Chương 2 : ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4. Hóa chất, thiết bị và kỹ thuật làm xét nghiệm căn nguyên
2.4.2. Kỹ thuật nuôi cấy vi khuẩn
2.4.2.1. Cấy dịch não tủy
Chỉ định: khi bệnh nhi có biểu hiện nhiễm trùng thần kinh trung ương
nghi do VK.
Trang thiết bị: Hóa chất; Sinh phẩm; Kỹ thuật cấy và xác định kết quả
giống như cấy máu.
Qui trình thực hiện có thể có 2 điểm khác cấy máu:
Trước khi ni cấy thì có thể ly tâm bệnh phẩm, lấy cặn nhuộm soi Gram và nuôi cấy.
Duy trì ni cấy 3 đến 5 ngày mà vẫn âm tính thì sẽ trả lời âm tính. Giám sát
Các bước thực hiện được tiến hành theo qui trình và có sự giám sát của Trưởng khoa Vi Sinh, Bệnh viện Nhi Trung ương.
2.4.2.2. Cấy máu
Chỉ định: khi bệnh nhi có biểu hiện nhiễm trùng tồn thân. Trang thiết bị:
Hệ thống tủ cấy tự động: loại BacT/ALERT 3D hoặc BACTEC 9240. Tủ ấm CO2: MEMMERT
Hệ thống máy định danh vi khuẩn và kháng sinh đồ tự động: VITEK 2 Compact.
Hóa chất, sinh phẩm:
Chai chứa môi trường nuôi cấy: chai nhỏ có chứa mơi trường ni cấy được sản xuất bởi công ty cung cấp máy.
Môi trường nuôi cấy Thạch máu, CHO do hãng Oxoud – Anh cung cấp. Card định danh và kháng sinh đồ tự động phù hợp vi khuẩn (GN, GP)
Kỹ thuật cấy và xác định kết quả:
Đưa chai chứa bệnh phẩm vào Hệ thống máy cấy tự động.
Kết quả của q trình này nếu có vi khuẩn mọc trong vịng 5 ngày thì máy sẽ tự động báo và sẽ lấy vi khuẩn nuôi cấy trong môi trường Thạch máu hoặc CHO, đưa vào tủ ấm 370C, theo dõi trong 24 giờ.
Chuyển vào máy định danh vi khuẩn và làm kháng sinh đồ tự động. Máy sẽ cho định danh vi khuẩn và kháng sinh đồ phù hợp vi khuẩn. Nếu kết quả ở máy cấy tự động chưa mọc vi khuẩn thì tiếp tục duy trì
ni cấy đến 5 ngày mà vẫn âm tính thì sẽ trả lời âm tính.
Giám sát: Các bước thực hiện được tiến hành theo qui trình và có sự
giám sát của Trưởng khoa Vi Sinh, Bệnh viện Nhi Trung ương.
2.4.2.3. Cấy vi khuẩn lao
Hóa chất: MGiT lỏng
Thiết bị: Memmert, máy ly tâm lạnh epedorf, máy đo quang phổ bactec Phương pháp: Định tính