1. Lấy que thử ra khỏi lọ và sử dụng càng nhanh càng tốt. Đóng chặt
nắp lọ ngay sau khi lấy ra một lượng que thử đủ theo nhu cầu. Nhúng hoàn toàn vùng phản ứng của que thử vào mẫu nước tiểu sạch, lắc đều và ngay lập tức lấy que thử ra để tránh thuốc thử bị hoà tan
2. Khi lấy que thử ra khỏi nước tiểu, trượt cạnh que thử lên
miệng
dụng cụ đựng nước tiểu để loại bỏ nước tiểu dư thừa. Giữ que thử nằm ngang và để cạnh que thử tiếp xúc với vật liệu thấm nước (như giấy ăn) để tránh hoá chất giữa các vùng phản ứng bị trộn lẫn hoặc làm bẩn tay
3. So sánh vùng thử với ô màu tương ứng trên nhãn lọ đựng que
thử tại
thời gian đọc của từng loại thuốc thử. Giữ que thử gần ô màu và so khớp màu cẩn thận
Lưu ý: kết quả có thể đọc trong vòng 2 phút sau thời gian đọc tương ứng của từng loại thuốc thử
que thử còn hạn sử dụng, so sánh kết quả với dung dịch chứng âm và chứng dương đã biết trước nồng độ
và lặp lại xét nghiệm với
que thử mới. Nếu vấn đề vẫn tồn tại, ngừng sử dụng máy và liên hệ đại lý phân phối.
VIII. Kiểm soát chất lượng:
Để kết quả chính xác hơn, hiệu quả xét nghiệm của que thử phải khẳng định bằng xét nghiệm với mẫu phẩm âm tính, dương tính/ dung dịch chứng đã biết trước khi thực hiện một xét nghiệm mới hoặc khi sử dụng một lọ que thử mới. Mỗi phịng thí nghiệm phải cơng bố mục tieu riêng cho các tiêu chuẩn phù hợp
X. Hạn chế:
Que thử nước tiểu có thể bị ảnh hưởng bởi các chất làm cho nước tiểu có màu bất thường như thuốc chứa thuốc nhuộm azo (ví dụ: pyridium, azo gantrisin, azo gantanol), nitrofurantoin (Microdatin, Furadantin) và ribotlavin. Màu phát triển trên ơ kiểm tra có thể bị che giấu hoặc phản ứng màu gây sai kết quả.
* Cảm quan:
Màu Nguyên nhân bệnh lý Thuốc và thực phẩm
Đục
Phosphatase niệu, lipid niệu, tăng
oxalate niệu Chế độ ăn nhiều purine
Nâu sẫm Sắc tố mật, melanin, methemoglobin Levodopa, methyldopa
Vàng Nước tiểu đặc Cà rốt
Xanh lá cây hoặc xanh dương Nhiễm Pseudomonas đường niệu,
biliverdin
Amtriptyline (Elavine), indigo carmine, IV cimetidine (Tagamet), IV
promethazine (Pheganeran), methylene blue, triamterene
(Dyrenium)
Cam Sắc tố mật Phenolthiazines, Phenazopydine
(pyridium)
Đỏ
Đái máu, đái Hb, tiểu myoglobin,
porphyrin niệu Phenolphthalein, rifampin (rifadin)
IX. Chi tiết các thơng số:
Thuốc thử và đặc tính hiệu quả:
Thuốc thử Thời gian
đọc Thành phần Mục đích Ascorbic acid (ASC) 30 giây 2,6-dichlorophe- nolindophenol; đệm và thành phần không phản ứng Phát hiện ASC từ nồng độ 5-10 mg/dl (0.28-0.56 mmol/l)
Glucose
(GLU) 30 giây
Glucose oxidase; peroxidase; KI; đệm; thành phần không phản ứng
Phát hiện GLU từ nồng độ trên 50-100 mg/dl (2.5-5 mmol/l) Bilirubin 30 giây 2,4-dicloroaniline; đệm và thành phần không phản ứng Phát hiện Bi từ nồng độ trên 0.4-1 mg/dl (6.8-17 mmol/l) Ketone
(KET) 40 giây Natri nitroprusside; đệm
Phát hiện KET từ nồng độ trên 2.5-5 mg/dl (0.25-0.5 mmol/l) Specific Gravity (SG) 45 giây Chất chỉ thị màu bromthymol; đệm và thành phần không phản ứng; poly
(methyl, vinyl ether/maleic anhydride); NaOH
