2.5.1. đặc tắnh sinh học
Trực khuẩn Salmonella thuộc bộ Eubacteriales, họ Enterobacteriaceae. Giống Salmonella gồm 2 loài: S. enterica và S. bongori ựã ựược phân chia thành trên 3000 serotyp theo bảng phân loại Kauffmann-White trên cơ sở cấu trúc của kháng nguyên thân O, kháng nguyên lông H và ựôi khi các kháng nguyên vỏ (kháng nguyên K). Gần ựây, loài S. enterica ựã ựược phân thành 6 phân loài, ựó là: S. enterica subsp. enterica, S. enterica subsp. salamae, S. enterica subsp. arizonae, S. enterica subsp. diarizinae, S. enterica subsp. houtenae, S. enterica
subsp. indica. Trong ựó phân loài S. enterica subsp. enterica gồm phần lớn các
chủng Salmonella là những tác nhân gây bệnh cho người và ựộng vật (Quinn, 2004).
2.5.1.1. Hình thái
Theo Bergey,s Manual (1957), vi khuẩn Salmonella là những trực khuẩn ngắn, hai ựầu tròn, có kắch thước 0,4-0,6 x 1,0-3,0 ộm, bắt màu Gram âm, không hình thành nha bào và giáp mô. đa số loài Salmonella có lông (flagella) từ 7-12 chiếc xung quanh thân (trừ S. gallinarum-pullorum).
Lông giúp cho vi khuẩn có khả năng di ựộng. Lông có hình tròn, dài, xuất phát từ màng cytoplasma. Do có cấu trúc từ các sợi protein hình xoắn nên có thể co giãn và di ựộng nên lông của chúng rất khó nhuộm. Nếu nhuộm bằng phương pháp Haschem (1972) thì có thể nhìn thấy chúng dưới kắnh hiển vi ựiện tử (Lê Văn Tạo, 1993). Lông có tắnh kháng nguyên và do các gen mã hóa tổng hợp protein riêng quy ựịnh.
Ngoài ra, trên bề mặt màng ngoài của vi khuẩn Salmonella ựều có các cấu trúc sợi nhỏ hơn, còn gọi là Fimbriae hay Pili. Theo Jones và cs (1981). Fimbriae tạo cho vi khuẩn khả năng bám dắnh (adhesion) lên các tế bào biểu mô ruột và xâm nhập vào lớp niêm mạc.
2.5.1.2 Tắnh chất nuôi cấy
Salmonella là vi khuẩn vừa hiếu khắ, vừa kỵ khắ không bắt buộc, dễ nuôi
cấy. Nhiệt ựộ nuôi cấy thắch hợp là 37oC, nhưng có thể phát triển ựược ở nhiệt ựộ từ 6- 42oC. Nuôi cấy ở 43oC có thể loại trừ ựược tạp khuẩn mà Salmonella
vẫn phát triển ựược (Timoney và cs, 1988). pH thắch hợp cho vi khuẩn phát triển là 7,6 tuy nhiên, vi khuẩn vẫn phát triển ựược ở pH từ 6-9.
Khi nuôi cấy vi khuẩn trong môi trường BPW (Buffered Pepton Water) và môi trường RV (Rappaport Vassiliadi), sau vài giờ nuôi cấy thấy môi trường vẩn ựục nhẹ, sau 18 ựến 24 giờ thấy canh trùng ựục ựều, trên mặt môi trường có màng mỏng, ựáy ống nghiệm có cặn.
Hiện nay có rất nhiều loại môi trường chọn lọc ựược các nhà vi sinh vật thú y sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu và phân lập vi khuẩn Salmonella như môi trường thạch DHL (Deoxycholate Hydrogen sulfide Lactose agar). Sau 24 giờ nuôi cấy vi khuẩn phát triển thành khuẩn lạc tròn, lồi, bóng láng (dạng S), có màu vàng nhạt. Các chủng sinh H2S thì giữa khuẩn lạc có màu ựen.
Môi trường thạch MacConkey: Vi khuẩn phát triển thành những khuẩn lạc tròn lồi, trong không màu, nhẵn bóng.
Trên môi trường thạch CHROMTM Salmonella, sau 24 giờ nuôi cấy, vi khuẩn hình thành khuẩn lạc trơn, tròn, bóng láng (dạng S) và có màu tắm hồng.
