3.3.3. Phương pháp Nghiên cứu lưu hành virus cúm A/H5N6 tại các chợ gia cầm sống và kỹ thuật chẩn đốn bệnh cúm gia cầm trong phịng thí nghiệm bằng kỹ thuật PCR (polymerase chain reaction)
Địa điểm lẫy mẫu: Lựa chọn ngẫu nhiên 4 chợ cĩ buơn bán gia cầm (sau khi thống kê tồn bộ số chợ cĩ gia cầm sống trên địa bàn tỉnh). Chợ này cần cĩ ít nhất 06 hộ buơn bán gà sống và 06 hộ buơn bán vịt sống.
Số lượng mẫu: Mỗi chợ lấy 18 mẫu gộp (gộp 5 mẫu swabs đơn thành 1 mẫu gộp). Trong đĩ 6 mẫu gộp lấy từ vịt; 6 mẫu gộp lấy từ vịt; 6 mẫu gộp lấy từ mơi trường.
Thời gian từ: tháng 8/2016- 4/2017 (6 vịng lấy mẫu, mỗi tháng 1 vịng). Phương pháp lấy mẫu (theo tài liệu hướng dẫn của Cục thú y)
* Phương pháp lấy mẫu swab hầu họng
Dùng tăm bơng vơ trùng đưa sâu vào trong hầu họng của gia cầm, ngốy nhẹ nhàng trên bề mặt niêm mạc; lấy tăm bơng ra sau đĩ cho vào ống nghiệm cĩ
chứa dung dịch bảo quản, đưa vào thùng bảo quản lạnh gửi về phịng thí nghiệm trong vịng 48h kể từ khi lấy mẫu. Đối tượng lẫy swab hầu họng mẫu là gà và vịt, khơng lấy ngan, ngỗng và các gia cầm khác.
- Đối với gà: Tại mỗi chợ, mỗi lần lấy 30 mẫu swab hầu họng của gà sống (gồm 5 mẫu gà/hộ x 6 hộ buơn bán gà sống). Gộp 05 mẫu swab đơn của một hộ thành 01 mẫu xét nghiệm, gộp ngay tại chợ.
- Đối với vịt: Tại mỗi chợ, mỗi lần lấy 30 mẫu swab hầu họng của vịt sống (gồm 5 mẫu gà/hộ x 6 hộ buơn bán gà sống). Gộp 05 mẫu swab đơn của một hộ thành 01 mẫu xét nghiệm, gộp ngay tại chợ.
* Phương pháp lấy mẫu swab mơi trường
Dùng tăm bơng vơ trùng ngốy phân, chất thải trên lồng nhốt gia cầm, mẫu nước thải tại khu buơn bán gia cầm, mẫu nước cho gia cầm uống sau đĩ cho vào ống nghiệm cĩ chứa dung dịch bảo, đưa vào thùng bảo quản lạnh gửi về phịng thí nghiệm trong vịng 48h kể từ khi lấy mẫu.
- Mẫu phân tươi: Phân tươi của gia cầm bán tại chợ. Dùng tăm bơng ngốy và cho vào ống mơi trường. Gộp 05 mẫu swab đơn thành 01 mẫu xét nghiệm, gộp ngay tại chợ.
- Mẫu chất thải trên lồng nhốt gia cầm: Lấy 10 mẫu swab đơn gộp thành 02 mẫu xét nghiệm, gộp ngay tại chợ.
- Mẫu nước thải tại chợ: Lấy 10 mẫu swab đơn gộp thành 02 mẫu xét nghiệm, gộp ngay tại chợ.
- Mẫu nước uống của gia cầm tại chợ: Lấy 05 mẫu swab đơn và gộp thành 01 mẫu xét nghiệm, gộp ngay tại chợ.
-Như vậy Tại mỗi chợ 1 vịng lấy mẫu tổng số mẫu Swabs gộp cần lấy là (6 mẫu Swabs vịt; 6 mẫu Swabs gà; 6 mẫu Mơi trường).
Trong quá trình lấy mẫu phải đảm bảo đúng kỹ thuật, tránh lây nhiễm chéo giữa các mẫu bệnh phẩm.
Chẩn đốn bệnh cúm gia cầm trong phịng thí nghiệm của Cơ quan thú y vùng II bằng kỹ thuật PCR (polymerase chain reaction)
* Phương pháp xét nghiệm virus cúm A/H5N6
Phương pháp này được tiến hành theo quy trình Hướng dẫn giám sát ban hành bởi Cục thú y theo hình 3.5.