Nghiờn cứu mụ tả từng ca cú can thiệp
2.2.2. Cỏc chỉ số nghiờn cứu 2.2.2.1. Lõm sàng
- Thu thập cỏc thụng tin về bệnh nhõn, bao gồm: + Tuổi + Giới + Tiền sử bệnh (Hoặc hỏi cha mẹ bệnh nhõn để biết tiền sử mắc bệnh) + Tuổi khởi phỏt bệnh + Tuổi bệnh + Số lần tỏi phỏt + Cỏc yếu tố liờn quan - Khỏm lõm sàng: * Cỏc triệu chứng cơ năng + Đau vựng cổ, quay cổ hạn chế: cú hay khụng + Sưng vựng cổ cao: cú hay khụng + Sưng đau vựng tuyến nước bọt + Sưng đau vựng sau tai
+ Chảy tai: thời gian, hoàn cảnh xuất hiện, tớnh chất mủ, cỏc triệu chứng kốm theo: nghe kộm, ự tai
* Triệu chứng toàn thõn: đú là cỏc ảnh hưởng của nang viờm đến toàn trạng của bệnh nhõn: hội chứng nhiễm trựng, nổi hạch.
Mức độ:
Vừa: ảnh hưởng ớt đến toàn trạng
Nặng: Cú cỏc ảnh huởng toàn thõn nặng nề như nhiễm trựng nhiễm độc.
Triệu chứng thực thể:
♦ Với nang viờm chưa vỡ ra ngoài
- Vị trớ nang viờm: thường chỉ gặp dấu hiệu này ở giai đoạn viờm nhiễm o Nang viờm sau tai
o Nang viờm vựng tuyến mang tai o Nang viờm vựng cổ
♦Phõn loại đường rũ:
- Rũ khe mang I týp 1 - Rũ khe mang I týp 2
♦ Với lỗ rũ ra ngoài: hầu hết cỏc bệnh nhõn của chỳng tụi khi đến viện trước phẫu thuật thỡ cỏc triệu chứng của giai đoạn viờm nhiễm khụng cũn, bệnh nhõn thường đến với một lỗ rũ ngoài da hoặc trong ống tai ngoàị Nờn trong nghiờn cứu này chỳng tụi đỏnh giỏ chủ yếu cỏc triệu chứng liờn quan đến lỗ rũ:
◘ Vị trớ lỗ rũ: chỳng tụi chia thành:
o Lỗ rũ sau tai: lỗ rũ nằm ngay sau dỏi tai o Mỏm chũm: lỗ rũ nằm ở ngay mỏm chũm o Lỗ rũ vựng tuyến mang tai
o Lỗ rũ vựng cổ: trong vựng tam giỏc Poncet o Rũ ống tai: lỗ rũ phớa trong
◘ Tớnh chất lỗ rũ:
o Rũ nguyờn phỏt: lỗ rũ cú từ lỳc mới sinh
o Rũ thứ phỏt: do nang viờm vỡ mủ hoặc do chớch rạch dẫn lưu
o Rũ hoàn toàn: lỗ rũ bờn ngoài da và trong ống tai là thụng với nhau
o Rũ khụng hoàn toàn: chỉ cú một lỗ rũ bờn ngoài hoặc bờn trong
ống tai
◘ Cỏc chỉ số phỏt hiện trong quỏ trỡnh phẫu thuật:
- Hỡnh thỏi đường rũ (theo phõn loại của Olsen và cộng sự [14] )
+ dạng nang (cysts): là những tỳi chứa dịch khụng cú lỗ rũ ra bờn ngoài cũng như bờn trong.
+ dạng lỗ rũ (sinus tracts): là dạng ống rũ cú một lỗ rũ hoặc ra ngoài da hoặc vào bờn trong ống tai ngoàị
+ dạng ống rũ (fistulous tracts): dạng ống rũ nối giữa hai lỗ rũ, một ở
ngoài da, một trong ống tai ngoàị
- Đường rũ cú phõn nhỏnh hay khụng, (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Liờn quan giữa đường rũ và dõy mặt: đường rũ nằm nụng hơn dõy VII, sõu hơn thõn chớnh hoặc chạy giữa cỏc nhỏnh của dõy VIỊ
Hỡnh 2.1. Liờn quan giải phẫu đường rũ và dõy VII [28]
- Tỡnh trạng nhiễm trựng của đường rũ: o Cú nhiễm trựng
o Khụng cú nhiễm trựng
2.2.2.2 Cận lõm sàng
Núi chung cỏc phương tiện thăm dũ cận lõm sàng của rũ khe mang I rất nghốo nàn.
