2.2.3.1. Phương pháp tính toán một số chỉ tiêu
Hệ số thành thục Gonado Somatic Index – GSI(%):
GSI (%) = GW x 100%
BW Trong đó: GSI – Hệ số thành thục
GW – Khối lượng tuyến sinh dục (g) BW – Khối lượng cơ thể cá (g)
Sức sinh sản tuyệt đối (Absolute Fecundity – AF): Sức sinh sản tuyệt đối là toàn bộ số trứng trong buồng trứng ở giai đoạn IV.
Sức sinh sản tương đối (Relative Fecundity – RF): Là số trứng trên một gam khối lượng cơ thể, theo công thức sau:
RF = BWAF (trứng/gam cá cái)
Xác định số lượng trứng ở buồng trứng bằng cách lấy 3 mẫu ở 3 phần khác nhau (đầu, giữa, cuối) của buồng trứng với khối lượng ≤ 1 gam/mẫu. Đếm tất cả các trứng có trong mẫu, sau đó lấy trung bình số trứng/ 1 gam buồng trứng.
Sức sinh sản thực tế (trứng/kg cá cái): = toàn bộ số trứng thu được sau khi cá đẻ (trứng/ kg cá cái).
Tỷ lệ cá đẻ (%):
Tỷ lệ đẻ = (Số cá đẻ trứng/ Tổng số cá cho đẻ) x 100. Tỷ lệ thụ tinh (%):
Tỷ lệ thụ tinh = (Số trứng thụ tinh/ Số trứng đưa vào ấp) x 100. Tỷ lệ nở (%):
Tỷ lệ nở = (Số trứng nở/ Số trứng thụ tinh) x 100. Năng suất trứng ( trứng/ kg cá cái):
Năng suất trứng = Số trứng thu được/ Khối lượng cá cái cho đẻ (trứng/kg cá cái).
Năng suấ bột (cá bột/kg cá cái):
Năng suất bột = Số cá bột thu được/ Khối lượng cá cho đẻ (trứng/ kg cá cái). Tốc độ sinh trưởng tuyệt đối AGR (gam/ngày):
AGR = Wt2 – W1 (g/ngày)
2 – t1 Tốc độ sinh trưởng tương đối WG (%):
WG = W2 – W1
x 100% W1
Trong đó: W1, W2 – Khối lượng cá ở thời điểm t1, t2 (gam) t1, t2 – Thời điểm cân cá lần trước và lần sau (ngày)
Tỷ lệ sống (%):
TLS (%) = Số cá khi kết thúc thí nghiệm x 100% Số cá ban đầu thí nghiệm
2.2.3.2. Phương pháp xử lý số liệu
Toàn bộ số liệu thu được ở các thí nghiệm đều xử lý trên phần mềm SPSS 16.0, phương pháp thống kê mô tả được sử dụng để phân tích các đặc điểm sinh học sinh sản của cá chim trắng bố mẹ. Phương pháp phân tích phương sai một yếu tố (oneway – ANOVA) và kiểm định Duncan test được sử dụng kiểm định sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) về giá trị trung bình của các thông số giữa các nghiệm thức trong từng thí nghiệm nhằm đánh giá ảnh hưởng của mật độ ương lên sinh trưởng và tỷ lệ sống của cá chim trắng giai đoạn từ cá bột lên cá giống.
Số liệu được trình bày trong báo cáo là giá trị Trung bình (TB) ± Độ lệch chuẩn (SD) và Trung bình (TB) ± Sai số chuẩn (SE).
CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1. Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học sinh sản của cá chim trắng
3.1.1. Phân biệt đực cái
Việc phân biệt đực cái bằng đặc điểm hình thái ngoài có ý nghĩa quan trọng trong tuyển chọn và sinh sản loài cá này. Bằng mắt thường không thể phân biệt được đâu là cá chim trắng đực, đâu là cá chim trắng cái. Chỉ khi cá thành thục tuyến sinh dục và vào mùa sinh sản thì mới nhận biết được thông qua những dấu hiệu hình thái đặc trưng như cơ quan sinh dục ngoài và màu sắc vây, vẩy trên cơ thể cá.
Cá đực lườn bụng cứng nháp có gai sắc, lỗ sinh dục khép kín, màu hồng nhạt.Vuốt nhẹ 2 bên lườn bụng về phía hậu môn thấy có sẹ đặc màu trắng sữa chảy ra (Hình 3.1).
