Các chủng Bacillus (B.subtilis, Bacillus sp), các chủng lactic (L.acidophilus, Lactobacillus sp1, Lactobacillus sp2) và các chủng vi khuẩn quang dưỡng (vi khuẩn tía và vi khuẩn quang dưỡng xanh lục) được giữ trong tủ lạnh ở nhiệt độ 40C. Tiến hành nhân giống cấp 1, nhân giống cấp 2 trên môi trường nuôi cấy cơ bàn của từng chủng. Nhân giống cấp 3 được thực hiện trên môi trường MRS mở rộng đối với chủng lactic, môi trường NP1 đối với chủng Bacillus, môi trường EB1 đối với nhóm vi khuẩn quang dưỡng. Quá trình nuôi cấy các chủng được thực hiện ở 370C với tỷ lệ giống bổ sung 10% đối với vi khuẩn lactic và 7,5% đối với nhóm vi khuẩn
quang dưỡng và vi khuẩn Bacillus. Sau 36h khi nuôi, sinh khối các chủng được thu hồi theo hai phương pháp khác nhau: ly tâm với tốc độ 7000 vòng/phút với thời gian là 5 phút rồi để lắng ở 100C trong 36 giờ và thu sinh khối bằng cách để lắng tự nhiên ở
Tiến hành lấy mẫu và xác định số lượng tế bào vi khuẩn, kết quả được thể hiện ở
các bảng 3.3.
Bảng 3.3. Kết quả thu hồi sinh khối của các chủng nghiên cứu (CFU/ml) Vi khuẩn l actic Vi khuẩn Bacillus Vi khuẩn quang dưỡng
Phương pháp thu hồi Dịch lên me n Dịch thu hồi Hiệu suất Dịch lên men Dịch thu hồi Hiệu suất Dịch lên men Dịch thu hồi Hiệu suất Ly tâm 4,25.109 3,66.109 86% 3,39.109 2,98.109 88% 3,72.109 3,24.109 87% Lắng 4,25.109 3,32.109 78% 3,39.109 2,78.109 82% 3,72.109 3,05.109 82% Nhận xét:
Từ kết quả ở bảng 3.3 chúng tôi nhận thấy hiệu suất thu hồi sinh khối theo
phương pháp lý tâm cao hơn so với phương pháp để lắng tự nhiên ở 100C, ở các nhóm vi khuẩn hiệu suất thu hồi theo phương pháp ly tâm không chênh lệch nhiều: nhóm vi khuẩn lactic 86%, nhóm vi khuẩn Bacillus 88%, nhóm vi khuẩn quang dưỡng là 87%. Khi sử dụng phương pháp để lắng ở nhiệt độ thấp thì nhận thấy hiệu suất thu hồi ở nhóm vi khuẩn Bacillus và nhóm vi khuẩn quang dưỡng là như nhau (82%) trong khi hiệu suất thu hồi của nhóm vi khuẩn lactic là 78%.
Mặc dù so với phương pháp ly tâm, phương pháp lắng tuy có hiệu suất thu hồi thấp hơn nhưng cũng không đáng kể, ngoài ra trong thực tế sản xuất thì việc thực hiện thu hồi sinh khối theo phương pháp lý tâm gặp nhiều khó khăn do vấn đề thiết bị, máy móc vì vậy chúng tôi lựa chọn phương pháp thu hồi sinh khối của các nhóm vi khuẩn bằng cách để lắng ở 100C trong 36 giờ nhằm đảm bảo quá trình sản xuất phù hợp với điều kiện sản xuất quy mô nhỏ.