- X quang: Việc bơm thuốc cản quang để chụp đường rũ trong rũ khe mang I thường khụng đem lại kết quả mong muốn do hỡnh ảnh đường rũ thường bị
che lấp bởi cỏc cấu trỳc xương xung quanh, nờn chỳng tụi khụng đỏnh giỏ tiờn chớ này trong nghiờn cứụ
- Nghiờn cứu mụ bệnh học của đường rũ
Mục đớch nghiờn cứu mụ bệnh học nhằm xỏc định loại biểu mụ đường rũ, đặc điểm mụ bệnh học đường rũ nhằm định typ đường rũ. Quy trỡnh nghiờn cứu mụ bệnh học được tiến hành như sau:
- Bệnh phẩm sinh thiết trước hoặc sau mổ được cố định bằng dung dịch formol trung tớnh 10%.
- Nhuộm mụ bằng phương phỏp nhuộm Hematoxxylin- Eosin (HE) và PAS (Periodic Acid Schiff với 8 trường hợp cú biểu mụ tuyến), ba màu Masson (5 trường hợp tăng sinh xơ và sợi keo) tại khoa GPB Bệnh viện TMH TƯ và Bộ mụn Giải phẫu bệnh- Đại học Y Hà Nội theo cỏc bước sau:
a, Quy trỡnh nhuộm HE:
ạ Vựi paraffin b. Đỳc bloc c. Cắt mảnh
d. Nhuộm:
Tẩy paraffin trong 3 bể toluen (hoặc xylen, xylon), mỗi bể 5 phỳt. Qua 4 bể cồn: 100° - 95° - 80° - 70°, mỗi bể nhỳng 15 lần.
Rửa nước cất: Nhỳng 15 lần.
Nhuộm nhõn bằng Hematoxylin Harris: 3-5 phỳt hoặc lõu hơn. Rửa nước chảy: 5-10 phỳt.
Kiểm tra màu của nhõn qua kớnh hiển vi, nếu đậm, tẩy nhẹ bằng cồn-axit. Rửa nước chảy:1phỳt.
Nhuộm Eosin1% : 1 -2 phỳt. Rửa nước chảy: 1 phỳt.
Biệt hoỏ trong 2 bể cồn 95° - 100°, mỗi bể 15 lần nhỳng. Qua 3 bể Toluen, bể I và II nhỳng 15 lần, bể III: 5-10 phỳt. Gắn lỏ kớnh
Kết quả: Nhõn tế bào xanh đến xanh đen, bào tương tế bào hồng đến đỏ, hồng cầu hồng đậm, sợi tạo keo hồng nhạt.
b, Nghiờn cứu hoỏ mụ miễn dịch
+ Cả 21 trường hợp đều được nhuộm HMMD với cỏc dấu ấn CK (dấu
ấn biểu mụ), SMA, (Actin cơ trơn- smooth muscle actin), Desmin, Vimentin nhằm xỏc định cỏc thành phần trung mụ.
Tất cả cỏc trường hợp này được nhuộm tại Trung tõm Giải phẫu bệnh - Tế bào bệnh học Bạch mai và Khoa Giải phẫu bệnh - Bệnh viện K Hà nội theo phương phỏp ABC. Quy trỡnh nhuộm húa mụ miễn dịch như sau:
* Cỏc bước chuẩn bị trước khi nhuộm
- Chuẩn bị tiờu bản
+ Cỏc lam kớnh dựng để nhuộm HMMD cần được sử lý trước với dung dịch Silane (3-aminopropyltriethoxy- silane) nhằm làm cho cỏc lỏt cắt gắn chặt vào lam kớnh, khụng bị bong trong quỏ trỡnh nhuộm.
+ Cỏc lỏt cắt cắt mỏng 3-4 micromet, để trong tủ ấm 37độ Cqua đờm. + Pha dung dịch đệm: Đệm TBS (Tris Buffer Saline), pH 7,2. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Dung dịch A: Dung dịch Tris-HCl đậm đặc: Pha loóng 60,55g Tris trong 500ml nước cất, thờm 35ml HCl đậm đặc, lắc đều, chỉnh pH bằng HCl 1M hoặc NaOH 1M, bảo quản ở 4 độ C.
