Đo lượng IAA được tổng hợp bằng phương pháp so màu Salkowsky, IAA được tạo ra trong dung dịch huyền phù vi khuẩn sẽ phản ứng với thuốc thử Salkowsky tạo thành dung dịch có màu hồng nhạt hay đậm tùy vào lượng IAA do vi khuẩn tạo ra nhiều hay ít.
Xây dụng đường chuẩn IAA với nồng độ các ống theo thứ tự là 0 – 1 – 2 – 3 – 4 – 5 μg/ml, IAA thu được phương trình đường chuẩn như hình 3.5
46
Hình 3.5 Đồ thị và phương trình đường chuẩn IAA
Sau 2 ngày xác định được hàm lượng IAA của các chủng như bảng 3.6
Bảng 3.6 Lượng IAA tổng hợp được sau 48 giờ
Chủng OD530nm Lượng IAA tổng
hợp (mg/ml) T2 0,79 5,4±0,002 T4 0,765 4,3±0,002 CP7 0,715 2,1±0,00,3 CP8 0,742 3,3±0,001 CP10 0,819 6,67±0,002
Sau 2 ngày khảo sát 5 chủng vi khuẩn Bacillus ni trên mơi trường Burk’s lỏng có bổ sung Tryptophan cho thấy tất cả các chủng đều có khả năng sinh tổng hợp IAA. Kết quả định lượng IAA tạo ra đo được dao động từ 2,1μg/ml đến 6,67mg/ml, chủng có khả năng sinh tổng hợp IAA lớn nhất là CP10 và T2. Kết quả của đề tài phù hợp kết quả nghiên cứu của Andriollo và cs. (1990) cho thấy IAA khoảng 0,15 – 1,8 (µg/mL) khi bổ sung 50 (µg/mL) tryptophan vào mơi trường ni vi khuẩn. Theo Patten và cs. (2002) khi có bổ sung tryptophan với nồng độ 500 (µg/mL) vào mơi trường ni vi khuẩn thì vi khuẩn sản sinh được lượng IAA là 3,2 ± 0,29 (μg/ml/OD600). Khalid và cs. (2001) khi phân lập một số vi sinh vật từ vùng rễ của cây lúa gạo và cây lúa mì và thử khả năng tổng hợp IAA của các dịng cao nhất là 12,1 µg/ml.
y = 0.0228x + 0.6669R² = 0.998 R² = 0.998 0.64 0.66 0.68 0.7 0.72 0.74 0.76 0.78 0.8 0 1 2 3 4 5 6 nm μg/ml OD530
47