Thiết kế nghiên cứu

Một phần của tài liệu (LUẬN án TIẾN sĩ) nghiên cứu tác dụng cải thiện suy giảm trí nhớ và chống trầm cảm của hương nhu tía (ocimum sanctum l ) trên thực nghiệm (Trang 71 - 75)

2.3.1. Nghiên cứu tác dụng và cơ chế tác dụng cải thiện trí nhớ của hương nhu tía

2.3.1.1. Nghiên cứu tác dụng cải thiện trí nhớ của cao chiết cồn hương nhu tía (OS) trên mơ hình chuột nhắt loại bỏ thùy khứu giác (Olfactory bulbectomy - OBX)

Chuột nhắt trắng được nuơi ổn định ít nhất một tuần trong phòng chăn nuơi với điều kiện nghiên cứu, chia ngẫu nhiên thành 5 lơ:

+ Lơ chứng sinh lý: uống nước cất.

+ Lơ chứng bệnh lý (OBX): gây mơ hình OBX khơng được điều trị, uống nước cất.

+ Các lơ thử: gây mơ hình OBX, uống cao tồn phần (OS) được phân tán đồng nhất trong nước cất, với hai mức liều thử 200 mg/kg (OS 200) và 400 mg/kg (OS 400). + Lơ chứng dương (DNP): gây mơ hình OBX, tiêm phúc mạc donepezil hịa tan

trong NaCl 0,9% với liều 1,5 mg/kg.

Chuột được dùng thuốc 1 lần/ngày từ trước phẫu thuật OBX 7 ngày cho đến khi kết thúc thí nghiệm. Trong vịng 3 ngày sau phẫu thuật OBX chuột được tạm ngừng thuốc. Lượng thuốc dùng cho chuột là 0,1 ml/10 g thể trọng. Các thử nghiệm hành vi đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ bao gồm thử nghiệm nhận diện vật thể và mê lộ chữ Y cải tiến được tiến hành lần lượt vào ngày thứ 17 và 24 sau phẫu thuật. Sau khi kết thúc thử nghiệm hành vi, thu não chuột để đánh giá mơ bệnh học và hĩa học thần kinh

(Hình 2.13.).

Hình 2.13. Sơ đồ thiết kế nghiên cứu tác dụng cải thiện trí nhớ của OS

2.3.1.2. Đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ của các cao chiết phân đoạn hương nhu tía trên mơ hình OBX

Tương tự, thí nghiệm đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ của các cao chiết phân đoạn hương nhu tía được thiết kế theo sơ đồ sau (Hình 2.14.):

Hình 2.14. Sơ đồ thiết kế thí nghiệm đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ của các cao

Trong đĩ:

- Đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ của cao OS và các cao chiết phân đoạn n-hexan (OS-H), ethyl acetat (OS-E) và n-butanol (OS-B) của hương nhu tía

Thí nghiệm được thiết kế tương tự giai đoạn trước, mẫu thử là cao OS và các cao chiết phân đoạn (OS-H, OS-E, OS-B), được phân tán đồng nhất trong nước cất, cho chuột uống liều 400 mg/kg.

Từ đĩ, tìm được phân đoạn cao chiết cĩ tác dụng cải thiện trí nhớ rõ nhất.

- Đánh giá tác dụng cải thiện trí nhớ với 2 mức liều của cao OS-E (phân đoạn cĩ tác dụng rõ nhất)

Thí nghiệm được thiết kế tương tự giai đoạn trước, mẫu thử là cao OS-E được phân tán đồng nhất trong nước, cho chuột uống với 2 mức liều 200 mg/kg (OS-E 200) và 400 mg/kg (OS-E 400).