Dung dịch B: Hoà tan 90gr NaCl vào 1000ml nước cất, bảo quản ở 4 độ C. Dung dịch TBS sử dụng: Trộn 100ml dung dịch A với 100ml dung dịch B thờm nước cất cho đủ 1000ml, điều chỉnh lại độ pH và bảo quản ở 4 độ C.
Kỹ thuật bộc lộ khỏng nguyờn
KN được bộc lộ bằng lũ vi súng.
- Khử hoạt động men peroxydase nội sinh: Tiờu bản đó tẩy nến được đặt vào dung dịch H202 trong 5 phỳt, sau đú rửa nước cất trong 2 phỳt. Tiờu bản
trờn tiờu bản.
- Pha loóng khỏng thể: Pha loóng KT theo nồng độ thớch hợp. Dung dịch pha loóng là dung dịch PBS trộn với 0.2% bovine serum albumin.
* Cỏc bước nhuộm
Sấy khụ tiờu bản cú mảnh cắt ở tủ ấm 37độ C trong 12 giờ.
Tẩy paraffin trong xylen, chuyển vào cỏc dung dịch cồn cú nồng độ
giảm dần rồi rửa trong nước chảỵ
Khử Peroxydaza nội sinh bằng dung dịch 3% H 0 trong 5 phỳt. Rửa tiờu bản bằng nước cất: 5 phỳt.
Bộc lộ khỏng nguyờn trong nồi cao ỏp hoặc lũ vi súng. Rửa nước cất trong 5 phỳt.
Rửa tiờu bản bằng dung dịch TBS qua 2 bể, mỗi bể 3 phỳt.
Ủ với khỏng thể thứ nhất trong 60 phỳt.
Rửa tiờu bản bằng dung dịch TBS qua 2 bể, mỗi bể 3 phỳt.
Ủ với khỏng thể thứ hai cú gắn với biotin trong 30 phỳt. Rửa tiờu bản bằng dung dịch TBS qua 2 bể, mỗi bể 3 phỳt.
Ủ với phức hợp ABC trong 30 phỳt.
Rửa tiờu bản bằng dung dịch TBS qua 2 bể, mỗi bể 3 phỳt. Phủ dung dịch tạo màu DAB (Diamino Benzidine trong 10 phỳt. Rửa tiờu bản bằng dung dịch TBS qua 2 bể, mỗi bể 3 phỳt. Nhuộm nhõn bằng Hematoxylin trong 1 phỳt.
Rửa nước chảỵ Khử nước.
Gắn lamen bằng Resin
Kết quả nhuộm HMMD được đỏnh giỏ theo 2 mức độ:
- Âm tớnh: tế bào biểu mụ khụng cú màu nõu hoặc ớt hơn 10% tế bào biểu mụ cú màu nõụ
- Dương tớnh: khi cú nhiều hơn 10% tế bào biểu mụ bắt màụ
- Kết quả xột nghiệm mụ bệnh học do cỏc Thầy Bộ mụn GPB Trường ĐHY Hà Nội kiểm định.
2.2.2.3 Phương phỏp điều trị phẫu thuật và đặc điểm liờn quan trong phẫu thuật
- Phương phỏp phẫu thuật:
Phẫu tớch lấy nang và ống rũ đơn thuần, khụng bộc lộ dõy VII Bộc lộ dõy VII,
Cắt thựy nụng tuyến mang tai kốm ống rũ
2.2.3. Phương tiện nghiờn cứu (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Mỏy nội soi Tai Mũi Họng Karl - Storz của Đức, nguồn sỏng và ống dẫn ỏnh sỏng lạnh Halogen. Dõy dẫn ỏnh sỏng được cấu tạo bằng những sợi thuỷ tinh đặc biệt cú khả năng dẫn truyền ỏnh sỏng tốt và cú thể uốn cong được.
- Ống nội soi cứng thẳng 00, thụng thường sử dụng ống nội soi đường kớnh 4mm, dựng trong phỏt hiện và đỏnh giỏ lỗ rũ ống tai ngoài
- Mỏy ảnh kĩ thuật số.