2.2. Phương pháp nghiên cứu
2.2.3. Gây mơ hình dược lý
2.2.3.1. Mơ hình chuột nhắt bị loại bỏ thùy khứu giác (Olfactory bulbectomy - OBX)
Mơ hình chuột nhắt bị loại bỏ thùy khứu giác (OBX) được dùng để nghiên cứu tác dụng cải thiện trí nhớ và tác dụng chống trầm cảm của hương nhu tía, được tiến hành theo cơng bố của Xoan Le và cộng sự [76], Mizuki và cộng sự [77]:
Chuột bị gây mê bằng sodium pentobarbital (60 mg/kg, i.p). Hộp sọ của chuột được cố định bằng dụng cụ chuyên dụng. Dùng kéo cắt một đường để bộc lộ phần hộp sọ bao bên ngồi của thùy khứu giác. Tại phần sọ này, sử dụng máy khoan để tạo một
lỗ đường kính 1mm. Sử dụng kim để phá hủy thùy khứu giác và sử dụng xi lanh để hút tồn bộ phần mảnh não này ra khỏi hộp sọ của chuột. Chuột được cầm máu bằng bọt gelatin (Hình 2.3.). Sau khi hồn thiện các thử nghiệm về hành vi, thu thập não chuột để kiểm tra các thương tổn trên vùng thùy khứu giác. Số liệu hành vi của những con chuột cĩ thùy khứu giác bị lấy đi dưới 70% sẽ bị loại bỏ khi phân tích kết quả (phần thùy khứu giác chưa được loại bỏ hết cĩ thể gây ảnh hưởng đến hành vi của chuột). Đối chứng sinh lý (sham operation) được tiến hành theo cách tương tự nhưng bỏ qua bước loại bỏ thùy khứu giác.
Hình 2.3. Phẫu thuật loại bỏ thùy khứu giác (OBX)
(A) Hình ảnh qui trình thực hiện: (1) cố định hộp sọ chuột; (2) khoan và dùng kim phá bỏ thùy khứu giác; (3) hút sạch mảnh não; (4) cầm máu bằng bọt gelatin; (B) Hình
ảnh não chuột sinh lý và não chuột đã bị loại bỏ thùy khứu giác.
2.2.3.2. Mơ hình chuột nhắt bị gây stress nhẹ trường diễn khơng dự đốn trước (unpredictable chronic mild stress - UCMS)
Mơ hình gây trầm cảm bằng stress nhẹ trường diễn khơng dự đốn trước (UCMS) được dùng để nghiên cứu tác dụng và cơ chế tác dụng chống trầm cảm của cao phân đoạn hương nhu tía cĩ tác dụng rõ nhất. UCMS được tiến hành dựa vào cơng bố của Daishu Mizuki và cộng sự, cĩ cải tiến nhỏ [100]. Chuột phải chịu các loại tác nhân gây stress nhẹ khơng thể đốn trước như:
- Gị bĩ chuột vào lọ nhỏ trong 3 giờ, 1 lần/tuần (Hình 2.4.); - Nghiêng chuồng 45° trong 24 giờ, 2 lần/tuần;
- Ướt chuồng (200ml nước/50g trấu) trong 24 giờ, 1 lần/tuần; - Chiếu sáng liên tục 36 giờ, 2 lần/tuần;
- Tiếng chuột cống kêu 3 giờ liên tục (phát băng ghi âm sẵn cĩ), 3 lần/tuần; - Nhồi 2 chuồng với nhau trong 24 giờ, 2 lần/tuần;
- Cơ lập chuột và bỏ thức ăn, nước uống trong 18 giờ, 1 lần/tuần (để chuẩn bị cho thử nghiệm tiêu thụ saccharose).
Hai trong số các tác nhân gây stress này được áp dụng hàng ngày vào các thời điểm khác nhau và tuân theo lịch trình 1 tuần bán ngẫu nhiên. Quá trình UCMS kéo dài 6 tuần trước khi kiểm tra hành vi. Các tác nhân gây stress tiếp tục được áp dụng trong suốt giai đoạn thử nghiệm hành vi, trừ những ngày thử nghiệm để tránh ảnh hưởng đến kết quả thử nghiệm. Lơ chứng sinh lý được nuơi trong điều kiện bình thường.
Hình 2.4. Gị bĩ chuột vào lọ nhỏ - một trong các tác nhân gây stress của mơ hình gây
stress nhẹ trường diễn khơng dự đốn trước (UCMS)