2.3.1.3. Nghiên cứu tác dụng cải thiện trí nhớ của các hoạt chất tiềm năng trong hương nhu tía (acid ursolic và acid oleanolic) trên mơ hình OBX

Các hoạt chất tiềm năng (cĩ hàm lượng cao trong phân đoạn cĩ tác dụng rõ nhất) được tiếp tục nghiên cứu tác dụng cải thiện trí nhớ. Thí nghiệm được thiết kế như sau (Hình 2.15.):

Hình 2.15. Sơ đồ thiết kế nghiên cứu tác dụng cải thiện trí nhớ của các hoạt chất

tiềm năng trong hương nhu tía

Trong đĩ:

- Nghiên cứu tác dụng cải thiện trí nhớ của acid ursolic

Mẫu thử là acid ursolic được phân tán đồng nhất trong nước cất chứa 0,1% (tt/tt) Tween 80, cho chuột uống với 2 mức liều 6 mg/kg (UA 6) và 12 mg/kg (UA 12).

- Nghiên cứu tác dụng cải thiện trí nhớ của acid oleanolic

Mẫu thử là acid oleanolic được phân tán đồng nhất trong nước cất chứa 0,1 % (tt/tt) Tween 80, cho chuột uống với 3 mức liều 6 mg/kg (OA 6); 12 mg/kg (OA 12) và 24 mg/kg (OA 24).

2.3.2. Nghiên cứu tác dụng và cơ chế tác dụng chống trầm cảm của hương nhu tía

2.3.2.1. Đánh giá tác dụng chống trầm cảm của cao OS và các cao chiết phân đoạn (n-hexan, OS-H; ethyl acetat, OS-E; n-butanol, OS-B) của hương nhu tía trên mơ hình chuột nhắt loại bỏ thùy khứu giác (OBX)

Tiếp tục sử dụng mơ hình OBX, thí nghiệm đánh giá tác dụng chống trầm cảm của cao OS và các cao chiết phân đoạn được thiết kế theo sơ đồ sau (Hình 2.16.):

Hình 2.16. Sơ đồ thiết kế thí nghiệm đánh giá tác dụng chống trầm cảm của các cao

chiết phân đoạn hương nhu tía trên mơ hình OBX

Chuột nhắt trắng được chia ngẫu nhiên thành 7 lơ như sau: + Lơ chứng sinh lý

+ Lơ chứng bệnh lý (OBX)

+ Các lơ thử: gây mơ hình OBX, uống cao OS và các cao chiết phân đoạn (OS- H, OS-E, OS-B), được phân tán đồng nhất trong nước cất, với liều 400 mg/kg.

+ Lơ chứng dương (IMP): gây mơ hình OBX, tiêm phúc mạc imipramin hịa tan trong NaCl 0,9%, với liều 8,0 mg/kg.

2.3.2.2. Nghiên cứu tác dụng chống trầm cảm của cao chiết phân đoạn tiềm năng (OS-B) trên mơ hình gây stress nhẹ trường diễn khơng dự đốn trước (UCMS)

Sử dụng mơ hình UCMS để nghiên cứu tác dụng và cơ chế tác dụng chống trầm cảm ở 2 mức liều thấp hơn của cao OS-B (cao chiết phân đoạn cĩ tác dụng rõ nhất). Thí nghiệm được thiết kế theo sơ đồ sau (Hình 2.17.):

Hình 2.17. Sơ đồ thiết kế nghiên cứu tác dụng chống trầm cảm của cao OS-B

trên mơ hình UCMS

Tương tự giai đoạn trước, mẫu thử là cao OS-B được phân tán đồng nhất trong nước cất, cho chuột uống với 2 mức liều 50 mg/kg (OS-B 50) và 100 mg/kg (OS-B 100). Thử nghiệm tiêu thụ saccharose được tiến hành hàng tuần từ tuần 0 đến tuần 4; tuần 9 và tuần 11 thực hiện thử nghiệm dược lý sử dụng chất đối kháng.

Một phần của tài liệu (LUẬN án TIẾN sĩ) nghiên cứu tác dụng cải thiện suy giảm trí nhớ và chống trầm cảm của hương nhu tía (ocimum sanctum l ) trên thực nghiệm (Trang 71 - 75)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(179 trang)