D 7 Trypsin nguyên bào sợi ở khoang dƣới và
3.2. Khả năng tạo dòng của tế bào (CFU-F)
Bảng 2. Khả năng tạo dòng của tế bào mới tách ra từ mô mỡ (n=5)
Thế hệ tế bào Số tế bào Số CFU -F tối thiểu
Số CFU-F tối đa
%CFU-F
Khối tế bào mới tách
từ mô mỡ thử nghiệm 50 TB/cm
2
09 15 14,6
Khối tế bào tính trong
1gram mơ mỡ 8,8x10
5
4.200 5.100 14,6
Nhận xét:
- Khối tế bào mới tách từ mô mỡ thử nghiệm (50TB/cm2): Số CFU-F tối thiểu là 09, tối đa là 15, tỷ lệ CFU-F là 14,6
- Khối tế bào tính trong 1 gram mơ mỡ (8,8x105): Số CFU-F tối thiểu là 4200, tối đa là 5100, tỷ lệ CFU-F là 14,6
Nghiên cứu của chúng tôi tập trung vào xác định khả năng tạo tập đoàn (colony) của các tế bào phân lập từ mô mỡ. Khả năng tạo colony là một trong những thí nghiệm thể hiện tế bào có khả năng tự đổi mới nhƣng vẫn duy trì đƣợc tính di truyền của tế bào. Các tế bào đầu dịng sẽ tạo colony, thí nghiệm này đánh giá bằng test CFU-F.
Kết quả cho thấy số lƣợng tế bào có khả năng sinh tập đoàn của khối tế bào mới tách từ mô mỡ là 7,5 ± 1,8 . Các thế hệ từ P1 - P5 đạt 16,5-18,6% tùy vào thế hệ tế bào thử nghiệm.
A
B
Hình 9. Tế bào gốc mỡ tạo colony – ngày thứ 1 và 5. (50X)
- (A ) Ngày thứ nhất, tế bào ít và mọc rải rác. - (B) Ngày thứ 5 đã xuất hiện colony.
A
B
Hình 10. Tế bào gốc mỡ tạo colony ở ngày thứ 10 và 20. (50X)
- (A) Ngày thứ 10, các colony rõ hơn.
Bảng 3. Khả năng tạo CFU-F theo các thế hệ tế bào (n=5) Thế hệ tế bào Số tế bào/cm2 Số CFU %CFU-F
P1 50 9-15 14,6 ± 1,5
P3 50 15-18 16,5 ± 1,9
P5 50 14-19 17,3 ± 1,8
Nhận xét:
- Các tế bào có xu hƣớng tạo colony nhiều hơn khi tăng số lần cấy chuyển lên đến P3, P5.
- Nhƣ vậy các tế bào đã dần đƣợc tinh lọc, những tế bào không thuộc trung mô sẽ chết trong các lần cấy chuyển đầu tiên.
- Colony tế bào gốc mỡ thuộc dạng colony fibroblast, các tế bào không đứng thành cụm nhƣ các tế bào biểu mơ.
A B
Hình 11. Các đĩa colony sau khi nhuộm giemsa (A)(B)
Kết quả khả năng tạo CFU-F của đề tài cao hơn một số tác giả khác có thể do mẫu mơ chúng tơi lấy đa số từ ngƣời còn nhỏ tuổi, còn các tác giả khác lấy mô mỡ từ các bệnh nhân thẩm mỹ thành bụng có tuổi đời cao hơn. Cùng phƣơng pháp đánh giá, có tác giả chỉ đạt 15 (C. Dromard và CS 2011).