♦ về vấn đề phân tích nước tiểu: I. Mục đích sử dụng:
Que thử nước tiểu là dạng tấm nhựa mỏng trên bề mặt có các vùng được phủ sẵn thuốc thử riêng biệt. Được dùng phát hiện định tính hoặc bán định lượng một hoặc vài chất cần phân tích sau trong nước tiểu: Ascorbic Acid, Glucose, Billirubin, Ketone (Acetonic Acid), trọng lượng riêng, máu, pH, protein, urobilinogen, nitrite, leukocytes. Que thử nước tiểu đucợ sử dụng cho xét nghiệm tại chỗ và các phòng thí nghiệm
II. Tổng quan:
Thành phần nước tiểu thay đổi trong suốt giai đoạn của bệnh hoặc rối loạn chức năng của cơ thể trước khi các thành phần của máu thay đổi rõ rệt. Phân tích nước tiểu là một quy trình hữu ích, mỗi một chỉ số sẽ phản ánh sức khoẻ; tình trạng bệnh và là một phần của kiểm tra sức khoẻ định kỳ. Que thử nước tiểu có thể dùng để đánh giá tổng quan sức khoẻ và hỗ trợ trong chẩn đoán, theo dõi quá trình chuyển hoá hoặc bệnh trên cơ thể gây ảnh hưởng đến chức năng thận, rối loạn nội tiết và bệnh rối loạn đường tiết niệu. III. Thận trọng:
Chỉ dùng chẩn đoán trong phòng thí nghiệm. Không dùng que thử đã hết hạn Que thử phải được bảo quản trong lọ đóng kín cho đến khi sử dụng
Tất cả mẫu bệnh phẩm được xem là nguy cơ đọc hại và xử lý như tác nhân gây bệnh Que thử sau khi dùng được huỷ theo quy định
IV. Bảo quản và độ ổn định:
Bảo quản trong lọ đóng kín nắp ở nhiệt độ phòng hoặc bảo quản lạnh (2-30oC). Tránh ánh sáng mặt trời. Que thử giữ ổn định trong
khoảng thời gian sử dụng ghi trên nhãn. Không được lấy túi hạt chống ẩm của lọ ra ngoài. Lấy lượng que thử vừa đủ và dùng ngay, đậy chặt nắp lọ ngay sau khi lấy que thử. Tránh đóng băng. Không sử dụng khi hết hạn
Lưu ý: Một khi mở lọ, que thử còn lại giữ ổn định đến 3 tháng. Độ ổn định có thể giảm trong điều kiện độ ẩm cao
V. Lấy và bảo quản mẫu:
Mẫu nước tiểu phải được chứa trong dụng cụ đựng mẫu khô, sạch và phải được xét nghiệm càng nhanh càng tốt. Không được ly tâm. Không sử dụng nước tiểu có chất bảo quản. Nếu xét nghiệm không thực hiện trong vòng 1 giờ sau lấy mẫu, ngay lập tức bảo quản lạnh mẫu và để mẫu đạt nhiệt độ phogf trước xét nghiệm.
Để mẫu nước tiểu không được bảo quản lâu hơn ở nhiệt độ phòng có thể dẫn tới sự tăng nhan của vi khuẩn và kết quả là thay đổi pH. Sự thay đổi alkaline pH có thể gây kết quả dương tính giả với xét nghiệm protein. Nước tiểu chưa GLU có thể gây giảm pH do vi sinh vật chuyển hoá glucose
Mẫu nước tiểu nhiễm bẩn với chất tẩy rửa da chứa chlohexide có thể ảnh hưởng đến kết quả protein (và ảnh hưởng thấp hơn với SG và BI)
VI. Hướng dẫn sử dụng:
1. Lấy que thử ra khỏi lọ và sử dụng càng nhanh càng tốt. Đóng chặt
nắp lọ ngay sau khi lấy ra một lượng que thử đủ theo nhu cầu. Nhúng hoàn toàn vùng phản ứng của que thử vào mẫu nước tiểu sạch, lắc đều và ngay lập tức lấy que thử ra để tránh thuốc thử bị hoà tan
2. Khi lấy que thử ra khỏi nước tiểu, trượt cạnh que thử lên
miệng
dụng cụ đựng nước tiểu để loại bỏ nước tiểu dư thừa. Giữ que thử nằm ngang và để cạnh que thử tiếp xúc với vật liệu thấm nước (như giấy ăn) để tránh hoá chất giữa các vùng phản ứng bị trộn lẫn hoặc làm bẩn tay
3. So sánh vùng thử với ô màu tương ứng trên nhãn lọ đựng que
thử tại
thời gian đọc của từng loại thuốc thử. Giữ que thử gần ô màu và so khớp màu cẩn thận
Lưu ý: kết quả có thể đọc trong vòng 2 phút sau thời gian đọc tương ứng của từng loại thuốc thử
que thử còn hạn sử dụng, so sánh kết quả với dung dịch chứng âm và chứng dương đã biết trước nồng độ
và lặp lại xét nghiệm với
que thử mới. Nếu vấn đề vẫn tồn tại, ngừng sử dụng máy và liên hệ đại lý phân phối.