Cá cái bụng phình to, mềm, da bụng mỏng, lỗ sinh dục lồi, có màu hồng đỏ hay phớt hồng. Hạt trứng có màu trắng ngà hoặc hơi vàng, căng tròn, đều, rời. Nhân hơi lệch về phía cực động vật (Hình.3.1).
Hình 3.1. Cơ quan sinh dục ngoài của cá chim trắng đực và cái
3.1.2. Quá trình phát triển tuyến sinh dục
Trong nghiên cứu này, sự phát triển tuyến sinh dục của cá chim trắng được chia làm 6 giai đoạn theo phương pháp phân chia của Nikolski (1963) và Sakun & Butskaia
(1978). Kết quả theo dõi sự phát triển tuyến sinh dục của cá chim trắng trong nhiều năm nuôi tại Hải Phòng cho thấy, tuyến sinh dục của loài cá này trải qua đầy đủ 6 giai đoạn cũng giống như các loài cá khác.
Giai đoạn I: Tuyến sinh dục bắt đầu hình thành, chỉ là 2 giải nhỏ màu trắng trong nằm dọc sát hai bên xoang bụng, khó nhìn thấy, khó phân biệt đực cái. Để phân biệt được phải dựa vào mẫu nhuộm kiểm tra trên kính hiển vi. Thời gian của giai đoạn này dài ngắn khác nhau theo điều kiện chăm sóc, chế độ dinh dưỡng và môi trường sống. Đối với điều kiện nuôi tại Hải Phòng, thời gian của giai đoạn này thường kéo dài trong 1 tháng (Hình 3.2A).
Buồng sẹ cũng có dạng sợi chỉ mảnh trong suốt. Tế bào sinh tinh ở dạng tinh nguyên bào.
Hình 3.2. Các giai đoạn phát triển buồng trứng và tinh sào cá chim trắng (A - Buồng trứng giai đoạn II, B – III, C- IV; D- Lát cắt tinh sào)
Giai đoạn II: Tuyến sinh dục hình thành đầy đủ, gồm 2 dải màu trắng đục hoặc hồng tươi, trông thấy các mạch máu, có khả năng phân biệt đực cái, tế bào trứng có đường kính từ 35- 70µm, mầu của tế bào chất hơi sẫm, trong tế bào chất có thể nhìn thấy nhân noãn hoàng màu xanh.
A B
Cuối giai đoạn II thể tích của tế bào trứng bắt đầu trương to hơn, mầu của tế bào chất nhạt hơn, nhân noãn hoàng tiêu đi, tế bào trứng được bao bọc bởi lớp màng trong suốt. Giữa các tế bào bắt đầu có huyết quản phân bố (Hình 3.2A).
Tinh sào cũng có sự gia tăng về kích thước, tinh nguyên bào bắt đầu phân cắt mạnh để tăng số lượng và hình thành các tinh bào
Giai đoạn III: Tuyến sinh dục đã lớn. Buồng sẹ có màu trắng, tuy nhiên vẫn chưa có tinh dịch chảy ra.
Buồng trứng đã phát triển to, đã trông thấy các hạt trứng và các mạch máu, nhưng chưa rời nhau, trứng tăng về thể tích, màng trứng dày lên, có 2 lớp bao bọc nhân tế bào, bắt đầu xuất hiện noãn hoàng (Hình 3.2B)
Giai đoạn IV: Nhìn hình dáng ngoài đã phân biệt đực cái khá rõ ràng, bụng cá cái khá to, bóp mạnh ở bụng trứng hoặc tinh dịch có thể chảy ra. Trứng đã rời, hệ thông mạch máu rất phát triển, tế bào trứng chứa đầy noãn hoàng, thể tích tế bào trứng đạt kích thước lơn nhất 850- 900µm, nhân tế bào hơi lệch. Nếu lấy trứng ra ngoài quan sát bằng mắt thường sẽ thấy trứng tròn, căng, rời và có màu trắng ngà hoặc màu vàng hơi xanh (Hình 3.2C).
Trong tuyến sinh dục của cá chim trắng thời kỳ này, tế bào trứng có đủ các giai đoạn từ II- IV. Điều này chứng tỏ cá chim trắng là loài cá đẻ nhiều lần trong năm.
