Sau khi lựa chọn ựược tỷ lệ urê/hỗn hợp axắt béo và tỷ lệ cồn/hỗn hợp axắt béo thắch hợp, chúng tôi tiếp tục nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt ựộ ựến hiệu suất tách các axắt béo no và axắt béo không no một nối ựôi ra khỏi hỗn hợp axắt béo omega-3 và omega-6 vì nhiệt ựộ ảnh hưởng lớn ựến quá trình tạo phức kết tinh giữa urê và các axắt béo no, axắt béo không no một nối ựôị Nếu nhiệt ựộ cao hoặc thấp quá làm cho việc hình thành mạng tinh thể gắn các axắt béo no, axắt béo không no một nối ựôi sẽ kém, dẫn tới hiệu suất tạo phức thấp.
Các thắ nghiệm ựược thực hiện ở các nhiệt ựộ khác nhau: 0; 5; 100C và 150C. Mỗi thắ nghiệm ựược lặp lại 03 lần trong cùng ựiều kiện công nghệ. Kết quả ựược trình bày ở bảng 4.18
Bảng 4.18. Ảnh hưởng của nhiệt ựộ ựến hiệu suất tạo phức
TT Nhiệt ựộ (0C) Hiệu suất tạo phức (%)
1 0 73,0b
2 5 73,2b
3 10 74,6a
4 15 71,9c
Chú thắch: a, b, c là sự khác nhau về ảnh hưởng của nhiệt ựộ ựến hiệu suất tạo phức
Qua kết quả trong bảng 4.18, chúng tôi lựa chọn nhiệt ựộ thắch hợp nhất cho quá trình tạo phức là 100C. Ở nhiệt ựộ này, phản ứng tạo phức xảy ra rất tốt nên việc tách các axắt béo no, axắt béo không no một nối ựôi ra khỏi hỗn hợp axắt béo omega-3 và omega-6 ựược triệt ựể hơn. Hiệu suất tạo phức ựạt 74,6%.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 67 Từ các kết quả nghiên cứu ở trên, chúng tôi ựưa ra quy trình công nghệ làm giàu hỗn hợp axắt béo omega-3 và omega-6 bằng phương pháp tạo phức với urê ựược trình bày trong sơ ựồ 4.3.
Sơ ựồ 4.3. Quy trình công nghệ làm giàu hỗn hợp axắt béo omega-3 và omega-6
Hỗn hợp axắt béo
Khuấy - Tỷ lệ urê/ hỗn hợp axắt béo: 2/1
- Tỷ lệ cồn/ hỗn hợp axắt béo: 9/1 Gia nhiệt ở 800C trong 15 phút Tạo phức kết tinh ở 100C trong 30 phút Ly tâm Phức kết tinh Hỗn hợp các axắt béo omega-3 và omega-6 trong cồn
đuổi dung môi Cồn Rửa 3 lần Nước nóng Tách nước Na2SO4 khan Lọc Na 2SO4 Hỗn hợp axắt béo omega-3 và omega-6
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 68
Mô tả quy trình công nghệ làm giàu hỗn hợp axắt béo omega-3 và omega-6 bằng phương pháp tạo phức với urê : Hỗn hợp axắt béo thu ựược sau quá trình thủy phân dầu hạt cải ựược trộn với urê theo tỷ lệ urê/hỗn hợp axắt béo : 2/1, sau ựó cho cồn vào theo tỷ lệ cồn/hỗn hợp axắt béo : 9/1. Tiến hành khuấy ựồng thời gia nhiệt 800C trong thời gian 15 phút ựể hỗn hợp axắt béo và urê tan hoàn toàn trong cồn. Sau ựó, ựể yên ở nhiệt ựộ khoảng 100C trong thời gian 30 phút nhằm tạo phức kết tinh giữa urê và các axắt béo no, axắt béo không no một nối ựôị Kết thúc quá trình tạo phức kết tinh, hỗn hợp ựược li tâm ựể loại bỏ phức kết tinh (bao gồm urê và các axắt béo no, axắt béo không no một nối ựôi). Hỗn hợp thu ựược là hỗn hợp gồm chủ yếu là các axắt béo không no ựa nối ựôi (omega-3 và omega-6), tiếp ựó hỗn hợp ựược cô chân không ựể thu hồi cồn và thu nhận hỗn hợp omega-3 và omega-6. Rửa hỗn hợp omega-3 và omega-6 bằng nước nóng 03 lần ựể loại bỏ hoàn toàn dư lượng urê. Sau ựó, hỗn hợp omega-3 và omega-6 ựược loại nước bằng Na2SO4 khan, lọc tách Na2SO4 thu ựược sản phẩm hỗn hợp omega-3 và omega-6 có ựộ tinh khiết cao
Từ toàn bộ các kết quả nghiên cứu ựược ở trên, chúng tôi ựưa ra quy trình công nghệ chiết tách hỗn hợp axắt béo không thay thế omega-3 và omega-6 từ dầu hạt cải, ựược trình bày trong sơ ựồ 4.4.
