3.5.3.1.Kiểm tra hình tháị
Từ giống phân lập giữ trên thạch máu cấy chuyển ra nước thịt hoặc thạch nghiêng làm tiêu bản nhuộm Gram ựể kiểm trạ Vi khuẩn Ẹ coli sẽ bắt màu ựỏ (Gram âm).
3.5.3.2. Kiểm tra khả năng di ựộng.
- Kiểm tra khả năng di ựộng bằng phương pháp cấy chắch sâu vi khuẩn vào thạch mềm.
- Phương pháp làm: dùng que cấy ựầu nhọn vô trùng lấy vi khuẩn cấy chắch sâu vào giữa ống thạch mềm ựến gần ựáy thì rút rạ để ống nuôi cấy trong tủ ấm 37oC trong 24 giờ.
- Kết quả: Nếu vi khuẩn có khả năng di ựộng thì dọc theo ựường cấy vi khuẩn mọc lan rạ
3.5.3.3. Kiểm tra tắnh chất mọc.
- Nuôi cấy vi khuẩn trên các môi trường: nước thịt thạch thường thạch máu các môi trường ựặc biệt như: Istrati, MacConkey, thạch Brilliant green, nước thịt gan yếm khắ, thạch máu yếm khắ. Quan sát tắnh chất mọc hình thái kắch thước và mầu sắc khuẩn lạc.
3.5.3.4. Giám ựịnh các ựặc tắnh sinh hóạ - Khả năng lên men các loại ựường:
Trong môi trường dinh dưỡng Nutrient Broth bổ sung thêm 1,5 ml xanh Bromothymol 1,5% trong cồn và các loại dung dịch ựường cần kiểm tra cấy vi khuẩn vào bồi dưỡng trong tủ ấm 37oC trong 24 giờ ựọc kết quả. Phản ứng dương tắnh khi môi trường chuyển màu hồng, và ngược lại nếu âm tắnh môi
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 40 trường vẫn giữ nguyên màu sắc ban ựầụ
- Phản ứng sinh Indol:
Nhỏ thuốc thử Kowacs vào môi trường Peptol ựã nuôi cấy vi khuẩn. Phản ứng dương tắnh khi có một vòng tròn ựỏ xuất hiện trên mặt môi trường. Phản ứng âm tắnh khi không có vòng ựỏ trên bề mặt môi trường.
- Phản ứng Oxidaza:
+ được làm trên giấy có tẩm dung dịch 1% Tetramethuyl Ờ P.pheny diamine hydrochloridẹ
+ Phương pháp làm: Dùng que cấy lấy vi khuẩn từ môi trường thạch chà sát lên mặt giấy ựã thấm thuốc thử. Nếu chỗ chà sát sau 30 giây xuất hiện màu tắm ựen là phản ứng dương tắnh. Nếu không xuất hiện màu tắm ựen hoặc không ựổi màu là phản ứng âm tắnh.
- Phản ứng catalaza:
Phương pháp làm: Lấy một phiến kắnh sạch dùng que cấy lấy khuẩn lạc từ môi trường thạch ựặt lên phiến kắnh sạch nhỏ 1 giọt dung dịch H2O2 3% (hydrogen peroxidaza). Nếu có hiện tượng sủi bọt là phản ứng dương tắnh nếu không thấy sủi bọt là phản ứng âm tắnh.
- Phản ứng thử V.P. (Voges Proskauer):
Cấy vi khuẩn vào môi trường Peptol glucoza 37oC trong 2-4 ngày sau ựó nhỏ thuốc thử (NaOH 40g/100ml nước cất hoặc dung dịch pootat) sau 5 phút nếu có màu ựỏ hồng là dương tắnh có thể phản ứng sau 4-5 giờ mới xuất hiện.
- Phản ứng thử M.R (Methuyl Rouge):
Cấy vi khuẩn vào môi trường Peptol glucoza 37oC trong vòng 2-4 ngày sau ựó nhỏ 2-3 giọt dung dịch ựỏ methyl 0.04% trong cồn 95o vào sau 5 phút nếu có màu ựỏ là phản ứng dương tắnh màu vàng là âm tắnh giữa màu ựỏ và màu vàng là phản ứng nghi ngờ.