Xác định tỉ trọng nước tiểu trong khoảng từ 1-1.03. Sai số so với giá trị thu bằng
phương pháp chỉ số khúc xạ chỉ trong 0.005 Blood (BLO) 60 giây 3,3’5,5’-tetramethylbenzidine (TMB); diisoproprylebenzen dihydroperoxide; Phát hiện Hb tự do từ nồng độ trên 0.018- 0.06 mg/dl (5-10 Ery//./!) trong mẫu nước
tiểu có nồng độ ASC < 50 mg/dl
pH 60 giây Muối natri methyl đỏ; bromthymol
xanh; thành phần không phản ứng
Cho phép phân biệt định lượng giá trị trong khoảng 5-9
Protein
(PRO) 60 giây
Tetrabromophenol xanh; đệm và thành phần không phản ứng
Phát hiện albumin từ nồng độ trên 7.5-15 mg/dl (0.075-0.15 mmol/l)
Urobilinogen
60 giây
Dùng trong phịng thí nghiệm và các thử nghiệm lâm sàng. Thông số quan trọng với người đọc là độ nhạy, độ đặc hiệu, độ chính xác. Nói chung, các xét nghiệm này đực dùng để phát hiện các thông số mà không bị ảnh hưởng bởi các chất gây nhiễu
Diễn giải kêt quả bằng mắt thường cũng phụ thuộc vào một vài yêu tố như sự thay đổi của màu sắc quan sát được, sự có hoặc khơng các u tố ức chê và điều kiện ánh sáng khi que thử dược đọc. Mỗi ô màu trên bảng màu tương ứng với một khoảng nơng độ chất cần phân tích
Khoảng giá trị đọc của pH, protein, urobilinogen và glucose là khác nhau giữa phương pháp đọc bằng mắt và máy phân tích
Độ nhạy các thông số trên dựa trên các nghiên cứu đọc bằng mắt thường và có thể khác nhau giữa đọc bằng mắt và máy phân tích. Khi đọc bằng mắt, nêu màu của o nằm giữa khoảng âm tính và có vêt thì kêt quả là âm tính.
1. Acid ascorbic:
HỌ , _ ĩ ỵ.o. ~ HCk
Hơ ƠH
(NIT) ethylenediamine; thành phần không
phản ứng
mg/dl trong nước tiểu với tỉ trọng thấp và ít hơn 30 mg/dL ASC
Leukocytes
(LEU) 120 giây
Dẫn xuất ester axit pyrole amino; muối diazonium; đệm và thành phần
không phản ứng
Phát hiện LEU từ nông độ trên 9-15 tê bào bạch cầu trên pl trong nước tiểu
a. Tổng quan
Còn được gọi là vitamin C, loại vitamin tan trong nước, là chất dinh dưỡng thiết yếu cho người, được cung cấp qua các loại rau củ quả giàu Vit C như cam, chanh,...
Là chất quan trọng tham gia vào quá trình trao đổi chất và cần thiết cho hệ miễn dịch
Có vai trị trong việc bảo vệ tế bào, duy trì sức khoẻ của da, sụn, răng, xương và tính bền vững của mạch máu. Ngồi ra cịn là chất chống lại q trình oxi hố mạnh
-> Ý nghĩa
Chỉ số ASC trong xét nghiệm nước tiểu cho thấy dấu hiệu để phát hiện các tế bào, trị liệu trong viêm nhiễm thận, đường tiết niệu, sỏi đường tiết niệu...
Việc đánh giá mức độ acid ascorbic trong nước tiểu có thể giúp làm giảm nguy cơ sai lệch kết quả trong một số bệnh. Acid ascorbic nồng độ cao trong nước tiểu có thể gây âm tính giả đối với một số chất (glucose, nitrite và bilirubin) hoặc tế bào (hồng cầu, bạch cầu) khi xét nghiệm nước tiểu bằng que thử.
b. Nguyên lý:
Xét nghiệm này liên quan đến sự mất màu của Tillman. Sự có mặt của acid ascorbic gây ra sự thay đổi màu từ xanh dương/lá cây sang màu cam. Bệnh nhân với chế độ ăn đầy đủ có thể bài tiết ra 2 - 10 mg/dl hằng ngày. Sau khi tiêu thụ lượng lớn axit ascorbic thì nồng độ có thể lên đến 200 mg/dl.