VIII. Kiểm soát chất lượng:
Để kết quả chính xác hơn, hiệu quả xét nghiệm của que thử phải khẳng định bằng xét nghiệm với mẫu phẩm âm tính, dương tính/ dung dịch chứng đã biết trước khi thực hiện một xét nghiệm mới hoặc khi sử dụng một lọ que thử mới. Mỗi phòng thí nghiệm phải công bố mục tieu riêng cho các tiêu chuẩn phù hợp
X. Hạn chế:
Que thử nước tiểu có thể bị ảnh hưởng bởi các chất làm cho nước tiểu có màu bất thường như thuốc chứa thuốc nhuộm azo (ví dụ: pyridium, azo gantrisin, azo gantanol), nitrofurantoin (Microdatin, Furadantin) và ribotlavin. Màu phát triển trên ô kiểm tra có thể bị che giấu hoặc phản ứng màu gây sai kết quả.
* Cảm quan:
Màu Nguyên nhân bệnh lý Thuốc và thực phẩm
Đục
Phosphatase niệu, lipid niệu, tăng
oxalate niệu Chế độ ăn nhiều purine
Nâu sẫm Sắc tố mật, melanin, methemoglobin Levodopa, methyldopa
Vàng Nước tiểu đặc Cà rốt
Xanh lá cây hoặc xanh dương Nhiễm Pseudomonas đường niệu,
biliverdin
Amtriptyline (Elavine), indigo carmine, IV cimetidine (Tagamet), IV
promethazine (Pheganeran), methylene blue, triamterene
(Dyrenium)
Cam Sắc tố mật Phenolthiazines, Phenazopydine
(pyridium)
Đỏ
Đái máu, đái Hb, tiểu myoglobin,
porphyrin niệu Phenolphthalein, rifampin (rifadin)
IX. Chi tiết các thông số:
Thuốc thử và đặc tính hiệu quả:
Thuốc thử Thời gian
đọc Thành phần Mục đích Ascorbic acid (ASC) 30 giây 2,6-dichlorophe- nolindophenol; đệm và thành phần không phản ứng Phát hiện ASC từ nồng độ 5-10 mg/dl (0.28-0.56 mmol/l)
Glucose
(GLU) 30 giây
Glucose oxidase; peroxidase; KI; đệm; thành phần không phản ứng
Phát hiện GLU từ nồng độ trên 50-100 mg/dl (2.5-5 mmol/l) Bilirubin 30 giây 2,4-dicloroaniline; đệm và thành phần không phản ứng Phát hiện Bi từ nồng độ trên 0.4-1 mg/dl (6.8-17 mmol/l) Ketone
(KET) 40 giây Natri nitroprusside; đệm
Phát hiện KET từ nồng độ trên 2.5-5 mg/dl (0.25-0.5 mmol/l) Specific Gravity (SG) 45 giây Chất chỉ thị màu bromthymol; đệm và thành phần không phản ứng; poly
(methyl, vinyl ether/maleic anhydride); NaOH
Xác định tỉ trọng nước tiểu trong khoảng từ 1-1.03. Sai số so với giá trị thu bằng
phương pháp chỉ số khúc xạ chỉ trong 0.005 Blood (BLO) 60 giây 3,3’5,5’-tetramethylbenzidine (TMB); diisoproprylebenzen dihydroperoxide; Phát hiện Hb tự do từ nồng độ trên 0.018- 0.06 mg/dl (5-10 Ery//./!) trong mẫu nước
tiểu có nồng độ ASC < 50 mg/dl
pH 60 giây Muối natri methyl đỏ; bromthymol
xanh; thành phần không phản ứng
Cho phép phân biệt định lượng giá trị trong khoảng 5-9
Protein
(PRO) 60 giây
