Z. zerumbet Gừng tía
2.3.6. Phân lập zerumbone bằng phƣơng pháp ép thuỷ lực, chiết và kết tinh phân đoạn
bằng SKBM so sánh với zerumbone chuẩn. Gộp các phân đoạn có một vệt zerumbone và cất loại dung môi thu đƣợc zerumbone. Kết quả từ 2 kg bột củ gừng gió tƣơi thu đƣợc 1,6 g zerumbone hiệu suất 0,08%, sản phẩm có điểm nóng chảy
64-65oC, Rf=0,65 (n-hexan/EtOAc 95/5).
2.3.6. Phân lập zerumbone bằng phƣơng pháp ép thuỷ lực, chiết và kết tinh phân đoạn phân đoạn
Cho 1 kg bột củ Gừng gió đƣợc chuẩn bị nhƣ mục 2.3.2 vào thiết bị ép. Tiến
hành ép với lực ép 6 kg/cm2, ép nhiều lần đến khi khối lƣợng bã không đổi thu đƣợc
720 g dịch ép và 280 g bã. Dịch ép đƣợc chiết 3 lần mỗi lần 200 ml n-hexan. Phần bã đƣợc nghiền nhỏ cỡ hạt Ø <0,6 mm và tiến hành ngâm chiết 3 lần mỗi lần với 800 ml n-hexan trong 3 ngày ở nhiệt độ phòng, lọc thu dịch lọc n-hexan. Gộp tất cả
các dịch chiết n-hexan và làm khô bằng Na2SO4 khan, sau đó cất loại dung mơi thu
đƣợc phần khơng phân cực củ Gừng gió kí hiệu NP2. Thêm 2% n-hexan tính theo
khối lƣợng khuấy đều và tiến hành kết tinh phân đoạn theo nhiệt độ và thời gian, lọc thu đƣợc 3,5 g zerumbone hiệu suất 0,35% theo trọng lƣợng tƣơi, sản phẩm có nhiệt
độ nóng chảy 64-65o
C, Rf=0,65 (n-hexac/EtOAc 95/5).
Sản phẩm zerumbone đƣợc kiểm tra độ tinh khiết bằng SKBM và xác định hàm lƣợng bằng phƣơng pháp HPLC-MS trên thiết bị LTQ Orbitrap XL lập đƣờng chuẩn với zerumbone chuẩn của hãng Sigma-Aldrich. Cấu trúc của zerumbone đƣợc xác định bằng các phƣơng pháp phổ 1D-NMR, 2D-NMR, các số liệu xác định cấu trúc đƣợc trình bày ở mục 4.2.