- Vi khuẩn Salmonella:
2.3.2Các loại môi trường, hóa chất * Môi trường:
Chương 2 NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU đỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3.2Các loại môi trường, hóa chất * Môi trường:
* Môi trường:
- Môi trường sử dụng trong nghiên cứu là những loại môi trường (của hãng: Oxoid, Merck) ở dạng tổng hợp, khi dùng pha theo công thức có sẵn bao gồm:
- Môi trường BPW, RVS, Muller kuffman, Môi trường thạch XLT4 và thạch Rambach dùng ựể nuôi cấy, phân lập vi khuẩn Salmonella
- Môi trường TSI (Kligler) dùng ựể kiểm tra tắnh chất sinh hóa của vi khuẩn Salmonella
* Kiểm tra tắnh chất sinh hoá
Từ môi trường XLT4 và môi trường Rambach chọn ra khuẩn lạc ựiển hình kiểm tra ựặc tắnh sinh hoá trên môi trường Kligler, ria cấy trên bề mặt thạch nghiêng và cấy chắch sâu ở phần thạch ựứng xuống tận ựáy ống nghiệm, ựể tủ ấm 37oC/18-24h, sau ựó ựọc kết quả:
+ Nếu phần thạch ựứng có màu vàng: Glucosa dương tắnh. + Nếu có bọt khắ: Sinh hơi dương tắnh.
+ Nếu dọc ựường cấy trắch sâu có màu ựen: H2S dương tắnh.
Những mẫu có phản ứng ựặc trưng của vi khuẩn Salmonella trên môi trường Kligler (Lên men ựường glucose, không lên men ựường lactose, sinh hơi, H2S dương tắnh) ựược cấy kiểm tra vào: Urease, LDC (nuôi cấy yếm khắ) và Simmon,s citrate, ựể tủ ấm 37oC/18-24h ựọc kết quả:
+ LDC: Dung dịch từ màu tắm chuyển sang màu vàng, lysine âm tắnh. + Simoncitrate: Phần thạch nghiêng chuyển từ màu xanh lá cây sang màu xanh nước biển.
+ Ure: Dung dịch có màu ựỏ nhạt chuyển sang mầu hồng rất ựậm, Ure dương tắnh.
Tiến hành ựịnh type theo bảng cấu trúc kháng nguyên của Kauffmann-White.
- Môi trường BHI (Brain Heart Infusion) dùng ựể ựịnh typ và giữ giống vi khuẩn
* Hóa chất:
- Các loại ựường: Glucoza, Mantol, Lactoza, Sorbitol, Dextroza, Sucroza, Galactoza, Manitol, Arabinoza
- Giấy tẩm kháng sinh (do hãng Oxoid của Anh sản xuất)