ia cac tac nhan tham gia dilu khiln tuong tac lectin - vi sinh vat [4.6].
Tac dung ciia pH
Nghien eii-u anh huang ciia p'r\ mo\
truong c6 y nghTa trong viec tim dieu kien thich hc?p de tiln hanh cac phan U'ng vai lectin.
Tren hinh 2 co the thiy che pham lectin dao bien eo pH toi thfch nam trong khoang trung tinh va hoi axit (pH
ti> 6.0 din 7,4), v i n con heat dong
trong khoang lech 2 do pH ye ca ha, phia (pHtu 4 din 8,3). DO vav, CO .he S^ dung cae loai dem khac n ^ u vol
ph6 pH^tuong f^^^^^^^^^^'
trinh tinh sach va su auny
6 6 '^.Za
< b K'Sa
3 6 kDa
Hinh 1. Anh dien di bien tfnh (SDS-PAGE) cac phan do^n lectin dao bien
Chu thich: 1. Cac protein chuan (BSA - 65, ovalbumin - 45. glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase - 35, tr^-psmogen- 24 trypsin inhibitor - 21 va a- lactalbumin - 14,2 kDa). 2 Dich chiet tho. 3 Dinh DEAE 4. Ch§ pham
•) HAA HAA 2 • 1 r ^ 2 4 5 6 e \ \ 7 4 V 8 A E 2 \ -V- 9 — • • - 10 1 pH ; Hinh 2. Anh hu-ang cua pH len hoat dp lectin dao bien
HAA C2';h C2';h B72n 1 i ^-A ^ ~] 30'C 35'C 40"C
NHlfNG VAN BE NGHIEN CU'U CO BAN TRONG KHOA HOC SU'SONG 403
Bang 1. Tac dung LPC c h i ciia cac saccharide len ho^t dp lectin h?t dao bien
Ning 6t tii thilu cdn gay LCC chi ( mm)
Tac dgng cua nhi^t dp
Che pham lectin dao bien da dup'c xu- ly a cac nhi^t do khac nhau trong nhung khoang thai gian xac djnh. K i t qua thu nghidm dup-c trinh bay tren hinh 2.
Co the thay lectin dao
bien ben a 4 °C, kha ben