Chỉ số bình thường: 5-10 mg/dL hoặc 0.28-0.56 mmol/L. Nhu cầu vitamin C thay đổi theo lứa tuổi cụ thể như sau:
• Trẻ từ 6-11 tháng là 25-30 mg/ngày
• Trẻ từ 1-6 tuổi là 30 mg/ngày, trẻ từ 7-9 là 35 mg/ngày
• Tuổi vị thành niên 10-18 tuổi là 65 mg/ngày
• Người trưởng thành là 70 mg/ngày
• Phụ nữ có thai là 80 mg/ngày
• Phụ nữ cho con bú là 95 mg/ngày.
Một số bệnh lý do thiếu/ thừa Vitamin C
Bênh thiếu máu: Vitamin C giúp hấp thu sắt do đó thiếu vitamin C cơ thể khơng thể hấp thu đủ sắt và gây ra tình trạng thiếu máu. Vết thương chậm lành
Bênh lỗng xương: người thiếu vitamin C có nguy cơ cao bị gãy xương, lỗng xương, đặc biệt là phụ nữ và người cao tuổi Bệnh thối hóa khớp: do vitamin C góp phần tham gia tổng hợp collagen.
Bênh tim mạch: Thiếu vitamin C có thể dẫn tới một số bệnh lý về tim mạch như thoát mạch, thành mạch kém bền ,...
Bệnh Scorbut: Là một trong những căn bệnh điển hình khi cơ thể bị thiếu vitamin C. Các triệu chứng điển hình của bệnh Scorbut gồm có: viêm lợi, răng dễ rụng, sưng khớp, chảy máu chân răng, xuất huyết dưới da,...
Thừa vitamin C cũng có thể dẫn tới nhiều tác hại. Nếu dùng vitamin C liều cao kéo dài, có thể gặp các tác dụng khơng mong muốn như rối loạn tiêu hóa, loét dạ dày, tá tràng, đau đầu, mất ngủ, viêm bàng quang, tiêu chảy, tăng tạo sỏi thận, gây bệnh gút, giảm độ bền hồng cầu, cản trở hấp thụ vitamin A, B12 và có thể gây ra hiện tượng ức chế ngược nếu ngừng đột ngột,. Đặc biệt, phụ nữ mang thai dùng vitamin C ở liều cao trong thời gian dài có thể gây ra những nhu cầu bất thường ở thai nhi, từ đó dẫn đến bệnh scorbut sớm ở trẻ.
2. Glucose:
GLUCOSE MOLECULE
a. Tổng quát:
Là đơn vị cấu tạo cơ bản của carbohydrat, thuộc loại monosaccharide
Có nguồn gốc ngoại sinh từ thức ăn và nội sinh từ quá trình phân giải glycogen ở gan hoặc từ q trình tân tạo glucose thơng qua việc thối hố lipid và protid
b. Nguyên lý và giá trị kỳ vọng:
Xét nghiệm này dựa trên phản ứng enzyme xảy ra giữa glucose oxidase, peroxidase và chất tạo màu. Glucose đầu tiên được oxi hoá tạo thành acid glucose oxidase. Hydrogen peroxidase phản ứng với chất tạo màu KI với sự hiện diện của peroxidase. Mức độ oxi hoá chất tạo màu chạy từ xanh đến nâu. Glucose thường khơng được phát hiện trong nước tiểu. Có một lượng nhỏ glucose được bài tiết bởi thận. Nồng độ thấp hơn 100 mg/dl có thể được xem là bất thường nếu kết quả là chính xác.