Mô tả quy trình công nghệ chiết tách hỗn hợp axắt béo không thay thế omega-3 và omega-6 từ dầu hạt cải:
Dầu hạt cải ựược cho vào dung dịch NaOH 7N trong cồn khoảng 80% (tỷ lệ dầu hạt cải/dung dịch NaOH theo thể tắch 1/2) ựể tiến hành xà phòng hóa ở nhiệt ựộ 800C, trong thời gian 90 phút. Sau khi kết thúc quá trình xà phòng hóa, thêm dung dịch muối NaCl 3% vào hỗn hợp ựã ựược xà phòng hoá (tỷ lệ dung dịch NaCl/hỗn hợp ựã ựược xà phòng hóa theo thể tắch 1/1). Do NaCl là chất ựiện li nên phần xà phòng hóa dễ dàng tách ra khỏi các chất không xà phòng hóa bằng li tâm. Tiếp sau, phần xà phòng ựược axắt hoá bằng dung dịch H2SO4 3N ựến pH = 1 và hỗn hợp ựược trắch ly bằng n- hexan. Làm khô hỗn hợp bằng muối Na2SO4 khan. Lọc tách muối Na2SO4, sau ựó cô quay chân không ựể ựuổi n-hexan và thu nhận hỗn hợp axắt.
Hỗn hợp axắt béo thu ựược sau quá trình thủy phân dầu hạt cải ựược trộn với urê theo tỷ lệ urê/hỗn hợp axắt béo : 2/1, sau ựó cho cồn vào theo tỷ lệ cồn/hỗn hợp
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 69 axắt béo : 9/1. Tiến hành khuấy ựồng thời gia nhiệt 800C trong thời gian 15 phút ựể hỗn hợp axắt béo và urê tan hoàn toàn trong cồn. Sau ựó, ựể yên ở nhiệt ựộ khoảng 100C trong thời gian 30 phút nhằm tạo phức kết tinh giữa urê và các axắt béo no, axắt béo không no một nối ựôị Kết thúc quá trình tạo phức kết tinh, hỗn hợp ựược li tâm ựể loại bỏ phức kết tinh (bao gồm urê và các axắt béo no, axắt béo không no một nối ựôi). Hỗn hợp thu ựược là hỗn hợp gồm chủ yếu là các axắt béo không no ựa nối ựôi (omega-3 và omega-6), tiếp ựó hỗn hợp ựược cô chân không ựể thu hồi cồn và thu nhận hỗn hợp omega-3 và omega-6. Rửa hỗn hợp omega-3 và omega-6 bằng nước nóng 03 lần ựể loại bỏ hoàn toàn dư lượng urê. Sau ựó, hỗn hợp omega-3 và omega-6 ựược loại nước bằng Na2SO4 khan, lọc tách Na2SO4 thu ựược sản phẩm hỗn hợp omega-3 và omega-6 có ựộ tinh khiết caọ
Sơ ựồ 4.4. Quy trình công nghệ chiết tách hỗn hợp axắt béo không thay thế omega-3 và omega-6 từ dầu hạt cải
Hỗn hợp axắt béo omega-3 và omega-6 Dầu hạt cải Hỗn hợp axắt béo Thủy phân
(Nồng ựộ cồn 80%, nhiệt ựộ 800C, thời gian 90 phút)
Làm giàu hỗn hợp axắt béo omega-3 và omega-6
(Tỷ lệ urê/hỗn hợp axắt béo:2/1; tỷ lệ cồn/hỗn hợp axắt béo: 9/1; nhiệt ựộ 100C) Urê, cồn NaOH H2SO4 Urê, Cồn
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 70