Giai đoạn V: Buồng trứng phát triển đến độ to hết cỡ, vuốt nhẹ trứng hoặc tinh dịch có thể chảy ra dễ dàng, bụng mềm (Hình 3.2D).
Giai đoạn VI: Giai đoạn cá đã đẻ xong, trứng và tinh trùng hầu như không còn, tuyến sinh dục teo nhỏ lại, mạch máu teo lại. Nhìn chung cá chim trắng phát dục không đồng bộ, cá đực thường phát dục chậm hơn cá cái. Hệ số thành thục của cá thường 5- 12%. Hệ số thành thục của cá tái phát dục thường cao hơn nhiều so với cá chính vụ. Có thể cho rằng yếu tố chính là do nhiệt độ.
Tuổi thành thục: Kết quả kiểm tra tuổi thành thục sinh dục của cá chim trắng cho thấy, cả cá đực và cá cái đều thành thục ở 3 tuổi, tuy nhiên cá cái thường thành thục sinh dục sớm hơn cá đực trong điều kiện nuôi ở trong ao, hồ. Điều này chứng tỏ sự phát triển thành thục tuyến sinh dục của cá chim trắng cũng giống như sự phát triển thành thục tuyến sinh dục của các loài cá nước ngọt và nước mặn khác.
Mùa vụ sinh sản: Kết quả theo dõi sự phát triển tuyến sinh dục của cá chim trắng tại Hải Phòng cho thấy, mùa vụ sinh sản của cá chim trắng tập trung diễn ra từ tháng 4- 6 và tháng 8- 10.
Bảng 3.1. Sự phát triển tuyến sinh dục theo các tháng trong năm Tháng Giai đoạn phát triển
tinh sào
Giai đoạn phát triển buồng trứng Đường kính trứng (mm,TB ± SD) 1 II II 0,64 ± 0,11 2 III III 0,66 ± 0,10 3 III III 0,72 ± 0,10 4 IV IV 0,79 ± 0,13 5 IV IV 0,84 ± 0,12 6 IV IV 0,87 ± 0,21 7 IV IV 0,83 ± 0,22 8 IV IV 0,84 ± 0,22 9 IV IV 0,88 ± 0,10 10 IV IV 0,87 ± 0,13 11 II II 0,35 ± 0,10 12 II II 0,48 ± 0,16
Mùa vụ sinh sản của cá chim trắng có sự khác biệt lớn giữa các quốc gia khác nhau và phụ thuộc chủ yếu vào nhiệt độ. Mùa vụ sinh sản của cá chim trắng ở Nam Mỹ, Mexico, từ tháng 3-7, Trung Quốc từ tháng 4-8. Ở Việt Nam cá chim trắng được nhập vào nuôi cũng nhanh thích ứng với các điều kiện thời tiết, khí hậu, địa lý, do đó cá chim trắng ở khu vực phía Bắc thường cho sinh sản tập trung từ tháng 4- 6 và tháng 8-10, còn ở phía Nam cá chim trắng có thể cho sinh sản quanh năm. Kích thước trứng cá chim trắng có sự thay đổi rõ rệt tùy theo giai đoạn phát triển của buồng trứng. Kết quả cho thấy, giai đoạn II đường kính trứng nhỏ nhất 0,35mm. Đường kính trứng bắt đầu tăng dần khi đạt đến giai đoạn III tuy nhiên, kích thước của chúng lại tăng dần theo thời gian mặc dù chúng đều ở giai đoạn III (0,66- 0,72mm). Kích thước trứng to nhất đạt được ở giai đoạn IV từ 0,79- 0,88mm (Bảng 3.1).
Bảng 3.2. Tỷ lệ thành thục của cá từ tháng 1 đến 4 (n = 100)
Ngày kiểm tra Số cá cái thành thục Tỷ lệ (%)
10/2/2013 15 15
30/2/2013 15 15
20/3/2013 25 25
10/4/2013 25 25
Tổng số 92 92
Kết quả kiểm tra ngẫu nhiên 100 cá cái (20 ngày/lần) cho thấy tỷ lệ thành thục của tổng đàn đạt 92%.
