CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.2. XÁC ĐỊNH LOÀI VÀ ĐỘ TUỔI THẢO DƯỢC
Độ tuổi và đặc tính của các lồi thực vật nói chung và thảo dược nói riêng rất khác nhau và luôn thay đổi phụ thuộc vào các yếu tố như thời kỳ sinh trưởng, môi trường, điều kiện sinh lý, thời gian thu hoạch, điều kiện bảo quản và xử lý [88]. Mặt khác, thành phần các chất và hoạt tính của nó trong dược liệu cũng bịảnh hưởng bởi thời gian thu hoạch, môi
trường sống ... Hiện nay, phân tích DNA là một cơng cụ phổ biến chính xác để phân loại
lồi thực vật [87] nhưng kỹ thuật này đòi hỏi phải đầu tư lớn và phải thực hiện tại phịng thí nghiệm. Do vậy, việc nghiên cứu về hình thái (nhận diện macro) và cấu trúc mô (nhận diện micro) thường được các nhà khoa học ưu tiên sử dụng trong xác định danh tính và độ tuổi của các loại dược liệu. Do vậy, luận án định hướng sử dụng đặc điểm hình thái và cấu trúc
mô để phân loại độ tuổi của củ đẳng sâm.
1.2.1. Phương pháp truyền thống (nhận dạng macro)
Phương pháp truyền thống để xác định độ tuổi dược liệu là dựa vào đặc điểm hình
thái và cấu trúc mô. Đây là một cách xác định đơn giản, nhanh và dễ thực hiện [158]. Việc nhận dạng macro dược liệu dựa trên củ bao gồm hình dạng bên ngoài, màu, mùi, vị, phân nhánh của rễ, kết cấu bề mặt cắt (bề mặt bị nứt, bề mặt mặt phẳng, mịn), thông qua bề mặt cắt của dược liệu có thể giúp phân biệt một số lồi khác nhau [174]. Các đặc
điểm macro thường được phối hợp với cấu trúc giải phẫu và thành phần hóa học bên trong để việc xác định độ tuổi chính xác hơn [158]. Màu sắc, hương vị của một số dược
liệu thường có mối quan hệ chặt chẽ với chất lượng và thành phần hóa học. Chẳng hạn, nhân sâm (P. gingsen) có vị hơi ngọt và hơi đắng vì chứa cả saccharide và saponin [174].
8
1.2.2. Phương pháp hiện đại (nhận dạng micro)
Nhận dạng vi mô là một cơng cụ hữu ích đểxác định tính xác thực và thậm chí đánh
giá chất lượng của dược liệu. Phương pháp nhận dạng vi mô thường dựa vào :
* Cấu trúc giải phẫu: Tiến hành kiểm tra vi mơ bằng kính hiển vi quang học là tiêu
chí khơng thể thiếu, như một thử nghiệm sàng lọc ban đầu để nhận dạng vật liệu bị cắt hoặc bột hoặc vật liệu được xử lý bằng chất hóa học đặc hiệu [59, 174]. Việc soi vi mô dưới kính hiển vi tuy khơng thể cung cấp nhận dạng đầy đủ nhưng khi phối hợp với các phương pháp phân tích khác có thể cung cấp khảnăng hỗ trợ vơ giá cho việc định danh lồi và xác định
độ tuổi [158, 174]. Người ta có thể sử dụng các vòng tăng trưởng hàng năm để xác định
tuổi [140]. Hình dạng vịng tăng trưởng hàng năm sẽ khác nhau tùy theo chi hoặc loài [51].
Độ tuổi của dược liệu sẽ được xem xét dựa vào vòng tăng trưởng hàng năm phối hợp với
các kỹ thuật phân tích về hình thức tăng trưởng, cốt vĩnh viễn hay xác định gene. Việc xác
định độ tuổi của dược liệu dựa vào cách phân tích hình thức tăng trưởng khơng chỉ thực
hiện ở các lồi thân gỗ mà còn được tiến hành ở các lồi khơng phải thân gỗ [140].
* Dựa vào các thành phần hóa học: Hương vị, mùi và đặc tính macro cùng với thành phần hóa học bên trong là cơ sở quan trọng cho việc phân loại độ tuổi [174].
Polysaccharide, polyacetylene, alkaloid và Saponin là thành phần chính có hoạt tính sinh học của Codonopsis [72]. Do đó, người ta có thể phân tích định lượng các thành phần trên để đánh giá chất lượng của loài thuộc chi Codonopsis và đánh giá độ tuổi. Người ta có
thể sử dụng các phương pháp phân tích hiện đại HPLC, UV-VIS và cộng hưởng từ hạt nhân NMR, … để phân tích thành phần các chất làm cơ sở đánh giá chất lượng, xác định độ tuổi,
tính đồng nhất và đánh giá tiềm năng của nguyên liệu thực vật [56, 88, 174]. Ngồi ra, có
thể dùng sắc ký lớp mỏng đểđịnh tính và xác định mức độ tinh khiết của một loại chất. Kỹ
thuật sắc ký lớp mỏng (TLC) khá hiệu quả và dễ thực hiện với chi phí khơng cao nên thường được sử dụng để đánh giá dược liệu và các chế phẩm của chúng [158].
Hiện tại củ đẳng sâm chủ yếu được người dân khai thác tự nhiên tại Lâm Đồng và một số tỉnh phía Bắc bán ra thị trường ở nhiều độ tuổi khác nhau. Củ đẳng sâm cũng bắt
đầu được người dân trồng trọt từ nguồn giống tự nhiên. Người tiêu dùng mua củ đẳng sâm
không chỉ để ngâm rượu mà củ non cịn được sử dụng như một món ăn bổ dưỡng dưới dạng nấu súp hoặc cháo. Theo Đỗ Tất Lợi nên thu hoạch củđẳng sâm sau 3 năm tuổi [9]. Tuy vậy, Đỗ Tất Lợi không đưa ra các đặc điểm đặc trưng để nhận biết củ đẳng sâm sau 3 năm tuổi. Các tài liệu như Dược điển Việt Nam hoặc Sách Đỏ Việt Nam hoặc Những cây thuốc
9
và vị thuốc Việt Nam có mơ tả nhận diện nguyên liệu củ đẳng sâm [6], [2] [9] nhưng không mô tả nhận diện cụ thể về độ tuổi đẳng sâm.
Từ các phân tích ở trên cho thấy Việt Nam hiện chưa có nghiên cứu nhận diện độ tuổi của củđẳng sâm thơng qua đặc điểm hình thái và cấu trúc mơ cũng như có nghiên cứu về mối tương quan giữa hoạt chất sinh học và độ tuổi của củđẳng sâm làm cơ sở xác định thời gian thu hoạch. Vì vậy, việc luận án định hướng nghiên cứu các đặc điểm hình thái và giải phẫu mô làm cơ sởxác định độ tuổi thu hoạch củđẳng sâm là cần thiết.
1.3. FRUCTAN VÀ MỘT SỐ LOẠI THỰC VẬT CÓ INULIN 1.3.1. Giới thiệu về fructan