Tetrabromophenol xanh; đệm và thành phần không phản ứng
Phát hiện albumin từ nồng độ trên 7.5-15 mg/dl (0.075-0.15 mmol/l)
Urobilinogen
60 giây
Dùng trong phòng thí nghiệm và các thử nghiệm lâm sàng. Thông số quan trọng với người đọc là độ nhạy, độ đặc hiệu, độ chính xác. Nói chung, các xét nghiệm này đực dùng để phát hiện các thông số mà không bị ảnh hưởng bởi các chất gây nhiễu
Diễn giải kêt quả bằng mắt thường cũng phụ thuộc vào một vài yêu tố như sự thay đổi của màu sắc quan sát được, sự có hoặc không các yêu tố ức chê và điều kiện ánh sáng khi que thử dược đọc. Mỗi ô màu trên bảng màu tương ứng với một khoảng nông độ chất cần phân tích
Khoảng giá trị đọc của pH, protein, urobilinogen và glucose là khác nhau giữa phương pháp đọc bằng mắt và máy phân tích
Độ nhạy các thông số trên dựa trên các nghiên cứu đọc bằng mắt thường và có thể khác nhau giữa đọc bằng mắt và máy phân tích. Khi đọc bằng mắt, nêu màu của o nằm giữa khoảng âm tính và có vêt thì kêt quả là âm tính.
1. Acid ascorbic:
HỌ ,
_ ĩ ỵ.o. ~ HCk
Hơ ƠH
(NIT) ethylenediamine; thành phần không
phản ứng
mg/dl trong nước tiểu với tỉ trọng thấp và ít hơn 30 mg/dL ASC
Leukocytes
(LEU) 120 giây
Dẫn xuất ester axit pyrole amino; muối diazonium; đệm và thành phần
không phản ứng
Phát hiện LEU từ nông độ trên 9-15 tê bào bạch cầu trên pl trong nước tiểu
a. Tổng quan
Còn được gọi là vitamin C, loại vitamin tan trong nước, là chất dinh dưỡng thiết yếu cho người, được cung cấp qua các loại rau củ quả giàu Vit C như cam, chanh,...
Là chất quan trọng tham gia vào quá trình trao đổi chất và cần thiết cho hệ miễn dịch
Có vai trò trong việc bảo vệ tế bào, duy trì sức khoẻ của da, sụn, răng, xương và tính bền vững của mạch máu. Ngoài ra còn là chất chống lại quá trình oxi hoá mạnh
-> Ý nghĩa
Chỉ số ASC trong xét nghiệm nước tiểu cho thấy dấu hiệu để phát hiện các tế bào, trị liệu trong viêm nhiễm thận, đường tiết niệu, sỏi đường tiết niệu...
Việc đánh giá mức độ acid ascorbic trong nước tiểu có thể giúp làm giảm nguy cơ sai lệch kết quả trong một số bệnh. Acid ascorbic nồng độ cao trong nước tiểu có thể gây âm tính giả đối với một số chất (glucose, nitrite và bilirubin) hoặc tế bào (hồng cầu, bạch cầu) khi xét nghiệm nước tiểu bằng que thử.
b. Nguyên lý:
Xét nghiệm này liên quan đến sự mất màu của Tillman. Sự có mặt của acid ascorbic gây ra sự thay đổi màu từ xanh dương/lá cây sang màu cam. Bệnh nhân với chế độ ăn đầy đủ có thể bài tiết ra 2 - 10 mg/dl hằng ngày. Sau khi tiêu thụ lượng lớn axit ascorbic thì nồng độ có thể lên đến 200 mg/dl.
