Trong đó:
T: mẫu thử (cao khơ) C: chuẩn luteolin
Nhận xét: cao khơ Lá đắng có chứa luteolin vì có vết trùng Rf (Rf = 0,71) và màu sắc với luteolin chuẩn.
4.1.1.4. Chiết xuất cao Lá đắng ở lô 6500 g
Thƣ hiện theo mục 3.3.1.4 thu đƣợc khoảng 345 Lít dịch chiết, đem cơ trực tiếp trên nồi nấu cao 300 Lít LHU trong 45 giờ thu đƣợc khoảng 5 Lít cao đặc (độ ẩm: 8,72% < 15%)
4.1.1.5. Điều chế cao khô Lá đắng lô 6500 g
- Sử dụng Avicel PH 102 (1300 g) làm tá dƣợc điều chế cao khô
- Thực hiện theo mục 3.3.1.5 thu đƣợc 2,8 kg cao khô Lá đắng, hiệu suất 22,33%, độ ẩm 3,22%
4.1.1.6. Kiểm tra chất lƣợng cao khô Lá đắng lơ 6500 g
Kết quả trình bày ở bảng 4.2 (kết quả sắc ký đồ đƣợc trích dẫn ở PL18)
Bảng 4.2. Kết quả kiểm nghiệm cao khô Lá đắng chiết từ 6500 g dƣợc liệu
Chỉ tiêu QTPP Kết quả lô
500 g
Kết quả lô 6500 g
Cảm quan Cao khô, màu nâu đồng nhất, tơi,
mịn, mùi thơm đặc trƣng, vị đắng Đạt Đạt
Độ ẩm < 5% 3,48% 3,22%
Hiệu suất chiết ≥ 15,0% 22,2% 22,3%
Định tính Các vết trong mẫu thử trùng với
các vết mẫu chuẩn Đúng Đúng
Định lƣợng
luteolin (%) ≥ 0,005% luteolin - Đạt
(0,0075%)
4.1.1.7. Kết quả thẩm định quy trình định lƣợng luteolin trong cao khô Lá đắng bằng phƣơng pháp HPLC
a) Tính tƣơng thích hệ thống
Tiến hành theo mục 3.3.1.7, kết quả đƣợc trình bày dƣới bảng 4.3 (kết quả sắc ký đồ đƣợc trích dẫn ở PL1 – PL3) Bảng 4.3. Kết quả tính tƣơng thích hệ thống STT tR (phút) S AS 1 5,921 721,961 0,854 2 5,918 720,160 0,864 3 5,918 721,111 0,865 4 5,922 723,269 0,864 5 5,923 722,398 0,868 6 5,925 730,179 0,896 TB 5,921 723,180 0,869 SD 0,00296 3,6195 Đạt
RSD (%) 0,05 0,50 Nhận xét:
- % RSD thời gian lƣu của luteolin là 0,05% < 2,0% - % RSD diện tích pic của luteolin là 0,50% < 2,0% - Hệ số đối xứng của pic luteolin: 0,8 < 0,869 < 1,5
Kết luận: quy trình đạt tính tƣơng thích hệ thống. b) Độ đặc hiệu
Kết quả khảo sát tính đặc hiệu đƣợc trình bày ở bảng 4.4 và hình 4.4
Bảng 4.4. Kết quả độ đặc hiệu – cao khơ Lá đắng
Hình 4.4. Sắc ký đồ mẫu trắng – mẫu chuẩn – mẫu thử – mẫu thử thêm chuẩn của
cao khô Lá đắng
Thời gian lƣu (phút) Diện tích pic
Mẫu chuẩn 50 ppm 5,925 722,179
Mẫu thử 5,926 710,297
Mẫu thử thêm chuẩn 5,926 1432,476
Mẫu trắng
Mẫu chuẩn Mẫu th