CH NGă2 .ăT HC NGH IM
2.4.4. ánhăgiáăh ot tính kháng oxy hó ab ngăph ngăphápăABTS
Ph ngăphápăTEACăhayăph ngăphápă2,2’ă- azinobis (3 ậ ethylbenzthiazoline - 6 - sulfonic acid) (ABTS) d a trên vi c b t các g c t do ABTS b ng các ch t kháng oxy hóa có trong m u. G c ABTS+ th ng có màu xanh l c đ n màu xanh ng c v i giá tr h p th c căđ i 645 nm, 734 nm và 815 nm. Các h p ch t kháng
oxyăhóaătrongămơiătr ng ph n ng s b t các g c t do d n t i m tămƠuăvƠădoăđóă
làm gi măđ h păthu,ăt ngă ng v i n ngăđ ch t kháng oxy hóa hi n di n. Ho t tính
khángăoxyăhóaăđ căxácăđ nhăkhiăđoăđ h p thu t iăb c sóng 734 nm v i ch tăđ i ch ng là ascorbic acid (vitamin C).
Sàng l c kho ng n ngăđ c ch :
M uăđ c phân tán trong dung d chăđ m phosphate pH = 7,4 thành các n ngăđ
th nghi m 100, 10, 1 ppm.
ABTSăđ căhòaătanătrongăn c v i n ngăđ 7 mM và đ c tr n v i dung d ch kali persulfate (K2S2O8) 2,45 mM theo t l 1:1 (v/v). Sauăđó,ăti n hành dung d ch
29
trong bóng t i nhi tăđ phòng trong kho ng 12 ậ 16 gi tr c khi s d ng. Pha loãng dung d ch này b ngăđ măđ năđ h p thu OD734 = 0,7 ± 0,02 tr c khi th c hi n ph n ng.
• M uăđo ch a 2.000 Lădungăd chăg căt ădo và 1.000 Lădungăd chăm uă ă n ngăđ ăth ănghi m.
• M uăđ iăch ngăch a 2.000ă Lădungăd chăg căt ădovƠă1.000ă Lădungăd chă
ascorbic acid 0,6 mg/mL.
• M uătr ngăch a2.000ă Lădungăd chăg căt ădovƠă1.000ă Lădungăd chăđ mă
pH 7,4.
H năh păđ c l căđ u,ăđ ăyênăchoăph nă ngă ănhi tăđ ăphòngătrongă30ăphútăr i ti năhƠnhăđoăđ ăh păthu.
− Xácăđnh giá tr IC50:
T k t qu kh o sát m u các n ngăđ th nghi m, ti n hành thí nghi măt ng
t v i các n ngăđ phù h p. M i n ngăđ m uăđ c th c hi n ít nh t 3 l năđ tính giá tr trung bình. Ph nătr mă c ch g c t doăđ c tính theo cơng th c sau:
Q AA x
Trongăđóμ Aμăđ h p thu c a dung d ch ch a m u th Aoμăđ h p thu c a dung d ch ch a m u tr ng
Giá tr IC50 đ că xácă đ nh t đ ng cong bi u di n m i quan h gi a n ng đ
và ph nătr mă c ch (%Q).