Chỉ số bình thường: 5-10 mg/dL hoặc 0.28-0.56 mmol/L. Nhu cầu vitamin C thay đổi theo lứa tuổi cụ thể như sau:
• Trẻ từ 6-11 tháng là 25-30 mg/ngày
• Trẻ từ 1-6 tuổi là 30 mg/ngày, trẻ từ 7-9 là 35 mg/ngày
• Tuổi vị thành niên 10-18 tuổi là 65 mg/ngày
• Người trưởng thành là 70 mg/ngày
• Phụ nữ có thai là 80 mg/ngày
• Phụ nữ cho con bú là 95 mg/ngày.
Một số bệnh lý do thiếu/ thừa Vitamin C
Bênh thiếu máu: Vitamin C giúp hấp thu sắt do đó thiếu vitamin C cơ thể không thể hấp thu đủ sắt và gây ra tình trạng thiếu máu. Vết thương chậm lành
Bênh loãng xương: người thiếu vitamin C có nguy cơ cao bị gãy xương, loãng xương, đặc biệt là phụ nữ và người cao tuổi Bệnh thoái hóa khớp: do vitamin C góp phần tham gia tổng hợp collagen.
Bênh tim mạch: Thiếu vitamin C có thể dẫn tới một số bệnh lý về tim mạch như thoát mạch, thành mạch kém bền ,...
Bệnh Scorbut: Là một trong những căn bệnh điển hình khi cơ thể bị thiếu vitamin C. Các triệu chứng điển hình của bệnh Scorbut gồm có: viêm lợi, răng dễ rụng, sưng khớp, chảy máu chân răng, xuất huyết dưới da,...
Thừa vitamin C cũng có thể dẫn tới nhiều tác hại. Nếu dùng vitamin C liều cao kéo dài, có thể gặp các tác dụng không mong muốn như rối loạn tiêu hóa, loét dạ dày, tá tràng, đau đầu, mất ngủ, viêm bàng quang, tiêu chảy, tăng tạo sỏi thận, gây bệnh gút, giảm độ bền hồng cầu, cản trở hấp thụ vitamin A, B12 và có thể gây ra hiện tượng ức chế ngược nếu ngừng đột ngột,. Đặc biệt, phụ nữ mang thai dùng vitamin C ở liều cao trong thời gian dài có thể gây ra những nhu cầu bất thường ở thai nhi, từ đó dẫn đến bệnh scorbut sớm ở trẻ.
2. Glucose:
GLUCOSE MOLECULE
a. Tổng quát:
Là đơn vị cấu tạo cơ bản của carbohydrat, thuộc loại monosaccharide
Có nguồn gốc ngoại sinh từ thức ăn và nội sinh từ quá trình phân giải glycogen ở gan hoặc từ quá trình tân tạo glucose thông qua việc thoái hoá lipid và protid
b. Nguyên lý và giá trị kỳ vọng:
Xét nghiệm này dựa trên phản ứng enzyme xảy ra giữa glucose oxidase, peroxidase và chất tạo màu. Glucose đầu tiên được oxi hoá tạo thành acid glucose oxidase. Hydrogen peroxidase phản ứng với chất tạo màu KI với sự hiện diện của peroxidase. Mức độ oxi hoá chất tạo màu chạy từ xanh đến nâu. Glucose thường không được phát hiện trong nước tiểu. Có một lượng nhỏ glucose được bài tiết bởi thận. Nồng độ thấp hơn 100 mg/dl có thể được xem là bất thường nếu kết quả là chính xác.