Hình 3.3. Hệ số thành thục của cá chim trắng qua các tháng trong năm (n =100)
Hệ số thành thục của cá chim trắng nước ngọt có sự gia tăng mạnh mẽ theo thời gian đặc biệt là cá cái, bắt đầu từ tháng 1 tới tháng 12. Kết quả kiểm tra cho thấy, hệ số thành thục thấp nhất vào các tháng 1- 3, từ 0,2- 4,3% tương đương với buồng trứng ở giai đoạn II. Sau đó hệ số thành thục bắt đầu tăng mạnh từ tháng 4- 10, từ 8- 15% tương đương với buồng trứng giai đoạn III- IV. Hệ số thành thục cao nhất đạt được vào tháng 10 là 15%. Buồng trứng đạt giai đoạn IV, cá thành thục hoàn toàn đã sẵn sàng tham gia sinh sản.
Bảng 3.3. Hệ số thành thục của cá chim trắng theo các tháng trong năm. Thời gian ( tháng) Khối lượng toàn thân (g) Khối lượng buồng trứng (g) Hệ số thành thục (%) 1 3500 7,0 0,2 2 3532 7,7 0,22 3 3605 15,1 0,42
4 3748 299,0 8,0 5 3830 421,1 11,0 6 3964 475,5 12,0 7 4020 393,3 9,8 8 4125 420,0 10,2 9 4233 575,5 13,6 10 4358 653,0 15,0 11 4460 13,0 0,3 12 4514 4,5 0,1
Hệ số thành thục của cá chim trắng nước ngọt nuôi tại Hải Phòng đạt 15%, cao hơn so với Bắc Ninh (13,2%) nhưng thấp hơn so với Vĩnh Phúc (16,5%) (Đào viết Thuận, 2002). Có sự khác nhau về hệ số thành thục sinh dục có thể do sự khác biệt của nhiệt độ vùng nuôi và chế độ chăm sóc quản lý đặc biệt là chế độ dinh dưỡng. Từ kết quả này có thể nhận thấy rằng giai đoạn thích hợp để đưa cá bố mẹ vào nuôi vỗ chính vụ là từ tháng 12 năm trước tới tháng 3 năm sau, nuôi vỗ cho đẻ tái phát từ tháng 7 tới tháng 10 hàng năm. Ở giai đoạn này cá bắt đầu tích lũy dinh dưỡng chuyển hóa vào sản phẩm sinh dục.
Bảng 3.4. Sức sinh sản thực tế của cá chim trắng nước ngọt tại Hải Phòng(n= 100) Tháng KLTB cá cái (g) KLTB trứng (g) SLTB (trứng) SSS thực tế 12/4 3.834±156 390,3± 56,2 46.836± 763 12.216± 384 10/5 3.967±145 411,5± 73,4 49.380± 841 12.447± 343 20/5 4.023±187 418,6± 62,3 50.232± 1.021 12.486± 530 5/6 4.127±215 421,2± 58,1 50.544± 1.245 12.247± 491 8/9 4.237±193 423,7± 71,7 50.844± 683 12.000± 427 2/10 4.358±160 425,8± 89,1 51.096± 972 11.724± 439
Ghi chú: KL- Khối lượng, SL- Số lượng, SSS- Sức sinh sản thực tế (trứng/cá cái).
Sức sinh sản thực tế của cá chim trắng nước ngọt giao động từ 110.724 đến 120.486 trứng/kg cá cái (Hình 3.5). Sức sinh sản thực tế thu được ở Hải Phòng cao hơn ở Bắc Ninh, Phú Thọ theo tài liệu của Đào Viết Thuận (2002) từ 50.792 đến 110.964 trứng/kg cá cái. Nguyên nhân chính có thể do sự khác biệt về kích thước cá bố mẹ và điều kiện nuôi. Khối lượng cá trong nghiên cứu này (3,0 - 4,0kg/con) cao hơn so với nghiên cứu của Đào Viết Thuận (4,0 - 4,5kg/con). Trong khi đó cũng có nhiều nghiên cứu chỉ ra rằng sức sinh sản của cá còn phụ thuộc vào nhiều yếu tố như kích thước cá, độ tuổi, chế độ dinh dưỡng, điều kiện nuôi… (Nguyễn Khắc Minh, 2002).