c. Hạn chế:
Vùng thuốc thử không phản ứng với lactose, galactose, fructose hoặc chất chuyển hoá khác, hoặc chất làm giảm chuyển hố thuốc (ví dụ: salicylates và acid nalidixic). Độ nhạy có thể ảnh hưởng với bệnh phẩm có tỉ trọng cao (> 1.025) và với nồng độ ASC (> 25
mg/dl). Nồng độ KET > 100 mg/dl có thể gây âm tính giả cho bệnh phẩm chứa lượng nhỏ GLU (50-100mg/dl) d. Biện luận:
Glucose khơng có trong nước tiểu vì chỉ có dưới 0.1% được lọc qua tiểu cầu xuất hiện qua nước tiểu (<130mg/ngày) Các yếu tố có thể gây ảnh hưởng:
• Hút thuốc hoặc sử dụng các chất kích thích
• Ăn trong 3 giờ trước khi xét nghiệm
• Do dùng các loại thuốc như cephalosporin, penicillin, nitrrofurantoin, methyldopa, tetracyclin, lithium, carbemazepin, phenolthiazin, steroid và thiazid
• Dương tính giả xảy ra khi sử dụng hydrogen peroxide hoặc thuốc tẩy
Nguyên nhân liên quan đến sinh lý:
• Mang thai
• Liên quan đến chế độ ăn nhiều carbohydrat
• Stress
Nguyên nhân liên quan đến bệnh lý:
• Đái tháo đường
-> Các bệnh lý liên quan đến thận đặc biệt là ống lượn gần 3. Bilirubin:
b. Là sản phẩm thoái hố của q trình thối hố nhân hem của hồng cầu và được vận chuyển đến gan nhờ albumin
Là chất có sắc tố màu vàng, có 2 dạng: billirubin tự do/gián tiếp (chưa kết hợp với acid glucoronic ở gan) và billirubin liên hợp/trực tiếp (kết hợp với acid glucoronic)
Billirubin tự do độc với cơ thể, đặc biệt đối với hệ thần kinh
-> Ý nghĩa: giúp chẩn đoán nguyên nhân của vàng da là trước hay sau gan c. Nguyên lý và giá trị kỳ vọng:
Xét nghiệm này dựa trên phản ứng cặp azo của billirubin với diazotized dichloroaniline trong môi trường acid mạnh. Mức billỉubin thay đỏi sẽ tạo ra màu hồng nhạt và đậm nhạt tỉ lệ thuận với nồng độ Bi trong nước tiểu. Trong nước tiểu bình thường khơng thể phát hiện được Bi kể cả sử dụng phương pháp nhạy nhất. Ngay cả khi theo dõi lượng Bi cũng cần điều tra thêm. Các kết quả khơng điển hình (màu sắc khác với ơ màu âm hay dương tính trong bảng màu) có thể chỉ ra rằng sắc tố có nguồn gốc Bi trong nước tiểu và có thể giấu đi phản ứng của Bi
d. Hạn chế:
BI khơng có mặt trong nước tiểu thơng thường, vậy nên bất kỳ kết quả dương tính nào, bao gồm dương tính vết, chỉ ra một tình trạng bệnh lý cơ bản và cần điều tra thêm. Phản ứng có thể xảy ra với mẫu nước tiểu chứa lượng lớn Chlorpromazine hoặc rifampin có thể gây nhằm lẫn dương tính Bi. Sự có mặt của các sắc tố mật có gốc Bi có thể che giấu phản ứng Bi. Hiện tượng nyà được đặc tả bởi phản ứng màu trên ô kiểm tra không tương quan với màu trên bảng màu. Nồng độ cao của ASC có thẻ giảm độ nhạy.
Bình thường sẽ khơng có Bi trong nước tiểu, là dấu hiệu sớm của bệnh gan và thường xuất hiện trước dấu hiệu lâm sàng của bệnh vàng da tiến triển
Giấy thử chỉ đo được lượng lớn hơn 0.4 mg/dl và là billirubin trực tiếp (do chỉ có bilỉubin liên hợp mới có thể đi xuyên qua ống thận để vào nước tiểu)
Sinh lý:
• Do dùng thuốc
Bệnh lý:
• Vàng da tại gan và sau gan
• Viêm gan siêu vi
• Viêm gan do ngộ độc hố chất
• Vàng da do tắc đường dẫn mật như ung thư tuỵ, sỏi mật, giun chi ống mật
-> Một lượng nhỏ Bi có thể tìm thấy trong giai đoạn đầu của bệnh gan. Ở giai đoạn cuối của bệnh, Bi liên hợp tăng cao ở huyết tương, sự bào tiết bi qua thận có ý nghĩa hơn
Các yếu tố gây ảnh hưởng:
• Dương tính giả do các loại thuốc phenolthiazin
4. Urobilinogen: a. Tổng quát:
Billirubin liên hợp theo mật đổ vào ruột non, ở ruột già dưới tác dụng của enzyme P-glucoronic của vi khuẩn, bilirubin liên hợp được thuỷ phân tạo bilirubin tự do và bilirubin này bị khử tạo hợp chất không màu là urobilinogen
Một phần urobilinogen (khoảng 20%) được tái hấp thụ về gan qua tĩnh mạch cửa. Tại gan sẽ oxi hoá tái tạo Bi, đổ vào mật -> chu trình gan-ruột.
