Ngành Công nghệ thực Viện Kỹ Thuật - Kinh Tế
1
Đồ án tốt nghiệp đại học Khóa 2013-
Cách tiến hành:
- Pha loãng mẫu theo dãy thập phân tuần tự thành dãy các nồng độ 1/10, 1/100, 1/1000,... mỗi bậc pha loãng là 1/10 được thực hiện bằng cách dùng 1 ml mẫu thêm vào 9 ml nước muối sinh lý 0,9 % NaCl, sau đó lắc kỹ sẽ được độ pha lỗng 1/10, tiếp tục pha lỗng cho đến khi 1 ơ nhỏ có khoảng 2,5–10 tế bào;
- Đặt lamelle sạch phủ khung đếm;
- Dùng micropipet hút dung dịch nấm men đã pha loãng, bỏ đi vào giọt đầu, bơm nhẹ vào rãnh buồng đếm, dung dịch thấm vào kẽ buồng đếm và lamelle;
- Dung dịch chảy từ từ vào các rãnh, lan tỏa lắp đầy khắp lamelle. Nếu bị bọt khí trong lamelle thì thực hiện lại thao tác;
- Đặt buồng đếm lên bàn kẹp của kính hiển vi, dùng kẹp cố định buồng đếm;
- Thao tác kính hiển vi, dùng vật kính x10 để điều chỉnh sơ bộ trước, sau đó dùng vật kính x40 để đếm;
- Đếm số tế bào trong 5 ơ lớn (4 ơ ở góc và 1 ơ ở chính giữa), đếm lần lượt từng
ơ nhỏ trong 1 ô lớn. Trong tất cả các ô nhỏ cần đếm số tế bào nằm hẳn trong ơ trước, sau đó đếm số tế bào nằm ở 4 góc;
- Đếm tất cả 80 ơ nhỏ có trong 5 ơ lớn.
Số lượng tế bào được tính theo cơng thức (2.1). N = (a/b).400/0,1.103.h
Trong đó:
- a: số tế bào trong 5 ơ vng lớn (80 ô vuông nhỏ);
- b: số ô vuông nhỏ (16.5 = 80);
- 400: tổng số ô nhỏ trong ô trung tâm;
- 0,1: thể tích dịch tế bào (tính bằng mm3) chứa trên ơ trung tâm;
- h: hệ số pha lỗng.
Ngành Công nghệ thực Viện Kỹ Thuật - Kinh Tế
1
Đồ án tốt nghiệp đại học Khóa 2013-