Trong môi trường thạch TSI (Triple Sugar Iron), vi khuẩn Salmonella do sản sinh alkaline nên phần thạch nghiêng có màu ựỏ (pH=7,3), ựáy ống nghiệm màu vàng (pH=6,8) do vi khuẩn chỉ lên men ựường Glucose. Phần giữa ống nghiệm có màu ựen do vi khuẩn sản sinh ra khắ H2S. Nếu ựể lâu (quá 24 giờ), màu ựen môi trường thường làm át phản ứng tạo axit ở phần ựáy ống nghiệm (không nhìn thấy màu vàng) (Quinn và cs, 2004).
Trong môi trường LIM (Lysine Indole Motility), vi khuẩn không làm chuyển màu môi trường, môi trường có màu tắm nhạt.
màu môi trường.
Môi trường thạch thường: Sau 24 giờ nuôi cấy, hình thành những khuẩn lạc lớn, hình thái rất khác nhau, trung bình ựường kắnh từ 2- 3mm. Khuẩn lạc có thể tròn, mặt hơi lồi, rìa bề mặt và rìa hình khắa răng cưa. Một số serotyp ựôi khi hình thành các khuẩn lạc dạng nhầy như: S.paratyphi B.
Trên môi trường thạch Endo: Vi khuẩn Salmonella hình thành khuẩn lạc màu trắng hồng, tròn trơn, nhẵn bóng trông như những hạt sương long lanh trên màu hồng nhạt của môi trường.
Trên môi trường thạch Brilliant green: Salmonella hình thành khuẩn lạc màu trắng hồng, sáng, bao bọc xung quanh bởi môi trường màu ựỏ sáng.
Trên môi trường thạch XLD: khuẩn lạc màu ựen bóng, hơi lồi.
2.5.1.3. đặc tắnh sinh hoá
Theo Quinn và cs (2004), giống vi khuẩn Salmonella ựược chia thành 7 phân nhóm, mỗi phân nhóm có khả năng lên men một số loại ựường nhất ựịnh và không ựổi. Phần lớn phân loài S. enterica subsp. enterica gây bệnh cho ựộng vật máu nóng. Chúng lên men và sinh hơi: Glucoza, Mannit, Mantoza, Galactoza, Dulcitol, Arabonoza, Sorbitol. Cũng ở nhóm này, hầu như các chủng vi khuẩn Salmonella ựều không lên men Lactoza và Saccaroza.
đa số các vi khuẩn thuộc giống Salmonella không làm tan chảy gelatin, không phân giải urê, không sản sinh Indol. Phản ứng MR, catalaza dương tắnh (trừ S. choleraesuis, S. gallinarum-pullorum có MR âm tắnh). Phản ứng Oxidaza âm tắnh. Phản ứng sinh H2S dương tắnh (trừ S. paratyphi A, S. typhisuis, S.
choleraesuis) (Ewing và Edwards, 1970).
2.5.1.4. Sức ựề kháng của vi khuẩn Salmonella
Vi khuẩn Salmonella mẫn cảm với nhiệt ựộ và các chất sát trùng mạnh. Ở nhiệt ựộ 50oC trong 1 giờ, 70oC trong 20 phút, 100oC trong 15 phút hoặc ánh sáng mặt trời chiếu thẳng trong 5 giờ có thể diệt ựược vi khuẩn (Laval, 2000).
Phenol 5%, Formon 1/500 diệt vi khuẩn trong 15- 20 phút.
Theo Laval (2000), vi khuẩn Salmonella sống ựược lâu trong ựiều kiện lạnh, chúng có thể sống trong bột thịt 8 tháng, nhưng ở ựiều kiện môi trường có ựộ pH ≤ 5 chúng chỉ sống ựược trong thời gian ngắn.
Vi khuẩn Salmonella tồn tại trong chất ựộn chuồng tới trên 30 tuần, có thể sống ở trong ựất với ựộ sâu 0,5m trong thời gian 2 tháng. Ở sàn gỗ, tường gỗ trong ựiều kiện ắt ánh sáng là 87 ngày, máng gỗ 108 ngày (đào Trọng đạt và cs, 1995). Trong nước tù ựọng, ựồng cỏ ẩm thấp S. typhimurium có thể tồn tại trên 7 tháng. Trong xác súc vật chết, Salmonella có thể sống trên 100 ngày, trong thịt ướp muối từ 6-8 tháng (Nguyễn Vĩnh Phước và cs, 1970).