Một phần nhỏ sẽ vào tuần hoàn chung, qua thận và đào thải qua nước tiểu, được oxi hoá nhờ oxi và tạo urobilin
Phần lớn ở lại ruột và đào thải ra ngoài qua phân, một phần bị oxi hố tạo hợp chất có màu, khi ra ngồi các hợp chất không màu sẽ tiếp tục bị oxi hố tạo sản phẩm khơng màu là stercobilin.
-> urobilin và stercobilin tạo màu vàng cho nước tiểu và phân b. Nguyên lý và giá trị kỳ vọng:
Xét nghiệm trên dửa trên phản ứng Ehrlich tác dụng giữa p-diathylaminobenzaldehyde và urobilinogen trong môi trường acid mạnh để tạo ra màu hồng. Urobilinogen là một trong những thành phần chính được tổng hợp thêm và thường gặp trong nước tiểu. Khoảng giá trị kì vọng của xét nghiệm này trong nước tiểu bình thường là 0.2-1 mg/dl (3.7-17lẲmol/l). Kết quả là 2.0 mg/dl (36
ựmol/l) có ý nghĩa lâm sàng và mẫu bệnh phẩn này cần được đánh giá.
Tất cả kết quả thấp hơn 1 mg/dl được biện luận là bình thường. Kết quả âm tính khơng có nghĩa là khơng có mặt URO trong nước tiểu. Vùng thc thử có thể phản ứng với chất gây nhiễu có phản ứng với thuốc thử của Ehrlich’s như axit p-aminosalicyliv và sulfonmide. Có thể gặp kết quả dương tính giả nếu gặp formalin. Xét nghiệm khơng được dùng cho phát hiện porphobilinogen d. Biện luận:
Lượng bình thường bài tiết qua nước tiểu là 1-4 mg/dl/24 giờ Nguyên nhân bệnh lý:
• Thiếu máu tán huyết và các bệnh về gan là nguyên nhân tăng sắc tố mật trong máu và có thể gây tăng urobinogen niệu
• Tắc mật hoàn toàn, tắc nghẽn tuần hoàn bên trong gan của sắc tố mật (thường do tắc đường mật) hoặc dùng kháng sinh làm thay
đổi kí sinh trong ruột có thể ngưng bài tiết urobinogen niệu
-> Nhạy nhưng không đặc hiệu với xác định tổn thương gan, tan máu và nhiễm khuẩn nặng
Bệnh lý Bi liên hợp (niệu) Urobilinogen niệu
Bệnh tan máu Âm tính Tăng
Bệnh gan Dương hoặc âm tính Tăng
Tắc mật Dương tính Bình thường
5. Specitíc Gravity: a. Tổng quan:
Trọng lượng riêng (Specitic gravity) hay tỷ trọng tương đối(kí hiệu:SG) là tỷ lệ của mật độ (khối lượng của một đơn vị thể tích) của một chất với mật độ của một tài liệu tham khảo nhất định.
Trọng lượng riêng đối với chất lỏng gần như luôn luôn được đo đối với nước ở độ đặc nhất của nó (ở 4 ° C hoặc 39,2 ° F); Đối với khí, tham chiếu là khơng khí ở nhiệt độ phịng (20 ° C hoặc 68 ° F)
Tỷ trọng nước tiểu có thể hiểu là lượng các chất hoà tan trong nước tiểu so với nước. Tỷ lệ này thể hiện rằng nước tiểu cô đặc hay