CHƯƠNG II : VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.3Các loại môi trường:
2.2 Vật liệu nghiên cứu
2.2.3Các loại môi trường:
Môi trường Potato Dextrose Agar – PDA Môi trường Potato Dextrose Broth – PDB
2.3 Phương pháp nghiên cứu
❖ Sơ đồ bố trí thí nghiệm
36
Ống giống
Hoạt hóa
Quan sát hình thái
Tách chiết hợp chất peptaibol thô
Thu hợp chất peptaibol thô
Xác định cấu trúc peptaibol
Sơ đồ bố trí thí nghiệm
❖ Thuyết minh quy trình
Các chủng nấm Trichoderma có trong bộ sưu tập giống của Viện khoa học ứng dụng được chọn ra để tiến hành đề tài. Các chủng nấm này sẽ cấy lên đĩa petri nhằm mục đích hoạt hóa giống và được sử dungg̣ trong q trình nghiên cứu. Mơi trường sinh viên thực hiện để cấy nấm là môi trường PDA. Sau khi cấy ủ nấm ở nhiệt độ phòng trong vòng 5 ngày để nấm mọc, tạo thành sợi nấm vàbào tử. Sau đó các chủng nấm này được sử dụng để quan sát hình thái sợi nấm, đặc điểm sinh trưởng và tăng sinh trên mơi trường PDB để thực hiện q trình tách chiết hợp chất kháng nấm. Quá trình tách chiết hợp chất peptaibol được tiến hành bằng cách tăng sinh khối nấm trên PDB trong 5 ngày tiếp theo lọc tiếp tuyến để loại bỏ sinh khối sau đó bổ sung butanol để trong 48 giờ cuối cùng cô quay chân không thu dịch chiết peptaibol thô. Hợp chất peptaibol sau khi thu một phần
37
TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com Khảo sát khả năng đối kháng nấm bệnh
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
sẽ tiến hành tinh sạch bằng methanol và chloroform để xác định cấu trúc peptaibol, phần còn lại sẽ tiến hành khảo sát khả năng đối kháng nấm bệnh Neoscytalidium
dimidiatum trong điều kiện invitro.