c. Hạn chế:
Vùng thuốc thử không phản ứng với lactose, galactose, fructose hoặc chất chuyển hoá khác, hoặc chất làm giảm chuyển hoá thuốc (ví dụ: salicylates và acid nalidixic). Độ nhạy có thể ảnh hưởng với bệnh phẩm có tỉ trọng cao (> 1.025) và với nồng độ ASC (> 25
mg/dl). Nồng độ KET > 100 mg/dl có thể gây âm tính giả cho bệnh phẩm chứa lượng nhỏ GLU (50-100mg/dl)
d. Biện luận:
Glucose không có trong nước tiểu vì chỉ có dưới 0.1% được lọc qua tiểu cầu xuất hiện qua nước tiểu (<130mg/ngày) Các yếu tố có thể gây ảnh hưởng:
• Hút thuốc hoặc sử dụng các chất kích thích
• Ăn trong 3 giờ trước khi xét nghiệm
• Do dùng các loại thuốc như cephalosporin, penicillin, nitrrofurantoin, methyldopa, tetracyclin, lithium, carbemazepin, phenolthiazin, steroid và thiazid
• Dương tính giả xảy ra khi sử dụng hydrogen peroxide hoặc thuốc tẩy
Nguyên nhân liên quan đến sinh lý:
• Mang thai
• Liên quan đến chế độ ăn nhiều carbohydrat
• Stress
Nguyên nhân liên quan đến bệnh lý:
• Đái tháo đường
-> Các bệnh lý liên quan đến thận đặc biệt là ống lượn gần 3. Bilirubin:
b. Là sản phẩm thoái hoá của quá trình thoái hoá nhân hem của hồng cầu và được vận chuyển đến gan nhờ albumin
Là chất có sắc tố màu vàng, có 2 dạng: billirubin tự do/gián tiếp (chưa kết hợp với acid glucoronic ở gan) và billirubin liên hợp/trực tiếp (kết hợp với acid glucoronic)
Billirubin tự do độc với cơ thể, đặc biệt đối với hệ thần kinh
-> Ý nghĩa: giúp chẩn đoán nguyên nhân của vàng da là trước hay sau gan c. Nguyên lý và giá trị kỳ vọng:
Xét nghiệm này dựa trên phản ứng cặp azo của billirubin với diazotized dichloroaniline trong môi trường acid mạnh. Mức billỉubin thay đỏi sẽ tạo ra màu hồng nhạt và đậm nhạt tỉ lệ thuận với nồng độ Bi trong nước tiểu. Trong nước tiểu bình thường không thể phát hiện được Bi kể cả sử dụng phương pháp nhạy nhất. Ngay cả khi theo dõi lượng Bi cũng cần điều tra thêm. Các kết quả không điển hình (màu sắc khác với ô màu âm hay dương tính trong bảng màu) có thể chỉ ra rằng sắc tố có nguồn gốc Bi trong nước tiểu và có thể giấu đi phản ứng của Bi
d. Hạn chế:
BI không có mặt trong nước tiểu thông thường, vậy nên bất kỳ kết quả dương tính nào, bao gồm dương tính vết, chỉ ra một tình trạng bệnh lý cơ bản và cần điều tra thêm. Phản ứng có thể xảy ra với mẫu nước tiểu chứa lượng lớn Chlorpromazine hoặc rifampin có thể gây nhằm lẫn dương tính Bi. Sự có mặt của các sắc tố mật có gốc Bi có thể che giấu phản ứng Bi. Hiện tượng nyà được đặc tả bởi phản ứng màu trên ô kiểm tra không tương quan với màu trên bảng màu. Nồng độ cao của ASC có thẻ giảm độ nhạy.
Bình thường sẽ không có Bi trong nước tiểu, là dấu hiệu sớm của bệnh gan và thường xuất hiện trước dấu hiệu lâm sàng của bệnh vàng da tiến triển
Giấy thử chỉ đo được lượng lớn hơn 0.4 mg/dl và là billirubin trực tiếp (do chỉ có bilỉubin liên hợp mới có thể đi xuyên qua ống thận để vào nước tiểu)
Sinh lý:
• Do dùng thuốc
Bệnh lý:
• Vàng da tại gan và sau gan
• Viêm gan siêu vi
• Viêm gan do ngộ độc hoá chất
• Vàng da do tắc đường dẫn mật như ung thư tuỵ, sỏi mật, giun chi ống mật
-> Một lượng nhỏ Bi có thể tìm thấy trong giai đoạn đầu của bệnh gan. Ở giai đoạn cuối của bệnh, Bi liên hợp tăng cao ở huyết tương, sự bào tiết bi qua thận có ý nghĩa hơn
Các yếu tố gây ảnh hưởng:
• Dương tính giả do các loại thuốc phenolthiazin