3.2. Thử nghiệm nuôi vỗ cá chim trắng bằng thức ăn công nghiệp.
3.2.1. Một số yếu tố môi trường trong thời gian nuôi vỗ.
Các thông số môi trường bao gồm nhiệt độ (oC), oxy hòa tan (DO), pH đóng vai trò quan trọng trong quá trình sinh trưởng và phát triển tuyến sinh dục của cá. Kết quả các thông số môi trường nuôi vỗ từ tháng 12/2012 đến tháng 3/2013 được thể hiện qua (Bảng 3.5).
Bảng 3.5. Một số yếu tố môi trường trong thời gian nuôi vỗ Yếu tố
Tháng Nhiệt độ Ôxy hòa tan pH
12/2012 22,7 ± 1,0 5,4 7,0
1/2013 20,3 ± 0,8 5,6 6,7
2/2013 21,5 ± 1,0 5,8 6,7
3/2013 22,8 ± 0,5 5,7 6,9
Nhìn chung các thông số môi trường: Nhiệt độ (oC), oxy hòa tan (DO), pH tương đối ổn định và nằm trong giới hạn cho phép cho nuôi trồng thủy sản, được khống thế nằm trong khoảng thích hợp cho cá chim trắng sinh trưởng và phát triển tuyến sinh dục.
3.2.2. Tỷ lệ sống và tăng trưởng của cá chim trắng trong giai đoạn nuôi vỗ.
Tỷ lệ sống của cá chim trắng bố mẹ trong thời gian nuôi vỗ là rất cao, đạt > 95%. Điều này chứng tỏ quá trình chăm sóc, nuôi vỗ, xử lý môi trường ao nuôi là rất tốt. Trong thời gian đầu nuôi vỗ cá chưa quen thức ăn công nghiệp nên sức tăng trưởng về khối lượng của cá còn thấp, sau đó tăng nhanh được trình bày ở Bảng 3.6
3.2.3. Sinh trưởng khối lượng
Bảng 3.6. Ảnh hưởng của thức ăn lên tốc độ tăng trưởng tuyệt đối (AGR)
Thức ăn Tốc độ tăng trưởng tuyệt đối (AGR) (g/ngày)
30 ngày 60 ngày 90 ngày 120 ngày
CDC 0,75± 0,02b 2,11± 0,11b 3,22± 0,17b 3,55 ± 0,26b
CC 0,88± 0,07b 2,50± 0,13a 3,43± 0,05ab 3,92± 0,36b
CG 1,4± 0,05a 2,65± 0,02a 3,71± 0,06a 4,92± 0,08a
Thời gian đầu nuôi vỗ cá bố mẹ tăng trưởng chậm về khối lượng, sau đó tăng nhanh và dần ổn định. Trong 30 ngày đầu nuôi vỗ với 3 loại thức ăn công nghiệp khác nhau cho thấy thức ăn CDC có tốc độ tăng trưởng chậm nhất 0,75± 0,02g/ngày, tiếp đến là thức ăn CC là 0,88± 0,07g/ngày, cuối cùng thức ăn CG 1,4± 0,05g/ngày. Sau 120 ngày nuôi vỗ tốc độ tăng trưởng của cá khi sử dụng thức ăn CG đạt 4,92± 0,08g/ngày cao nhất so với hai loại thức ăn còn lại là CC đạt 3,92± 0,36g/ngày, CDC đạt 3,55 ± 0,26g/ngày.
Hình 3.4. Tốc độ tăng trưởng khối lượng đặc trưng SGRw
Có sự khác biệt rõ rệt về tăng trưởng khối lượng của cá khi sử dụng thức ăn CG so với cá sử dụng thức ăn CC và CDC, cá sử dụng thức ăn CG có tăng trưởng cao so với cá sử dụng thức ăn CC, CDC. Không thấy có sự khác biệt về tăng trưởng khối lượng của cá khi sử dụng thức ăn CC và CDC.
3.3. Thử nghiệm (KDT) kích thích sinh sản cá chim trắng nước ngọt.
3.3.1. Kết quả ảnh hưởng kích dục tố và liều lượng tiêm đến sinh sản cá chimtrắng.trắng.trắng. trắng.
Biến động các yếu tố môi trường trong các đợt thí nghiệm:
Các yếu tố môi trường có vai trò rất quan trọng đối với sinh sản và phát triển của cá chim trắng. Trong quá trình tiến hành thí nghiệm, các công thức được bố trí